血清胸腺因子（FTS）對(duì)荷瘤小鼠干擾素、白介素2分泌的影響

1、血清胸腺因子FTS對(duì)荷瘤小鼠干擾素、白介素-2分泌的影響【摘要】目的觀察FTS對(duì)進(jìn)步荷瘤動(dòng)物干擾素IFN-、白介素-2IL-2分泌的影響。方法對(duì)荷瘤動(dòng)物皮下注射不同劑量的FTS后,取其血清，測(cè)定血清中IFN-的含量，并測(cè)定其脾細(xì)胞在nA刺激下分泌IL-2的含量。結(jié)果與對(duì)照組比，F(xiàn)TS2.5g/kg、1.25g/kg可以使荷瘤小鼠血清中的干擾素含量顯著進(jìn)步P0.01，同時(shí)也使脾細(xì)胞分泌IL-2的才能進(jìn)步。結(jié)論FTS可以刺激機(jī)體進(jìn)步分泌細(xì)胞因子的才能，對(duì)抗腫瘤有著積極的作用?！娟P(guān)鍵詞】血清胸腺因子干擾素白介素-2抗腫瘤【Abstrat】bjetivebservatintheFTStenhaneth

2、eDuthlupanialIFN-，IL-2seretininfluene.ethdsAfterDuthlupanialhypderiinjetindifferentdsagefFTS,takesitsbldseru,inthedeterinatinbldseruIFN-thentent,anddeterinesitsspleenelltsereteIL-2underthenAstiulatinthentent.Resultsiththentrlgrupparedt,FTS2.5g/kg,1.25g/kganauseintheDuthlupuseinbldseruftheinterfernnt

3、entrearkableenhaneentP0.01,siultaneuslyalsausesthespleenelltsereteIL-2abilityenhaneent.nlusinFTSanstiulaterganisenhaneentseretryellfatrability,theresistaneturhasthepsitivefuntin.【Keyrds】FTS;IFN;IL-2;anti-tur據(jù)報(bào)道，血清胸腺因子Thyulin,FTS來(lái)源于胸腺組織，其氨基酸序列為NH2/Glu-Ala-Lys-Ser-Gln-Gly-Ser-Asn，是一類小分子肽1，對(duì)參與獲得性和先天免疫的

4、細(xì)胞FTS都能產(chǎn)生作用2，在雞模型中，F(xiàn)TS能參加IL-2R的表達(dá)，特別對(duì)D4+細(xì)胞，它也影響人IFN-受體的表達(dá)，使細(xì)胞更易被細(xì)胞因子刺激3，本文通過(guò)研究FTS對(duì)荷瘤動(dòng)物分泌IFN及IL-2的影響，理解FTS對(duì)免疫低下機(jī)體的細(xì)胞因子的作用，從而為國(guó)內(nèi)進(jìn)一步研究FTS在抗腫瘤方面的應(yīng)用打下良好的基矗1材料與方法1.1藥物與試劑血清胸腺因子FTS，批號(hào)060821，由深圳市翰宇生物工程提供,其純度為96%,凍干粉末,冷凍保存，臨用前取FTS1g，加1l消毒生理鹽水稀釋為1g/l的原液，供皮下注射用。陽(yáng)性對(duì)照藥為胸腺肽，凍干粉末，200g/支,黑龍江迪龍藥業(yè)提供,批號(hào)20221001；小鼠干擾素-

5、ELISA試劑盒，晶美生物工程提供,批號(hào)20220529；刀豆蛋白AnA，SIGA公司提供，濃度為10g/l和30g/l；TT，SIGA公司提供，使用濃度為5g/l，20l/孔。1.2瘤株小鼠H22，取接種于小鼠的腹腔第7天的瘤株,配成106/l瘤細(xì)胞懸液，接種于小鼠前肢腋窩皮下0.2l/鼠。1.3動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用體重1820g的SPF級(jí)雄性昆明小鼠；57BL/6小鼠，68雄性，動(dòng)物合格證號(hào)：SXK京2022-2022，均由中國(guó)藥品生物制品檢定所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng)觀察2天后使用。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室為無(wú)菌空氣二級(jí)過(guò)濾，人工日光燈12h自動(dòng)照明，恒溫、恒濕送風(fēng)，溫度2224，相對(duì)濕度40%45。鼠籠具為塑料

6、盒,不銹鋼絲蓋。1.4荷瘤動(dòng)物模型用1820g的昆明小鼠皮下注射H22瘤株，24h后小鼠隨機(jī)分組用于實(shí)驗(yàn)。1.5給藥方法分別取荷瘤小鼠，安康動(dòng)物及免疫缺陷型動(dòng)物各50只，均分為5組，分別按高、中、低3個(gè)劑量注射FTS，對(duì)照組注射NS，用胸腺肽做陽(yáng)性對(duì)照，均皮下注射給藥，每日給藥1次，共給藥14天。1.6小鼠IL-2的產(chǎn)生將給藥后的小鼠斷頸放血，取脾置于無(wú)血清RPI-1640培養(yǎng)液中去雜質(zhì)，研磨成單個(gè)細(xì)胞后用100目篩及200目篩過(guò)濾，將濾液1000rp,5in離心，取上清，除紅細(xì)胞后，用無(wú)血清RPI-1640培養(yǎng)液洗1次，最終用含10%小牛血清的RPI-1640培養(yǎng)液配成0.5107/l，參加

7、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中500l/孔，同時(shí)參加等體積的nA10g/l，37，5%2，培養(yǎng)24h，取出2500rp,20in離心，收取上清，除菌后，-20保存?zhèn)溆谩?.7小鼠胸腺細(xì)胞的制備將57BL/6小鼠斷頸放血，取胸腺置于無(wú)血清RPI-1640培養(yǎng)液中去雜質(zhì)，研磨成單個(gè)細(xì)胞后用100目篩及200目篩過(guò)濾，將濾液1000rp,5in離心，去上清，除紅細(xì)胞后，用含5%小牛血清的RPI-1640培養(yǎng)液洗二次，最終用含10%小牛血清的RPI-1640培養(yǎng)液配成1.0107/l。1.8小鼠血清的制備將給藥后的小鼠從眼靜脈叢取血，待凝固后別離血清，-20保存?zhèn)溆谩?.9檢測(cè)指標(biāo)用酶標(biāo)儀測(cè)定各組的D值，IFN-

8、測(cè)定用490n，TT測(cè)定用550n。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用xs表示，組間比擬用t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1FTS對(duì)荷瘤小鼠IFN-分泌的影響將給藥后的小鼠血清稀釋5倍和10倍，按IFN-ELISA測(cè)定試劑盒的要求，測(cè)定每個(gè)小鼠血清IFN-的含量，10倍稀釋后的血清比5倍稀釋后的血清測(cè)定結(jié)果要高，結(jié)果見表1。表1荷瘤小鼠血清10IFN-的含量注：與對(duì)照組比擬，*P0.05，*P0.01；與胸腺肽比，P0.01由表1可見，與NS組比擬，F(xiàn)TS2.5g/l、1.25g/l可以極顯著地增強(qiáng)荷瘤小鼠IFN-的分泌P0.01，比胸腺肽的刺激作用強(qiáng)P0.01。2.2FTS對(duì)荷瘤小鼠IL-2分泌的影響將含IL-2的樣品倍比稀釋后

9、參加96孔細(xì)胞板，100l/孔，每稀釋度3個(gè)復(fù)孔，再參加nA30g/l；20l/孔，同時(shí)設(shè)nA對(duì)照和培養(yǎng)液對(duì)照，培養(yǎng)72h，培養(yǎng)完畢前4h參加TT，按TT測(cè)定法在550n測(cè)D值，結(jié)果見表2。表2FTS對(duì)荷瘤小鼠IL-2分泌的影響由表2可見，與NS組比擬，F(xiàn)TS2.50.63g/l可以極顯著地增強(qiáng)荷瘤小鼠IL-2的分泌活性，而胸腺肽與對(duì)照組比差異有顯著性，但是比FTS要弱。3結(jié)論生物反響調(diào)節(jié)劑是繼三大常規(guī)手段手術(shù)、放療、化療治療惡性腫瘤后的又一新的手段4，細(xì)胞因子是生物反響調(diào)節(jié)劑中最活潑的一群，大量資料說(shuō)明，干擾素和白介素-2可以促進(jìn)NK細(xì)胞的殺傷活性，抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，是重要的抗腫瘤細(xì)胞因子5

10、。從本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果中看出，通過(guò)給荷瘤小鼠注射血清胸腺因子FTS，可以進(jìn)步機(jī)體分泌干擾素、白介素-2的才能P0.01，從而加強(qiáng)了機(jī)體的抗腫瘤才能。胸腺肽是目前常用的免疫增強(qiáng)劑，大量用于腫瘤病人術(shù)后的治療中6，從本文的實(shí)驗(yàn)中可以看出，F(xiàn)TS對(duì)細(xì)胞因子的激活才能比胸腺肽要強(qiáng)得多P0.01，但有效劑量要小52倍，所以將FTS開發(fā)成抗腫瘤新藥是很有開展前景的，生物治療已成為21世紀(jì)腫瘤治療的主要方向和潮流，無(wú)疑可以在腫瘤綜合治療中發(fā)揮更重要的作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1KhdaY,KaaiY,IatN,etal.Seruthyifatr,FTS,attenuatesisplatinnephrtxiitybysuppressingisplatin-induedERKativatin.BihePharal，2022,709:1408-1416.2Dhandratilleke,GAarsh.TheeffetfthyulinnavianIL-2reeptrexpressin.IntJIunpharal,2000,22:887-896.3PGerlin,JAarsh.TheenhaneentfavianNKellyttxiitybythyulinisntediatedbytheregulatinfIFN-prdutin.DevIunl,2002,261:1