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病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷(一)?考點(diǎn)病毒的生物學(xué)性狀病毒的實(shí)驗(yàn)室檢查方法常見病毒的感染[.講義編號(hào)NODE70103300270100000101:針對(duì)本講義提問]【內(nèi)容講解】第一節(jié)概述一類非細(xì)胞型微生物,個(gè)體極小,可通過細(xì)菌濾器,需用電子顯微鏡觀察。僅含一種核酸作為遺傳物質(zhì),外被蛋白質(zhì)衣殼或還有包膜。病毒只能在活細(xì)胞內(nèi)寄生,以復(fù)制的方式進(jìn)行增殖。在臨床微生物感染中,近75%的傳染病是由病毒引起的。[講義編號(hào)NODE70103300270100000102:針對(duì)本講義提問]一、病毒的基本性狀(一)形態(tài)結(jié)構(gòu).大小和形狀:大小:測(cè)量單位用納米表示,一般在20-300nm之間。形態(tài)大致可分為:球形或近似球形、桿狀、彈形、磚形、蝌蚪形等。[講義編號(hào)NODE70103300270100000103:針對(duì)本講義提問].結(jié)構(gòu)[講義編號(hào)NODE70103300270100000104:針對(duì)本講義提問](二)病毒的增殖病毒必須依賴宿主細(xì)胞,

以特殊的自我復(fù)制方式進(jìn)行增殖。病毒的復(fù)制周期:吸附、穿入、脫殼、生物合成、組裝與成熟、釋放6個(gè)階段。[講義編號(hào)NODE70103300270100000105:針對(duì)本講義提問]異常增殖:頓挫感染:病毒進(jìn)入細(xì)胞后的環(huán)境不利于它的復(fù)制,不能合成本身的成分或不能組裝和釋放有感染性的病毒顆粒。缺陷病毒:由于病毒基因組不完整或基因位點(diǎn)改變而不能進(jìn)行正常增殖的病毒。干擾現(xiàn)象:當(dāng)兩種不同的病毒或兩株性質(zhì)不同的同種病毒,同時(shí)或先后感染同一細(xì)胞或機(jī)體時(shí),可發(fā)生一種病毒抑制另一種[講義編號(hào)NODE70103300270100000106:針對(duì)本講義提問](三)噬菌體以細(xì)菌、真菌等為宿主,能引起細(xì)菌等裂解的病毒。噬菌體特異性識(shí)別細(xì)菌表面受體,可用于進(jìn)行細(xì)菌的鑒定與分型。噬菌體感染細(xì)菌后產(chǎn)生兩種后果:溶菌周期和溶源性周期。[講義編號(hào)NODE70103300270100000107:針對(duì)本講義提問](四)非尋常病毒比病毒更小更簡(jiǎn)單的致病因子,又稱為亞病毒因子,包括類病毒、衛(wèi)星病毒和朊粒等。朊粒個(gè)體微小,不含核酸,其主要成分是一種蛋白酶抗性蛋白,對(duì)各種理化作用的抵抗力強(qiáng),具有傳染性,是引起傳染性海朊粒致中樞神經(jīng)系統(tǒng)退化性病變,引起牛海綿狀腦?。ǒ偱2。???搜挪。↗D)和Kuru病被認(rèn)為與朊粒感染有關(guān)。[講義編號(hào)NODE70103300270100000108:針對(duì)本講義提問]二、病毒的分類與命名科、屬、種3級(jí)或科、亞科、屬、種4級(jí)。DNA病毒、RNA病毒、DNA和RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒三大類。按傳播途徑可分為呼吸道病毒、胃腸炎病毒、經(jīng)性傳播感染的病毒等。按感染部位與癥狀特征可分為肝炎病毒、出血性熱病毒、皰疹病毒等。[講義編號(hào)NODE70103300270100000109:針對(duì)本講義提問]第二節(jié)病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)室診斷有三個(gè)方面:①直接檢測(cè)和分離鑒定;②檢測(cè)病毒蛋白抗原成分和核酸;③檢測(cè)抗體。[講義編號(hào)NODE70103300270100000n0:針對(duì)本講義提問]一、標(biāo)本采集、運(yùn)送及處理(一)標(biāo)本采集.采樣時(shí)機(jī):應(yīng)在病人急性期或發(fā)病初期采集標(biāo)本。.標(biāo)本種類:根據(jù)不同病毒感染采集不同標(biāo)本,如鼻咽分泌物、腦脊液、血液、糞便等。(二)標(biāo)本的運(yùn)送及保存

快速傳遞,立即處理和接種。采集和運(yùn)送過程注意冷藏。如不能立即處理和接種,可在4℃保存數(shù)小時(shí),長(zhǎng)時(shí)間保存需置-70℃。[<講義編號(hào)NODE701033002701000001n:針對(duì)本講義提問](三)標(biāo)本處理凝固的血液需先離心,得到的血清可以用于病毒分離。肝素抗凝全血、腦脊液、胸腔液、水痘液以及尿液均可直接用于病毒分離培養(yǎng)。有些標(biāo)本如糞便等,常需粗提、提純和濃縮等復(fù)雜處理過程。[講義編號(hào)NODE70103300270100000n2:針對(duì)本講義提問]二、分離培養(yǎng)與鑒定(一)分離培養(yǎng).組織培養(yǎng)包括器官培養(yǎng)、組織塊培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)。目前常用的方法是細(xì)胞培養(yǎng);常用細(xì)胞:①原代和次代細(xì)胞培養(yǎng);②二倍體細(xì)胞株;③傳代細(xì)胞系。[講義編號(hào)NODE70103300270100000n3:針對(duì)本講義提問].雞胚接種一般選用9-12日齡雞胚。雞胚中的部位卵黃囊雞胚中的部位卵黃囊羊膜腔嗜神經(jīng)病毒,如乙型腦炎病毒流感病毒尿囊腔流感病毒、腮腺炎病毒,還可制備疫苗和大量病毒抗原絨毛尿囊膜天花病毒、單純皰疹病毒腦內(nèi)狂犬病病毒.動(dòng)物接種實(shí)驗(yàn)室常用新生小鼠或乳鼠進(jìn)行病毒分離。[講義編號(hào)NODE70103300270100000n4:針對(duì)本講義提問](二)病毒鑒定.初步鑒定根據(jù)臨床癥狀、流行病學(xué)特點(diǎn)、標(biāo)本來源、易感動(dòng)物范圍、細(xì)胞病變特征及生物學(xué)特征、理化性質(zhì)可初步判.最終鑒定在初步鑒定的基礎(chǔ)上,選擇適當(dāng)?shù)难鍖W(xué)方法對(duì)病毒分離株進(jìn)行最后鑒定,常用中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、分子生物學(xué)方法也在病毒鑒定方面得到應(yīng)用。[講義編號(hào)NODE70103300270100000n5:針對(duì)本講義提問]初步鑒定(舉例):

細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE):細(xì)胞形態(tài)變化病毒細(xì)胞圓縮,分散,不聚集,全部細(xì)胞被破壞腸道病毒細(xì)胞腫大,顆粒增多,病變細(xì)胞聚集呈葡萄狀腺病毒細(xì)胞融合成多核細(xì)胞副粘病毒,空泡狀,多核巨細(xì)胞麻疹病毒脂溶耐酸[講義三、(一1.用核內(nèi)胞漿劑敏感實(shí)驗(yàn):有包膜(+),無包膜(-);實(shí)驗(yàn):腸道病毒(R),鼻病毒(S)。編號(hào)NODE70103300270100000n6:針對(duì)本講義提問]病毒感染的診斷)顯微鏡檢杳光學(xué)顯微鏡直接檢查病毒包涵體??勺鳛椴《靖腥镜妮o助診斷,不是特異性試驗(yàn)。包涵體:常見DNA病毒如巨細(xì)胞病毒單純皰疹病毒水痘-帶狀皰疹病毒和腺病毒等內(nèi)包涵體:常見RNA病毒。如呼吸道合胞病毒、狂犬病病毒和痘類病毒等。由工口陽(yáng)谷山門、、畫/小立痣芹*?胞質(zhì)2.用數(shù)小應(yīng)用[講義內(nèi)和胞核內(nèi)包涵體:麻疹病毒等。電子顯微鏡直接檢查病毒顆粒。時(shí)即可從病毒形態(tài)上作出明確的鑒別診斷。免疫電鏡靈敏度更高。編號(hào)NODE70103300270100000n7:針對(duì)本講義提問](二)病毒抗原檢查利用特異性免疫血清檢測(cè)標(biāo)本中的病毒抗原。常用方法有:免疫熒光技術(shù)、酶免疫技術(shù)、放射免疫法、反相間接血凝和對(duì)流免疫電泳等方法常用對(duì)于一些血清型別不多或在一般細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中尚不能成功增殖的病毒,直接檢測(cè)病毒抗原是快速而實(shí)用的方法講義編號(hào)NODE70103300270100000n8:針對(duì)本講義提問](三)病毒抗體檢查利用

常用特異性抗原檢測(cè)病毒感染者血清中的IgM和利用

常用IgM的方法有中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)及免疫擴(kuò)散等,還可以利用放射免疫法及酶聯(lián)免疫吸附法抗體出現(xiàn)在病毒感染的早期,所以標(biāo)本采集時(shí)間對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響很大。IgMIgG抗體檢測(cè)需采集感染急性期與恢復(fù)期雙份血清,恢復(fù)期IgG效價(jià)必須比急性期增高4倍或4倍以上時(shí),才有診斷意義。(四)病毒核酸檢測(cè)利用核酸雜交和PCR技術(shù)檢測(cè)病毒特異基因片段。檢出病毒核酸并不等于檢出具有傳染性的病毒顆粒。[講義編號(hào)NODE70103300270100000n9:針對(duì)本講義提問]病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷(二)第三節(jié)各類病毒感染的簡(jiǎn)介一、呼吸道病毒二、腸道病毒一、呼吸道病毒二、腸道病毒三、急性胃腸炎病毒四、黃病毒五、出血熱病毒六、皰疹病毒七、肝炎病毒八、反轉(zhuǎn)錄病毒九、狂犬病病毒十、人乳頭瘤病毒[麻講義編號(hào)NODE70103300270200000101:針對(duì)本講義提問]一、呼吸道病毒(一)流行性感冒病毒(二)呼吸道合胞病毒(三)麻疹病毒(四)風(fēng)疹病毒[講義編號(hào)NODE70103300270200000102:針對(duì)本講義提問](一)流行性感冒病毒1.生物學(xué)性狀(1)形態(tài):具有多形性,一般為球形或絲狀,絲狀多見于新分離株,感染性較強(qiáng)。(2)結(jié)構(gòu):[講義編號(hào)NODE70103300270200000103:針對(duì)本講義提問](2)分型與變異1)分型:根據(jù)核蛋白抗原和M蛋白的不同,將流感病毒分為甲(A)、乙(B)、丙(C)型;甲型流感病毒根據(jù)NA和HA的抗原性不同又分為若干亞型。2)變異:變異的物質(zhì)基礎(chǔ)是HA和NA??乖儺惙刃r(shí)稱為抗原漂移;變異幅度大形成新的亞型,引起大規(guī)模流行,為抗原轉(zhuǎn)變。(3)培養(yǎng)特性:常用雞胚接種培養(yǎng),初次分離接種羊膜腔為最佳,傳代適應(yīng)后可移種尿囊腔。細(xì)胞培養(yǎng)一般用原代猴腎細(xì)胞(PMK)或犬腎傳代細(xì)胞(MDCK)。利用紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)確定病毒的存在。(4)抵抗力:不耐熱,對(duì)干燥、日光、紫外線以及甲醛、乙醇等均敏感。[麻講義編號(hào)NODE70103300270200000104:針對(duì)本講義提問]2.微生物檢驗(yàn)(1)標(biāo)本采集和處理:在發(fā)病急性期,以前3天為最好。采集鼻腔洗液、咽拭子、鼻拭子等,置于Hanks液中。放入冰壺中,速送實(shí)驗(yàn)室。若48小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行接種,標(biāo)本應(yīng)放于低溫中保存。(2)分離培養(yǎng)與鑒定:標(biāo)本接種于雞胚羊膜腔,35℃3天后,收集羊水和尿囊液進(jìn)行血凝試驗(yàn)并測(cè)定滴度。血凝陽(yáng)性者,用已知抗體作血凝抑制試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。若血凝陰性時(shí),需用雞胚盲傳1?2次,仍不出現(xiàn)血凝陽(yáng)性者,方可判斷病毒分離陰性。也可接種原代猴腎細(xì)胞(PMK)或犬腎傳代細(xì)胞(MDCK)。[講義編號(hào)NODE70103300270200000105:針對(duì)本講義提問](3)快速診斷1)免疫熒光技術(shù)和酶免疫技術(shù)。2)分子雜交技術(shù)。3)PCR技術(shù)。4)免疫電鏡技術(shù)。(4)血清學(xué)診斷:需同時(shí)檢測(cè)急性期(5天以內(nèi))和恢復(fù)期(2?4周)血清,在相同條件下進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn),如恢復(fù)期抗體效價(jià)比急性期高[講義編號(hào)NODE70103300270200000106:針對(duì)本講義提問].臨床意義病毒隨飛沫傳播進(jìn)入易感者呼吸道,依靠血凝素與黏膜柱狀上皮細(xì)胞相應(yīng)受體結(jié)合,感染細(xì)胞。主要在呼吸道柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖,很少入血,但代謝毒素樣物質(zhì)可進(jìn)入血流引起發(fā)熱、頭痛和全身酸痛。甲型流感可以是散發(fā),也可以是全球性大流行。乙型流感的播散速度及范圍不如甲型。[講義編號(hào)NODE70103300270200000107:針對(duì)本講義提問](二)呼吸道合胞病毒.生物學(xué)性狀:屬副粘病毒科、肺病毒亞科、肺病毒屬。球形,具有多形性。核酸為單負(fù)股RNA,不分節(jié)段。包膜上有兩種刺突:G蛋白作用于類似于流感病毒的血凝素蛋白HA;F蛋白是融合蛋白,介導(dǎo)病毒穿入和細(xì)胞融合。[舒講義編號(hào)NODE70103300270200000108:針對(duì)本講義提問].微生物學(xué)檢查(1)標(biāo)本采集和處理:可采用鼻腔洗液或鼻咽拭子,置轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中冷藏(4℃)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,盡可能立即接種。(2)分離培養(yǎng)與鑒定:不能在雞胚中增殖,可在人類上皮細(xì)胞傳代細(xì)胞系內(nèi)增殖。培養(yǎng)后3?7天,細(xì)胞病變?yōu)楹习w形成即細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體。(3)直接檢測(cè)病毒抗原:可利用免疫熒光技術(shù)和酶免疫技術(shù)。(4)血清學(xué)診斷:常用中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)和酶免疫試驗(yàn)檢查血清中IgG、IgM及IgA。中和試驗(yàn)需雙份血清,檢測(cè)IgG滴度變化。檢測(cè)患者IgM、IgA可進(jìn)行早期診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270200000109:針對(duì)本講義提問].臨床意義:最常見的傳播途徑是經(jīng)飛沫傳染。引起嬰幼兒下呼吸道疾病的最常見的病毒。最易引起嬰幼兒細(xì)支氣管炎和細(xì)支氣管肺炎,若不及時(shí)處理,死亡率較高;較大兒童和成人主要引起上呼吸道感染。[講義編號(hào)NODE70103300270200000n0:針對(duì)本講義提問](三)麻疹病毒.生物學(xué)性狀:屬副粘病毒科、麻疹病毒屬。球形,核心為單負(fù)鏈RNA,三種衣殼蛋白(L、P、N),外被包膜,包膜內(nèi)面為M蛋白,包膜表面有血凝素(H蛋白)和融IH蛋白與細(xì)胞表面病毒受體CD46結(jié)合,感染宿主。病毒抵抗力不強(qiáng),對(duì)陽(yáng)光和一般消毒劑敏感。[講義編號(hào)NODE70103300270200000in:針對(duì)本講義提問].微生物學(xué)檢查(1)標(biāo)本采集:在病人急性期內(nèi)采集標(biāo)本,如鼻咽拭子、鼻咽吸取物、痰等。(2)直接檢測(cè)病毒:感染細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞融合和多核巨細(xì)胞,胞質(zhì)和胞核內(nèi)有嗜酸性包涵體。電鏡或免疫電鏡檢查病毒顆粒。免疫熒光技術(shù)及酶免疫技術(shù),如EIA進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。PCR技術(shù)或核酸探針進(jìn)行鑒定。(3)病毒分離:接種傳代細(xì)胞系HeLa、Vero以及原代人胚腎細(xì)胞等。鏡下觀察是否有細(xì)胞病變出現(xiàn)。(4)血清學(xué)診斷:雙份血清作補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn),酶免疫測(cè)定及血凝抑制試驗(yàn)等。用ELISA法檢測(cè)血清特異性IgM可協(xié)助診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270200000n2:針對(duì)本講義提問]3.臨床意義:麻疹是兒童時(shí)期最常見的急性呼吸道傳染病。通過飛沫直接傳播,冬春季易發(fā)。侵入上呼吸道和眼結(jié)膜上皮細(xì)胞內(nèi)增殖,通過局部淋巴組織入血,出現(xiàn)第一次病毒血癥,病毒隨血流侵入全身淋巴組織和毒血癥,并感染眼結(jié)膜、皮膚、口腔黏膜、呼吸道、消化道、血管。遠(yuǎn)期并發(fā)癥是亞急性硬化性全腦炎(SSPE)。[薛講義編號(hào)NODE70103300270200000n3:針對(duì)本講義提問](四)風(fēng)疹病毒.生物學(xué)性狀:球形,核心為單正鏈RNA,外被包膜,包膜表面有血凝素。能在綠猴腎、兔腎和人胚腎細(xì)胞內(nèi)增殖。抵抗力不強(qiáng),不耐熱,對(duì)脂溶劑敏感,紫外線能滅活病毒。[講義編號(hào)NODE70103300270200000n4:針對(duì)本講義提問].微生物學(xué)檢查(1)標(biāo)本采集:在早期采集標(biāo)本,如咽拭子、皮疹液、尿液以及死亡嬰兒的各種臟器等。(2)直接檢測(cè)病毒:利用PCR技術(shù)或核酸探針進(jìn)行鑒定。(3)病毒分離與鑒定:接種非洲綠猴腎Vero以及原代人胚腎細(xì)胞等。鏡下觀察是否有細(xì)胞病變出現(xiàn)。用酶標(biāo)或熒光素標(biāo)I(4)血清學(xué)診斷:雙份血清作血凝抑制試驗(yàn)等。用ELISA法檢測(cè)血清特異性IgM可協(xié)助診斷。患兒出生時(shí)血清中有抗風(fēng)疹病毒IgM抗體和從母體獲得的IgG抗體,或?qū)m內(nèi)羊水中有IgM抗體可判定為先天性風(fēng)疹綜合征。[講義編號(hào)NODE70103300270200000n5:針對(duì)本講義提問].臨床意義:風(fēng)疹是兒童時(shí)期常見的傳染病。風(fēng)疹是全身麻疹樣出疹伴耳后及枕下淋巴結(jié)腫大為特征的急性呼吸道傳染病。病毒在局部淋巴結(jié)增殖后,通過病毒血癥播撒全身。大多數(shù)情況下,屬于一過性和無明顯臨床癥狀的感染。孕婦在妊娠早期感染病毒,經(jīng)胎盤垂直傳播感染胎兒,可引起先天性風(fēng)疹綜合征。胎兒出生后患先天性心臟病、耳聾、失?[講義編號(hào)NODE70103300270200000n6:針對(duì)本講義提問]二、腸道病毒腸道病毒屬小RNA病毒科腸道病毒屬。由糞-口途徑傳播。主要包括脊髓灰質(zhì)炎病毒、柯薩奇病毒、埃可病毒和一些新腸道病毒。(一)生物學(xué)性狀無包膜,由簡(jiǎn)單的病毒衣殼和單股正鏈RNA組成。能在猴腎、人胚腎、人羊膜細(xì)胞、HEP-2、HeLa細(xì)胞中增殖。對(duì)外界抵抗力較強(qiáng),在污水及糞便中可生存數(shù)月。對(duì)酸及乙醚穩(wěn)定,對(duì)紫外線、干燥及熱敏感,56℃30分鐘可滅活。[講義編號(hào)NODE70103300270200000n7:針對(duì)本講義提問](二)微生物學(xué)檢查.標(biāo)本的采集與處理:合理采集相應(yīng)標(biāo)本,如腦脊液、血液、尿液、直腸拭子、咽喉拭子、鼻腔洗液等,將液體標(biāo)本置無菌試管內(nèi)立即送檢。.直接檢測(cè)病毒:電鏡檢查及酶免疫法均可直接檢測(cè)腸道病毒。PCR在腸道病毒檢測(cè)方面更具優(yōu)勢(shì)。.病毒分離:猴細(xì)胞系對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒,B組柯薩奇病毒和ECH0病毒具有良好的敏感性。人類二倍體成纖維細(xì)胞適合于A組柯薩奇病毒的分離。[麻講義編號(hào)NODE70103300270200000n8:針對(duì)本講義提問].病毒鑒定:中和試驗(yàn)進(jìn)行病毒鑒定,此為鑒定的標(biāo)準(zhǔn)方法。PCR及免疫熒光法進(jìn)行快速鑒定。.血清學(xué)診斷:常用方法有中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、及血凝抑制試驗(yàn)。三種試驗(yàn)只有中和試驗(yàn)較特異,但操作繁瑣。[講義編號(hào)NODE70103300270200000n9:針對(duì)本講義提問](三)臨床意義腸道病毒雖然以感染胃腸道作為開始,但卻很少引起胃腸道疾病。病毒的靶器官以神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉和其他系統(tǒng)為主。在糞便中有腸道病毒排出時(shí),多數(shù)病人往往無任何癥狀。中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血液、眼結(jié)膜分泌物和泌尿生殖道等部位的標(biāo)本中檢出腸道病毒,就意味著真正的病毒侵入。[講義編號(hào)NODE70103300270200000120:針對(duì)本講義提問]疾病腸道病毒疾病脊髓灰質(zhì)炎病毒損害脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞,導(dǎo)致脊髓灰質(zhì)炎即小兒麻痹癥脊髓灰質(zhì)炎病毒柯薩奇病毒以幼年兒童最常見,極少數(shù)患者出現(xiàn)無菌性腦膜炎和輕癱等癥狀??梢鹦募⊙缀托陌?、急性結(jié)ECH0病毒以幼年兒童最常見,極少數(shù)患者出現(xiàn)無菌性腦膜炎和輕癱等癥狀。腸道病毒71型導(dǎo)致手足口病、無菌性腦膜炎等,目前尚無有效的疫苗。腸道病毒71型[講義編號(hào)NODE70103300270200000121:針對(duì)本講義提問]三、急性胃腸炎病毒一輪狀病毒.生物學(xué)性狀:球形,核心含雙鏈RNA,外被雙層衣殼,內(nèi)層核衣殼的殼粒呈放射狀排列,電鏡下猶如車輪狀外形。常用的細(xì)胞為原代猴腎細(xì)胞和傳代猴腎細(xì)胞。病毒抵抗力強(qiáng),耐酸堿,耐乙醚。56℃30分鐘可滅活。可被消毒劑滅活。微生物檢驗(yàn)(1)標(biāo)本采集與處理:發(fā)病早期采集腹瀉糞便,密封送檢。(2)標(biāo)本直接檢查:1)電鏡和免疫電鏡檢查2)抗原檢測(cè)常用ELISA法、膠乳凝集試驗(yàn)3)病毒RNA聚丙烯酰胺凝膠電泳分析用于病毒分型4)檢測(cè)核酸(3)分離培養(yǎng)[麻講義編號(hào)NODE70103300270200000122:針對(duì)本講義提問]臨床意義:輪狀病毒是引起嬰幼兒急性腹瀉的主要病因。在發(fā)展中國(guó)家發(fā)病率高。其發(fā)病和嬰幼兒病死率僅次于呼吸道感染。A組感染引起嬰幼兒急性胃腸炎,感染以溫帶地區(qū)的秋冬季為主。B組引起成人腹瀉,無明顯季節(jié)性。[講義編號(hào)NODE70103300270200000123:針對(duì)本講義提問]四、黃病毒一大群通過吸血的節(jié)肢動(dòng)物而傳播疾病的病毒。(一)流行性乙型腦炎病毒.生物學(xué)性狀:基因組為單正鏈RNA。結(jié)構(gòu)蛋白有三種:M、C和E。M位于包膜內(nèi)面,C在衣殼中,E是鑲嵌在包膜上的糖蛋白,組成血凝素。最易感染的動(dòng)物為出生2?3天的乳鼠,經(jīng)腦內(nèi)接種后3?5天即可發(fā)病。在地鼠腎,幼豬腎等原代培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)增殖,并引式抗原性穩(wěn)定,很少變異。[講義編號(hào)NODE70103300270200000124:針對(duì)本講義提問].微生物學(xué)檢查(1)標(biāo)本直接檢查:免疫熒光技術(shù)及酶免疫技術(shù)進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。PCR技術(shù)或核酸探針檢測(cè)核酸。(2)分離培養(yǎng)與鑒定:接種乳鼠腦內(nèi),或原代金色地鼠腎細(xì)胞等培養(yǎng)細(xì)胞。根據(jù)細(xì)胞病變、紅細(xì)胞吸附試驗(yàn)證實(shí)病毒的增殖,陽(yáng)性即可傳代或鑒定。(3)血清學(xué)診斷:可以利用血凝抑制、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)等進(jìn)行血清學(xué)診斷。.臨床意義:豬為最重要的宿主和傳染源。通過三帶喙庫(kù)蚊叮咬傳播,引起流行性乙型腦炎。夏秋季節(jié)流行。人感染后,絕大多數(shù)表現(xiàn)為隱性或輕型感染。只有少數(shù)發(fā)生腦炎。病毒侵入腦組織內(nèi)增殖,造成腦實(shí)質(zhì)病變,表現(xiàn)為高熱、驚厥或昏迷癥狀。[講義編號(hào)NODE70103300270200000125:針對(duì)本講義提問]五、出血熱病毒(一)漢坦病毒.生物學(xué)性狀:圓形、橢圓形或多形性。單負(fù)股RNA,有長(zhǎng)、中、短三片段。在人肺傳代細(xì)胞(A549),非洲綠猴腎細(xì)胞(Vero-E6),人胚肺二倍體細(xì)胞(2BS)及地鼠腎細(xì)胞中增殖,不引起明顯的名中和試驗(yàn)可將世界各地分離的漢坦病毒分成6個(gè)血清型。對(duì)脂溶劑敏感,對(duì)酸抵抗力弱,60℃1小時(shí)可被滅活。[哈講義編號(hào)NODE70103300270200000126:針對(duì)本講義提問].微生物學(xué)檢查(1)病毒分離與抗原檢測(cè):常用Vero-E6細(xì)胞、A549細(xì)胞分離病毒。免疫熒光抗體染色檢查細(xì)胞胞漿內(nèi)的病毒抗原。(2)血清學(xué)診斷:免疫熒光染色,檢查病人血清中的特異性IgM或IgG抗體。ELISA檢測(cè)特異性IgM適用于早期診斷。.臨床意義:引起腎綜合征出血熱(HFRS)。侵入人體后約有2周的潛伏期,可引起流行性出血熱,起病急,典型臨床表現(xiàn)為高熱、出血和腎損害。伴有三痛(頭痛、目眼結(jié)膜、咽部及軟腭充血。軟腭、液下、前胸等處有出血點(diǎn)。[講義編號(hào)NODE70103300270200000127:針對(duì)本講義提問]六、皰疹病毒(一)單純皰疹病毒(HSV)(二)水痘-帶狀皰疹病毒(三)巨細(xì)胞病毒(四)EB病毒[講義編號(hào)NODE70103300270200000128:針對(duì)本講義提問](一)單純皰疹病毒(HSV).生物學(xué)性狀:有包膜的DNA病毒,基因組由兩個(gè)互相連接的長(zhǎng)片段(L)和短片段(S)組成,為雙股線狀DNA。在多種細(xì)胞內(nèi)增殖,如原代兔腎、人胚肺、人胚腎細(xì)胞或地鼠腎細(xì)胞等。細(xì)胞被感染后很快發(fā)生病變。如細(xì)胞腫脹、變圓、出現(xiàn)嗜酸性核內(nèi)包涵體。有兩種血清型,HSV-1和HSV-2。[講義編號(hào)NODE70103300270200000129:針對(duì)本講義提問].微生物學(xué)檢查(1)標(biāo)本采集和處理;采集水皰液、唾液、尿液、血液、腦脊液、陰道或?qū)m頸拭子標(biāo)本應(yīng)立即接種敏感細(xì)胞培養(yǎng)液,如果不能則將標(biāo)本置于轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基,快速送檢。(2)直接檢查病毒:免疫電鏡檢查病毒顆?;虿∽兗?xì)胞。姬姆薩染色,在光學(xué)顯微鏡下檢查多核巨細(xì)胞和胞核內(nèi)嗜酸性包涵體。直接免疫熒光法或酶免疫法進(jìn)行病毒抗原檢測(cè)。[舒講義編號(hào)NODE70103300270200000130:針對(duì)本講義提問](3)分離及鑒定:病毒分離培養(yǎng)是HSV感染實(shí)驗(yàn)室診斷的最敏感的方法,HSV-1和HSV-2在細(xì)胞培養(yǎng)中均可出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變。利用單克隆抗體進(jìn)行確定HSV分離株的型別。(4)分子生物學(xué)診斷;核酸雜交技術(shù)或PCR技術(shù)可檢測(cè)出HSV。(5)血清學(xué)診斷:ELISA或膠乳凝集試驗(yàn)可檢測(cè)HSV抗體,但難以區(qū)分兩型的感染。無助于早期診斷及指導(dǎo)抗病毒治療。[講義編號(hào)NODE70103300270200000131:針對(duì)本講義提問].臨床意義:通過直接密切接觸和性接觸傳播,也可經(jīng)飛沫及垂直傳播。HSV-1感染常局限在口咽部,通過唾液或呼吸道分泌物傳播,引起口咽部皰疹、皰疹性角結(jié)膜炎、腦炎等。多見于半歲以JHSV-2的原發(fā)感染多見于青春期以后的患者,主要通過生殖道途徑傳播,主要表現(xiàn)為生殖器皰疹。[講義編號(hào)NODE70103300270200000132:針對(duì)本講義提問](二)水痘-帶狀皰疹病毒(VZV).生物學(xué)性狀:與HSV相似,為線狀雙股DNA病毒。只有一個(gè)血清型。一般實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及雞胚對(duì)VZV均不敏感。能在人胚二倍體腎細(xì)胞(HFDK)或人胚二倍體肺細(xì)胞(HFDL)培養(yǎng)中增殖。受感染的細(xì)胞出現(xiàn)嗜酸性核內(nèi)包涵體和多核巨細(xì)胞。.微生物學(xué)檢查(1)直接檢測(cè)病毒或抗原:直接或間接免疫熒光法檢測(cè)病變細(xì)胞內(nèi)的VZV抗原,有助于快速診斷。免疫電鏡檢查,可對(duì)VZV感染進(jìn)行特異性診斷。核酸雜交或PCR技術(shù)亦可檢出皰疹液中的VZV。[講義編號(hào)NODE70103300270200000133:針對(duì)本講義提問](2)病毒分離:取水痘內(nèi)容物(要求4天以內(nèi)的內(nèi)容物)接種人胚腎或人胚肺細(xì)胞。多數(shù)情況下3?7天可出現(xiàn)細(xì)胞病變效應(yīng)。(3)鑒定:根據(jù)典型細(xì)胞病變效應(yīng)進(jìn)行初步鑒定;利用標(biāo)記的抗VZV的單克隆抗體進(jìn)行直接熒光抗體染色,進(jìn)行特異性鑒定。(4)血清學(xué)診斷:EIA已成為VZV血清學(xué)診斷的主要方法。[講義編號(hào)NODE70103300270200000134:針對(duì)本講義提問].臨床意義:VZV可引起水痘和帶狀皰疹。水痘為原發(fā)感染引起,主要發(fā)生于兒童,兒童初次感染vzv大約有兩周的潛伏期,然后皮膚出現(xiàn)斑疹、水皰疹,可進(jìn)一步:帶狀皰疹為復(fù)發(fā)感染所致,多發(fā)生于成人和老人。[制講義編號(hào)NODE70103300270200000135:針對(duì)本講義提問](三)巨細(xì)胞病毒.生物學(xué)性狀:形態(tài)與基因組結(jié)構(gòu)與HSV極為相似。種屬特異性高,即人CMV(HCMV)只能感染人。只能在人成纖維細(xì)胞中才能增殖,增殖緩慢。細(xì)胞病變特點(diǎn)為腫脹、核變大形成巨大細(xì)胞,核內(nèi)有致密的嗜堿性包涵體,形似貓頭鷹眼特征。加熱56℃30分鐘,低pH、乙醚、紫外線、反復(fù)凍融均能使CMV滅活。[講義編號(hào)NODE70103300270200000136:針對(duì)本講義提問].微生物檢驗(yàn)(1)標(biāo)本采集:病毒分離可采取患者尿液、口腔拭子、外周血白細(xì)胞等。血清學(xué)診斷可采取患者血清。(2)直接檢查病毒:HE等染色觀察巨大細(xì)胞和細(xì)胞核內(nèi)的包涵體。免疫熒光技術(shù)和酶免疫技術(shù)檢查標(biāo)本中的HCMV抗原。核酸雜交或PCR技術(shù)檢測(cè)HCMV的核酸。[講義編號(hào)NODE70103300270200000137:針對(duì)本講義提問].臨床意義通過多種途徑傳播。有先天性或獲得性細(xì)胞免疫缺陷的兒童或成人,如艾滋病及器官移植患者,CMV感染很常見。(1)正常人感染:常呈隱性感染,少數(shù)出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥。(2)免疫功能缺損的個(gè)體的感染:致的間質(zhì)性肺炎是骨髓移植受者的首位死因。AIDS患者HCMV感染以肺、中樞神經(jīng)系統(tǒng).(3)先天性和圍生期感染1)先天感染:母體發(fā)生CMV感染,經(jīng)胎盤傳至胎兒引起宮內(nèi)感染。2)產(chǎn)時(shí)感染:與產(chǎn)道中的病毒相接觸被感染。3)產(chǎn)后感染:與排病毒的個(gè)體密切接觸而獲得。[講義編號(hào)NODE70103300270200000138:針對(duì)本講義提問](四)EB病毒1.生物學(xué)性狀病毒顆粒為球形。不能用常規(guī)的皰疹病毒培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。一般用人臍血淋巴細(xì)胞或從外周血分離的B淋巴細(xì)胞培養(yǎng)。根據(jù)病毒抗原表達(dá)時(shí)所處的病毒增殖周期的不同階段,將EBV抗原分為3類:1)潛伏期表達(dá)的抗原:EBV核抗原(EBNA)和潛伏期膜蛋白。2)EBV增殖早期抗原(EA)。3)病毒增殖晚期抗原:EBV衣殼抗原(VCA)及EBV包膜抗原(MA)。[講義編號(hào)NODE70103300270200000139:針對(duì)本講義提問](1)直接檢查病毒:抗補(bǔ)體免疫熒光法檢查淋巴細(xì)胞或上皮細(xì)胞EB病毒核抗原。核酸雜交和PCR或RT-PCR技術(shù)檢測(cè)病毒。(2)病毒分離培養(yǎng)及鑒定:接種人臍帶血淋巴細(xì)胞對(duì)EB病毒進(jìn)行分離培養(yǎng),孵育4周,病毒陽(yáng)性培養(yǎng)物,通過抗補(bǔ)體免疫熒光法進(jìn)行EB鑒定。(3)血清學(xué)診斷:嗜異性抗體檢測(cè)可用于輔助診斷傳染性單核細(xì)胞增多癥。進(jìn)行針對(duì)病毒VCA、EA和EBNA的抗體測(cè)定,不同疾病患者的體內(nèi)針對(duì)EBV不同的抗原成分所產(chǎn)生的抗體的組成及水平均有[薛講義編號(hào)NODE70103300270200000140:針對(duì)本講義提問]3.臨床意義流行廣泛。主要通過唾液傳播,也可因輸血傳染。幼兒感染后多數(shù)無明顯癥狀,但終生攜帶病毒,或引起輕度咽炎和上呼吸道感染。青春期發(fā)生原發(fā)感染,約50%出現(xiàn)傳染性單核細(xì)胞增多癥。EBV主要侵犯B細(xì)胞,與EB病毒感染有關(guān)的疾病主要有:傳染性單核細(xì)胞增多癥、非洲兒童惡性淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金[講義編號(hào)NODE70103300270200000141:針對(duì)本講義提問]病毒感染的實(shí)驗(yàn)診斷(三)七、肝炎病毒病毒HAVHBVHCVHDV致病甲型乙型丙型丁型基因組ssRNAdsDNAssRNAssRN傳播糞-口血/垂血/垂血/垂流行流行/暴發(fā)好發(fā)兒/青慢性攜帶十十十肝硬化/肝癌十十自動(dòng)免疫十十被動(dòng)免疫丙球HBIg[講義編號(hào)NODE70103300270300000101:針對(duì)本講義提問](一)甲型肝炎病毒.生物學(xué)性狀小RNA病毒科,無包膜,核心為單正股RNA。只有一個(gè)血清型。抵抗力較其他小RNA病毒強(qiáng),60℃加熱10?12小時(shí)后仍具有感染性,85℃加熱立即滅活,對(duì)乙醚、氯仿及pH為3的酸性壬.微生物檢驗(yàn)甲型肝炎患者病期不長(zhǎng),預(yù)后良好,一般不需進(jìn)行病原學(xué)檢查。微生物檢驗(yàn)以測(cè)定病毒抗原或抗體為主。感染早期一般可用RIA或ELISA檢測(cè)患者血清中抗-HAVIgM,是HAV新近感染的重要指標(biāo)。了解既往感染史或進(jìn)行流行病RT-PCR、核酸雜交技術(shù)直接檢測(cè)抗原。[薛講義編號(hào)NODE70103300270300000102:針對(duì)本講義提問].臨床意義主要通過糞一口傳播,傳染源多為人類,潛伏期15?50天,平均28天。病毒常在患者ALT升高前5?6天就存在于患者的血清和糞便中,2?3周后,隨血清特異性抗體的產(chǎn)生,血清和糞便的傳染甲型肝炎患者的糞便污染水源、食物以及某些海產(chǎn)品,可造成散發(fā)式大流行。[講義編號(hào)NODE70103300270300000103:針對(duì)本講義提問](二)乙型肝炎病毒.生物學(xué)性狀(1)形態(tài)與結(jié)構(gòu):電鏡下可見3種特有顆粒:①大球形顆粒:為具有感染性的HBV完整顆粒,呈球形,又稱Dane顆粒。②小球形顆粒:成分為HBsAg,無傳染性;③管形顆粒:成分亦是HBsAg,由多個(gè)小球型顆?!按?lián)而成”。[講義編號(hào)NODE70103300270300000104:針對(duì)本講義提問]完整病毒結(jié)構(gòu):外衣殼:相當(dāng)于病毒的包膜,HBsAg鑲嵌于包膜的脂質(zhì)雙層中。內(nèi)衣殼:是HBcAg,用酶或去垢劑作用后,可暴露出HBeAg。核心:基因組環(huán)狀dsDNAS,L,DNAP。[講義編號(hào)NODE70103300270300000105:針對(duì)本講義提問](2)抗原成分:)HBsAg是HBV感染的主要標(biāo)志,由病毒DNA的S區(qū)編碼。)HBcAg被HBsAg所覆蓋,血中不易檢出。由DNA的C區(qū)編碼。HBcAg免疫原性強(qiáng),抗-HBcIgG在血清中持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),抗-3)HBeAg為可溶性蛋白質(zhì),游離在血中,其消長(zhǎng)與病毒體及DNA多聚酶的消長(zhǎng)基本一致,故HBeAgE作為HBV復(fù)制及具有,(3)抵抗力:對(duì)理化因素有較強(qiáng)抵抗力。60℃加熱10小時(shí),98℃加熱1分鐘,以及乙醚、pH為2.4的酸性環(huán)境處理6小時(shí)均不能有效滅活病毒。[講義編號(hào)NODE70103300270300000106:針對(duì)本講義提問].微生物檢驗(yàn)(1)標(biāo)本的采集與處理:臨床上常采集血液標(biāo)本,HBV的血清標(biāo)志物較穩(wěn)定。(2)檢查方法:主要靠RIA和ELISA等血清學(xué)方法檢測(cè)HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBC.抗-HBe。其中HBsAg的檢測(cè)最為重要,可發(fā)現(xiàn)無癥PCR檢測(cè)HBVDNA也用于乙型肝炎的臨床診斷。[講義編號(hào)NODE70103300270300000107:針對(duì)本講義提問].臨床意義傳染源是HBV攜帶者和患者的血液、唾液、精液和陰道分泌物。傳播途徑大致可分為血液、血制品傳播、性傳播、母嬰傳播。通過破損的皮膚和黏膜侵入機(jī)體。乙型肝炎臨床表現(xiàn)呈多樣性。肝炎的癥狀可以是輕度而短暫的,也可以是重度和遷延性的?;颊呖梢酝耆謴?fù)健康。也可因暴發(fā)性肝炎而致死或成為慢性[講義編號(hào)NODE70103300270300000108:針對(duì)本講義提問](三)丙型肝炎病毒.生物學(xué)性狀小的有包膜的單正股RNA病毒??稍诤谛尚审w內(nèi)傳代。尚不能用體外細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行分離。抗原成分主要包括核衣殼蛋白,包膜蛋白及非結(jié)構(gòu)蛋白。對(duì)各種理化因素的抵抗力較弱。.微生物檢驗(yàn)?zāi)壳芭R床上常用的HCV檢測(cè)方法主要有兩類:血清學(xué)方法:測(cè)定抗-HCV。ELISA法作為篩選試驗(yàn)條帶免疫法作確認(rèn)試驗(yàn)PCR方法:檢測(cè)HCVRNA。[麻講義編號(hào)NODE70103300270300000109:針對(duì)本講義提問].臨床意義主要經(jīng)輸血或其他非腸道途徑(如共用針頭、血透析等)進(jìn)行傳播。HCV的亞臨床感染者是丙型肝炎的主要傳染源。根據(jù)臨床病程可劃分為急性和慢性,以6個(gè)月為區(qū)分界限。HCV感染的一個(gè)主要特點(diǎn)就是慢性化的幾率很高,感染過程很長(zhǎng),存在不同程度的肝組織病變,并呈慢性進(jìn)行性??砂l(fā)展為)[講義編號(hào)NODE70103300270300000n0:針對(duì)本講義提問](四)丁型肝炎病毒.生物學(xué)特性球形,外被HBsAg包繞,核心含HDV抗原(HDAg)和HDV-RNA基因組,基因組為一單負(fù)鏈環(huán)狀RNA。HDV不能獨(dú)立復(fù)制,需要HBV輔助才能增殖。對(duì)HDV敏感的動(dòng)物有黑猩猩、東方土撥鼠等。[講義編號(hào)NODE701033002703000001n:針對(duì)本講義提問].微生物檢驗(yàn)(1)HDAg檢測(cè):去除表面的HBsAg,然后用RIA或ELISA檢測(cè)HDAg。(2)HDVRNA檢測(cè):核酸雜交或RT-PCR技術(shù)對(duì)HDVRNA進(jìn)行檢測(cè)。(3)抗-HDV抗體檢測(cè):HDV感染后2周左右產(chǎn)生抗-HDIgM,一個(gè)月達(dá)高峰,隨后迅速下降,抗-HDIgG出現(xiàn)較遲,在恢復(fù)丁型肝炎抗體不能清除病毒,如持續(xù)高效價(jià),可作為慢性丁肝的指標(biāo)。利用ELISA等方法檢測(cè)患者血清中抗-HDVIgM或抗-HDVIgG,通過檢測(cè)抗-HBsIgM或IgG以及HBeAg和抗-HBe,作出同步[講義編號(hào)NODE70103300270300000n2:針對(duì)本講義提問].臨床意義HDV可引起與HBV相關(guān)聯(lián)的急性和慢性肝病。HDV感染通常引起嚴(yán)重和進(jìn)行性的肝病。HDV傳播方式主要是經(jīng)血傳播,也可通過密切接觸與母嬰間垂直傳播。HDV感染只有在感染了HBV的人群或是與HBV同時(shí)侵[講義編號(hào)NODE70103300270300000n3:針對(duì)本講義提問](五)戊型肝炎病毒.生物學(xué)特性球型,無包膜,基因組為正單股RNA。體外培養(yǎng)不易獲得成功,敏感的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為靈長(zhǎng)目。特別是獼猴和黑猩猩。對(duì)高鹽、氯化銫、氯仿和反復(fù)凍融敏感。.微生物檢驗(yàn)可用電鏡或免疫電鏡技術(shù)檢測(cè)患者糞便中的HEV顆粒。PCR方法檢測(cè)標(biāo)本中HEVRNA。臨床常用的診斷方法是檢測(cè)血清中的抗HEVIgM或IgG。[.講義編號(hào)NODE70103300270300000n4:針對(duì)本講義提問]3.臨床意義主要經(jīng)糞-口途徑傳播,患者多見于成人,未成年者大多為隱性感染。戊型肝炎的潛伏期約為10?60天,潛伏期末和急性期初的患者糞便中病毒量較大,傳染性最強(qiáng),是戊型肝炎的主要傳染源臨床表現(xiàn)以黃疸為主多數(shù)患者發(fā)病6周即可好轉(zhuǎn)并痊愈,不發(fā)展為慢性肝炎。[講義編號(hào)NODE70103300270300000n5:針對(duì)本講義提問]八、反轉(zhuǎn)錄病毒帶有以RNA為模板合成DNA的反轉(zhuǎn)錄酶。人類免疫缺陷病毒人類免疫缺陷病毒(HIV)在病毒分類學(xué)上屬反轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒亞科慢病毒屬。已發(fā)現(xiàn)有HIV-1和HIV-2兩型:HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原體;HIV-2主要局限于西部非洲。[講義編號(hào)NODE70103300270300000n6:針對(duì)本講義提問].生物學(xué)特性(1)形態(tài)結(jié)構(gòu):RNA病毒,呈球形。核心含有RNA.逆轉(zhuǎn)錄酶和核衣殼蛋白。包膜,其中鑲嵌有g(shù)p120和gp41兩種特異的糖蛋白。gp120與CD4受體蛋白結(jié)合。gp41為跨膜蛋白。[講義編號(hào)NODE70103300270300000n7:針對(duì)本講義提問](2)基因組結(jié)構(gòu):由兩條拷貝的單股正鏈RNA在5’端通過氫鍵結(jié)合而形成二聚體?;蚪M從5’至3’端依次排列為L(zhǎng)TR、gag、pol、env、LTR:gag基因編碼病毒核心蛋白,其中衣殼蛋白p24特異性最強(qiáng)。pol基因編碼病毒復(fù)制所需的酶類。env基因編碼合成兩種包膜糖蛋白gp120和gp41。[<講義編號(hào)NODE70103300270300000n8:針對(duì)本講義提問][講義編號(hào)NODE70103300270300000n9:針對(duì)本講義提問](4)病毒受體與細(xì)胞親嗜性:HIV的主要靶細(xì)胞是CD4T淋巴細(xì)胞和單核-巨噬細(xì)胞亞群。皮膚的Langerhans細(xì)胞、淋巴結(jié)濾泡的樹突狀細(xì)胞、腦小膠質(zhì);CD4分子是HIV的主要受體,現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)兩種輔助受體CXCR4和CCR5。CXCR4是HIV的親T細(xì)胞病毒株的輔助受體,CCR5是(5)培養(yǎng)特性:體外僅感染表面有CD4受體的T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)室常用新鮮分離的正常人T細(xì)胞或病人自身分離的T細(xì)胞培養(yǎng)病毒。(6)抵抗力:病毒抵抗力較弱,56℃30分鐘可滅活??杀幌緞缁?。但在室溫病毒活性可保持7天。[講義編號(hào)NODE70103300270300000120:針對(duì)本講義提問].微生物檢查(1)病毒標(biāo)志:病毒培養(yǎng):分離HIV。分子生物學(xué)方法:檢測(cè)HIVRNA。(2)免疫標(biāo)志:HIV抗原及抗體等免疫復(fù)合物。1)抗原檢測(cè):常用間接ELISA法檢測(cè)p24抗原。2)抗體檢測(cè):抗p24及其前體p55的抗體在血清中出現(xiàn)最早,隨后出現(xiàn)抗gp120/160的抗體,是初期感染的最穩(wěn)定的指標(biāo)現(xiàn)。①初篩試驗(yàn):EIA.IFA.凝集試驗(yàn)等。②確證試驗(yàn):免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Westernbolt,WB)、放射免疫沉淀試驗(yàn)。3)相關(guān)標(biāo)志:與艾滋病病情發(fā)展或HIV感染密切相關(guān)而存在于體內(nèi)的某些生化或化學(xué)物質(zhì)。如CD4細(xì)胞、新蝶呤、白細(xì)胞介素等。[講義編號(hào)NODE70103300270300000121:針對(duì)本講義提問].臨床意義HIV是獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS,艾滋?。┑牟≡w。AIDS是以侵犯CD4細(xì)胞為主,造成細(xì)胞免疫功能缺陷,并繼發(fā)體液免疫功能缺損為基本特征的傳染病。傳染源是HIV無癥狀攜帶者和艾滋病患者。傳播途徑主要有:性接觸傳播、血液傳播、母嬰傳播。[哈講義編號(hào)NODE70103300270300000122:針對(duì)本講義提問]臨床病程分為4個(gè)時(shí)期,即急性感染期、無癥狀感染期、艾滋病相關(guān)綜合征、艾滋?。ò滩⊥耆停IV的致病機(jī)制:HIV直接損傷或間接損傷CD4T細(xì)胞;HIV抑制抗原遞呈細(xì)胞功能;HIV誘發(fā)自身免疫性疾病及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;HIV導(dǎo)致CD8T細(xì)胞喪失抗病毒活性等。機(jī)體感染HIV后可產(chǎn)生多種抗體,病毒也可刺激機(jī)體產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答,但依然無法清除病毒,這與病毒能逃逸免疫作用1[講義編號(hào)NODE70103300270300000123:針對(duì)本講義提問]九、狂犬病病毒(一)生物學(xué)性狀外形似子彈狀,病毒體內(nèi)含單負(fù)股RNA,外面是脂蛋白包膜,其表面有許多糖蛋白刺突,與病毒的感染性和毒力有關(guān)。一種嗜神經(jīng)性病毒。該病毒可感染的動(dòng)物范圍較廣。在易感動(dòng)物或人類的中樞神經(jīng)細(xì)胞中增殖時(shí),在胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體,稱內(nèi)基小體,在診斷上很有價(jià)值。[講義編號(hào)NODE70103300270300000124:針對(duì)本講義提問](二)微生物檢驗(yàn).隔離觀察動(dòng)物若7?10天不發(fā)病,一般認(rèn)為該動(dòng)物沒有患狂犬病或咬人時(shí)唾液中尚無狂犬病病毒。.印片、切片檢查取帶病毒動(dòng)物海馬回部組織作切片或涂片,HE染色檢查內(nèi)基小體;直接熒光抗體法(DFA)或ELISA法檢測(cè)病毒抗原。[講義編號(hào)NODE70103300270300000125:針對(duì)本講義提問].細(xì)胞培養(yǎng)接種敏感細(xì)胞,培養(yǎng)40?48小時(shí)后,用DFA進(jìn)行病毒抗原檢測(cè),如果陰性進(jìn)行第二代培養(yǎng),經(jīng)3?4天,再用DFA檢查是否為陰性。.血清學(xué)診斷中和試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、ELISA試驗(yàn)等。.分子生物學(xué)RT-PCR技術(shù)檢測(cè)標(biāo)本中狂犬病毒RNA,此方法敏感、快速、特異。[講義編號(hào)NODE70103300270300000126:針對(duì)本講義提問](三)臨床意義人類狂犬病大多數(shù)是由病犬咬傷所致,有時(shí)也可因貓、狼以及其他帶菌動(dòng)物咬傷所致。典型臨床表現(xiàn)是神經(jīng)興奮性增高,吞咽或飲水時(shí)喉頭肌痙攣,甚至聞水聲或其他輕微刺激包括光線均可引起全身痙攣發(fā)作,最后因昏迷、呼吸循環(huán)衰竭而死亡。死亡率幾乎達(dá)100%。[哈講義編號(hào)NODE70103300270300000127:針對(duì)本講義提問]十、人乳頭瘤病毒(一)生物學(xué)性狀由病毒衣殼和雙鏈環(huán)狀DNA組成。具有宿主和組織特異性,只能感染人的皮膚、黏膜的上皮細(xì)胞。易感細(xì)胞核內(nèi)增殖形成核內(nèi)嗜酸性包涵體。目前HPV組織培養(yǎng)尚未成功。(二)微生物檢驗(yàn)臨床常根據(jù)病史及典型的臨床表現(xiàn)即可作出診斷。癥狀不典型:病理學(xué)檢查或用免疫組化技術(shù)等方法檢查病變組織中的HPV抗原。分子生物學(xué)診斷方法有:核酸分析、原位雜交、DNA印跡、PCR。[講義編號(hào)NODE70103300270300000128:針對(duì)本講義提問](三)臨床意義HPV可通過性接觸感染,引起尖銳濕疣。也可經(jīng)產(chǎn)道感染。病毒感染僅局限于局部皮膚和黏膜中,引起該部位多種疣,不產(chǎn)生病毒血癥。尖銳濕疣主要由HPV-6引起,也可由1、2等型引起。HPV-16、18、31、33等型別可引起宮頸內(nèi)瘤樣變,組織學(xué)變化可由宮頸上皮的不典型增生至原位癌,嚴(yán)重者可發(fā)展為浸潤(rùn)加[講義編號(hào)NODE70103300270300000129:針對(duì)本講義提問]【例題】病毒與立克次體的主要相同點(diǎn)是A.細(xì)胞內(nèi)寄生B.繁殖方式C.對(duì)抗生素敏感D.單一核酸類型E.可在人工培養(yǎng)基生長(zhǎng)[講義編號(hào)NODE70103300270300000130:針對(duì)本講義提問]【例題】病毒的干擾現(xiàn)象是指A.兩種病毒感染同一宿主細(xì)胞后產(chǎn)生的B.一種病毒感染兩種宿主細(xì)胞后產(chǎn)生的C.對(duì)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的干擾D.對(duì)細(xì)菌的干擾E.對(duì)抗生素的敏感性消失?顯示答案[講義編號(hào)NODE70103300270300000131:針對(duì)本講義提問]【例題】病毒的直接鏡檢錯(cuò)誤的是A.包涵體分嗜酸性和嗜堿性兩種B.可查宿主細(xì)胞內(nèi)的包涵體C.病毒形態(tài)、大小檢查需用電子顯微鏡D.檢查包涵體常用吉姆薩染色E.檢查包涵體也必須用電子顯微鏡[講義編號(hào)NODE70103300270300000132:針對(duì)本講義提問]【例題】預(yù)防脊髓灰質(zhì)炎的疫苗為A.基因工程疫苗B.口服減毒活疫苗C.注射滅活疫苗D.多肽疫苗E.核酸疫苗[講義編號(hào)NODE70103300270300000133:針對(duì)本講義提問]【例題】滅活是指使病毒失去A.紅細(xì)胞吸附性B.紅細(xì)胞凝集性C.細(xì)胞融合性D.感染性E.自身復(fù)制繁殖的能力[講義編號(hào)NODE70103300270300000134:針對(duì)本講義提問]【例題】艾滋病患者的T4和T8淋巴細(xì)胞數(shù)以及T4/T8比值為A.T4tT8tT4/T8tB.T41T8TT4/T8IC.T41T81T4/T8ID.T4TT81T4/T8tE.T4tT8tT4/T8正常[制講義編號(hào)NODE70103300270300000135:針對(duì)本講義提問]【例題】SARS的病原體是A.冠狀病毒B.肺炎支原體C.肺炎球菌D.肺炎衣原體E.痘病毒[講義編號(hào)NODE70103300270300000136:針對(duì)本講義提問]【例題】病毒的基本結(jié)構(gòu)是A.核酸B.衣殼C.包膜D.核衣殼E.殼微粒[講義編號(hào)NODE70103300270300000137:針對(duì)本講義提問]【例題】判斷病毒有無包膜的依據(jù)為A.是否出現(xiàn)細(xì)胞病變B.對(duì)石碳酸是否敏感口對(duì)溫度的抵抗力是否強(qiáng)D.對(duì)脂溶劑是否敏感E.超速離心沉淀速度

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