二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物分析

1、關(guān)于二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析第1頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四學(xué)習(xí)要求：1. 掌握：二氫吡啶類藥物的基本結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)；結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與分析方法間的關(guān)系；鈰量法的原理、方法及注意事項(xiàng)。2. 熟悉：二氫吡啶類藥物的化學(xué)鑒別反應(yīng)及有關(guān)物質(zhì)檢查的方法；3. 了解：二氫吡啶類藥物其他的鑒別試驗(yàn)及含量測(cè)定方法、及體內(nèi)分析中樣品的處理方法。第2頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四第一節(jié) 結(jié)構(gòu)與性質(zhì)二氫吡啶類藥物的基本骨架：第3頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四硝苯地平（nifedipine)尼群地平（nitrendipine)

2、尼莫地平（nimodipine)一、代表性藥物的結(jié)構(gòu)第4頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四一、代表性藥物的結(jié)構(gòu)尼索地平（nisoldipine)非洛地平（Felodipine)拉西地平（Lacidipine)伊拉地平（Isradipine)第5頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四3. 二氫吡啶環(huán)氨基質(zhì)子解離性4. 穩(wěn)定性 遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)5. 旋光性6. 吸收光譜特性 2. 硝基的氧化性1. 二氫吡啶環(huán)的還原性 氧化還原反應(yīng)鑒別或氧化還原滴定法含量測(cè)定二、主要理化性質(zhì)第6頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四第九章

3、 二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析6. 吸收光譜特性 本類藥物具有芳環(huán)，有明顯的紫外吸收特征和紅外特征。藥物溶劑濃度（g/ml）max/min(nm)吸光度比值硝苯地平無(wú)水乙醇15237,320-335寬吸收尼群地平無(wú)水乙醇20236,353/303A353/A302=2.1-2.3尼莫地平乙醇10237尼索地平無(wú)水乙醇10237非洛地平乙醇20238, 361第7頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)一、化學(xué)鑒別法（一）與亞鐵鹽反應(yīng) 二氫吡啶類藥物苯環(huán)上硝基具有氧化性，可將氫氧化亞鐵氧化為紅棕色氫氧化鐵沉淀。第8頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)4

4、0分，星期四ChP2010尼莫地平的鑒別： 取本品約20mg，加乙醇2ml溶解后，加新制的5%硫酸亞鐵銨溶液2ml，1.5mol/L硫酸溶液1滴與0.5mol/L氫氧化鉀溶液1ml，強(qiáng)烈振搖，1分鐘內(nèi)沉淀由灰綠色變?yōu)榧t棕色。Fe(OH)2 Fe(OH)3(紅色沉淀）第9頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四（二）與氫氧化鈉試液反應(yīng)ChP2010硝苯地平的鑒別： 取本品約25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氫氧化鈉溶液35滴，振搖，溶液顯橙紅色。二氫吡啶類藥物與堿作用后，二氫吡啶環(huán)1,4-位氫可以發(fā)生解離，形成共軛環(huán)發(fā)生顏色變化，可以進(jìn)行鑒別。第10頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，

5、5月20日，20點(diǎn)40分，星期四（三）沉淀反應(yīng)ChP2010尼莫地平注射液的鑒別： 取本品適量（約相當(dāng)于尼莫地平20mg），置分液漏斗中，加乙醚30ml振搖提取，靜置，分取乙醚層，置水浴上蒸干，放冷，殘?jiān)右掖?ml，攪拌使溶解，移至試管中，加1%氯化汞溶液3ml，即發(fā)生白色沉淀。第11頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四（四）重氮化-偶合反應(yīng)BP2010硝苯地平的鑒別： 取本品25mg，加10ml鹽酸-水-乙醇混合溶液（1.53.5 5），溫?zé)?，加入鋅粒0.5g，放置5分鐘，濾過，濾液加亞硝酸鈉溶液（10g/L）5ml，放置2分鐘，再加入氨基磺酸銨溶液（50g/L）2m

6、l，搖勻，加入鹽酸萘乙二胺溶液（5g/L）2ml，即顯紅色（持續(xù)5分鐘以上）。第12頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四二、分光光度法（一）紫外分光光度法ChP2010尼群地平軟膠囊的鑒別： 避光操作。取本品的內(nèi)容物約1g，置100ml量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，取10ml，置100ml量瓶中，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，在353nm與303nm的波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸光度，在353nm與303nm的吸光度比值應(yīng)為2.12.3。（二）紅外分光光度法第13頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四五、色譜法（一）高效液相色譜法ChP2010尼莫地平片的鑒別： 在

7、含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。第14頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四（二）薄層色譜法BP2010硝苯地平的鑒別： 取本品加甲醇制成每1ml 中約含1mg的溶液，作為供試品溶液；另取硝苯地平對(duì)照品適量，加甲醇制成每1ml 約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。吸取上述兩種溶液各5ul，分別點(diǎn)于同一硅膠F254薄層板上，以乙酸乙酯-環(huán)己烷（4060）為展開劑，展開，晾干，置紫外光燈（254nm）下檢視，供試品溶液所顯主斑點(diǎn)的位置和顏色應(yīng)與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)一致。第15頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星

8、期四第三節(jié) 有關(guān)物質(zhì)的檢查 二氫吡啶類藥物遇光極不穩(wěn)定，易發(fā)生光化學(xué)歧化作用，引入雜質(zhì)，因此各國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)中均規(guī)定在避光條件下進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，大多采用HPLC法。第16頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四 硝苯地平在光照和氧化劑存在條件下分別生成兩種降解氧化產(chǎn)物：雜質(zhì)I：2,6-二甲基-4-(2-硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯雜質(zhì)II：2,6-二甲基-4-(2-亞硝基苯基)-3,5-吡啶二甲酸二甲酯第17頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四 1.供試液和的制備 2.有關(guān)雜質(zhì)對(duì)照品液和的制備 3.色譜條件 填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠; 流動(dòng)相：

9、甲醇-水（3 ：2）； 檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm。結(jié)果：按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，均不得超過0.1%，其他單個(gè)雜質(zhì)的峰面積不得大于對(duì)照品溶液中硝苯地平峰面積(0.2%)，雜質(zhì)總量不得過0.5%。第18頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四第四節(jié) 含量測(cè)定一、鈰量法硝苯地平與硫酸鈰反應(yīng)的摩爾比為12。鄰二氮菲-Fe(II)指示劑 終點(diǎn)時(shí)（鄰二氮菲-Fe(II)指示劑）:微過量的Ce4+將指示劑中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈無(wú)色，以指示終點(diǎn)的到達(dá)。 原理第19頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四第九章 二氫吡啶類鈣通道阻滯藥物的分析ChP2010

10、硝苯地平的含量測(cè)定： 取本品約0.4g，精密稱定，加無(wú)水乙醇50ml，微熱使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加水至100ml）50ml、鄰二氮菲指示液3滴，立即用硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，在水浴中加熱至50左右，繼續(xù)緩緩滴定至橙紅色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml硫酸鈰滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于17.32mg的C17H18N2O6。含量計(jì)算公式：第20頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四優(yōu)點(diǎn)：以Ce(SO4)2標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定，長(zhǎng)時(shí)間放置、曝光、加熱不會(huì)引起濃度的變化。Ce4+還原為Ce3+是單電子轉(zhuǎn)移，不是生成中間價(jià)態(tài)

11、，反應(yīng)簡(jiǎn)單，副反應(yīng)少。大部分有機(jī)物不與Ce(SO4)2作用，不干擾測(cè)定。特別適用于糖漿劑以及片劑等制劑藥物的測(cè)定。終點(diǎn)指示：Ce4+為黃色，Ce3+為無(wú)色， Ce4+可自身作為指示劑，但不夠靈敏。常用鄰二氮菲作為指示劑，即稍過量的Ce4+將指示液中的Fe2+氧化成Fe3+，使橙紅色配合物離子呈無(wú)色，以指示終點(diǎn)的到達(dá)。如：尼莫地平，尼群地平，非洛地平，硝苯地平采用該法定量。（ChP2010）第21頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四二、紫外-可見分光光度法ChP2010尼群地平軟膠囊的含量測(cè)定三、高效液相色譜法ChP2010尼莫地平分散片的含量測(cè)定第22頁(yè)，共28頁(yè)，202

12、2年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四設(shè)計(jì)一種容量分析方法測(cè)定其含量（名稱、原理、溶劑、滴定劑、指示劑、取樣量及操作）第23頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四第五節(jié) 體內(nèi)二氫吡啶類藥物的分析 氨氯地平分子結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)手性碳原子，故具有一對(duì)光學(xué)異構(gòu)體R-(+)-氨氯地平與S-(-)-氨氯地平，僅S-(-)-氨氯地平具有血管擴(kuò)張作用，其中左旋氨氯地平藥效是消旋氨氯地平的2倍，因此需進(jìn)行血漿中氨氯地平對(duì)映體的手性分離與立體選擇性藥動(dòng)學(xué)研究。第24頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四 人血漿中氨氯地平對(duì)映體的固相萃取LC-MS/MS法測(cè)定：第25頁(yè)，共2

13、8頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四樣品處理：血漿樣品1.0ml，與1.0ml用流動(dòng)相制備的內(nèi)標(biāo)溶液(10 ng/ml)混合后，取1.8ml上載至C18固相萃取柱(萃取柱預(yù)先用含2.5%氨的甲醇1.0ml洗滌2次，再用5mmol/L醋酸銨溶液1.0ml沖洗平衡)，分別用5mmol/L醋酸銨溶液1.0ml和水-甲醇(65:35)1.0ml洗滌，再用含2.5%氨的甲醇1.0ml洗脫，洗脫液在60下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上蒸發(fā)至干，殘?jiān)锛?50l流動(dòng)相溶解，吸取100l注入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)進(jìn)行分析。第26頁(yè)，共28頁(yè)，2022年，5月20日，20點(diǎn)40分，星期四色譜與質(zhì)譜條件 色譜柱為Chiral-AGP柱(150mm4.0mm，5m)，流動(dòng)相為10 mmol/L醋酸銨緩沖液(pH4.5)-正丙醇(99:1)，流速0.9 ml/min，柱溫30。APCI離子源，溫度3