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文檔簡介
檢測生物組織中糖類、蛋白質(zhì)、脂肪第一頁,共21頁。檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)
1.實驗原理第二頁,共21頁。
斐林試劑蘇丹Ⅲ橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹Ⅳ
雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)試劑實驗現(xiàn)象還原性糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉
碘液
藍色生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗原理第三頁,共21頁。第四頁,共21頁。選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾),蘋果、梨最好
。
實驗流程(步驟)1.可溶性還原糖
制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)取液:(2mL)顯色反應
2mL組織樣液剛配制的斐林試劑2mL現(xiàn)象:
呈現(xiàn)藍色變成磚紅色(用前混勻)50~65.C水浴加熱2min葡萄糖,果糖,麥芽糖;蔗糖為非還原性糖第五頁,共21頁。還原糖的檢測和觀察:第六頁,共21頁。還原糖的檢測結(jié)果第七頁,共21頁。第八頁,共21頁。2.脂肪的鑒定
取材:花生種子(浸泡3-4h),去皮,將子葉削成薄片
制片:①選取最薄的薄片移至載玻片中央②在薄片上滴加蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)
染液2-3滴,染色2-3min③滴加體積分數(shù)為50%的酒精溶液1—2滴,洗去浮色(多余的蘇丹Ⅲ
)④吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片顯微觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現(xiàn)象:有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第九頁,共21頁。脂肪的檢測結(jié)果第十頁,共21頁。第十一頁,共21頁。3.蛋白質(zhì)的鑒定選材與制備組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)[黃豆浸泡→去皮→切片→研磨→過濾→濾液]
顯色反應2mL組織樣液雙縮脲試劑A2mL現(xiàn)象:無色雙縮脲試劑B3-4滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設堿性條件)(提供Cu2+)第十二頁,共21頁。蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果第十三頁,共21頁。第十四頁,共21頁。4.淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿檢測:2mL組織樣液碘液2滴現(xiàn)象:
搖勻后變成藍色第十五頁,共21頁。問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加3~4滴而不能過量?
過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應,使溶液呈藍色,而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?
時間太長,Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。深化第十六頁,共21頁。4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液在堿性環(huán)境下的Cu2+NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,搖勻。(不能過量)水浴加熱不需要第十七頁,共21頁。知識結(jié)構第十八頁,共21頁。1、青蘋果汁遇碘液顯藍色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀,下列結(jié)論中最合理的是()A.青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖
B.熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉
C.蘋果轉(zhuǎn)熟時,大量淀粉水解成還原糖
D.蘋果轉(zhuǎn)熟時單糖聚合成淀粉
C例題
第十九頁,共21頁。2、安徽阜陽劣質(zhì)奶粉事件震驚全國,引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品,肯定不需要用到的化學試劑是()A.斐林試劑
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