大腸菌群檢測(cè)操作規(guī)范優(yōu)質(zhì)推薦課件

1、大腸菌群檢測(cè)操作規(guī)范培訓(xùn)大腸菌群檢測(cè)操作規(guī)范培訓(xùn)目錄一、細(xì)菌介紹二、大腸桿菌生物學(xué)特性三、大腸桿菌檢測(cè)儀器、設(shè)備四、檢測(cè)培養(yǎng)基及試劑五、檢測(cè)前培養(yǎng)基準(zhǔn)備六、接種培養(yǎng)七、MPN單位介紹八、檢測(cè)注意事項(xiàng)目錄一、細(xì)菌介紹一、細(xì)菌介紹細(xì)菌是單細(xì)胞原核微生物，個(gè)體微小（細(xì)胞直徑約0.5m, 0.5-5m），結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，以二等分裂方式繁殖。在自然界中，細(xì)菌分布最廣、數(shù)量最多。一、細(xì)菌介紹細(xì)菌是單細(xì)胞原核微生物，個(gè)體微小（細(xì)胞直徑約0.1、細(xì)菌的形態(tài) 細(xì)菌個(gè)體微小、形態(tài)各異球菌桿菌弧菌與彎曲菌螺旋菌及螺旋體不規(guī)則形弧菌1、細(xì)菌的形態(tài) 細(xì)菌個(gè)體微小、形態(tài)各異弧菌2、細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括：細(xì)胞壁、 細(xì)胞

2、膜、間體、細(xì)胞漿、核糖體、細(xì)胞質(zhì)。 細(xì)菌的附屬結(jié)構(gòu)包括：質(zhì)粒、莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞。2、細(xì)菌的結(jié)構(gòu) 細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括：細(xì)胞壁、 細(xì)胞膜、間體、3、細(xì)菌的繁殖 細(xì)菌最普遍、最主要的繁殖方式：二分分裂繁殖。在分裂前先延長(zhǎng)菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長(zhǎng)軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞質(zhì)膜凹陷生長(zhǎng)，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。 3、細(xì)菌的繁殖 細(xì)菌最普遍、最主要的繁殖方式：二分分裂繁殖。4、細(xì)菌的菌落 單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)菌落。4、細(xì)菌的菌落 單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為

3、濕潤(rùn)、粘稠、光滑、較透明、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位顏色一致等。 細(xì)菌菌落常表現(xiàn)為濕潤(rùn)、粘稠、光滑、較透明、易挑取、質(zhì)地均勻以細(xì)菌的菌落圖細(xì)菌的菌落圖二、大腸桿菌生物學(xué)特性大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。主要包括埃希氏菌、檸檬酸細(xì)菌、腸桿菌、克雷伯氏菌等，均屬于腸桿菌。二、大腸桿菌生物學(xué)特性大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、大腸菌群以大腸埃希氏菌為主，是革蘭氏陰性、兩端鈍圓的桿菌，無芽孢，以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)或不運(yùn)動(dòng)。最適生長(zhǎng)溫度為37，在42-44條件下仍能生長(zhǎng)，生長(zhǎng)溫度范圍為15-46。大腸菌群以大腸埃希氏菌為主，是革蘭氏陰性、

4、兩端鈍圓的桿菌，無1、大腸桿菌平板菌落圖片1、大腸桿菌平板菌落圖片2、大腸桿菌革蘭氏染色圖片2、大腸桿菌革蘭氏染色圖片3、大腸桿菌微菌落圖片3、大腸桿菌微菌落圖片4、大腸桿菌透射電鏡圖片4、大腸桿菌透射電鏡圖片5、大腸桿菌掃描電鏡圖片5、大腸桿菌掃描電鏡圖片85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:100的稀釋液；單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖后，會(huì)形成以母細(xì)胞為中心的一堆肉眼可見、有一定形態(tài)構(gòu)造的子細(xì)胞集團(tuán)菌落。細(xì)菌是單細(xì)胞原核微生物，個(gè)體微小（細(xì)胞直徑約0.4、先熄滅酒精燈再擦拭操作臺(tái)和酒精燈。雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外，其它成分加倍。無典型菌落，應(yīng)挑取紅色和粉色菌落。將接種完的試管連同試管架一

5、起置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察乳糖膽鹽發(fā)酵管的變化情況。另換1根1ml滅菌移液管吸取1:10的稀釋液1ml于含有9ml0.3、拿刻度吸管時(shí)，注意用手托住吸管筒輕輕抖出。凡是革蘭氏陰性無芽孢桿菌乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣的菌落即可報(bào)告大腸菌群陽性。采用9管法，對(duì)樣品選三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管相應(yīng)的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，然后根據(jù)情況做出判斷陽性和陰性，再根據(jù)不同稀釋度的陽性管數(shù)查表即可得到被測(cè)樣品相應(yīng)指標(biāo)的MPN值。同時(shí)分別吸取1ml樣品試液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。革蘭氏染色和乳糖復(fù)發(fā)酵時(shí)如有典型菌落，則挑取典型菌落；1、伊紅美藍(lán)瓊脂平板分離主要包括埃希氏菌、檸檬

6、酸細(xì)菌、腸桿菌、克雷伯氏菌等，均屬于腸桿菌。01ml (10-2濃度)3支。85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:100的稀釋液；2、為了盡量減少污染，接種培養(yǎng)時(shí)先接生理鹽水管再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。2、為了盡量減少污染，接種培養(yǎng)時(shí)先接生理鹽水管再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。2、接種培養(yǎng)時(shí)，先接生理水管，再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。6、大腸桿菌分裂圖片85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:100的稀釋液；6、大三、檢測(cè)儀器、設(shè)備 冰箱：04 恒溫培養(yǎng)箱：361 恒溫水浴鍋：461 微生物顯微鏡三、檢測(cè)儀器、設(shè)備 冰箱：04架盤藥物天平：0g500g，精確至0.5g 三角瓶：500ml 滅菌吸管：1ml、10ml 滅

7、菌平皿：直徑90mm 試管：18180mm架盤藥物天平：0g500g，精確至0.5g四、檢測(cè)培養(yǎng)基及試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管伊紅美藍(lán)瓊脂乳糖發(fā)酵管革蘭氏染色液生理鹽水四、檢測(cè)培養(yǎng)基及試劑乳糖膽鹽發(fā)酵管乳糖膽鹽發(fā)酵管：用于大腸菌群的測(cè)定。35g乳糖膽鹽于1升蒸餾水中，溶解，分裝于發(fā)酵試管中，放入小倒管，11515分鐘高壓滅菌。雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管除蒸餾水外，其它成分加倍。乳糖膽鹽發(fā)酵管：用于大腸菌群的測(cè)定。35g乳糖膽鹽于1升蒸餾乳糖發(fā)酵管：大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用。 30g乳糖于1升蒸餾水中，溶解，分裝于發(fā)酵試管中，放入小倒管，11515分鐘高壓滅菌。乳糖發(fā)酵管：大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用。 30g乳糖于1升蒸餾水

8、中，伊紅美蘭瓊脂：用于大腸菌群的固體平板檢測(cè)。 37.5g于1升蒸餾水中，搖勻，加熱煮沸，12115分鐘高壓滅菌。伊紅美蘭瓊脂：用于大腸菌群的固體平板檢測(cè)。 37.5g于1升五、檢測(cè)前培養(yǎng)基準(zhǔn)備 檢查預(yù)先經(jīng)過滅菌處理的乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基小導(dǎo)管內(nèi)是否有氣體。按產(chǎn)品品種將培養(yǎng)基分別放在試管架內(nèi)，同時(shí)將9ml 0.85%滅菌鹽水管也放入相應(yīng)的試管架內(nèi)。五、檢測(cè)前培養(yǎng)基準(zhǔn)備 檢查預(yù)先經(jīng)過滅菌處理的乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)六、接種培養(yǎng) （一）酸牛奶系列產(chǎn)品酸牛奶系列產(chǎn)品接種單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基9支管，分別接種樣品量為1ml (原濃度)3支，0.1ml (10-1濃度)3支，0.01ml (10-2濃度)3支。

9、 六、接種培養(yǎng) （一）酸牛奶系列產(chǎn)品1、 1ml接種培養(yǎng)在無菌條件下，用1ml滅菌吸管吸取1ml樣品試液于含有9ml0.85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:10的稀釋液；同時(shí)分別吸取1ml樣品試液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。1、 1ml接種培養(yǎng)在無菌條件下，用1ml滅菌吸管吸取1ml錄像中存在的細(xì)節(jié)問題：若有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則要做證實(shí)試驗(yàn)。挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色后接種乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基，置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察產(chǎn)氣情況。滅菌平皿：直徑90mm1ml (10-1濃度)3支，0.另換1根1ml滅菌移液管吸取1:10的稀釋液1ml于含有9ml0.乳糖膽鹽發(fā)酵管：

10、用于大腸菌群的測(cè)定。在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上的菌落如為深紫色有金屬光澤，則為典型菌落，98%以上為大腸菌群。1、用酒精棉球擦拭操作臺(tái)，點(diǎn)酒精燈，消毒手，擦拭樣品表面并記錄，消毒手，消毒剪刀，剪開樣品袋。將接種完的試管連同試管架一起置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察乳糖膽鹽發(fā)酵管的變化情況。無典型菌落，應(yīng)挑取紅色和粉色菌落。01ml (10-2濃度)3支。食品大腸菌群是以每克或100ML中大腸菌群的最近似值，是用MPN來表示。2、為了盡量減少污染，接種培養(yǎng)時(shí)先接生理鹽水管再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。酸牛奶系列產(chǎn)品接種單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基9支管，分別接種樣品量為1ml (原濃度)3支，0.3、大腸桿菌微

11、菌落圖片85%滅菌鹽水管也放入相應(yīng)的試管架內(nèi)。在分裂前先延長(zhǎng)菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長(zhǎng)軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞質(zhì)膜凹陷生長(zhǎng)，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。主要包括埃希氏菌、檸檬酸細(xì)菌、腸桿菌、克雷伯氏菌等，均屬于腸桿菌。乳糖發(fā)酵管：大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用。2、 0.1ml接種培養(yǎng)另換1根1ml滅菌移液管吸取1:10的稀釋液1ml于含有9ml0.85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:100的稀釋液；同時(shí)分別吸取1ml 1:10稀釋液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。錄像中存在的細(xì)節(jié)問題：2、 0.1ml接種培養(yǎng)另換1根1ml3、 0.01ml接

12、種培養(yǎng)另換1根1ml滅菌移液管分別吸取1ml 1:100稀釋液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。3、 0.01ml接種培養(yǎng)另換1根1ml滅菌移液管分別吸取14、接種過程操作錄像檢測(cè)單料大腸檢測(cè).MPG4、接種過程操作錄像檢測(cè)單料大腸檢測(cè).MPG討論錄像中存在的問題：1、整個(gè)微生物檢測(cè)前應(yīng)先消毒手。2、為了盡量減少污染，接種培養(yǎng)時(shí)先接生理鹽水管再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。3、拿刻度吸管時(shí)，注意用手托住吸管筒輕輕抖出。4、先熄滅酒精燈再擦拭操作臺(tái)和酒精燈。5、剪刀用完后及時(shí)的進(jìn)行擦拭干凈。討論錄像中存在的問題：5、接種后培養(yǎng)將接種完的試管連同試管架一起置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h

13、，觀察乳糖膽鹽發(fā)酵管的變化情況。5、接種后培養(yǎng)將接種完的試管連同試管架一起置于361的培6、結(jié)果查詢并記錄若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大腸菌群陰性。若有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則要做證實(shí)試驗(yàn)。6、結(jié)果查詢并記錄若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大（二）活性乳酸菌飲料系列產(chǎn)品活性乳酸菌飲料系列產(chǎn)品接種雙料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基3支管，單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基6支，分別接種樣品量為10ml 3支，1ml 3支，0.1ml 3支。（二）活性乳酸菌飲料系列產(chǎn)品活性乳酸菌飲料系列產(chǎn)品接種雙料乳1、 10ml接種培養(yǎng)在無菌條件下，用1ml滅菌吸管吸取1ml樣品試液于含有9ml0.85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖

14、勻制成1:10的稀釋液；同時(shí)用10ml滅菌吸管分別吸取10ml樣品試液于3支雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。1、 10ml接種培養(yǎng)在無菌條件下，用1ml滅菌吸管吸取1m2、 1ml接種培養(yǎng)另用1ml滅菌移液管分別吸取1ml 樣品試液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。2、 1ml接種培養(yǎng)另用1ml滅菌移液管分別吸取1ml 樣品3、 0.1ml接種培養(yǎng)另換1根1ml滅菌移液管分別吸取1ml 1:10稀釋液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。3、 0.1ml接種培養(yǎng)另換1根1ml滅菌移液管分別吸取1m30g乳糖于1升蒸餾水中，溶解，分裝于發(fā)

15、酵試管中，放入小倒管，11515分鐘高壓滅菌。食品大腸菌群是以每克或100ML中大腸菌群的最近似值，是用MPN來表示。將接種完的試管連同試管架一起置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察乳糖膽鹽發(fā)酵管的變化情況。無典型菌落，應(yīng)挑取紅色和粉色菌落。5、剪刀用完后及時(shí)的進(jìn)行擦拭干凈。革蘭氏染色和乳糖復(fù)發(fā)酵時(shí)如有典型菌落，則挑取典型菌落；85%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:100的稀釋液；三、大腸桿菌檢測(cè)儀器、設(shè)備主要包括埃希氏菌、檸檬酸細(xì)菌、腸桿菌、克雷伯氏菌等，均屬于腸桿菌。35g乳糖膽鹽于1升蒸餾水中，溶解，分裝于發(fā)酵試管中，放入小倒管，11515分鐘高壓滅菌。乳糖發(fā)酵管：大腸菌群證實(shí)試驗(yàn)用。

16、若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大腸菌群陰性。同時(shí)分別吸取1ml樣品試液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。另換1根1ml滅菌移液管分別吸取1ml無典型菌落，應(yīng)挑取紅色和粉色菌落。五、檢測(cè)前培養(yǎng)基準(zhǔn)備架盤藥物天平：0g500g，精確至0.乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)小導(dǎo)管內(nèi)如無氣泡，需輕振試管，若有氣泡上冒，也算產(chǎn)氣。4、先熄滅酒精燈再擦拭操作臺(tái)和酒精燈。1、 10ml接種培養(yǎng)4、接種過程操作錄像檢測(cè)雙料大腸檢測(cè).MPG30g乳糖于1升蒸餾水中，溶解，分裝于發(fā)酵試管中，放入小倒管討論錄像中存在的細(xì)節(jié)問題：1、整個(gè)微生物檢測(cè)前應(yīng)先消毒手。2、為了盡量減少污染，接種培養(yǎng)時(shí)先接生理鹽

17、水管再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。3、拿刻度吸管時(shí)，注意用手托住吸管筒輕輕抖出。4、先熄滅酒精燈再擦拭操作臺(tái)和酒精燈。5、剪刀用完后及時(shí)的進(jìn)行擦拭干凈。討論錄像中存在的細(xì)節(jié)問題：5、接種后培養(yǎng)將接種完的試管連同試管架一起置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察乳糖膽鹽發(fā)酵管的變化情況。5、接種后培養(yǎng)將接種完的試管連同試管架一起置于361的培6、結(jié)果查詢并記錄若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大腸菌群陰性。 若有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則要做證實(shí)試驗(yàn)。6、結(jié)果查詢并記錄若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大（三）證實(shí)試驗(yàn)1、伊紅美藍(lán)瓊脂平板分離將產(chǎn)酸產(chǎn)氣乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)的培養(yǎng)物分別接種于伊紅美蘭瓊脂平板(劃線分

18、離)，置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h。（三）證實(shí)試驗(yàn)1、伊紅美藍(lán)瓊脂平板分離接種和分離工具1接種針 2.接種環(huán) 3.接種鉤 4.5.玻璃涂棒 6.接種圈 7.接種鋤 8.小解剖刀接種和分離工具1接種針 2.接種環(huán) 3.接種鉤 4.5.玻平板分離畫線法1.斜線法 2.曲線法 3.方格法 4.放射法 5.四格法平板分離畫線法1.斜線法 2.曲線法 3.方格法 4.放射法將伊紅美藍(lán)瓊脂平板從培養(yǎng)箱取出后,觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和乳糖復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)。革蘭氏染色：見革蘭氏染色及鏡檢操作規(guī)范。將伊紅美藍(lán)瓊脂平板從培養(yǎng)箱取出后,觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染（四）乳糖發(fā)酵試驗(yàn)挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色后接種

19、乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基，置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察產(chǎn)氣情況。（四）乳糖發(fā)酵試驗(yàn)挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色后接種乳糖發(fā)酵培凡是革蘭氏陰性無芽孢桿菌乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣的菌落即可報(bào)告大腸菌群陽性。凡是革蘭氏陰性無芽孢桿菌乳糖發(fā)酵管產(chǎn)酸產(chǎn)氣的菌落即可報(bào)告大腸在分裂前先延長(zhǎng)菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長(zhǎng)軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞質(zhì)膜凹陷生長(zhǎng)，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。另換1根1ml滅菌移液管吸取1:10的稀釋液1ml于含有9ml0.在無菌條件下，用1ml滅菌吸管吸取1ml樣品試液于含有9ml0.恒溫培養(yǎng)箱：36185%滅菌鹽水試管中，振蕩搖勻制成1:100的稀釋液；1

20、、 10ml接種培養(yǎng)挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色后接種乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基，置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察產(chǎn)氣情況。另換1根1ml滅菌移液管分別吸取1ml2、為了盡量減少污染，接種培養(yǎng)時(shí)先接生理鹽水管再接乳糖膽鹽發(fā)酵管。若所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則報(bào)告大腸菌群陰性。大腸菌群檢測(cè)操作規(guī)范培訓(xùn)乳糖膽鹽發(fā)酵管：用于大腸菌群的測(cè)定。挑取可疑菌落進(jìn)行革蘭氏染色后接種乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基，置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察產(chǎn)氣情況。按產(chǎn)品品種將培養(yǎng)基分別放在試管架內(nèi)，同時(shí)將9ml 0.大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。若有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則要做證實(shí)試驗(yàn)。4、先熄滅

21、酒精燈再擦拭操作臺(tái)和酒精燈。1、伊紅美藍(lán)瓊脂平板分離無典型菌落，應(yīng)挑取紅色和粉色菌落。同時(shí)分別吸取1ml樣品試液于3支單料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。根據(jù)證實(shí)為大腸菌群的陽性管數(shù)，查MPN檢索表，查找每100ml樣品內(nèi)的大腸菌群的MPN值。在分裂前先延長(zhǎng)菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長(zhǎng)軸分裂，細(xì)胞七、MPN單位介紹MPN=Most Probable Number ，最大可能數(shù) ，是一種利用統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測(cè)微生物的方法。食品大腸菌群是以每克或100ML中大腸菌群的最近似值，是用MPN來表示。七、MPN單位介紹MPN=Most Probable Num采用9管法，對(duì)樣品選三個(gè)稀釋度，

22、每個(gè)稀釋度接種三管相應(yīng)的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，然后根據(jù)情況做出判斷陽性和陰性，再根據(jù)不同稀釋度的陽性管數(shù)查表即可得到被測(cè)樣品相應(yīng)指標(biāo)的MPN值。采用9管法，對(duì)樣品選三個(gè)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種三管相應(yīng)的培養(yǎng)八、注意事項(xiàng) 乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)小導(dǎo)管內(nèi)如無氣泡，需輕振試管，若有氣泡上冒，也算產(chǎn)氣。 在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上的菌落如為深紫色有金屬光澤，則為典型菌落，98%以上為大腸菌群。八、注意事項(xiàng) 乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)小導(dǎo)管內(nèi)如無氣泡，需輕振試管革蘭氏染色和乳糖復(fù)發(fā)酵時(shí)如有典型菌落，則挑取典型菌落；無典型菌落，應(yīng)挑取紅色和粉色菌落。如果只有紅色或粉色菌落，應(yīng)挑取3個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色，并接種乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基。如果有紅色和粉

23、色菌落，則各挑取3個(gè)做革蘭氏染色，各挑取3個(gè)接種乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基混合接種。革蘭氏染色和乳糖復(fù)發(fā)酵時(shí)如有典型菌落，則挑取典型菌落；無典型另換1根1ml滅菌移液管分別吸取1ml細(xì)菌個(gè)體微小、形態(tài)各異同時(shí)用10ml滅菌吸管分別吸取10ml樣品試液于3支雙料乳糖膽鹽發(fā)酵管內(nèi)，并輕微振蕩搖勻，放入原位置。二、大腸桿菌生物學(xué)特性大腸菌群檢測(cè)操作規(guī)范培訓(xùn)在分裂前先延長(zhǎng)菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長(zhǎng)軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞質(zhì)膜凹陷生長(zhǎng)，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔壁，這樣便產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞。01ml (10-2濃度)3支。若有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，則要做證實(shí)試驗(yàn)。4、大腸桿菌透射電鏡圖片根據(jù)證實(shí)為大腸菌群的陽性管數(shù)，查

24、MPN檢索表，查找每100ml樣品內(nèi)的大腸菌群的MPN值。5、剪刀用完后及時(shí)的進(jìn)行擦拭干凈。細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)包括：細(xì)胞壁、 細(xì)胞膜、間體、細(xì)胞漿、核糖體、細(xì)胞質(zhì)。1、用酒精棉球擦拭操作臺(tái)，點(diǎn)酒精燈，消毒手，擦拭樣品表面并記錄，消毒手，消毒剪刀，剪開樣品袋。將接種完的試管連同試管架一起置于361的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)242h，觀察乳糖膽鹽發(fā)酵管的變化情況。恒溫培養(yǎng)箱：361酸牛奶系列產(chǎn)品接種單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基9支管，分別接種樣品量為1ml (原濃度)3支，0.細(xì)菌是單細(xì)胞原核微生物，個(gè)體微?。?xì)胞直徑約0.在分裂前先延長(zhǎng)菌體，染色體復(fù)制為二，然后垂直于長(zhǎng)軸分裂，細(xì)胞赤道附近的細(xì)胞質(zhì)膜凹陷生長(zhǎng)，直至形成橫隔膜，同時(shí)形成橫隔