新項(xiàng)目方法驗(yàn)證總結(jié)GB5750.4揮發(fā)酚類4氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法、直接分光光度法

1、扌艮告日期：扌艮告日期：*方法驗(yàn)證報(bào)告方法名稱:生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法感官性狀和物理指標(biāo)GB/T5750.4-2006揮發(fā)酚4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法、直接分光光度法項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：扌艮告編寫人：TOC o 1-5 h z1方法概要3 HYPERLINK l bookmark21.1目的31.2測定原理3儀器與化學(xué)試劑32.1儀器32.2試劑33簡要操作步驟44方法確認(rèn)程序54.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：54.2方法檢出限：64.3方法精密度實(shí)驗(yàn)64.4方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)：75評價(jià)與驗(yàn)證結(jié)論95.1評價(jià)95.1.1空白值最低檢出限評價(jià)95.1.2精密度評價(jià)95.1.3準(zhǔn)確度評價(jià)95.2結(jié)論9扌艮告

2、日期：扌艮告日期：1方法概要1.1目的根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的檢測能力和條件以及檢測檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定評審準(zhǔn)則的要求，確認(rèn)開展揮發(fā)酚類生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法感官性狀和物理指標(biāo)GB/T5750.4-2006項(xiàng)目的檢測能力，通過試驗(yàn)進(jìn)行分析總結(jié)，編制此方法驗(yàn)證報(bào)告。1.2測定原理在PH=100.2和有氧化劑鐵氰化鉀存在的溶液中，酚與4-氨基安替吡啉形成紅色的安替吡啉染料，用三氯甲烷萃取后比色定量。酚的對位取代基可阻止酚與安替吡啉的反應(yīng),但羥基（一0H）、鹵素、磺?；ㄒ籗O2H）、羧基（一COOH）、甲氧基（一OCH3）除外。因此，鄰位硝基也阻止反應(yīng)，間位硝基部分地阻止反應(yīng)。2儀器與化學(xué)試劑2.1儀器儀器名稱規(guī)

3、格型號儀器出廠編號性能狀況（計(jì)量/校準(zhǔn)狀態(tài)、量程、靈敏度）有效期全玻璃蒸餾器500mL分液漏斗500mL具塞比色皿10mL容量瓶250mL分光光度計(jì)22試劑名稱生產(chǎn)廠家純度/規(guī)格氫氧化鈉三氯甲烷五水硫酸銅氯化銨氨水P20=0.88g/mL4-氨基安替吡啉鐵氰化鉀溴化鉀溴酸鉀可溶性淀粉水楊酸氧化鋅硫酸溶液1+9苯酚鹽酸P20=1.19g/mL碘化鉀硫代硫酸鈉重鉻酸鉀溶液c(1/6K2Cr2O7)=0.1000mol/L簡要操作步驟4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法：取樣250mL水樣，置于500mL全玻璃蒸餾瓶中。以甲基橙為指示劑用硫酸溶液調(diào)PH至4.0以下，使水樣由桔黃色變?yōu)槌壬尤?m

4、L硫酸銅溶液及數(shù)粒玻璃珠，加熱蒸餾。待蒸餾出總體積的90%左右，停止蒸餾。稍冷，向蒸餾瓶內(nèi)加入25mL純水，繼續(xù)蒸餾，知道收集250mL餾出液為止。注：由于酚隨水蒸氣揮發(fā)，速度緩慢，收集餾出液的體積應(yīng)與原水體積相等。試驗(yàn)證明接受的餾出液體積若不與原水樣相等，將影響回收率。比色測定將水樣餾出液全部轉(zhuǎn)入500mL分液漏斗中，另取酚標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0mL,0.5mL，1.00mL,2mL，4mL，6mL，8mL和10mL，分別置于預(yù)先盛有100mL純水的500mL分液漏斗中，最后補(bǔ)加純水至250mL。向各分液漏斗中加入2mL氨水-氯化銨緩沖液，混勻。再各加1.5mL的4-氨基安替吡啉溶液，混勻，最后加入

5、1.50mL鐵氰化鉀溶液，充分混勻，準(zhǔn)確靜置10min。加入10.0mL三氯甲烷，振搖2min，靜置分層。在分液漏斗頸部塞入濾紙卷將三氯甲烷萃取溶液緩緩放入干燥比色管中，用分光光度計(jì)，于460nm波長，用2cm比色皿，以三氯甲烷為參比，測量吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處揮發(fā)酚的質(zhì)量。直接分光光度法：水樣處理同上。吸取50mL蒸餾液（或取適量用純水稀釋至50mL）于50mL具塞比色管中。另取50mL比色管7支，分別加入每毫升含10Ug酚（以苯酚計(jì)）的標(biāo)準(zhǔn)使用液0mL、0.5mL,1.00mL,3.00mL,5.00mL,7.00mL和10.00mL,用純水稀釋至50mL。向水樣及標(biāo)準(zhǔn)中各

6、加入0.5mL緩沖液，搖勻。加1.0mL4-氨基安替吡啉溶液混勻。最后加入1.0mL鐵氰化鉀溶液，充分混勻，準(zhǔn)確放置10min。于510nm波長，用2cm比色皿，以空白管為參比,測量吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查處揮發(fā)酚的質(zhì)量。用（1）式計(jì)算。1)1)C6H5OH)式中：P（C6H5OH）水樣中揮發(fā)酚（以苯酚計(jì)）的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）m從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的樣品管中揮發(fā)酚的質(zhì)量（以苯酚計(jì)），單位為微克（Ug）V水樣體積，單位為毫克（mL）方法確認(rèn)程序4.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法濃度點(diǎn)1#2#3#4#5#6#7#8#體積（mL）00.501.00

7、2.004.006.008.0010.00吸光度校準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)直接分光光度法濃度點(diǎn)1#2#3#4#5#6#7#體積（mL）00.501.003.005.007.0010.00吸光度校準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)4.2方法檢出限：參考環(huán)境監(jiān)測分析方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂技術(shù)導(dǎo)則（HJ168-2010）,根據(jù)扣除空白值后的與0.01吸光度相對應(yīng)的濃度值作為檢出限，根據(jù)（2）式計(jì)算MDL=0.01/b（2）4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法檢出限為直接分光光度法檢出限為：4.3方法精密度實(shí)驗(yàn)配制6份濃度為0.1C、0.5C、0.9C的樣品溶液，（C即標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度點(diǎn)），按照給定分析方法的全過程進(jìn)行處理和測定

8、，記錄6個(gè)平行樣的測定結(jié)果，統(tǒng)計(jì)其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取分光光度法：平行號試樣0.1C0.5C0.9C測定結(jié)果（mg/L）123456平均值X（mg/L）標(biāo)準(zhǔn)偏差S（mg/L）相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD（%）注1：0.1C,0.5C,0.9C中的C即標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度點(diǎn)配制6份濃度為0.1C、0.5C、0.9C的樣品溶液，（C即標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度點(diǎn)），按照給定分析方法的全過程進(jìn)行處理和測定，記錄6個(gè)平行樣的測定結(jié)果，統(tǒng)計(jì)其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。直接分光光度法：平行號試樣0.1C0.5C0.9C測定結(jié)果（mg/L）123456平均值X（mg/L）標(biāo)準(zhǔn)偏差S（mg/L）相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD（%）注1

9、：0.1C,0.5C,0.9C中的C即標(biāo)準(zhǔn)曲線最高濃度點(diǎn)4.4方法準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)：（1）采用水中揮發(fā)酚成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，進(jìn)行準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品測試數(shù)據(jù)平行號有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品備注測定結(jié)果（mg/L）123456平均值X（mg/L）有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度（含量）山(mg/L)相對誤差REa國家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)值土不確定度。(2)分別取三種不同的水樣進(jìn)行實(shí)際樣品測試和加標(biāo)實(shí)驗(yàn)。分別取三個(gè)樣品500mL,在樣品中分別添加水中揮發(fā)酚成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)mL、mL、mL,按全程序每個(gè)樣品平行測定6次，分別計(jì)算每個(gè)樣品的加標(biāo)回收率，統(tǒng)計(jì)其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。4-氨基安替吡啉三氯甲烷萃取

10、分光光度法：實(shí)際樣品加標(biāo)測試數(shù)據(jù)平行號實(shí)際樣品備注樣品1樣品2樣品3樣品加標(biāo)樣品樣品加標(biāo)樣品樣品加標(biāo)樣品測定結(jié)果(mg/L)123456平均值x、y(mg/L)加標(biāo)量卩(mL)加標(biāo)回收率P注1：x為實(shí)際樣品測試均值，y為加標(biāo)樣品測試均值。直接分光光度法：平行號實(shí)際樣品備注樣品1樣品2樣品3樣品加標(biāo)樣品樣品加標(biāo)樣品樣品加標(biāo)樣品測定結(jié)果(mg/L)123456平均值X、y（mg/L）加標(biāo)量卩（mL）加標(biāo)回收率P注1：x為實(shí)際樣品測試均值，y為加標(biāo)樣品測試均值。5評價(jià)與驗(yàn)證結(jié)論5.1評價(jià)5.1.1空白值最低檢出限評價(jià)本方法的最低檢出限為；本實(shí)驗(yàn)的最低檢出限為,符合方法要求。5.1.2精密度評價(jià)本方法揮發(fā)酚濃度在時(shí)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為。本實(shí)驗(yàn)的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（變異系數(shù)）在，符合規(guī)范要求。5.1.3準(zhǔn)確度評價(jià)根據(jù)方法條件，檢測環(huán)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)揮發(fā)酚含量，其結(jié)果均在其不確定度范圍內(nèi)。5.2結(jié)論本次方法驗(yàn)證，所有參加人員均經(jīng)培訓(xùn)持證上崗；所用儀器設(shè)備均經(jīng)檢定并在有效期內(nèi)；檢測方法為有效版本；實(shí)驗(yàn)過程中本項(xiàng)目未收到其他項(xiàng)目干擾；分析實(shí)驗(yàn)過程中均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的試劑和蒸餾水。該項(xiàng)目測定結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)曲線