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1、PAGE8重組技術(shù)的基本工具【學(xué)習(xí)目標(biāo)】1通過(guò)觀察圖像、查閱資料,了解基因工程的誕生歷程,說(shuō)出基因工程的概念;2通過(guò)閱讀文本、觀察圖片、師生交流,說(shuō)出DNA重組技術(shù)所需的三種基因工具的作用?!緦W(xué)習(xí)重點(diǎn)】DNA重組技術(shù)所需的三種基因工具的作用【基礎(chǔ)回扣】含有指導(dǎo)生物體生命活動(dòng)的,每個(gè)DNA分子包含著成百上千個(gè)基因,基因控制著的合成。研究證實(shí),遺傳密碼在動(dòng)物、植物和微生物之間是的。的基本組成單位是,它包含3部分分別是、。在右側(cè)畫出由A、T、G、C四種堿基組成的四種核苷酸組成的DNA分子的平面結(jié)構(gòu)圖,并說(shuō)出DNA分子結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)【預(yù)習(xí)導(dǎo)學(xué)】一、基因工程原理1概念:基因工程又叫或DNA重組技術(shù)。它是按照
2、人們的意愿,把一種生物的分離出來(lái),在體外巧妙的進(jìn)行,然后轉(zhuǎn)入另一種體內(nèi),從而改造生物遺傳性狀,最終獲得我們所需要的新品種。2理解:操作環(huán)境:;操作對(duì)象:;操作水平:;結(jié)果:。3工具:進(jìn)行基因操作最少需要以下三種工具:準(zhǔn)確的工具(“分子手術(shù)刀”);DNA片段的工具(“分子縫合針”);基因進(jìn)入的載體(“分子運(yùn)輸車”)(一)限制性內(nèi)切酶-“分子手術(shù)刀”1種酶。2特點(diǎn):能將外來(lái)的切斷,由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進(jìn)行的,故名限制性核酸內(nèi)切酶。識(shí)別的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。3結(jié)果:形成兩種末端:和,當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的中心軸線切開時(shí),被限制酶
3、切開的DNA兩條的切口,帶有幾個(gè)伸出的核苷酸,他們之間正好互補(bǔ)配對(duì),這樣的切口叫黏性末端。當(dāng)限制酶從識(shí)別序列的切開時(shí),切開的DNA的切口,是平整的,這樣的切口叫平末端。4識(shí)別序列:大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由個(gè)核苷酸組成,也有少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由個(gè)核苷酸組成。(二)DNA連接酶-“分子縫合針”1作用:可把之間的縫隙“縫合”起來(lái),是把梯子兩邊扶手的斷口連接起來(lái),這樣分子才能形成。2分類:根據(jù)離得到的,作用是將粘性末端之間連接;另一類是從分離出來(lái)的,作用是既可以“縫合”粘性末端,又可以“縫合”平末端(效率低)。(三)基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體-“分子運(yùn)輸體”1作用:將送入受體細(xì)胞2種類:、三種3作為運(yùn)載
4、體必修具備的條件:(1)能在宿主細(xì)胞內(nèi)并穩(wěn)定地。(2)具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)以便與目的基因連接(3)具有某些基因(4)對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害(5)比較容易得到4、質(zhì)粒:是一種裸露的,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并能夠自我_能力的雙鏈_DNA分子;_的衍生物;_?!疽呻y解析】酶(1)DNA水解酶:能夠?qū)NA水解成4種脫氧核苷酸,徹底水解成磷酸、脫氧核糖、四種堿基。(2)DNA解旋酶:作用的部位是氫鍵,結(jié)果是DNA雙螺旋打開,形成DNA單鏈。注意:使DNA解成兩條長(zhǎng)鏈的方法除用解旋酶以外,在適當(dāng)?shù)母邷兀ㄈ?4)、重金屬鹽的作用下,也可使DNA解旋。(3)DNA聚合酶:能將單個(gè)的核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接成
5、DNA長(zhǎng)鏈。(4)DNA連接酶:是通過(guò)磷酸二酯鍵連接雙鏈DNA的缺口。DNA連接酶與DNA聚合酶作用的比較DNA連接酶DNA聚合酶不同點(diǎn)連接的DNA雙鏈單鏈模板不要模板要模板連接的對(duì)象2個(gè)DNA片段單個(gè)脫氧核苷酸加到已存在的單鏈DNA片段上相同點(diǎn)作用實(shí)質(zhì)形成磷酸二酯鍵化學(xué)本質(zhì)蛋白質(zhì)2、載體“分子運(yùn)輸車”。(1)載體必須具備三個(gè)條件:能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。具有一至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),供外源DNA片段插入。具有某些標(biāo)記基因,以便進(jìn)行篩選。(2)載體的種類:質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)、植物病毒等。【例題鞏固】1依下圖有關(guān)基因工程的工具酶功能的敘述,不正確的是()處的酶為限制核酸性內(nèi)切酶連接酶處的酶為解
6、旋酶處的為限制性內(nèi)切酶2不屬于目的基因與運(yùn)載體結(jié)合過(guò)程的是()A用一定的限制酶切割質(zhì)粒露出黏性末端B用同種限制酶切割目的基因露出黏性末端C將切下的目的基因的片段插入到質(zhì)粒切口處導(dǎo)入到受體細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增【基礎(chǔ)檢測(cè)】利用基因工程生產(chǎn)蛋白質(zhì)藥物,經(jīng)歷了三個(gè)發(fā)展階段。第一階段,將人的基因轉(zhuǎn)入細(xì)菌細(xì)胞;第二階段,將人的基因轉(zhuǎn)入小鼠等動(dòng)物的細(xì)胞。前兩個(gè)階段都是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),提取藥物。第三階段,將人的基因轉(zhuǎn)入活的動(dòng)物體,飼養(yǎng)這些動(dòng)物,從乳汁或尿液中提取藥物。(1)將人的基因轉(zhuǎn)入異種生物的細(xì)胞或個(gè)體內(nèi),能夠產(chǎn)生藥物蛋白的原理是基因能控制。(2)人的基因能和異種生物的基因拼接在一起,是因?yàn)樗鼈兊姆肿佣季哂须p螺旋結(jié)構(gòu),都是由四種構(gòu)成,基因中堿基配對(duì)的規(guī)律都是。(3)人的基因在異種生物細(xì)胞中表達(dá)成蛋白質(zhì)時(shí),需要經(jīng)過(guò)和翻譯兩個(gè)步驟。在翻譯中需要的模板是,原料是氨基酸,直接能源是ATP,搬運(yùn)工兼裝配工是,將氨基酸的肽鍵連接成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所是_,“翻譯”可理解為將由_個(gè)“字母”組成的核酸“語(yǔ)言”翻譯成由個(gè)“字母”組成的蛋白質(zhì)“語(yǔ)言”,從整體來(lái)看在翻譯中充任著“譯員”。【基礎(chǔ)鞏固】糖尿病是一種常見病,且發(fā)病率有逐年增加的趨勢(shì),以致發(fā)達(dá)國(guó)家把它列為第3號(hào)“殺手”。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:1目前,對(duì)糖尿病的治療,大多采用激素療法,所用激素為,由_細(xì)胞分泌。2目前檢測(cè)尿糖常用的試劑為,糖尿遇該試劑加
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