人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講

基因工程基因工程1設(shè)想一能否讓水稻植株也能夠固定空氣中的氮？能否讓細(xì)菌“吐出”蠶絲？設(shè)想二能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物？設(shè)想三……設(shè)想一能否讓水稻植株也能夠固定空氣中的氮？能否讓細(xì)菌“吐出”2▲“基因工程”技術(shù)即根據(jù)人類的意愿定向改變生物---令人神往!▲“基因工程”技術(shù)即根據(jù)人類的意愿定向改變生物3基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌獲取抗蟲基因（目的基因）與運(yùn)載體DNA拼接導(dǎo)入棉花細(xì)胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)▲基因工程實(shí)例:基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽4什么叫基因工程？基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過在生物體外進(jìn)行DNA重組等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù).（一）基因工程的概念什么叫基因工程？基因工程是指按照人們的愿望,5基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品切割→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)基因重組▲基因工程的若干問題:基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼6DNA重組技術(shù)(基因工程)的

基本工具做工程是需要工具的.DNA重組技術(shù)(基因工程)的做工程是需要工具的.7前面介紹的利用基因工程培育抗蟲棉的主要步驟有哪幾個(gè)?步驟一：從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來抗蟲基因(目的基因).步驟二：抗蟲基因與運(yùn)載體DNA連接步驟三：抗蟲基因?qū)胧荏w(普通棉花)細(xì)胞▲思考:提示:共四步;步驟四是“檢測和鑒定”.前面介紹的利用基因工程培育抗蟲棉的主要步驟有哪幾個(gè)?步驟一：8▲上述的三個(gè)步驟中各需要什么工具？步驟一的工具：步驟二的工具：步驟三的工具：“分子手術(shù)刀”——限制性內(nèi)切酶“分子縫合針”——DNA連接酶“分子運(yùn)載車”——載體▲這里的“分子”是指__________________分子.DNA(目的基因、載體)▲上述的三個(gè)步驟中各需要什么工具？步驟一的工具：“分子手術(shù)刀9▲這三種工具的作用各是什么?▲這三種工具的作用各是什么?101.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制酶主要是從原核微生物中分離純化出來的。能識別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間(此處叫“切點(diǎn)”)的磷酸二酯鍵斷開(注意:不是氫鍵).（二）DNA重組技術(shù)的基本工具及其作用注意:

一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在一個(gè)特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。即：特異性.(注意:特異性表現(xiàn)在兩個(gè)方面.)1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制11AATTGCCTTAAGDNA雙鏈及“磷酸二酯鍵”磷酸二酯鍵AATTGCCTTAAGDNA雙鏈及“磷酸二酯鍵”磷酸二酯鍵121.大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識別的脫氧核苷酸序列是(用堿基表示)_____________;切點(diǎn)在________之間。限制酶▲看圖回答:GAATTCG和A2.若從切點(diǎn)處切開,形成的兩個(gè)DNA片斷是怎樣的?1.大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識別的脫13▲限制性內(nèi)切酶的特異性表現(xiàn)在:特定的核苷酸序列-----是“回文序列”(?).特定的切點(diǎn).▲限制性內(nèi)切酶的特異性表現(xiàn)在:14被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，他們之間正好互補(bǔ)配對，這樣的切口叫黏性末端.注意:

切口處的兩條單鏈一長一短.伸出來的那一條長鏈叫黏性末端被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)15限制酶▲在G和A之間被限制酶切斷的是化學(xué)鍵是___________________.限制酶▲在G和A之間被限制酶切斷的是化學(xué)鍵是________16▲“黏性末端”和“平末端”當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線的兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端.而當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端。▲“黏性末端”和“平末端”當(dāng)限制酶在它識別序列17人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講181.要想獲得某一個(gè)特定性狀的基因(即”目的基因”)必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端.2.如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，產(chǎn)生黏性末端相同嗎？會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端..思考:1.要想獲得某一個(gè)特定性狀的基因(即”19人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講20▲你是否想過?

限制酶是否會(huì)切割自己細(xì)胞里的DNA呢?為什么?這對于其自身有意義嗎?▲你是否想過?21▲DNA連接酶的種類(根據(jù)來源分)及其在功能上的異同.

----見課文P5.來源功能同異名稱E.ColiDNA連接酶T4DNA連接酶大腸桿菌T4噬菌體形成磷酸二酯鍵只能:互補(bǔ)的黏性末端黏性末端和平末端均可▲DNA連接酶的種類(根據(jù)來源分)及其在功能上的異同.來源功22顯然,若將上述兩者的黏性末端黏合(連接)起來，就似乎可以合成新的DNA分子(重組DNA分子)了用什么工具連接呢?這個(gè)工具是怎樣將兩者連接起來的?顯然,若將上述兩者的黏性末端黏合(連接)起來，就似乎可232.DNA連接酶——“分子縫合針”2.DNA連接酶——“分子縫合針”24DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口(注意位置)連接起來，這樣一個(gè)重組的DNA分子就形成了.▲思考:

DNA連接酶的作用是使斷口處的相鄰的兩個(gè)脫氧核苷酸之間形成____________鍵.DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把25人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講26

異:

DNA連接酶:是將幾個(gè)DNA片段連接起來;不需DNA模板.

DNA聚合酶:則是將脫氧核苷酸連接(聚合)成DNA;需以DNA的一條鏈為模板.▲提示:

注意比較基因工程中的DNA連接酶和DNA復(fù)制中的DNA聚合酶的作用有何異同?同:兩種酶都是形成磷酸二酯鍵.異:▲提示:同:兩種酶都是形成磷酸二酯鍵.27----導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸“目的基因”的工具——載體。

▲如何將目的基因(如上例中的“抗蟲基因”)導(dǎo)入受體細(xì)胞(即接受目的基因的生物的細(xì)胞,如上例中的棉花細(xì)胞)？▲注意:一般地,不能將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞.----導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸“目的基因”的工具——載體。▲28▲載體是什么(生物化學(xué)成分)?它從哪里獲得?它是如何承載目的基因的?▲載體是什么(生物化學(xué)成分)?它從哪里獲得?它是如何承載目的293.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”.常用的運(yùn)載體主要有兩類：1）質(zhì)粒:一些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)里的質(zhì)粒.2）病毒:噬菌體(即細(xì)菌病毒)或某些動(dòng)、植物病毒.3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”.常用的運(yùn)載30▲什么是質(zhì)粒?是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體(即原核的DNA)之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子.質(zhì)粒是基因工程最常用的載體.絕大多數(shù)細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子。有的一個(gè)細(xì)菌中有一個(gè)，有的一個(gè)細(xì)菌中有多個(gè).▲小結(jié):質(zhì)粒是小型、環(huán)狀的DNA分子.▲什么是質(zhì)粒?是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體31最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的存在與否對宿主細(xì)胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成。▲質(zhì)粒的一種:大腸桿菌的質(zhì)?！⒁?能充當(dāng)載體的是大腸桿菌的質(zhì)粒,而不是大腸桿菌.最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四32▲載體的作用有哪些？1.作為運(yùn)輸工具，將目的基因(如抗蟲基因)轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)中去。2.利用載體在受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)內(nèi)，對目的基因(如抗蟲基因)進(jìn)行大量復(fù)制。▲載體的作用有哪些？33▲作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2）載體DNA必須有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便目的基因插入到載體上去。3）具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。載體DNA必須是安全的,不會(huì)對受體細(xì)胞有害,或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去;5)載體DNA分子大小應(yīng)適合,以便提取和在體外進(jìn)行操作,太大就不便操作.▲作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地34雙基練習(xí)：一、基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外____和____等技術(shù),賦予生物以心得遺傳特性,創(chuàng)造出符合人們的需要的新的____和____.又叫做DNA的重組技術(shù).二、DNA重組技術(shù)的基本工具1.限制性核酸內(nèi)切酶-----“分子手術(shù)刀”(1)主要來源:從____生物中分離出來的.(2)特點(diǎn):能夠識別DNA特定的核苷酸序列,切開雙基練習(xí)：一、基因工程的概念35兩個(gè)____之間的_____.(3)DNA末端:限制酶切割DNA產(chǎn)生的DNA末端有兩種形式:______和_______.2.DNA連接酶----“分子縫合針”(1)作用:恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的______.(2)種類:①E.coliDNA連接酶:只能縫合DNA的_____②T4DNA連接酶:既可縫合DNA的_____,又可縫合雙鏈DNA的_______.兩個(gè)____之間的_____.363.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體----”分子運(yùn)輸車”(1)載體的種類①質(zhì)粒:是一種裸露的,結(jié)構(gòu)簡單,獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并能夠自我_____能力的雙鏈______DNA分子;②______.③________.(2)載體的特點(diǎn)①能夠在細(xì)胞內(nèi)_______;②有一個(gè)或多個(gè)____切割位點(diǎn),便于供源DNA的插入.③具有_____基因,供重組DNA的鑒定和選擇.3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體----”分子運(yùn)輸車”37基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序38▲基因工程的基本操作流程▲基因工程的基本操作流程39▲基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)基本步驟：1）目的基因的獲取2）“基因表達(dá)載體”的構(gòu)建3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(即“轉(zhuǎn)化”)4）目的基因的檢測與鑒定▲基因工程的基本操作程序主要包括1）目的基因的獲取40人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講41步驟一：目的基因的獲取▲什么叫目的基因?主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因.步驟一：目的基因的獲取▲什么叫目的基因?42▲獲取目的基因的途徑有哪些?1.從“基因文庫”中獲取.2.利用“PCR技術(shù)”擴(kuò)增.3.直接人工合成(適合于基因較小且已知其核苷酸順序)----見課文.共三條.▲獲取目的基因的途徑有哪些?1.從“基因文庫”中獲取.---43▲從基因文庫中獲取“目的基因”：什么叫“基因文庫”?分為:1.基因組文庫:基因文庫中包含了一種生物所有的基因,這種基因文庫叫做基因組文庫.2.部分基因文庫:基因文庫中包含了一種生物的一部分基因,這種基因文庫叫做部分基因文庫.如cDNA文庫.將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因,稱為基因文庫(genelibrary)類似從圖書館里取書.▲從基因文庫中獲取“目的基因”：什么叫“基因文庫”?分為:44人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講45▲利用PCR技術(shù)擴(kuò)增“目的基因”.1.概念:PCR即“聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”,是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的技術(shù).2.原理:DNA的半保留復(fù)制.3.過程:(見圖).4.優(yōu)點(diǎn):大量獲取目的基因.(指數(shù)式擴(kuò)增,近2n)▲利用PCR技術(shù)擴(kuò)增“目的基因”.1.概念:PCR即“聚合酶46▲提示與思考:1.圖中的“模板DNA”就是已知核苷酸序列的目的基因.2.引物是人工合成的,與模板DNA(即目的基因)互補(bǔ),作用是使___.3.加熱的作用是使_________.4.聚合酶(Tap酶)是指____(選:DNA聚合酶;RNA聚合酶),其特點(diǎn)是_________.5.原料是_________.6.每擴(kuò)增一次,目的基因的數(shù)目增加___.7.“退火”DNA解鏈▲提示與思考:DNA解鏈47▲提示:PCR的基本操作(過程):

PCR是一種反復(fù)循環(huán)的DNA合成反應(yīng)過程,其基本反應(yīng)有三個(gè)步驟：

1.變性:通過加熱(高溫)使模板DNA完全變性成為單鏈,同時(shí)引物自身和引物之間存在的局部雙鏈也得以消除.

2.退火:將溫度下降至適宜溫度，使引物與模板DNA退火結(jié)合；

3.延伸:將溫度升高,熱穩(wěn)定DNA聚合酶(即耐高溫)以dNTP(即脫氧核苷酸)為底物(即原料)催化合成DNA鏈延伸.

以上三步為一個(gè)循環(huán)，新合成的DNA分子又可以作為下一輪合成的模板，經(jīng)多次循環(huán)后即可達(dá)到擴(kuò)增DNA片段的目的.▲顯然,每循環(huán)(擴(kuò)增)一次,就需要添加一次(共兩個(gè))引物.▲提示:PCR的基本操作(過程):

PCR是一種反復(fù)循48▲提示:兩個(gè)引物、一個(gè)模板.▲提示:兩個(gè)引物、一個(gè)模板.49▲人工合成目的基因如果基因比較小，核苷酸序列又已知，也可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接合成。1.通過反轉(zhuǎn)錄法合成:又分為:目的基因的mRNA(已知)單鏈DNA雙鏈DNA(即目的基因)反轉(zhuǎn)錄合成▲人工合成目的基因如果基因比較小，核苷酸序列又已知，502.直接合成.根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)的信使RNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對原則，推測出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過化學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成2.直接合成.根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)51在獲取目的基因后,如何將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢?能直接導(dǎo)入嗎?必須借助載體!在獲取目的基因后,如何將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢52怎樣借助載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢?必須把目的基因“裝到”載體上!如何裝?怎樣借助載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢?53步驟二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建.▲什么是“基因表達(dá)載體”?就是已經(jīng)裝上了(含有)目的基因的載體.步驟二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建.▲什么是“基因表達(dá)載體”?541）用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出黏性末端。2）用同一種限制酶切取目的基因，使其產(chǎn)生相同的黏性末端。3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，再加入適量DNA連接酶，形成了一個(gè)重組DNA分子（重組質(zhì)粒）▲目的基因與載體的結(jié)合過程，實(shí)際上是不同來源的基因重組的過程▲基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟.

----見課文.1）用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出黏55▲提示與思考:1.“基因表達(dá)載體”就是已插入目的基因的載體.2.看左圖回答:

基因表達(dá)載體由哪些部分組成?___________.▲提示與思考:2.看左圖回答:563.啟動(dòng)子:是有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷,位于目的基因的首端,是RNA聚合酶的識別和結(jié)合的部位.有它才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出MRNA.最終獲得蛋白質(zhì).(不是復(fù)制!)4.終止子:位于目的基因的端尾端.作用是終止轉(zhuǎn)錄.5.標(biāo)記基因:是為了鑒別受體細(xì)胞里是否已經(jīng)含有目的基因,從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來.如“抗生素基因”、“熒光標(biāo)記基因”等.(醒目的,特別的標(biāo)記)6.復(fù)制原點(diǎn)是載體復(fù)制(不是轉(zhuǎn)錄)時(shí)的起點(diǎn).3.啟動(dòng)子:是有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷,位于目的基因的首端,是57▲什么叫轉(zhuǎn)化?

將目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定(如復(fù)制)和表達(dá)(即轉(zhuǎn)錄、翻譯為特定蛋白質(zhì)及表現(xiàn)特定性狀等)的過程.▲受體細(xì)胞是指什么?它包括哪些細(xì)胞?▲提示:注意,目的基因是隨著基因表達(dá)載體被導(dǎo)入受體細(xì)胞的,而不是被單獨(dú)導(dǎo)入的.步驟三：

轉(zhuǎn)化----將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞▲什么叫轉(zhuǎn)化?▲受體細(xì)胞是指什么?它包括哪些細(xì)胞?▲提示:581.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞----農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.1.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞----農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.59▲提示:(1)農(nóng)桿菌及農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法:農(nóng)桿菌是土壤中的一種細(xì)菌.能感染雙子葉植物和裸子植物.其細(xì)胞里含Ti質(zhì)粒,該質(zhì)粒上含有一段DNA叫“T-DNA”(叫“可轉(zhuǎn)移的DNA”).將目的基因插入到該“T-DNA”中,通過使農(nóng)桿菌感染植物,而將目的基因轉(zhuǎn)化入植物細(xì)胞并將其插入到植物細(xì)胞中的染色體的DNA上.(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法還有:基因槍法和花粉通道法.▲提示:(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法還有:60▲將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的其他方法:花粉管通道法基因槍法.▲將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的其他方法:612.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞---顯微注射法.2.將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞---顯微注射法.62用口徑為1μm的DNA注射器，將大量目的基因片段(注意:是含目的基因的“基因表達(dá)載體”,而不是裸的目的基因)注入到受精卵的核內(nèi)，然后把經(jīng)過注射的受精卵移植到另一只雌性動(dòng)物的子宮內(nèi)，使受精卵發(fā)育為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。什么叫顯微注射技術(shù)？用口徑為1μm的DNA注射器，將大量目的基因633.將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞—感受態(tài)細(xì)胞法.大腸桿菌細(xì)胞是最常用的微生物受體細(xì)胞.轉(zhuǎn)化方法是:首先用Ca2+(如CaCL溶液)處理細(xì)胞,以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài),這種細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞.第二步是將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程.3.將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞—感受態(tài)細(xì)胞法.大腸641）將細(xì)菌用CaCl2處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性。2）使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。3）目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)，隨其繁殖而復(fù)制，由于細(xì)菌繁殖的速度非常快，在很短的時(shí)間內(nèi)就能獲得大量的目的基因。1）將細(xì)菌用CaCl2處理，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性65導(dǎo)入過程：運(yùn)載體為質(zhì)粒，受體細(xì)胞為細(xì)菌受體細(xì)胞：細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性增大重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制氯化鈣大量的目的基因?qū)脒^程：運(yùn)載體為質(zhì)粒，受體細(xì)胞為細(xì)菌受體細(xì)胞：細(xì)菌細(xì)胞壁的66▲通過轉(zhuǎn)化以后,目的基因是否真正插入到了受體細(xì)胞的DNA中，是否能夠在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和正確表達(dá)呢?這只有通過檢測、鑒定才能得知.▲通過轉(zhuǎn)化以后,目的基因是否真正插入到了受體細(xì)胞的DNA67步驟四：目的基因的檢測與鑒定▲怎樣檢測和鑒定?----見課文.思考:有哪幾種檢測方法?每一種方法的原理是什么?步驟如何?步驟四：目的基因的檢測與鑒定▲怎樣檢測和鑒定?----見課文68▲提示:目的基因的檢測與鑒定檢測—鑒定——①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等方法——方法--方法——DNA分子雜交分子雜交（注意與上不同之處）抗原抗體雜交▲提示:目的基因的檢測與鑒定檢測—鑒定——①檢測轉(zhuǎn)基因生物染69▲DNA分子雜交原理：DNA分子雜交是基因診斷最基本的方法之一。其基本原理是：互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈，即能夠進(jìn)行雜交。這種結(jié)合是特異的，即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)配對進(jìn)行。因此，當(dāng)用一段已知基因的核苷酸序列作為探針，與被測基因進(jìn)行接觸，若兩者的堿基完全配對成雙鏈，則表明被測基因中含有已知的基因序列?！鳧NA分子雜交原理：DNA分子雜交是基因診斷最70基因探針：

基因探針就是一段與目的基因或DNA互補(bǔ)的特異核苷酸序列。它包括整個(gè)基因，或基因的一部分；可以是DNA本身，也可以是由之轉(zhuǎn)錄而來的RNA。基因探針：基因探針就是一段與目的基因或DNA互補(bǔ)711.檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入目的基因2.檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA1.檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入目的基因72上圖顯示,基因探針只能和______(選:目的基因;非目的基因)雜交.上圖顯示,基因探針只能和______(選:目的基因;73----個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定如一個(gè)抗蟲或抗病的目的基因?qū)胫参锛?xì)胞后，是否賦予抗蟲或抗病特性，需要做抗蟲或抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否具有抗性以及抗性的程度。3.檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)----個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定如一個(gè)抗蟲或抗病的74多細(xì)胞生物的檢測，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整個(gè)體，檢測這些個(gè)體是否攝入目的基因，攝入的基因是否表達(dá)（是否表現(xiàn)出相應(yīng)的性狀）。淘汰無變化的個(gè)體，保留有相應(yīng)變化的個(gè)體進(jìn)一步培養(yǎng)、研究。例：用棉鈴飼喂棉鈴蟲，如蟲吃后不出現(xiàn)中毒癥狀，說明未攝入目的基因或攝入目的基因未表達(dá)。如蟲吃后中毒死亡，則說明攝入了抗蟲基因并得到表達(dá)。多細(xì)胞生物的檢測，將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)并誘導(dǎo)發(fā)育成完整75基因工程基因工程76設(shè)想一能否讓水稻植株也能夠固定空氣中的氮？能否讓細(xì)菌“吐出”蠶絲？設(shè)想二能否讓微生物產(chǎn)生出人的胰島素、干擾素等珍貴的藥物？設(shè)想三……設(shè)想一能否讓水稻植株也能夠固定空氣中的氮？能否讓細(xì)菌“吐出”77▲“基因工程”技術(shù)即根據(jù)人類的意愿定向改變生物---令人神往!▲“基因工程”技術(shù)即根據(jù)人類的意愿定向改變生物78基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌獲取抗蟲基因（目的基因）與運(yùn)載體DNA拼接導(dǎo)入棉花細(xì)胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)▲基因工程實(shí)例:基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽79什么叫基因工程？基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),并通過在生物體外進(jìn)行DNA重組等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性,從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,因此又叫做DNA重組技術(shù)或基因拼接技術(shù).（一）基因工程的概念什么叫基因工程？基因工程是指按照人們的愿望,80基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼接技術(shù)或DNA重組技術(shù)生物體外基因DNA分子水平人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品切割→拼接→導(dǎo)入→表達(dá)基因重組▲基因工程的若干問題:基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實(shí)質(zhì)結(jié)果基因拼81DNA重組技術(shù)(基因工程)的

基本工具做工程是需要工具的.DNA重組技術(shù)(基因工程)的做工程是需要工具的.82前面介紹的利用基因工程培育抗蟲棉的主要步驟有哪幾個(gè)?步驟一：從蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞內(nèi)提取出來抗蟲基因(目的基因).步驟二：抗蟲基因與運(yùn)載體DNA連接步驟三：抗蟲基因?qū)胧荏w(普通棉花)細(xì)胞▲思考:提示:共四步;步驟四是“檢測和鑒定”.前面介紹的利用基因工程培育抗蟲棉的主要步驟有哪幾個(gè)?步驟一：83▲上述的三個(gè)步驟中各需要什么工具？步驟一的工具：步驟二的工具：步驟三的工具：“分子手術(shù)刀”——限制性內(nèi)切酶“分子縫合針”——DNA連接酶“分子運(yùn)載車”——載體▲這里的“分子”是指__________________分子.DNA(目的基因、載體)▲上述的三個(gè)步驟中各需要什么工具？步驟一的工具：“分子手術(shù)刀84▲這三種工具的作用各是什么?▲這三種工具的作用各是什么?851.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制酶主要是從原核微生物中分離純化出來的。能識別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間(此處叫“切點(diǎn)”)的磷酸二酯鍵斷開(注意:不是氫鍵).（二）DNA重組技術(shù)的基本工具及其作用注意:

一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并且能在一個(gè)特定的切點(diǎn)上切割DNA分子。即：特異性.(注意:特異性表現(xiàn)在兩個(gè)方面.)1.限制性核酸內(nèi)切酶——“分子手術(shù)刀”限制86AATTGCCTTAAGDNA雙鏈及“磷酸二酯鍵”磷酸二酯鍵AATTGCCTTAAGDNA雙鏈及“磷酸二酯鍵”磷酸二酯鍵871.大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識別的脫氧核苷酸序列是(用堿基表示)_____________;切點(diǎn)在________之間。限制酶▲看圖回答:GAATTCG和A2.若從切點(diǎn)處切開,形成的兩個(gè)DNA片斷是怎樣的?1.大腸桿菌(EcoRΙ)的一種限制酶能識別的脫88▲限制性內(nèi)切酶的特異性表現(xiàn)在:特定的核苷酸序列-----是“回文序列”(?).特定的切點(diǎn).▲限制性內(nèi)切酶的特異性表現(xiàn)在:89被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)伸出的核苷酸，他們之間正好互補(bǔ)配對，這樣的切口叫黏性末端.注意:

切口處的兩條單鏈一長一短.伸出來的那一條長鏈叫黏性末端被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個(gè)90限制酶▲在G和A之間被限制酶切斷的是化學(xué)鍵是___________________.限制酶▲在G和A之間被限制酶切斷的是化學(xué)鍵是________91▲“黏性末端”和“平末端”當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線的兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端.而當(dāng)限制酶在它識別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的則是平末端?！梆ば阅┒恕焙汀捌侥┒恕碑?dāng)限制酶在它識別序列92人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講931.要想獲得某一個(gè)特定性狀的基因(即”目的基因”)必須要用限制酶切幾個(gè)切口？可產(chǎn)生幾個(gè)黏性末端？要切兩個(gè)切口，產(chǎn)生四個(gè)黏性末端.2.如果把兩種來源不同的DNA用同一種限制酶來切割，產(chǎn)生黏性末端相同嗎？會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端..思考:1.要想獲得某一個(gè)特定性狀的基因(即”94人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講95▲你是否想過?

限制酶是否會(huì)切割自己細(xì)胞里的DNA呢?為什么?這對于其自身有意義嗎?▲你是否想過?96▲DNA連接酶的種類(根據(jù)來源分)及其在功能上的異同.

----見課文P5.來源功能同異名稱E.ColiDNA連接酶T4DNA連接酶大腸桿菌T4噬菌體形成磷酸二酯鍵只能:互補(bǔ)的黏性末端黏性末端和平末端均可▲DNA連接酶的種類(根據(jù)來源分)及其在功能上的異同.來源功97顯然,若將上述兩者的黏性末端黏合(連接)起來，就似乎可以合成新的DNA分子(重組DNA分子)了用什么工具連接呢?這個(gè)工具是怎樣將兩者連接起來的?顯然,若將上述兩者的黏性末端黏合(連接)起來，就似乎可982.DNA連接酶——“分子縫合針”2.DNA連接酶——“分子縫合針”99DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把梯子兩邊扶手的斷口(注意位置)連接起來，這樣一個(gè)重組的DNA分子就形成了.▲思考:

DNA連接酶的作用是使斷口處的相鄰的兩個(gè)脫氧核苷酸之間形成____________鍵.DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，即把100人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講101

異:

DNA連接酶:是將幾個(gè)DNA片段連接起來;不需DNA模板.

DNA聚合酶:則是將脫氧核苷酸連接(聚合)成DNA;需以DNA的一條鏈為模板.▲提示:

注意比較基因工程中的DNA連接酶和DNA復(fù)制中的DNA聚合酶的作用有何異同?同:兩種酶都是形成磷酸二酯鍵.異:▲提示:同:兩種酶都是形成磷酸二酯鍵.102----導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸“目的基因”的工具——載體。

▲如何將目的基因(如上例中的“抗蟲基因”)導(dǎo)入受體細(xì)胞(即接受目的基因的生物的細(xì)胞,如上例中的棉花細(xì)胞)？▲注意:一般地,不能將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞.----導(dǎo)入過程需要運(yùn)輸“目的基因”的工具——載體?！?03▲載體是什么(生物化學(xué)成分)?它從哪里獲得?它是如何承載目的基因的?▲載體是什么(生物化學(xué)成分)?它從哪里獲得?它是如何承載目的1043.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”.常用的運(yùn)載體主要有兩類：1）質(zhì)粒:一些細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)里的質(zhì)粒.2）病毒:噬菌體(即細(xì)菌病毒)或某些動(dòng)、植物病毒.3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體---“分子運(yùn)輸車”.常用的運(yùn)載105▲什么是質(zhì)粒?是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體(即原核的DNA)之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子.質(zhì)粒是基因工程最常用的載體.絕大多數(shù)細(xì)菌質(zhì)粒都是閉合環(huán)狀DNA分子。有的一個(gè)細(xì)菌中有一個(gè)，有的一個(gè)細(xì)菌中有多個(gè).▲小結(jié):質(zhì)粒是小型、環(huán)狀的DNA分子.▲什么是質(zhì)粒?是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于細(xì)菌染色體106最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四環(huán)素的標(biāo)記基因。質(zhì)粒的存在與否對宿主細(xì)胞生存沒有決定性作用，但復(fù)制只能在宿主細(xì)胞內(nèi)完成。▲質(zhì)粒的一種:大腸桿菌的質(zhì)?！⒁?能充當(dāng)載體的是大腸桿菌的質(zhì)粒,而不是大腸桿菌.最常用的質(zhì)粒是大腸桿菌的質(zhì)粒，其中常含有抗藥基因，如四107▲載體的作用有哪些？1.作為運(yùn)輸工具，將目的基因(如抗蟲基因)轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)中去。2.利用載體在受體細(xì)胞(如棉花細(xì)胞)內(nèi)，對目的基因(如抗蟲基因)進(jìn)行大量復(fù)制?！d體的作用有哪些？108▲作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。2）載體DNA必須有一個(gè)或多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便目的基因插入到載體上去。3）具有某些標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選。如抗菌素的抗性基因、產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因等。載體DNA必須是安全的,不會(huì)對受體細(xì)胞有害,或不能進(jìn)入到除受體細(xì)胞外的其他生物細(xì)胞中去;5)載體DNA分子大小應(yīng)適合,以便提取和在體外進(jìn)行操作,太大就不便操作.▲作為載體必須具備哪些條件？1）能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地109雙基練習(xí)：一、基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外____和____等技術(shù),賦予生物以心得遺傳特性,創(chuàng)造出符合人們的需要的新的____和____.又叫做DNA的重組技術(shù).二、DNA重組技術(shù)的基本工具1.限制性核酸內(nèi)切酶-----“分子手術(shù)刀”(1)主要來源:從____生物中分離出來的.(2)特點(diǎn):能夠識別DNA特定的核苷酸序列,切開雙基練習(xí)：一、基因工程的概念110兩個(gè)____之間的_____.(3)DNA末端:限制酶切割DNA產(chǎn)生的DNA末端有兩種形式:______和_______.2.DNA連接酶----“分子縫合針”(1)作用:恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的______.(2)種類:①E.coliDNA連接酶:只能縫合DNA的_____②T4DNA連接酶:既可縫合DNA的_____,又可縫合雙鏈DNA的_______.兩個(gè)____之間的_____.1113.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體----”分子運(yùn)輸車”(1)載體的種類①質(zhì)粒:是一種裸露的,結(jié)構(gòu)簡單,獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并能夠自我_____能力的雙鏈______DNA分子;②______.③________.(2)載體的特點(diǎn)①能夠在細(xì)胞內(nèi)_______;②有一個(gè)或多個(gè)____切割位點(diǎn),便于供源DNA的插入.③具有_____基因,供重組DNA的鑒定和選擇.3.基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體----”分子運(yùn)輸車”112基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序113▲基因工程的基本操作流程▲基因工程的基本操作流程114▲基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)基本步驟：1）目的基因的獲取2）“基因表達(dá)載體”的構(gòu)建3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(即“轉(zhuǎn)化”)4）目的基因的檢測與鑒定▲基因工程的基本操作程序主要包括1）目的基因的獲取115人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講116步驟一：目的基因的獲取▲什么叫目的基因?主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因.步驟一：目的基因的獲取▲什么叫目的基因?117▲獲取目的基因的途徑有哪些?1.從“基因文庫”中獲取.2.利用“PCR技術(shù)”擴(kuò)增.3.直接人工合成(適合于基因較小且已知其核苷酸順序)----見課文.共三條.▲獲取目的基因的途徑有哪些?1.從“基因文庫”中獲取.---118▲從基因文庫中獲取“目的基因”：什么叫“基因文庫”?分為:1.基因組文庫:基因文庫中包含了一種生物所有的基因,這種基因文庫叫做基因組文庫.2.部分基因文庫:基因文庫中包含了一種生物的一部分基因,這種基因文庫叫做部分基因文庫.如cDNA文庫.將含有某種生物不同基因的許多DNA片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因,稱為基因文庫(genelibrary)類似從圖書館里取書.▲從基因文庫中獲取“目的基因”：什么叫“基因文庫”?分為:119人教版教學(xué)課件基因工程課件(人教版高中生物選修)精講120▲利用PCR技術(shù)擴(kuò)增“目的基因”.1.概念:PCR即“聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”,是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的技術(shù).2.原理:DNA的半保留復(fù)制.3.過程:(見圖).4.優(yōu)點(diǎn):大量獲取目的基因.(指數(shù)式擴(kuò)增,近2n)▲利用PCR技術(shù)擴(kuò)增“目的基因”.1.概念:PCR即“聚合酶121▲提示與思考:1.圖中的“模板DNA”就是已知核苷酸序列的目的基因.2.引物是人工合成的,與模板DNA(即目的基因)互補(bǔ),作用是使___.3.加熱的作用是使_________.4.聚合酶(Tap酶)是指____(選:DNA聚合酶;RNA聚合酶),其特點(diǎn)是_________.5.原料是_________.6.每擴(kuò)增一次,目的基因的數(shù)目增加___.7.“退火”DNA解鏈▲提示與思考:DNA解鏈122▲提示:PCR的基本操作(過程):

PCR是一種反復(fù)循環(huán)的DNA合成反應(yīng)過程,其基本反應(yīng)有三個(gè)步驟：

1.變性:通過加熱(高溫)使模板DNA完全變性成為單鏈,同時(shí)引物自身和引物之間存在的局部雙鏈也得以消除.

2.退火:將溫度下降至適宜溫度，使引物與模板DNA退火結(jié)合；

3.延伸:將溫度升高,熱穩(wěn)定DNA聚合酶(即耐高溫)以dNTP(即脫氧核苷酸)為底物(即原料)催化合成DNA鏈延伸.

以上三步為一個(gè)循環(huán)，新合成的DNA分子又可以作為下一輪合成的模板，經(jīng)多次循環(huán)后即可達(dá)到擴(kuò)增DNA片段的目的.▲顯然,每循環(huán)(擴(kuò)增)一次,就需要添加一次(共兩個(gè))引物.▲提示:PCR的基本操作(過程):

PCR是一種反復(fù)循123▲提示:兩個(gè)引物、一個(gè)模板.▲提示:兩個(gè)引物、一個(gè)模板.124▲人工合成目的基因如果基因比較小，核苷酸序列又已知，也可以通過DNA合成儀用化學(xué)方法直接合成。1.通過反轉(zhuǎn)錄法合成:又分為:目的基因的mRNA(已知)單鏈DNA雙鏈DNA(即目的基因)反轉(zhuǎn)錄合成▲人工合成目的基因如果基因比較小，核苷酸序列又已知，1252.直接合成.根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)的信使RNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對原則，推測出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過化學(xué)方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成2.直接合成.根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出相應(yīng)126在獲取目的基因后,如何將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢?能直接導(dǎo)入嗎?必須借助載體!在獲取目的基因后,如何將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢127怎樣借助載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢?必須把目的基因“裝到”載體上!如何裝?怎樣借助載體將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞呢?128步驟二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建.▲什么是“基因表達(dá)載體”?就是已經(jīng)裝上了(含有)目的基因的載體.步驟二：基因表達(dá)載體的構(gòu)建.▲什么是“基因表達(dá)載體”?1291）用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出黏性末端。2）用同一種限制酶切取目的基因，使其產(chǎn)生相同的黏性末端。3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處，再加入適量DNA連接酶，形成了一個(gè)重組DNA分子（重組質(zhì)粒）▲目的基因與載體的結(jié)合過程，實(shí)際上是不同來源的基因重組的過程▲基因表達(dá)載體的構(gòu)建步驟.

----見課文.1）用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出黏130▲提示與思考:1.“基因表達(dá)載體”就是已插入目的基因的載體.2.看左圖回答:

基因表達(dá)載體由哪些部分組成?___________.▲提示與思考:2.看左圖回答:1313.啟動(dòng)子:是有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷,位于目的基因的首端,是RNA聚合酶的識別和結(jié)合的部位.有它才能驅(qū)動(dòng)目的基因轉(zhuǎn)錄出MRNA.最終獲得蛋白質(zhì).(不是復(fù)制!)4.終止子:位于目的基因的端尾端.作用是終止轉(zhuǎn)錄.5.標(biāo)記基因:是為了鑒別受體細(xì)胞里是否已經(jīng)含有目的基因,從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來.如“抗生素基因”、“熒光標(biāo)記基因”等.(醒目的,特別的標(biāo)記)6.復(fù)制原點(diǎn)是載體復(fù)制(不是轉(zhuǎn)錄)時(shí)的起點(diǎn).3.啟動(dòng)子:是有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片斷,位于目的基因的首端,是132▲什么叫轉(zhuǎn)化?

將目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定(如復(fù)制)和表達(dá)(即轉(zhuǎn)錄、翻譯為特定蛋白質(zhì)及表現(xiàn)特定性狀等)的過程.▲受體細(xì)胞是指什么?它包括哪些細(xì)胞?▲提示:注意,目的基因是隨著基因表達(dá)載體被導(dǎo)入受體細(xì)胞的,而不是被單獨(dú)導(dǎo)入的.步驟三：

轉(zhuǎn)化----將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞▲什么叫轉(zhuǎn)化?▲受體細(xì)胞是指什么?它包括哪些細(xì)胞?▲提示:1331.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞----農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.1.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞----農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法.134▲提示:(1)農(nóng)桿菌及農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法:農(nóng)桿菌是土壤中的一種細(xì)菌.能感染雙子葉植物和裸子植物.其細(xì)胞里含Ti質(zhì)粒,該質(zhì)粒上含有一段DNA叫“T-DNA”(叫“可轉(zhuǎn)移的DNA”).將目的基因插入到該“T-DNA”中,通過使農(nóng)桿菌感染植物,而將目的基因轉(zhuǎn)化入植物細(xì)胞并將其插入到植物細(xì)胞中的染色體的DNA上.(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法還有:基因槍法和花粉通道法.▲提示:(2)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法還有:135▲將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的其他方法:花粉管通道法