基因靶向治療課件

EGFR基因靶向治療EGFR基因靶向治療1主要內(nèi)容一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能二、EGFR在腫瘤中的變異三、針對EGFR進行腫瘤靶向治療的的藥物四、EGFR靶向治療當中產(chǎn)生的耐藥問題五、檢測EGFR基因變異的臨床診斷主要內(nèi)容一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能二、EGFR在腫瘤中2一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能表皮生長因子受體（Epidermalgrowthfactorreceptor），簡稱為EGFR、ErbB-1或HER1。是ErbB受體家族家族的成員之一。erbB家族為受體酪氨酸激酶，是一類具有跨膜結(jié)構(gòu)的酶蛋白，包括HER1/EGFR/erbB-1、HER2/erbB-2、HER3/erbB-3、HER4/erbB-4四個成員。由于EGFR的酪氨酸激酶活性，可以調(diào)節(jié)細胞的生長、增殖，分化，遷移，并且與腫瘤的發(fā)生有關(guān)。一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能表皮生長因子受體（Epide3EGFR是一種跨膜蛋白，由三個部分組成：①細胞外結(jié)構(gòu)域：是配體的結(jié)合位點；②單次跨膜的疏水α螺旋區(qū)；③細胞質(zhì)部分：有自磷酸化位點、和酪氨酸蛋白激酶(RTK)活性結(jié)構(gòu)域。EGFR是一種跨膜蛋白，由三個部分組成：4受體激活：當EGF同受體細胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合位點結(jié)合后，受體被激活，導致兩個EGF受體單體形成二聚體，使酪氨酸自我磷酸化，激活細胞質(zhì)部分的酪氨酸激酶?；虬邢蛑委熣n件5配體：表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)、雙向調(diào)節(jié)蛋白(AR)、

β-細胞素(BTC)、肝素結(jié)合EGF樣生長因子(HB-EGF)、表皮調(diào)節(jié)素(EPR)等。

配體：6信號通路激活：二聚體自磷酸化之后酪氨酸激酶活性增強，下游信號通路的蛋白質(zhì)可與EGFR上磷酸化的酪氨酸位點結(jié)合，分別引起細胞內(nèi)不同的信號應答，從而引起一系列生物效應，調(diào)節(jié)細胞的生長、增殖，分化，遷移，與腫瘤的發(fā)生。主要激活的信號通路有：JAK/STAT、PI3K/AKT、RAS信號通路。信號通路激活：7基因靶向治療課件8EGFR失活：膜表面沒有與配體結(jié)合的EGFR單體，可被內(nèi)吞至細胞內(nèi)部，被內(nèi)吞的EGFR一部分被細胞降解，一部分重新回到細胞膜上。細胞膜上EGFR的半衰期為30分鐘。EGFR失活：9二、EGFR在腫瘤中的變異二、EGFR在腫瘤中的變異10EGFR在腫瘤細胞中的變異：數(shù)量變異結(jié)構(gòu)變異EGFR在腫瘤細胞中的變異：11數(shù)量變異：正常情況下，一個細胞上會有4*10^4~1*10^5個EGFR分子。腫瘤細胞中，可觀察到每個細胞有2*10

^6個EGFR分子。在許多腫瘤細胞中，都有EGFR異常高表達現(xiàn)象。當細胞膜上有高濃度的EGFR單體時，EFGR分子可在沒有配體的情況下自行聚合形成二聚體，并且二聚體可自我激活，激活下游的信號通路。數(shù)量變異：12基因變異：EFGR基因位于第七號染色體的短臂上。EGFR的酪氨酸激酶活性位點，主要是位于第18號外顯子到第24號外顯子之間。此區(qū)域的突變會影響EGFR的酪氨酸激酶活性。基因變異：13基因變異：45%是第19號外顯子缺失變異；40%是發(fā)生在第21號外顯子上的L858R變異（第858號氨基酸殘基由亮氨酸變成了精氨酸）；變異的EGFR不需要與配體結(jié)合就擁有了持續(xù)的酪氨酸酶活性?；蜃儺悾?4三、針對EGFR進行腫瘤靶向治療的的藥物特異性針對腫瘤細胞進行靶向治療，可以從分子水平逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的惡性生物學行為。靶向治療具有靶向性強、特異性高和毒副作用低等特點，并能增強放、化療療效，代表著腫瘤治療領(lǐng)域的最新發(fā)展方向。單克隆抗體(Mab)：西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗。酪氨酸激酶抑制劑（TKI）：吉非替尼、厄洛替尼、?？颂婺?；阿法替尼；塔格瑞斯。副作用：皮疹、瘙癢、腹瀉、腸道潰瘍。三、針對EGFR進行腫瘤靶向治療的的藥物特異性針對腫瘤細胞進15單克隆抗體：抗體可特異性地識別EFGR，阻斷了配體與EGFR的結(jié)合，從而阻斷了配體對EGFR的激活作用，抑制了EGFR的酪氨酸激酶活性。同時還可促進EGFR的內(nèi)吞機制，減少膜表面的EGFR數(shù)量。對野生型、變異型EGFR均有效。單克隆抗體：16西妥昔單抗（Cetuximab，商品名愛必妥、爾必得舒、艾比特思）。是第一個FDA批準抗EGFR的單抗藥。由德國默克里昂公司出品。是一種人/鼠嵌合單克隆抗體?？捎糜谥委熮D(zhuǎn)移型結(jié)腸直腸癌和頭頸部腫瘤。西妥昔單抗（Cetuximab，商品名愛必妥、爾必得舒、艾比17帕尼單抗（Panitumumab，商品名Vectibix）是第一個完全人源化單克隆抗體與EGFR具有高親和性，用于治療化療失敗后轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌。尼妥珠單抗（Nimotuzomab，商品名泰欣生）是我國第一個用于治療惡性腫瘤的功能性單抗藥物，用于與放療聯(lián)合治療EGFR)表達陽性的III/IV期鼻咽癌。帕尼單抗（Panitumumab，商品名Vectibix）18酪氨酸激酶抑制劑TKI：TKI與ATP競爭EGFR的酪氨酸酶活性中心，阻止酪氨酸激酶活性的激活，從而抑制EGFR對下游信號通路的激活作用。酪氨酸激酶抑制劑TKI：19易瑞沙（Iressa，通用名Gefitinib）EGFR的可逆抑制劑，用于治療晚期非小細胞肺癌，尤其化療失敗后的非小細胞肺腺癌。阿斯利康公司易瑞沙/印度易瑞沙第一代TKI類藥物對19號外顯子缺失變異和L858R變異（第858號氨基酸殘基由亮氨酸變成了精氨酸）的EGFR療效更為顯著?；虬邢蛑委熣n件20基因靶向治療課件21塔格瑞斯

（Tagrisso）由FDA2015年11月批準上市的第三代TKI類靶向藥物。由阿斯利康研發(fā)。對于有T790M耐藥突變的EGFR有很強的抑制作用。塔格瑞斯（Tagrisso）22四、EGFR靶向治療當中產(chǎn)生的耐藥問題第一代TKI類藥物用藥4-6個月后會出現(xiàn)耐藥突變。耐藥并非單一因素且機制之間也存在交叉，錯綜復雜：1、EGFR基因突變或靶點缺失：T790M2、繞開EGFR通路的其他TK受體的活化3、胞內(nèi)EGFR下游信號蛋白非依賴性或組成性活化：Kras、PI3K、Src4、腫瘤誘導的非依賴于EGFR的血管生成：VEGF的過度表達5、膜表面的EGFR內(nèi)吞降解過程異常四、EGFR靶向治療當中產(chǎn)生的耐藥問題第一代TKI類藥物用藥23T790M變異：T790M突變是導致TKI耐藥主要因素。EGFR基因第790號氨基酸殘基由蘇氨酸變成體積龐大的甲硫氨酸，造成了位阻效應，導致TKI類藥物無法靠近酪氨酸激酶活性中心；T790M突變還增加了EGFR-L858R突變體與ATP的親和力，而產(chǎn)生對TKI的獲得性耐藥與T790M相似的耐藥突變還有D761Y、L747S和T854A。爭議：T790M是“獲得性”還是“選擇性”？T790M變異：24其他TK受體的活化：

細胞內(nèi)存在許多轉(zhuǎn)導增殖刺激的TK受體，它們都參與調(diào)節(jié)細胞的許多生理功能，并且許多調(diào)節(jié)作用存在相互交叉。細胞從環(huán)境中得到的不是單一的信號，許多信號通路是公用的。因此，EGFR被阻斷后，其他受體能夠通過替代EGFR的主要功能來維持細胞的存活。肝細胞生長因子受體MET擴增，酪氨酸激酶活性增強，也可激活PI3K/AKT、RAS等信號通路。肝細胞生長因子HGF也能刺激EGFR的轉(zhuǎn)錄活化。MET抑制劑聯(lián)合使用。其他TK受體的活化：25Kras突變：在ras基因中，K-Ras對人類癌癥影響最大，在生理情況下，EGFR信號通路活化后，KRAS蛋白短暫激活，其后迅速失活，KRAS激活/失活效應是受控的。而KRAS基因突變時，可以導致EGRF信號通路持續(xù)激活，加速腫瘤細胞增殖。20%非小細胞肺癌、30-35%大腸癌患者中存在KRAS基因突變。K-ras突變型編碼異常的蛋白，刺激促進惡性腫瘤細胞的生長和擴散；并且不受上游EGFR的信號影響，所以對抗EGFR治療效果差。Kras突變：26

VEGF的過度表達：EGFR自分泌通路能夠部分調(diào)控多種血管生成生長因子，其中包括VEGF與ｂＦＧＦ。EGFR抑制劑的獲得性耐藥可能是由于VEGF的表達增強所致。VEGF的過度表達：27五、檢測EGFR基因變異的臨床診斷近年來表皮生長因子受體（EGFR）在肺癌致瘤中的作用以及針對EGFR的靶向治療備受關(guān)注，病理學家在如何篩選合理的EGFR靶向治療對象及判定檢測結(jié)果中起著關(guān)鍵的作用。1、通過基因檢測篩選出對藥物敏感的患者，為患者提供個體化用藥的科學依據(jù)；2、指導EGFR-TKI類藥物的合理使用，幫助醫(yī)生為患者選擇最優(yōu)的治療方案；3、避免無治療或治療不當造成病人病情延誤，降低治療風險；4、減輕患者的經(jīng)濟和精神負擔，節(jié)省醫(yī)療資源。五、檢測EGFR基因變異的臨床診斷近年來表皮生長因子受體（E28目前臨床實踐中主要針對EGFR絡(luò)氨酸激酶編碼區(qū)18、19、20、21外顯子的突變位點開展檢測測方法：1、TKI藥物對18、19或21外顯子發(fā)生敏感突變的EGFR更為有效，而野生型則無法獲益。女性、從不吸煙，亞裔被認為是與非小細胞肺癌EGFR基因敏感突變最重要因素。2、T790M突變獲得耐藥性。3、KRAS突變：KRAS抑制劑靶向治療。目前臨床實踐中主要針對EGFR絡(luò)氨酸激酶編碼區(qū)18、19、229謝謝謝謝30EGFR基因靶向治療EGFR基因靶向治療31主要內(nèi)容一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能二、EGFR在腫瘤中的變異三、針對EGFR進行腫瘤靶向治療的的藥物四、EGFR靶向治療當中產(chǎn)生的耐藥問題五、檢測EGFR基因變異的臨床診斷主要內(nèi)容一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能二、EGFR在腫瘤中32一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能表皮生長因子受體（Epidermalgrowthfactorreceptor），簡稱為EGFR、ErbB-1或HER1。是ErbB受體家族家族的成員之一。erbB家族為受體酪氨酸激酶，是一類具有跨膜結(jié)構(gòu)的酶蛋白，包括HER1/EGFR/erbB-1、HER2/erbB-2、HER3/erbB-3、HER4/erbB-4四個成員。由于EGFR的酪氨酸激酶活性，可以調(diào)節(jié)細胞的生長、增殖，分化，遷移，并且與腫瘤的發(fā)生有關(guān)。一、EGFR蛋白的正常結(jié)構(gòu)與功能表皮生長因子受體（Epide33EGFR是一種跨膜蛋白，由三個部分組成：①細胞外結(jié)構(gòu)域：是配體的結(jié)合位點；②單次跨膜的疏水α螺旋區(qū)；③細胞質(zhì)部分：有自磷酸化位點、和酪氨酸蛋白激酶(RTK)活性結(jié)構(gòu)域。EGFR是一種跨膜蛋白，由三個部分組成：34受體激活：當EGF同受體細胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合位點結(jié)合后，受體被激活，導致兩個EGF受體單體形成二聚體，使酪氨酸自我磷酸化，激活細胞質(zhì)部分的酪氨酸激酶。基因靶向治療課件35配體：表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子α(TGFα)、雙向調(diào)節(jié)蛋白(AR)、

β-細胞素(BTC)、肝素結(jié)合EGF樣生長因子(HB-EGF)、表皮調(diào)節(jié)素(EPR)等。

配體：36信號通路激活：二聚體自磷酸化之后酪氨酸激酶活性增強，下游信號通路的蛋白質(zhì)可與EGFR上磷酸化的酪氨酸位點結(jié)合，分別引起細胞內(nèi)不同的信號應答，從而引起一系列生物效應，調(diào)節(jié)細胞的生長、增殖，分化，遷移，與腫瘤的發(fā)生。主要激活的信號通路有：JAK/STAT、PI3K/AKT、RAS信號通路。信號通路激活：37基因靶向治療課件38EGFR失活：膜表面沒有與配體結(jié)合的EGFR單體，可被內(nèi)吞至細胞內(nèi)部，被內(nèi)吞的EGFR一部分被細胞降解，一部分重新回到細胞膜上。細胞膜上EGFR的半衰期為30分鐘。EGFR失活：39二、EGFR在腫瘤中的變異二、EGFR在腫瘤中的變異40EGFR在腫瘤細胞中的變異：數(shù)量變異結(jié)構(gòu)變異EGFR在腫瘤細胞中的變異：41數(shù)量變異：正常情況下，一個細胞上會有4*10^4~1*10^5個EGFR分子。腫瘤細胞中，可觀察到每個細胞有2*10

^6個EGFR分子。在許多腫瘤細胞中，都有EGFR異常高表達現(xiàn)象。當細胞膜上有高濃度的EGFR單體時，EFGR分子可在沒有配體的情況下自行聚合形成二聚體，并且二聚體可自我激活，激活下游的信號通路。數(shù)量變異：42基因變異：EFGR基因位于第七號染色體的短臂上。EGFR的酪氨酸激酶活性位點，主要是位于第18號外顯子到第24號外顯子之間。此區(qū)域的突變會影響EGFR的酪氨酸激酶活性。基因變異：43基因變異：45%是第19號外顯子缺失變異；40%是發(fā)生在第21號外顯子上的L858R變異（第858號氨基酸殘基由亮氨酸變成了精氨酸）；變異的EGFR不需要與配體結(jié)合就擁有了持續(xù)的酪氨酸酶活性。基因變異：44三、針對EGFR進行腫瘤靶向治療的的藥物特異性針對腫瘤細胞進行靶向治療，可以從分子水平逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的惡性生物學行為。靶向治療具有靶向性強、特異性高和毒副作用低等特點，并能增強放、化療療效，代表著腫瘤治療領(lǐng)域的最新發(fā)展方向。單克隆抗體(Mab)：西妥昔單抗、帕尼單抗、尼妥珠單抗。酪氨酸激酶抑制劑（TKI）：吉非替尼、厄洛替尼、?？颂婺?；阿法替尼；塔格瑞斯。副作用：皮疹、瘙癢、腹瀉、腸道潰瘍。三、針對EGFR進行腫瘤靶向治療的的藥物特異性針對腫瘤細胞進45單克隆抗體：抗體可特異性地識別EFGR，阻斷了配體與EGFR的結(jié)合，從而阻斷了配體對EGFR的激活作用，抑制了EGFR的酪氨酸激酶活性。同時還可促進EGFR的內(nèi)吞機制，減少膜表面的EGFR數(shù)量。對野生型、變異型EGFR均有效。單克隆抗體：46西妥昔單抗（Cetuximab，商品名愛必妥、爾必得舒、艾比特思）。是第一個FDA批準抗EGFR的單抗藥。由德國默克里昂公司出品。是一種人/鼠嵌合單克隆抗體?？捎糜谥委熮D(zhuǎn)移型結(jié)腸直腸癌和頭頸部腫瘤。西妥昔單抗（Cetuximab，商品名愛必妥、爾必得舒、艾比47帕尼單抗（Panitumumab，商品名Vectibix）是第一個完全人源化單克隆抗體與EGFR具有高親和性，用于治療化療失敗后轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌。尼妥珠單抗（Nimotuzomab，商品名泰欣生）是我國第一個用于治療惡性腫瘤的功能性單抗藥物，用于與放療聯(lián)合治療EGFR)表達陽性的III/IV期鼻咽癌。帕尼單抗（Panitumumab，商品名Vectibix）48酪氨酸激酶抑制劑TKI：TKI與ATP競爭EGFR的酪氨酸酶活性中心，阻止酪氨酸激酶活性的激活，從而抑制EGFR對下游信號通路的激活作用。酪氨酸激酶抑制劑TKI：49易瑞沙（Iressa，通用名Gefitinib）EGFR的可逆抑制劑，用于治療晚期非小細胞肺癌，尤其化療失敗后的非小細胞肺腺癌。阿斯利康公司易瑞沙/印度易瑞沙第一代TKI類藥物對19號外顯子缺失變異和L858R變異（第858號氨基酸殘基由亮氨酸變成了精氨酸）的EGFR療效更為顯著。基因靶向治療課件50基因靶向治療課件51塔格瑞斯

（Tagrisso）由FDA2015年11月批準上市的第三代TKI類靶向藥物。由阿斯利康研發(fā)。對于有T790M耐藥突變的EGFR有很強的抑制作用。塔格瑞斯（Tagrisso）52四、EGFR靶向治療當中產(chǎn)生的耐藥問題第一代TKI類藥物用藥4-6個月后會出現(xiàn)耐藥突變。耐藥并非單一因素且機制之間也存在交叉，錯綜復雜：1、EGFR基因突變或靶點缺失：T790M2、繞開EGFR通路的其他TK受體的活化3、胞內(nèi)EGFR下游信號蛋白非依賴性或組成性活化：Kras、PI3K、Src4、腫瘤誘導的非依賴于EGFR的血管生成：VEGF的過度表達5、膜表面的EGFR內(nèi)吞降解過程異常四、EGFR靶向治療當中產(chǎn)生的耐藥問題第一代TKI類藥物用藥53T790M變異：T790M突變是導致TKI耐藥主要因素。EGFR基因第790號氨基酸殘基由蘇氨酸變成體積龐大的甲硫氨酸，造成了位阻效應，導致TKI類藥物無法靠近酪氨酸激酶活性中心；T790M突變還增加了EGFR-L858R突變體與ATP的親和力，而產(chǎn)生對TKI的獲得性耐藥與T790M相似的耐藥突變還有D761Y、L747S和T854A。爭議：T790M是“獲得性”還是“選擇性”？T790M變異：54其他TK受體的活化：

細胞內(nèi)存在許多轉(zhuǎn)導增殖刺激的TK受體，它們都參與調(diào)節(jié)細胞的許多生理功能，并且許多調(diào)節(jié)作用存在相互交叉。細胞從環(huán)境中得到的不是單一的信號，許多信號通路是公用的。因此，EGFR被阻斷后，其他受體能夠通過替代EGFR的主要功能來維持細胞的存活。肝細胞生長因子受體MET擴增，酪氨酸激酶活性增強，也可激活PI3K/AKT、RAS等信號通路。肝細胞生長因子HGF也能刺激EGFR的轉(zhuǎn)錄活化。MET抑制劑聯(lián)合使用。其他TK受體的活化：55Kras突變：在ras基因中，K-Ras對人