低溫乙醇蛋白分離實(shí)現(xiàn)自控后對(duì)人血白蛋白質(zhì)量的影響

1、低溫乙醇蛋白別離實(shí)現(xiàn)自控后對(duì)人血白蛋白質(zhì)量的影響【摘要】目的低溫乙醇血漿蛋白別離工藝實(shí)現(xiàn)自控后被別離的人血白蛋白各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)和收獲率進(jìn)展評(píng)價(jià)。方法按照?中華人民共和國(guó)藥典?2022年版三部有關(guān)規(guī)定的方法和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)低溫乙醇別離的人血白蛋白樣品各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)展測(cè)定，并將測(cè)定的結(jié)果與自控前的制品進(jìn)展比擬。結(jié)果連續(xù)測(cè)定血漿蛋白別離實(shí)現(xiàn)自控后42批人血白蛋白樣品，與該工藝實(shí)現(xiàn)自控前連續(xù)35批成品檢定結(jié)果進(jìn)展比擬，發(fā)現(xiàn)其人血白蛋白的純度、收獲率均有明顯的進(jìn)步；多聚體有明顯的下降，其它指標(biāo)離子含量、吸光度等均無(wú)明顯改變，且制品質(zhì)量穩(wěn)定，符合?中國(guó)藥典?2022年版三部有關(guān)要求。結(jié)論通過人血白蛋白各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)、收獲

2、率的比擬，低溫乙醇蛋白別離過程實(shí)現(xiàn)自控后，進(jìn)一步進(jìn)步了人血漿蛋白的內(nèi)在質(zhì)量，同時(shí)，還全面提升了該工藝的別離程度，使得血漿蛋白別離過程中的溫度、乙醇濃度、離子強(qiáng)度和蛋白含量等因素變得更加容易控制，使得制品各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)更加穩(wěn)定，批間差異縮小，更加符合GP管理的要求。【關(guān)鍵詞】血漿蛋白別離;自動(dòng)控制;純度;多聚體人血白蛋白HAS具有維持血管內(nèi)膠體浸透壓，結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)體內(nèi)各種脂肪酸、激素、離子以及多種藥物的重要生物學(xué)功能1，已廣泛應(yīng)用各種低白蛋白血癥或創(chuàng)傷性休克。自從1946年hn和他的同事們發(fā)表了低溫乙醇hn6法別離白蛋白以來(lái)2，相隔十年Nitshann和Kistler于1954年又提出了另一種改變的

3、低溫乙醇別離血漿蛋白方法3，該改進(jìn)方法簡(jiǎn)化了操作，縮短了消費(fèi)周期，進(jìn)步了血漿白蛋白的回收率當(dāng)時(shí)的最大收率為2.5g/100l血漿，降低了乙醇的消耗，是目前國(guó)際上普遍使用的方法之一。低溫乙醇法的最大優(yōu)點(diǎn)是適應(yīng)工業(yè)化、自動(dòng)化的消費(fèi)要求，為了充分發(fā)揮該工藝的潛能，適應(yīng)GP管理的要求，不斷進(jìn)步血漿蛋白制品的內(nèi)在質(zhì)量，增加收獲量，在不改變?cè)瓉?lái)根本工藝道路的前提下，我們于2022年末實(shí)現(xiàn)了低溫乙醇血漿蛋白別離工藝系統(tǒng)的自控包括溫度控制、加液控制、自動(dòng)清洗等。通過血漿蛋白別離工藝實(shí)現(xiàn)自控后，使批處理的血漿才能增加了一倍，工藝操作更加符合GP管理的要求，血漿蛋白能充分有效的混合反響，蛋白別離的五個(gè)控制因素：反

4、響液溫度、pH值、離子強(qiáng)度、酒精濃度和蛋白濃度得到了嚴(yán)格、準(zhǔn)確的控制，防止了人為操作的誤差，經(jīng)過連續(xù)4年人血白蛋白的質(zhì)量指標(biāo)的綜合分析評(píng)價(jià)，實(shí)現(xiàn)自控后，人血白蛋白的純度、收獲率均有明顯的進(jìn)步；多聚體有明顯地下降，其他指標(biāo)如鉀離子含量、吸光度等與自控前無(wú)明顯差異，均在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi)。1材料與方法11材料111人血白蛋白樣品2022年2022年上半年期間制備的人血白蛋白檢定樣品由蘭州生物制品研究所血液制劑室提供。112儀器設(shè)備分光光度計(jì)日立3400型；電泳儀DYY-2型，北京六一儀器廠；掃描儀BEKANSDS-200型；液相色譜儀SP8800，USA；火焰光度計(jì)RNING480型，USA。12方

5、法121純度測(cè)定純度測(cè)定按?中華人民共和國(guó)藥典?2022年版三部附錄A規(guī)定進(jìn)展4。122吸光度測(cè)定吸光度測(cè)定按?中華人民共和國(guó)藥典?2022年版三部附錄A規(guī)定進(jìn)展4，用生理熱氯化鈉溶液將人血白蛋白樣品含量稀釋至10g/L，按紫外分光光度計(jì)法，在波長(zhǎng)403n處測(cè)定吸光度。123鉀離子含量的測(cè)定鈉、鉀離子含量的測(cè)定按?中華人民共和國(guó)藥典?2022年版三部附錄附錄J規(guī)定進(jìn)展4。124多聚體含量測(cè)定多聚體含量測(cè)定按?中華人民共和國(guó)藥典?2022年版三部附錄Q規(guī)定進(jìn)展4。2結(jié)果21人血白蛋白質(zhì)量指標(biāo)的比擬通過對(duì)20222022年共77批人血白蛋白的檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明，血漿蛋白別離工藝實(shí)現(xiàn)自控前與自控后其人血白

6、蛋白的純度、多聚體均有明顯地差異，工藝實(shí)現(xiàn)自控后，其中人血白蛋白純度平均進(jìn)步0.25%，多聚體平均下降0.72%，其他指標(biāo)如鈉、鉀離子含量、吸光度均無(wú)明顯變化，結(jié)果見表1。表1人血白蛋白質(zhì)量指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果比擬22人血白蛋白的收獲率的比擬根據(jù)2022年2022年上半年連續(xù)共153批人血白蛋白統(tǒng)計(jì)數(shù)字分析，自動(dòng)化控制前后人血白蛋白收獲率也有明顯差異，實(shí)現(xiàn)自控后，人血白蛋白分裝前收獲率均有明顯進(jìn)步，進(jìn)步的比率為0.02g/100l血漿。結(jié)果見表2。表2人血白蛋白收獲率的比擬3討論在血漿蛋白的別離過程中，各種成分的有效別離、回收、提純是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，在采用低溫乙醇法消費(fèi)人血白蛋白過程中，影響人血白蛋白

7、的5個(gè)重要消費(fèi)工藝參數(shù)：反響液溫度、pH值、乙醇濃度、離子強(qiáng)度和蛋白濃度，其中任何一個(gè)參數(shù)的改變都會(huì)影響到白蛋白的別離效果，甚至影響制品質(zhì)量。盡管低溫乙醇血漿蛋白別離工藝已延用多年，但由于自動(dòng)化程度不高，大局部工序均為人工操作，眾多技術(shù)指標(biāo)均靠經(jīng)歷和手工控制，如乙醇、緩沖液的滴加，設(shè)備的清洗，制品反響溫度的控制和反響液計(jì)量等，且不說(shuō)工作人員勞動(dòng)強(qiáng)度大，操作時(shí)人為的因素造成的誤差操作誤差、計(jì)量誤差、溫度控制誤差等嚴(yán)重影響著制品的質(zhì)量和收獲率，形成較大的批間差，未能充分發(fā)揮低溫乙醇血漿蛋白別離的諸多優(yōu)勢(shì)5，通過實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化控溫、稱重、加液和自動(dòng)清洗，從而實(shí)現(xiàn)了設(shè)備狀態(tài)的自動(dòng)控制，減少了血漿蛋白別離過

8、程中手工操作的誤差，有效地控制了制品制備過程中的微生物污染，降低熱原質(zhì)。通過自動(dòng)化控制，使得血漿蛋白別離過程中嚴(yán)格控制的五個(gè)控制因素反響液溫度、乙醇濃度、離子強(qiáng)度、pH值和蛋白濃度有機(jī)結(jié)合并得到準(zhǔn)確的控制，使得整個(gè)血漿蛋白別離過程趨于理想狀態(tài)，使被別離的制品各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)更加趨于穩(wěn)定，工藝特點(diǎn)得以最大限度的發(fā)揮，更加符合GP管理要求，從而獲得較好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。總之，血漿蛋白別離工藝實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化后，為進(jìn)一步全面進(jìn)步血漿蛋白的質(zhì)量和收率，增加制品平安性、有效性、穩(wěn)定性、均一性，為充分挖掘低溫乙醇血漿蛋白別離工藝的潛力奠定了堅(jiān)實(shí)的基?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1王憬惺.血液制品學(xué).北京:人民衛(wèi)生出版社，1998，74：57.2hnEJ,StrngLE,HugesL,etal.PreparatinandprpertiesfseruandplasaprtEinsIVAsystefrtheseparatinintfratinsftheprteinandlipprteinpnentsfbilgialtissuesandfluids.AerheS,1946,68:459-475.3KistlerP,NitshannH.Largesaleprdutinfhuanplasafratins.EightyearsexperieneiththealhlfratinatinpredurefNitsha