尿膽原定性測定干法學法作業(yè)指導書

1、尿膽原定性測定干法學法作業(yè)指導書1. 實驗原理試帶有兩種，一種是以Ehrlich醛反應為基礎的快速檢驗試帶，另一種是利用尿膽原與重氮化合物的耦聯(lián)反應，根據產生紅色的深淺判斷尿膽原含量。既可以定性，也可以定量。2. 標本采集2.1 標本采集前病人準備：以清晨第一次尿為宜，急診患者可隨時留取。2.2 標本種類：新鮮尿液2.3 標本要求：采集患者尿液標本時，盛尿液的容器必須清潔干燥，要求留取中段尿。3. 標本儲存：排出到檢測應在2小時內完成。如不能及時送檢或分析，應置4下冷藏保存，但冷藏時間不得超過6小時。4. 標本運輸：室溫運輸。5. 標本拒收標準：細菌，經血，白帶，精液，糞便污染標本不能作測定。

2、6. 試劑6.1 試劑名稱：Combur10 TestR M6.2 試劑廠家：德國 Roche 診斷試劑公司6.3 包裝規(guī)格：100Test/kit6.4 試劑盒組成：試紙條：100條6.5 試劑儲存條件及有效期：試劑盒貯存于2-30條件下，可使用至試劑盒所標示有效期。7. 儀器設備7.1 儀器名稱：羅氏尿液分析儀7.2 儀器廠家：Roche7.3 儀器型號：MiditronR Junior II7.4 儀器校準程序：在使用過程中，一般是兩周校準一次，如超過此期限，儀器會提示“Please Calibrate”（請校準）。通過測定內部參比塊，環(huán)境溫度和光學系統(tǒng)的改變都可被補償。當條件改變很大時

3、，比如參比塊腐蝕或發(fā)光二極管的亮度變暗，儀器將打印出一個錯誤信息；校準條是有穩(wěn)定特征的灰白色試條，這些校準條只能使用一次。校準前，應先清潔試紙托盤與運輸臂。步驟為：在“READY”顯示時，按鍵，放上校準條。再按鍵，校準條被送入機器內，屏幕顯示“Calibrating”（正在校準），約一分鐘后，標準結果將被打印出?！癈alibrating O.K”，表示校準成功。8. 操作步驟：8.1 按鍵，顯示“Prepare Strip”，此時試條筒中拿出試條。8.2 約4秒鐘后，顯示“Dip Strip 1”，同時綠燈閃爍，將試條浸入尿樣中。8.3 當顯示“Insert Strip 1”，把試條放在試條托

4、盤上，此時綠燈亮，若要人工輸入顏色，按鍵，再按鍵，選擇相近的顏色，最后按鍵確認，同樣也可人工輸入濁度。8.4 約20秒后，顯示“Dip Strip 2”，然后重復以上過程。8.5 每一個測量完成后將自動打印出結果。9. 結果判斷：不變色（0mg/L），淺棕色(0.5 mg/L)，黃棕色(1.5 mg/L)，棕色(4.0 mg/L)，深桔色(80 mg/L)10. 質量控制：質控尿液的應用：用人工質控尿液進行空內質控，低濃度質控液應為（），高濃度質控液應為（）。11. 參考范圍：陰性或弱陽性，1：20稀釋后陰性12. 臨床意義：12.1 正常人為弱陽性反應，尿液稀釋20倍后多為陰性。12.2 尿

5、膽原陰性常見于完全阻塞性黃疸。12.3 尿膽原增加常見于溶血性疾患及肝實質性病變如肝炎。13. 操作性能：快速簡便，特異性強，靈敏度高，重復性好。14. 方法局限性14.1 由于醛反應快速，應在規(guī)定時間內觀察結果.14.2 卟膽原，內生性吲哚，黑色素原可造成假陽性。14.3 陽性反應時稀釋的方法同改良Ehrlich。14.4 尿液要新鮮。15. 注意事項：15.1 陽性程度與飲水量有關，夜間和上午排泄較少，午餐后迅速增高。而且尿膽原的清除率與尿液PH有關，PH為5.0時，排泄率為2ml/min；而為8.0時，排泄率為25ml/min。測試前應囑患者口服少量NaHCO3使尿液堿化，留取午餐后2-4時尿液做尿膽原定性。檢測前再以乙酸調節(jié)PH至弱酸性。15.2 若尿膽原定性陰性，可加做尿膽素定性試驗予以驗證，以免因標本久置造成假陰性。15.3 長期應用抗生素可抑制腸道菌群，嚴重腹瀉也會影響膽紅素轉變?yōu)槟蚰懺?，造成結果陰性。長期便秘使尿膽原過度吸收，定性時陽性程度增高，分析結果時應注意。16. 當檢驗系統(tǒng)（儀器）不能工作時，所采取的補救措施：當檢驗系統(tǒng)（儀器）不能工作時，可聯(lián)系儀器廠家，進行緊急修理，如一時不能修好，如別的實驗室有同類儀器可到別的儀器上先測，如別的實驗室無同類儀器，申請廠家送一臺能正常工作的儀器代替。17. 參考文獻17