結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能培訓(xùn)課件_第1頁
結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能培訓(xùn)課件_第2頁
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1、結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能研究背景microRNA的概念及其作用機(jī)制 2結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能研究背景microRNA的概念及其作用機(jī)制 2結(jié)直腸癌異時(shí)性研究背景miRNA對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要的作用miRNA在不同腫瘤組織中具有特征性表達(dá)模式miRNA與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān)可用于診斷CLL、乳腺癌和軟組織肉瘤等腫瘤miRNA與結(jié)直腸癌(CRC)肝轉(zhuǎn)移的關(guān)系?3結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能研究背景miRNA對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著重要的作用3結(jié)直腸癌異實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮Y選可能有助于預(yù)測(cè)CRC肝轉(zhuǎn)移的m

2、iRNAsCRC肝轉(zhuǎn)移相關(guān)的miRNAs功能研究4結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)?zāi)康?結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能培訓(xùn)課件實(shí)驗(yàn)方案體外培養(yǎng)病毒感染 基因增強(qiáng)表達(dá)效率測(cè)定 比較轉(zhuǎn)染前后生物學(xué)性狀的改變 低轉(zhuǎn)移潛能CRC細(xì)胞系HT29接種裸鼠移殖瘤裸鼠局部成瘤能力浸潤(rùn)能力生長(zhǎng)增殖裸鼠局部瘤的轉(zhuǎn)移潛能攜帶miRNA前體的慢病毒表達(dá)載體6結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)方案體外培養(yǎng)病毒感染 基因增實(shí)驗(yàn)結(jié)果完成miRNA芯片檢測(cè) 無肝轉(zhuǎn)移的CRC組織:5例伴有同時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的CRC組織:5例篩選出7個(gè)在兩組間差異

3、表達(dá)倍數(shù)大于1.7倍的miRNAsmiR-181a,152,320aLet-7d,miR-15b,20b,2237結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果完成miRNA芯片檢測(cè) 7結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子實(shí)驗(yàn)結(jié)果構(gòu)建組織芯片同時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的CRC原發(fā)灶 :n=160異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的CRC原發(fā)灶 :n=37無肝轉(zhuǎn)移的CRC原發(fā)灶:n=97遠(yuǎn)癌正常CRC粘膜:n=72原位雜交Dig標(biāo)記的LNA探針8結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果構(gòu)建組織芯片8結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物實(shí)驗(yàn)結(jié)果構(gòu)建慢病毒過表達(dá)載體LV-miR-181a-GFPLV-NC-GFP慢病毒載體轉(zhuǎn)

4、染HT29細(xì)胞系9結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果構(gòu)建慢病毒過表達(dá)載體9結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志實(shí)驗(yàn)結(jié)果Figure 1. miRNA detection in colorectal cancer tissues by LNA-ISH. 10結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果Figure 1. miRNA detection 表1. miRNAs在CRC組織中的表達(dá)情況11結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能表1. miRNAs在CRC組織中的表達(dá)情況11結(jié)直腸癌異時(shí)Figure 2. . overall survival in CRC pa

5、tients with different expression level of miR-181a 12結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 2. . overall survival iFigure 3.The expression of reporter gene GFP in HT29 cell line13結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 3.The expression of repFigure 4.The fold change of the miR-181a expression in cell line14結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子

6、標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 4.The fold change of thFigure 5. miR-181a enhance the proliferation of HT29 cell15結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 5. miR-181a enhance theFigure 6. miR-181a enhance the migration of HT29 cell in vitro16結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 6. miR-181a enhance theFigure 7. miR-181a enhance the mig

7、ration and invasion of HT29 cell in vitro17結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 7. miR-181a enhance theFigure 8. In vivo tumor growth in NOD-SCID mice18結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 8. In vivo tumor growthFigure 9. Xenograft tumors in three groups 19結(jié)直腸癌異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物和生物學(xué)功能Figure 9. Xenograft tumors in 結(jié)論miR-181a對(duì)預(yù)測(cè)CRC異時(shí)性肝轉(zhuǎn)移可能具有重要的意義miR-181a高表達(dá)是預(yù)后不良的分子標(biāo)志物miR

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