小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等

食品毒理學(xué)

實(shí)驗(yàn)小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁(yè)!課程簡(jiǎn)介：本實(shí)驗(yàn)課程主要面向“食品質(zhì)量與安全”等專(zhuān)業(yè)本科生，是食品類(lèi)專(zhuān)業(yè)課程《食品毒理學(xué)》的實(shí)踐環(huán)節(jié)，共有學(xué)時(shí)數(shù)16學(xué)時(shí)，教學(xué)內(nèi)容包括“小鼠口服急性毒性試驗(yàn)”等。實(shí)驗(yàn)教學(xué)中主要為技能型實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)，以提高學(xué)生應(yīng)用毒理學(xué)基本實(shí)驗(yàn)測(cè)試食品及藥品毒性的動(dòng)手操作應(yīng)用能力。小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁(yè)!目錄實(shí)驗(yàn)1毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本操作技術(shù)訓(xùn)練實(shí)驗(yàn)2小鼠口服急性毒性試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)3小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)4小鼠精子畸形試驗(yàn)小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁(yè)!【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法

】（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捕捉固定小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁(yè)!【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法

】（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別鑒定小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁(yè)!小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁(yè)!實(shí)驗(yàn)2小鼠口服急性毒性試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、學(xué)習(xí)急性毒性試驗(yàn)的試驗(yàn)設(shè)計(jì)原則，2、學(xué)會(huì)經(jīng)口灌胃技術(shù)、隨機(jī)分組方法，3、掌握主要的LD50計(jì)算方法和急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁(yè)!健康小鼠或大鼠的選擇，性別的辨認(rèn)。稱(chēng)重、編號(hào)和隨機(jī)分組方法。受試化學(xué)物溶液的配制。小鼠和大鼠經(jīng)口灌胃技術(shù)。毒性體征的觀察、LD50計(jì)算和毒性分級(jí)。【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容】小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁(yè)!結(jié)果評(píng)定

根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中毒體征、死亡時(shí)間和特征、LD50，接受試物種類(lèi)，分別參照相應(yīng)的經(jīng)口急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)定，判斷該受試物的毒性大小及毒性特征。小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁(yè)!外來(lái)化學(xué)物干擾細(xì)胞的有絲分裂或使染色體發(fā)生斷裂損傷，使細(xì)胞在有絲分裂后期受損的染色體或其片斷不能及時(shí)進(jìn)入細(xì)胞核，而留在細(xì)胞質(zhì)中，形成大小為主核1/20至1/5的微核。骨髓嗜多染紅細(xì)胞為剛剛成熟排出主核的細(xì)胞，細(xì)胞中如果有微核形成則會(huì)很清晰觀察到。檢測(cè)的遺傳學(xué)終點(diǎn)：染色體分離改變或完整性改變。毒理學(xué)意義：由于微核是骨髓細(xì)胞染色體斷裂后產(chǎn)生，所以可用來(lái)檢測(cè)化學(xué)物是否具有致突變作用。【實(shí)驗(yàn)原理】小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁(yè)!（五）結(jié)果觀察與計(jì)算先于低倍鏡下選擇細(xì)胞分布均勻、染色均勻，細(xì)胞無(wú)損區(qū)域，再在油鏡下計(jì)算500個(gè)嗜多染細(xì)胞的微核率。微核出現(xiàn)率％＝微核出現(xiàn)個(gè)數(shù)/細(xì)胞數(shù)×100小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁(yè)!實(shí)驗(yàn)示范小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁(yè)!實(shí)驗(yàn)4小鼠精子畸形試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、掌握小鼠精子畸形試驗(yàn)方法：包括動(dòng)物選擇、劑量分組、取材、制片、染色、觀察整個(gè)過(guò)程；2、熟悉畸形精子形成的原因：控制精子形態(tài)的基因受損、精子發(fā)生過(guò)程受影響、能量提供不足、精子膜受損等。小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁(yè)!1、劑量設(shè)計(jì)2、染毒3、制片4、固定5、染色6、觀察與計(jì)數(shù)【實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與步驟】小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁(yè)!小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁(yè)!結(jié)果統(tǒng)計(jì)與分析小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁(yè)!實(shí)驗(yàn)1毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本操作技術(shù)訓(xùn)練1、了解常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)、特性；2、掌握大鼠、小鼠、家兔的捉拿與固定技術(shù)；3、學(xué)會(huì)大、小鼠性別的辨認(rèn)；4、掌握大、小鼠灌胃染毒技術(shù)，家兔被皮技術(shù)；5、熟悉大、小鼠生物材料采集方法；6、掌握大鼠斷頭處死、小鼠脫頸椎處死方法；7、對(duì)大、小鼠進(jìn)行常規(guī)解剖，辨認(rèn)各臟器及正常解剖位置【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹啃∈罂诜毙远拘栽囼?yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁(yè)!小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁(yè)!（三）染毒技術(shù)小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁(yè)!（四）動(dòng)物的麻醉與外死（1）頸椎脫臼法（2）斷頭法（3）擊打法（4）急性大出血法（5）藥物致死法小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁(yè)!選擇健康的試驗(yàn)動(dòng)物，根據(jù)體重按隨機(jī)分組的方法，依據(jù)LD50計(jì)算的設(shè)計(jì)原則將動(dòng)物分成數(shù)個(gè)染毒組。一次或24h內(nèi)多次給予受試物后，了解動(dòng)物所產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)及其嚴(yán)重程度，中毒死亡的特征以及可能的死亡原因，觀察受試物毒性反應(yīng)與劑量的關(guān)系，求出半數(shù)致死量（LD50），并根據(jù)LD50值將受試物進(jìn)行急性毒性分級(jí)?！緦?shí)驗(yàn)原理】小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁(yè)!LD50計(jì)算根據(jù)受試物的種類(lèi)由指導(dǎo)教師事先確定采用何種方法(改進(jìn)寇氏法，霍恩法等)進(jìn)行計(jì)算，并在試驗(yàn)前設(shè)計(jì)劑量分組和每組動(dòng)物數(shù)。選擇適宜的方法求出LD50及95％的可信限范圍。如毒性反應(yīng)存在性別差異，應(yīng)分別求出不同性別動(dòng)物的LD50值。小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁(yè)!實(shí)驗(yàn)3小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?、了解骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)及毒理學(xué)意義2、掌握實(shí)驗(yàn)原理其實(shí)驗(yàn)方法。小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁(yè)!（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理（二）微核分析片準(zhǔn)備（三）固定（四）染色【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁(yè)!正常對(duì)照小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁(yè)!（六）結(jié)果評(píng)價(jià)

將各組微核率進(jìn)行X2檢驗(yàn)，判斷其影響程度，還可進(jìn)行劑量反應(yīng)關(guān)系評(píng)價(jià)小鼠口服急性毒性試驗(yàn)等共30頁(yè)，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁(yè)!二、實(shí)驗(yàn)器材、試劑（一）器材生物顯微鏡、解剖剪、鑷子、表面皿、離心管、小漏斗、吸管、滴管、載玻片、擦鏡紙等。（二）試劑1、1%伊紅染色液：稱(chēng)取伊紅1g溶于100ml蒸餾水中