液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用LC

液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)應(yīng)用研究作者：黃曼來源：《科技資訊》2012年第25期黃曼(南京化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院江蘇南京210048)摘要:液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)是一項既可定性又可定量檢測的較完美的、應(yīng)用范圍廣、與傳統(tǒng)分離分析方法相比具有獨特優(yōu)勢的技術(shù)。本文在綜合近年來有關(guān)文獻的基礎(chǔ)上系統(tǒng)地闡述了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)及其在食品、醫(yī)藥、飼料、化學(xué)化工等領(lǐng)域的應(yīng)用進展,以期為在生產(chǎn)和科研中進一步發(fā)揮此技術(shù)的獨特優(yōu)勢而提供理論參考。關(guān)鍵詞:液相色譜液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用研究應(yīng)用中圖分類號：0657 文獻標識碼:A 文章編號：1672-3791(2012)09(a)-0094-02(LC-MS)echnologyanditsapplicationHuangman(Nanjingchemicalvocationalandtechnicalcollege,JiangsuNanjing210048)Abstract:Liquidchromatography-massspectrometry(LC-MS)isthemostimportantnotonlycanbeusedforqualitativeanalysisandcanbeusedforquantitativedetectionofmodernseparationtechniques.ThisarticleprovidesanoverviewofLC-MStechnology,introducedinthefoodindustry,medicine,feedindustry,chemicalindustrywideapplication,withaviewtoLC-MStechnologytoprovidereferenceforfurtherstudyandapplication.Keywords:HPLC;LC-MS;Review液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(Liquidchromatography-massspectormetry,簡稱LC-MS)技術(shù)是由于氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)不能分離不穩(wěn)定和不揮發(fā)性物質(zhì)，于20世紀末迅速發(fā)展和成熟起來的一種較完美的、與傳統(tǒng)分離分析方法相比具有獨特優(yōu)勢的現(xiàn)代分離分析方法,在食品、醫(yī)藥、飼料化學(xué)化工等領(lǐng)域起著十分重要的作用,已日益受到人們的關(guān)注。本文在綜合國內(nèi)外有關(guān)文獻的基礎(chǔ)上系統(tǒng)地闡述了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)技術(shù)及其在食品、醫(yī)藥、飼料、化學(xué)化工等領(lǐng)域的應(yīng)用成果,以期為此技術(shù)在生產(chǎn)和科研中進一步發(fā)揮其獨特的優(yōu)勢而提供理論參考。LC-MS技術(shù)概述LC-MS主要由液相色譜系統(tǒng)(LC)和質(zhì)譜儀(MS)等部分組成(見圖1)。LC系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器等部分組成。MS又稱質(zhì)譜計，由離子源、質(zhì)量分析器和離子檢測器等部分組成，按應(yīng)用范圍分為同位素質(zhì)譜儀、有機質(zhì)譜儀和無機質(zhì)譜儀;按工作原理分為靜態(tài)儀器和動態(tài)儀器。簡言之,此技術(shù)是先通過液相色譜對所檢測物質(zhì)進行分離，然后通過質(zhì)譜來鑒定，具備LC的特性(如分辨率咼、靈敏度咼)和MS的特點(如測試速度快、精確度咼)。液相色譜的分析對象主要是難揮發(fā)和熱不穩(wěn)定物質(zhì),這與質(zhì)譜儀中常用的離子源要求樣品汽化是不相適應(yīng)的。為了實現(xiàn)聯(lián)用,一般是選用合適的“接口”以協(xié)調(diào)液相色譜和質(zhì)譜的不同特殊要求。常用于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的接口主要有移動帶技術(shù)(MB)、熱噴霧接口、粒子束接口(PB)、快原子轟擊(FAB)、電噴霧接口(ESI)等。其中，電噴霧接口的應(yīng)用極為廣泛，其主要由大氣壓離子化室和離子聚焦透鏡組件構(gòu)成。噴口一般由雙層同心管組成,外層通入氮氣作為噴霧氣體，內(nèi)層輸送流動相及樣品溶液。通常要對LC-MS進行定期校準以保證其測量結(jié)果的準確性。；豹】博￡取!T|也的#*；豹】博￡取!T|也的#*fIL甩般件卩1LIiht- :■rtipi'.'iK-riTSiifi.CMS s-r1^141^kimmBra,OGfcDpol?LC-MS技術(shù)的應(yīng)用應(yīng)用于食品領(lǐng)域張愛芝等［1］針對食品動物禁用的獸藥中外源性激素，建立了超高效液相色譜一質(zhì)譜/質(zhì)譜(UPLC—MC/MC)法，研究表明該法檢測外源性激素的靈敏度高，檢出限低，分析時間短。楊成對等［4］用液相色譜-質(zhì)譜法用于蝦中微量的氯霉素殘留的定量檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該方法快速靈敏，定量范圍寬，檢驗結(jié)果準確可靠，應(yīng)用性強。周莉莉等［2］采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC—MS/MS)測定食品中的三氯蔗糖含量，研究發(fā)現(xiàn)該方法用于乳制品及含乳制品、炒貨類和酒類等食品中可以快速、準確地定性和定量檢測這些食品中的三氯蔗糖含量。李秀琴等［3］則采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法用于糕點、含乳餅干、飲料、蛋制品、調(diào)味品、豆類制品和鮮蛋等6類基體14種食品基體中的三聚氰胺的測定；陳波等［4］應(yīng)用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)用于植物源性食品中4種噻唑類殺菌劑的檢測，發(fā)現(xiàn)4種噻唑類殺菌劑的分離效果良好，該方法檢測的線性范圍為20?100ug/L,檢出限均為10ug/kg，回收率為64%?115%,相對標準偏差(RSD)為2.8%?12.5%;各項檢測技術(shù)指標均達標，可滿足植物源性食品中4種噻唑類殺菌劑的監(jiān)測需求。應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域趙素敏等［5］利用LC-MS技術(shù)于卵巢腫瘤的磷脂輪廓分析以及研究卵巢癌(M)和良性卵巢腫瘤(B)的患者血清中磷脂代謝的差異情況，其研究結(jié)果為M組和B組與正常對照(N)組比較都存在明顯的磷脂代謝差異，發(fā)生改變的磷脂主要為磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰膽堿、鞘磷脂等。王兆基等用LC—MS-MS法探討了中烏頭鹼及有關(guān)中成藥中烏頭鹼含量的檢測方法，被分析樣品中各烏頭鹼濃度在0.5?40mg/L范圍內(nèi)，濃度與色譜峰面積存在較好的線性關(guān)系。劉國文等為了測定復(fù)方“清開靈”注射液中的鵝去氧膽酸(CDCA))和膽酸(cholicacid)等物質(zhì)，通過保留時間、分子量和二級質(zhì)譜等信息優(yōu)化了相關(guān)技術(shù)條件,成功建立了一種對復(fù)方中相對含量較大的cholicacid的定量分析方法-液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜法，這種方法樣品處理簡單、選擇性好、靈敏度高。褚揚等采用LC-MS-MS法用于人血漿中阿德福韋(Adefovir)濃度的測定,研究發(fā)現(xiàn)該方法具有快速、準確、靈敏等優(yōu)勢，認為其適用于Adefovir的藥動學(xué)研究。李驍勇等［6］報道了液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用法用于西洋參特有指標成分擬人參皂昔P-F11含量的測定的線性范圍為0.45?7.20ug，回收率為98.7%,重現(xiàn)性實驗和精密度RSD值分別為2.8%和2.5%,且樣品在48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。應(yīng)用于飼料領(lǐng)域黃芳等［7］將LC—MS法用于飼料中三聚氰胺(melamine)的檢測，并結(jié)合實踐經(jīng)驗對質(zhì)譜條件進一步優(yōu)化,研究發(fā)現(xiàn)應(yīng)用此方法檢測大量樣品中三聚氰胺的含量的結(jié)果準確可靠、操作性強。高照等將LC-MS/MS應(yīng)用于馬復(fù)合飼料中嗎啡、可待因和罌粟堿等三種天然痕量生物堿的快速篩查和定量測定，樣品經(jīng)充分粉碎后用lmmol/LHCl04溶液提取,并通過混合型固相萃取進行凈化，實驗結(jié)果令人滿意，發(fā)現(xiàn)該方法可以滿足馬飼料中該類藥物的常規(guī)檢測分析且有較好的精密度和靈敏度。顧亮等［8］證實了HPLC-MS/MS用于飼料中喹烯酮含量的測定也收到較好的效果，研究發(fā)現(xiàn)喹烯酮濃度在0.01?0.2ug/g范圍內(nèi)標準曲線的相關(guān)系數(shù)大于0.998;在不同添加水平下的回收率為81.9%?111.6%,檢出限(LOD)為5ug/kg。張毅等將LC-MS/MS用于谷物類飼料中雄性激素(10種)、孕激素(11種)、糖皮質(zhì)激素(10種)、雌性激素(5種)及二羥基苯甲酸內(nèi)酯類藥物(5種)的檢測，試驗在優(yōu)化條件下，這41種化合物在5.0?200.0ug/kg含量范圍內(nèi)有良好的線性相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)均不低于0.99,定量限(S/N210)為0.123?2.72ug/kg;在5、40、200ug/kg或10、40、200ug/kg3個添加水平下，豆粕類飼料中各化合物的回收率為70.3%?118.1%，相對標準偏差(RSD)為0.82%?19.5%;而在玉米類飼料中各化合物的回收率為76.1%?122.8%，RSD為1.3%?15.0%;綜合試驗研究認為LC-MS/MS法操作簡便、結(jié)果準確，適合谷物類飼料中孕激素、雄(雌)性激素、二羥基苯甲酸內(nèi)酯類激素及糖皮質(zhì)激素的篩查和測定。應(yīng)用于化學(xué)化工領(lǐng)域任磊等［9］研究了LC—MS對乳化炸藥爆炸殘留物中失水山梨醇單油酸酯(SP-80)的檢測效果,試驗研究認為該方法操作簡便、靈敏度高、樣品用量少，線性范圍廣，并通過試驗指出在法醫(yī)微量物證檢驗中可用于乳化炸藥的推斷。黃少嬋等研究認為LC—MS適用于塑料制品中雙酚A和四溴雙酚A的殘留分析,研究表明高效液相色譜-質(zhì)譜分離時間短、操作簡便、實用性強、靈敏度高。馬強州等［10］將高效液相色譜(HPLC)――二極管陣列檢測器(DAD)用于化妝品中士的寧和馬錢子堿的測定，探討了清潔類、護理類、美容類等不同功能的花露水、清潔霜、浴液、潤唇膏護膚膏霜、粉餅、化妝水、洗發(fā)液、洗面奶、護發(fā)素等不同類型的進口化妝品樣品共40件和國產(chǎn)化妝品樣品共10件的分析測定方法，測試結(jié)果經(jīng)LC—MS確證，均未檢出含有士的寧和馬錢子堿。結(jié)語LC—MS技術(shù)體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜優(yōu)勢的互補，大量在食品、醫(yī)藥、飼料、化學(xué)化工等領(lǐng)域的試驗研究結(jié)果表明，此技術(shù)為生產(chǎn)和科研提供了很多有實用價值的數(shù)據(jù)，成功解決了許多在此之前難以解決的問題。隨著這項技術(shù)的不斷成熟與完善，這項技術(shù)會越來越被人們熟練地掌握，相信一定有著很好的應(yīng)用與發(fā)展前景。參考文獻［1］ 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