鹽補(bǔ)骨脂飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、鹽補(bǔ)骨脂飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究李先端程立平顧雪竹游修琪毛淑杰【摘要】：目的建立鹽補(bǔ)骨脂飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用傳統(tǒng)鑒別、薄層鑒別及hpl法測定生、鹽補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素成分含量；同時(shí)對其水分、灰分、浸出物、農(nóng)藥殘留、重金屬等進(jìn)展測定。結(jié)果10多個(gè)生、熟樣品中,補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素含量總和平均不低于0.5%和0.6%。結(jié)論hpl方法操作簡便、結(jié)果可靠、重現(xiàn)性好、專屬性強(qiáng),可用于補(bǔ)骨脂中成分含量的測定,制定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)、系統(tǒng)、結(jié)果準(zhǔn)確。【關(guān)鍵詞】鹽補(bǔ)骨脂補(bǔ)骨脂素異補(bǔ)骨脂素質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)abstrat：bjetivetestablishqualitystandardfrpreparedsliesfsal

2、t-pressedpsralearyliflia.ethdspsralenandispsratenintherudepsralearylifliaanditssalt-pressedprdutseredeterinedbytraditinalidentifiatin,thin-layeridentifiatinandhplethd.ater,ash,extrat,pestiideresidueandheavyetalserealsdeteted.resultstheaveragententfttalntentdeterinatinfrpsralenandispsrateninrethan10p

3、athesfrudeandpressedsaplesasntbel0.5%and0.6%respetively.nlusinhplethdissipleandtheresultisreliableithgdrepeatabilityandanbeusedfrthedeterinatinfthepnentsinpsralearyliflia.thequalityntrlstandardsfthepsralearylifliaisnrative,systeatiandtheresultisaurate.keyrds：salt-pressedpsralearyliflia；psralen；ispsr

4、ate；qualitystandards補(bǔ)骨脂為豆科植物補(bǔ)骨脂(psralearyliflial.)的枯燥成熟果實(shí)。具有溫腎助陽、納氣、止瀉的成效。用于陽痿遺精,遺尿尿頻,腰膝冷痛,腎虛作喘,五更泄瀉；外用治療白癜風(fēng)、斑禿等1,為臨床常用中藥。補(bǔ)骨脂中含有黃酮、香豆素、補(bǔ)骨脂酚等30余種化合物2,其中呋喃香豆精類成分補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素是其主要有效成分,具有光敏、抗癌、解痙及止血等作用。故目前補(bǔ)骨脂的質(zhì)量均以該2種成分的含量為根據(jù),來衡量補(bǔ)骨脂藥材的質(zhì)量優(yōu)劣。?中華人民共和國藥典?對鹽補(bǔ)骨脂飲片目前還沒有詳細(xì)的質(zhì)量要求。我們配合“常用中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)化研究課題(“九五攻關(guān)),對鹽補(bǔ)骨脂飲片質(zhì)量作了

5、較系統(tǒng)的研究,可為制定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供科學(xué)根據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。1實(shí)驗(yàn)材料1.1藥物購置產(chǎn)于四川、河南、云南、浙江地區(qū)的補(bǔ)骨脂藥材,經(jīng)鑒定為豆科植物補(bǔ)骨脂psralearyliflial.的枯燥成熟果實(shí)。1.2炮制品藥典法炮制品：取凈制補(bǔ)骨脂10kg,加2%鹽溶液1kg與藥材拌勻,悶1h,置炒藥機(jī)內(nèi)(130150)炒1518in,出鍋,晾干,即得。新法炮制品：取凈制補(bǔ)骨脂10kg,加水10kg,浸漬一晝夜,晾干,再加2%鹽溶液1kg,拌勻,悶1h,置炒藥機(jī)內(nèi)(130150)炒1518in,出鍋,晾干,即得。1.3儀器及試劑高效液相色譜儀(美國沃特斯公司)；yj-700滾桶式炒藥機(jī)(上海制造)。

6、補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素(中國生物制品檢定所提供)；硅膠g(青島海洋化工廠消費(fèi))。甲醇為色譜純；其它試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1飲片性狀生補(bǔ)骨脂：呈腎形略扁,長35,寬24,厚約1.5。外表黑褐色或灰褐色,有微細(xì)的網(wǎng)紋。質(zhì)堅(jiān)硬,破開內(nèi)有白色種仁,有油性。微有香氣,味辛微苦。藥典法鹽補(bǔ)骨脂：形如補(bǔ)骨脂,微鼓起,色澤加深。氣微香,味微咸。新法鹽補(bǔ)骨脂：腎形,微鼓起,長35,寬24。外表黑色、黑褐色或灰褐色,具細(xì)微網(wǎng)狀皺紋。頂端圓鈍,有一小突起,凹側(cè)有果梗痕。質(zhì)松脆,斷面棕褐色。果皮薄,與種子易別離。氣香,味微咸。2.2粉末顯微特征生補(bǔ)骨脂：粉末灰黃色。種皮柵欄細(xì)胞成片,橫斷面觀細(xì)胞1列,光芒帶位

7、于上端；頂面觀呈多角形,胞腔極校種皮支持細(xì)胞1列,側(cè)面觀呈啞鈴狀；外表觀呈類圓形,可見環(huán)狀增厚壁。內(nèi)生腺體自果皮表皮向內(nèi)著生,形大,常破碎。完好者側(cè)面觀略呈半球形,由十?dāng)?shù)個(gè)至數(shù)十個(gè)細(xì)胞組成,呈放射狀排列。子葉細(xì)胞模糊粉粒和油滴。藥典法鹽補(bǔ)骨脂：與生補(bǔ)骨脂不同之處為子葉細(xì)胞糊粉粒糊化狀。新法鹽補(bǔ)骨脂：粉末黃棕色。種皮柵狀細(xì)胞橫切面觀細(xì)胞1列,側(cè)壁上部較厚,下部較薄,內(nèi)壁薄；頂面觀多角形,胞腔極小,孔溝細(xì)而明晰；底面觀呈類圓形,胞腔較大。種皮支持細(xì)胞側(cè)面觀呈啞鈴狀；外表觀呈類圓形,可見環(huán)狀增厚壁。內(nèi)生腺體常破碎,完好者有時(shí)可見,外表觀類圓形,中央有多個(gè)子角形表皮細(xì)胞集成類圓形細(xì)胞群,周圍細(xì)胞縱向延

8、長,呈放射狀排列。內(nèi)胚乳細(xì)胞呈類圓形、類長方形或多角形,細(xì)胞界限不明顯,腔內(nèi)有糊化淀粉粒。2.3薄層鑒別取補(bǔ)骨脂粉末(60目)0.5g,加甲醇10l,超聲處理20in,濾過,濾液作為供試品溶液。另取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對照品,加甲醇制成每1l含1g的溶液,作為對照品溶液。照2022版?中華人民共和國藥典?(一部)附錄b試驗(yàn),汲取上述2種溶液各24l,分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上,以正己烷-醋酸乙酯(82)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%氫氧化鈉乙醇溶液,置紫外光燈(365n)下檢視。供試品色譜中,在與對照品色譜相應(yīng)位置上,顯一樣的2個(gè)藍(lán)白色熒光斑點(diǎn)。2.4檢查2.4.1水分測定取過2號篩的

9、粉末供試品24g,精細(xì)稱定,平鋪于枯燥至恒重的稱量瓶中,厚度不超過5,翻開瓶蓋,在100105枯燥5h,蓋瓶蓋,移置枯燥器中,冷卻30in,精細(xì)稱定重量,再在上述溫度枯燥1h,冷卻,稱重,至2次稱重的差異不超過5g為止。根據(jù)減失的重量,計(jì)算供試品含水量,測定結(jié)果見表1、表2。2.4.2總灰分及酸不溶性灰分測定總灰分測定：取過2號篩的粉末供試品34g,精細(xì)稱定,置熾灼至恒重的坩堝中,緩緩熾熱,注意防止燃燒,至完全炭化時(shí),逐漸升高溫度至500600,使完全炭化并至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?計(jì)算供試品總灰分的含量(%)。如供試品不易炭化,可將坩堝放冷,加熱水或10%硝酸銨溶液2l,使殘?jiān)睗?然后置水浴上

10、蒸干,殘?jiān)涨胺胱?至坩堝內(nèi)容物完全炭化。測定結(jié)果見表1、表2。酸不溶性灰分測定：勸2.4.2項(xiàng)下所得的灰分,在坩堝中參加稀鹽酸約10l,用外表皿覆蓋坩堝,置水浴上加熱10in,外表皿用熱水5l沖洗,洗液并入坩堝中,用無灰濾紙濾過,坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上,并洗滌至洗液不顯氯化物反響為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中,枯燥,熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?計(jì)算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)。測定結(jié)果見表1、表2。2.5浸出物測定取供試品約24g,稱定重量,置250l錐形瓶中,精細(xì)參加水100l,塞緊,稱定重量,靜置1h后,連接回流冷凝管,加熱至沸騰,并保持微沸1h。放冷后,取下錐形瓶,密塞,稱定

11、重量,用水補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過。精細(xì)量取續(xù)濾液25l,置已恒重的蒸發(fā)皿中,水浴上蒸干后,于105枯燥3h,移置枯燥器中,冷卻30in,迅速精細(xì)稱定重量,以枯燥品計(jì)算供試品中水浸出物的含量(%),結(jié)果見表1、表2。表1中試樣品中總灰分、酸不溶性灰分、水分、浸出物含量(略)表2中試樣品中總灰分、酸不溶性灰分、水分、浸出物含量(略)2.6含量測定3色譜柱：填料為krasil-18,5,4.6250(北京分析儀器廠填裝)；流動(dòng)相：甲醇-水-冰醋酸(50501)；柱溫：室溫；檢測波長：246n；流速：0.8l/in。對照品溶液的制備：精細(xì)稱取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對照品各2.5g,分別置25l量瓶中

12、,用甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻；分別精細(xì)量取補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素溶液各4l,置25l量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得(每ll含補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素各16g)。供試品溶液的制備：取補(bǔ)骨脂各飲片粉末(60目)約0.15g,精細(xì)稱定,置50l具塞三角瓶中,精細(xì)加甲醇25l,稱定重量,超聲處理20in,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,用微孔濾膜(0.45)濾過,即得。分別精細(xì)汲取上述對照品溶液與供試品溶液各10l,注入液相色譜儀,測定峰面積,計(jì)算含量,測定結(jié)果見表3、表4。表3中試13批樣品中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素含量測定結(jié)果(略)表4中試13批樣品中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素含

13、量測定結(jié)果(略)2.7重金屬測定精細(xì)稱取過2號篩的供試品粉末適量,經(jīng)微波消化處理后,用原子吸收光譜法分析測定,結(jié)果見表5。表5重金屬測定結(jié)果(略)2.8農(nóng)藥殘留量測定精細(xì)稱取補(bǔ)骨脂、藥典法鹽補(bǔ)骨脂及新法鹽補(bǔ)骨脂粉末適量,經(jīng)提取制得供試品溶液,用氣相色譜法分析測試,結(jié)果見表6。表6農(nóng)藥殘留測定結(jié)果(略)2.9微生物檢查按照2022版?中華人民共和國藥典?附錄試驗(yàn),檢查結(jié)果見表7。表7微生物檢測結(jié)果略注：重金屬、農(nóng)藥殘留、微生物檢查由北京譜尼理化分析測試中心測定3討論粉末顯微鑒別說明,補(bǔ)骨脂生品與鹽制品的顯微特征區(qū)別為：生品子葉細(xì)胞模糊粉粒和油滴明晰可見,而鹽制品油滴消失,子葉細(xì)胞糊粉化。無論小試和中試(4個(gè)產(chǎn)地)10多批補(bǔ)骨脂樣品,經(jīng)新工藝炮制后,有效成分補(bǔ)骨脂素與異補(bǔ)骨脂素含量與生品、?中華人民共和國藥典?方法比擬均增加,這與以前的文獻(xiàn)報(bào)道根本一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果更進(jìn)一步說明,新工藝是可行的,炮制是有科學(xué)道理的。從不同產(chǎn)區(qū)生補(bǔ)骨脂2種成分測定結(jié)果看,總量有差異。雖然河南也為補(bǔ)骨脂主要產(chǎn)地,但四川、云南、浙江產(chǎn)2種成分總量均高于河南1倍,原因值得進(jìn)一步討論。hp