第十七章基因重組和基因工程習(xí)題

1、PAGE PAGE 13第十七章 基因重組和基因工程一、單項選擇題1.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生 A. 5磷酸基和3羥基基團的末端 B. 5磷酸基和3磷酸基團的末端 C. 5羥基和3羥基基團的末端 D. 3磷酸基和5羥基基團的末端 E. 以上都不是 2. 可識識別并切切割特異異DNAA序列的的酶是 A. 非限限制性核核酸外切切酶 BB. 限制制性核酸酸內(nèi)切酶酶 C. 限制制性核酸酸外切酶酶 DD. 非限限制性核核酸內(nèi)切切酶 EE. DNNA酶3. 有關(guān)關(guān)限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶，以以下哪個個描述是是錯誤的的？A. 識別別和切割割位點通通常是448個個bp長長度 BB. 大多數(shù)數(shù)酶的識識別序列

2、列具有回回文結(jié)構(gòu)構(gòu)C. 在識別別位點切切割磷酸酸二酯鍵鍵 D. 只能識識別和切切割原核核生物DDNA分分子 E. 只能切切割含識識別序列列的雙鏈鏈DNAA分子4. 在重重組DNNA技術(shù)術(shù)中催化化形成重重組DNNA分子子的酶是 A. 解鏈鏈酶 B. DNNA聚合合酶 CC. DNNA連接接酶 D. 內(nèi)切切酶 EE. 拓撲撲酶 5. 對基基因工程程載體的的描述，下下列哪個個不正確確？A. 可以以轉(zhuǎn)入宿宿主細胞胞 B. 有限制制酶的識識別位點點 C. 可與目目的基因因相連 D. 是環(huán)狀狀DNAA分子 E. 有篩選選標志6. 克隆隆所依賴賴的DNAA載體的的最基本本性質(zhì)是是 A. 卡那那霉素抗抗性 B

3、. 青霉霉素抗性性 C. 自我我復(fù)制能能力 D. 自我我表達能能力 EE. 自我我轉(zhuǎn)錄能能力 7. 重組組DNAA技術(shù)中中常用的的質(zhì)粒DDNA是是 A. 病毒毒基因組組DNAA的一部部分 B. 細菌菌染色體體外的獨獨立遺傳傳單位 C. 細菌菌染色體體DNAA的一部部分 DD. 真核核細胞染染色體外外的獨立立遺傳單單位 EE. 真核核細胞染染色體DDNA的的一部分分 8. 下列列哪種物物質(zhì)一般般不用作作基因工工程的載載體？A. 質(zhì)粒粒 B. 噬菌體體 C. 哺乳乳動物的的病毒 D. 逆轉(zhuǎn)錄錄病毒E. 大腸腸桿菌基基因組9. 關(guān)于于pBRR3222質(zhì)粒描描述錯誤誤的是 有一些些限制酶酶的酶切切位點

4、 含含有1個個orii.含有來來自大腸腸桿菌的的laccZ基因因片段 含含個氨卞卞青霉素素抗性基基因含四環(huán)環(huán)素抗性性基因。10. 以以為模模板催化化合成成需要下下列酶 A. RNNA聚合合酶 B. DNAA聚合酶酶C. Kleenoww片段 D. 逆轉(zhuǎn)錄酶酶 E. 酶11. 催催化聚合合酶鏈反反應(yīng)需要要下列酶酶 A. RNNA聚合合酶 B. DNAA聚合酶酶C. TaaqDNNA聚合合酶 D. 逆轉(zhuǎn)錄酶酶 E.限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶12. 關(guān)關(guān)于的描描述下列列哪項不不正確？A. 是一一種酶促促反應(yīng) BB. 引物決決定了擴擴增的特特異性 C. 擴增產(chǎn)產(chǎn)物量大大 DD. 擴增增的對象象是序列列E.

5、擴增增的對象象是RNNA序列列13. 在在基因工工程中，DDNA重重組體是是指A. 不同同來源的的兩段DDNA單單鏈的復(fù)復(fù)性 B. 目的的基因與與載體的的連接物物C. 不同同來源的的DNAA分子的的連接物物 DD. 原原核DNNA與真真核DNNA的連連接物E. 兩個個不同的的結(jié)構(gòu)基基因形成成的連接接物14. 基基因工程程操作中中轉(zhuǎn)導(dǎo)是是指 A. 把重重組質(zhì)粒粒導(dǎo)入宿宿主細胞胞 BB. 把把DNAA重組體體導(dǎo)入真真核細胞胞C. 把DDNA重重組體導(dǎo)導(dǎo)入原核核細胞 D. 把外外源DNNA導(dǎo)入入宿主細細胞E. 以噬噬菌體或或病毒為為載體構(gòu)構(gòu)建的重重組DNNA導(dǎo)入入宿主細細胞15. 重重組DNNA的篩

6、篩選與鑒鑒定不包包括哪一一方法 A. 限制制酶酶切切圖譜鑒鑒定 B. PCCR擴增增鑒定C. 顯微微注射 D. 藍白篩篩選E.抗藥藥篩選二、多項選選擇題1. 在分分子克隆隆中，目目的DNNA可來來自A.原核細細胞染色色體DNNA BB.真核核細胞染染色體DDNAC.人工合合成的DDNA D.聚合酶酶鏈反應(yīng)應(yīng)E.真核細細胞mRRNA反反轉(zhuǎn)錄獲獲得的ccDNAA2. 重組組DNAA技術(shù)基基本過程程包括 A.目的基基因的獲獲取 B.克隆隆載體的的構(gòu)建C.目的DDNA與與載體的的連接 D.將重組組體導(dǎo)入入受體菌菌E.重組DDNA分分子轉(zhuǎn)化化受體菌菌的篩選選3. 分子子克隆又又稱A.基因克克隆 B.DD

7、NA克克隆C.單克隆隆抗體制制備 D.構(gòu)建建基因組組DNAA文庫E. 基因因重組 4. 參與與聚合酶酶鏈反應(yīng)體體系的組組分有 A. DNNA引物物 B. 目的的DNAAC. 三磷磷酸脫氧氧核苷 DD. TTaq DNAA聚合酶酶E. RNNA聚合合酶5從基因因組DNNA文庫庫或cDDNA文文庫分離離、擴增增某一感感興趣基基因的過過程就是是A.基因克克隆 BB.分子子克隆C.DNAA克隆 D.構(gòu)建建基因組組DNAA文庫E.重組DDNA技技術(shù)6. 可用用作克隆隆基因載載體的DDNA有有A.細菌質(zhì)質(zhì)粒DNNA B.真核核細胞基基因組DDNAC.病毒DDNA DD.酵母母人工染染色體E.噬菌體體DNA

8、A7將重組組DNAA分子導(dǎo)導(dǎo)入受體細細菌的方方法有A.接合 B.轉(zhuǎn)座 C.感染 DD.轉(zhuǎn)染染 EE.轉(zhuǎn)化化8轉(zhuǎn)染真真核細胞胞的方法法有A. 磷酸酸鈣共沉沉淀法 BB. 電電穿孔C. DEEAE葡葡聚糖法法 D. 脂質(zhì)質(zhì)體載體體法E. 顯微微注射法法9下述操操作可能能用于基基因工程程過程的的是DNAA的制備備和酶解解 不同同來源DDNA的的拼接重組DDNA導(dǎo)導(dǎo)入受體體細胞 細菌菌的生長長和繁殖殖核酸分分子雜交交10關(guān)于于質(zhì)粒DDNA的的敘述正正確的是是A.是基因因組DNNA的組組成部分分 B.具有有獨立復(fù)復(fù)制功能能C.含有抗抗生素抗抗性基因因 D.含有感感興趣的的目的DDNAE.具有編編碼蛋白白

9、質(zhì)的功功能三、填空題題、DNAA重組技技術(shù)主要要涉及兩兩大核心心技術(shù)：和。、一個完完整的基基因克隆隆過程應(yīng)應(yīng)包括：目的基基因的獲獲取， _ 的選選擇與改改造， _ 的連連接，重重組 DDNA 分子 受體細細胞， 出含感感興趣基基因的重重組 DDNA 轉(zhuǎn)化細細胞。 、限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶是是由_產(chǎn)產(chǎn)生的一一類識別別 _ ，并在識識別位點點切割鍵鍵的核酸酸內(nèi)切酶酶。 、科學(xué)家家感興趣趣的外源源基因又又稱 _ ，其其來源有有_、_、_、_等等幾種途途徑。、常用的的目的基基因與載載體連接接的方式式有_、_、_、_。 、根據(jù)采采用的克克隆載體體性質(zhì)不不同，將將重組 DNAA 分子子導(dǎo)入細菌的的方法有有_

10、 、 _等。 、基因組組文庫含含有組織織或細胞胞的_信信息，ccDNAA文庫含含有組織織或細胞胞的_信信息。8、 載體體的本質(zhì)質(zhì)是 ，它它應(yīng)具備備下列基基本條件件： 、 、 、 和 。四、名詞解解釋 1. 基因因工程 2. DNAA重組 33. 克隆隆 44. DNNA克隆隆5. 目的的基因 6. 基因因載體 77. 質(zhì)粒粒 8. 限制制性核酸酸內(nèi)切酶酶9. 基因因文庫 10. cDNNA文庫庫 11. 轉(zhuǎn)化 122. 轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)13. 轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)染五、問答題題. 載體體應(yīng)具備備以下基基本條件件. 常用用的工具具酶有哪哪些？其其主要用用途是什什么？. 重組組DNAA技術(shù)常常包括哪哪些基本本步驟：. 常用

11、用的目的的基因的的獲取方方法有哪哪些？. 常用用的目的的基因與與載體的的連接方方法有哪哪些？. 何謂謂限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶？寫出大大多數(shù)限限制性核核酸內(nèi)切切酶識 DNAA 序列列的結(jié)構(gòu)構(gòu)特點。. 解釋釋質(zhì)粒，為為什么質(zhì)質(zhì)?？勺髯鳛榛蛞蜉d體。參考答案 一、單項選選擇題1. 2. 3. 4. 55. 6. 7. 8. 9. 100.11.122.13.144.E15.二、多項選選擇題1.、2.、 3.、 4.、5.、 6.、 7.、 8.、9.、10.、三、填空題題 DNNA重組組、克隆 載體體、目的基基因與載載體、導(dǎo)導(dǎo)入、篩篩選 細菌菌、雙鏈DDNA中中的特定定堿基序序列、磷酸二二酯 目的的基

12、因、制備基基因組文文庫、構(gòu)建ccDNAA文庫、PCRR擴增、人工合合成DNNA技術(shù)術(shù) 黏性性末端連連接、平頭末末端連接接、人工接接頭法、同源多多聚尾連連接法 轉(zhuǎn)化化、轉(zhuǎn)導(dǎo) DNNA、 mRNNA。8 DNNA、具具有獨立立復(fù)制能能力、具具有多克克隆位點點、具有有篩選標標志、具具有足夠夠的容量量、能導(dǎo)導(dǎo)入受體體細胞四、名詞解解釋 1、是指在在體外將將DNAA分子“剪切”并重新新“拼接”形成一一個新的的重組DDNA分分子，然然后將它它導(dǎo)入細細菌或動動物細胞胞內(nèi)使之之表達，產(chǎn)產(chǎn)生出人人類所需需要的基基因產(chǎn)物物或改造造新的生生物品種種。2、是指用用酶學(xué)方方法將不不同來源源的DNNA進行行切割、連連接，

13、組組成一個個新的DDNA分分子的過過程。3、克隆(cloone)原指一一個親本本細胞經(jīng)經(jīng)無性繁繁殖產(chǎn)生生無數(shù)個個相同細細胞的子子代群體體的過程程。4、是指將將重組DDNA分分子導(dǎo)入入到合適適的受體體細胞中中，使其其擴增和和繁殖，以以獲得大大量的相相同的DDNA分分子，又又稱分子子克隆或或基因克克隆。5、要分離離和克隆隆的相應(yīng)應(yīng)基因常常稱為目目的基因因。因目目的基因因片段需需插入載載體，導(dǎo)導(dǎo)入宿主主細胞內(nèi)內(nèi)進行復(fù)復(fù)制或表表達，所所以對宿宿主細胞胞DNAA而言，又又稱它為為外源性性基因或或外源性性DNAA。6、能夠攜攜帶外源源DNAA進入受受體細胞胞內(nèi)進行行復(fù)制或或表達的的DNAA分子，被被稱為基

14、基因載體體。7、是獨立立于細菌菌染色體體之外，能能自主復(fù)復(fù)制的共共價閉合合環(huán)狀雙雙鏈DNNA。8、是由細細菌產(chǎn)生生的一類類能特異異識別雙雙鏈DNNA中的的特定堿堿基序列列，并在在識別位位點切割割磷酸二二酯鍵的的核酸內(nèi)內(nèi)切酶(簡稱限限制酶)。9、將所有有的重組組DNAA分子都都導(dǎo)入宿宿主細胞胞進行擴擴增，得得到分子子克隆的的混合體體，這樣樣一個混混合體稱稱為基因因文庫。10、從組組織細胞胞中分離離得到純純化的mmRNAA，然后后以mRRNA為為模板，利利用逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶合合成其互互補DNNA，再再復(fù)制成成雙鏈ccDNAA片段，與與適當載載體連接接后導(dǎo)入入受體菌菌內(nèi)，擴擴增，構(gòu)構(gòu)建cDDNA文文庫。1

15、1、是指指以質(zhì)粒粒為載體體構(gòu)建的的重組DDNA導(dǎo)導(dǎo)入處于于感受態(tài)態(tài)的宿主主細胞，并并使其獲獲得新的的表型的的過程。12、以噬噬菌體或或細胞病病毒為載載體構(gòu)建建的重組組DNAA導(dǎo)入受受體細胞胞并獲得得新的表表型的過過程稱為為轉(zhuǎn)導(dǎo)(traansdducttionn)。13、真核核細胞主主動攝取取或被動動導(dǎo)入外外源DNNA片段段而獲得得新的表表型的過過程稱為為轉(zhuǎn)染。五、問答題題 、 具有獨獨立復(fù)制制能力； 具備備多個限限制酶的的識別位位點(多多克隆位位點)； 具有有遺傳表表型或篩篩選標志志； 有足足夠的容容量以容容納外源源DNAA片段； 可導(dǎo)導(dǎo)入受體體細胞。經(jīng)經(jīng)過人工工構(gòu)建的的載體，不不但能與與外源

16、基基因相連連接，導(dǎo)導(dǎo)入受體體細胞，還還能利用用本身的的調(diào)控系系統(tǒng)，使使外源基基因在宿宿主細胞胞中復(fù)制制并表達達。、（1）限限制性核核酸內(nèi)切切酶：識別并并特異切切割DNNA堿基基序列；（2）DNA pol：催化缺口平移，制備高比度DNA探針；（3）Klenow片段：合成cDNA第二條鏈，補齊或標記雙鏈DNA3端；（4）TaqDNA聚合酶：DNA體外擴增(PCR)；（5）逆轉(zhuǎn)錄酶：催化合成cDNA；(6) T4DNA聚合酶：聚合補平或標記DNA平末端或3凹端等；（7）DNA連接酶：催化2條DNA鏈之間形成磷酸二酯鍵；（8）大腸桿菌DNA連接酶： 應(yīng)用于黏端DNA或切口間連接；（9）T4DNA連接酶

17、：應(yīng)用于黏性或平末端DNA的連接；（10）末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶：給載體或cDNA加上互補的同聚尾、加標記物；（11）堿性磷酸酶：防止載體自身連接、32P標記5端；（12）T4多核苷酸激酶：5端磷酸化、5端標記放射性核素。、（1）分分離制備備目的基基因“分”；（22）切割割目的基基因和載載體“切”；（3）目目的基因因與載體體的連接接“接接”；（4）將將重組DDNA導(dǎo)導(dǎo)入宿主主細胞“轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)”；（5）篩篩選并鑒鑒定含重重組DNNA分子子的受體體細胞克克隆“篩”；（6）克克隆基因因在受體體細胞內(nèi)內(nèi)進行復(fù)復(fù)制或表表達“表”。、（1） 制備基基因組文文庫；（2） 構(gòu)建ccDNAA文庫；（3） PCRR擴增目

18、目的基因因；（4） 人工合合成DNNA技術(shù)術(shù)。、 黏性末末端連接接：將靶基基因片段段和載體體DNAA經(jīng)相同的限限制酶分分別切割割，使它它們兩端端產(chǎn)生相相同的黏黏性末端端。然后后經(jīng)黏性性末端堿堿基配對對，再經(jīng)DNNA連接接酶作用用，共價價連接成成新的重重組DNNA分子子； 平頭末末端連接接：將平末端端的DNAA分子在在T4DNAA連接酶酶催化下下，使DDNA分分子的33OH和和5P進行共共價結(jié)合合； 人工工接頭法法： 是指利利用人工工接頭加加在平端端DNAA片段的的兩端，然然后用相相應(yīng)限制制酶切割割人工接接頭以產(chǎn)產(chǎn)生黏性性末端，再再與帶相相同黏性性末端的的載體相相連； 同源源多聚尾尾連接法法：在末端脫脫氧核苷苷酸轉(zhuǎn)移移酶催化化下，在線線型載體體分子的的兩端加加上單一一核苷酸酸如dGG組成的的多聚尾尾；而在在目的DDNA分分子的兩兩端加上上dC尾尾，兩者者混合退退火，然然后經(jīng)DNAA聚合酶酶或Kllenoow填補補裂口處處缺失的的核苷酸酸，再通通過DNNA連接接酶修復(fù)復(fù)成環(huán)狀狀的雙鏈鏈DNAA。6、限制性性核酸內(nèi)內(nèi)切酶(RE)是由細細菌產(chǎn)生生的一類類能特異異識別雙雙鏈DNNA中的的特定堿堿基序列列，并在在識別位位點切割割磷酸二二酯鍵的的核酸內(nèi)內(nèi)切酶(簡稱限限制酶)。限制制酶的識識別和切切割位點點通常是是488個bpp長度且且具有回回文序列列的DNNA