無菌工藝模擬課件

無菌工藝模擬—培養(yǎng)基灌裝

工藝技術(shù)部2014年12月

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無菌工藝模擬—培養(yǎng)基灌1：無菌工藝模擬的重要性2：GMP對無菌工藝模擬的要求3：無菌工藝模擬驗證的設(shè)計4：培養(yǎng)結(jié)果的評價5：發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查6：模擬灌裝常見問題討論目錄21：無菌工藝模擬的重要性目錄2

無菌工藝模擬的重要性

無菌工藝模擬的重要性3無菌工藝模擬的重要性無菌工藝模擬的重要性3定義：—無菌工藝模擬：無菌工藝模擬試驗就是指采用微生物培養(yǎng)基替代產(chǎn)品（無菌粉末分裝的培養(yǎng)基灌裝試驗實際是將產(chǎn)品替代品溶入培養(yǎng)基中，不是直接替代產(chǎn)品）對無菌工藝進行評估的驗證技術(shù)。4定義：4背景-為什么進行模擬灌裝？藥品檢驗

局限性？5背景-為什么進行模擬灌裝？藥品檢驗

局限性？5從藥品審評的角度來看，藥品檢驗不僅是對于所設(shè)定的質(zhì)量檢查項目的考核，更是對藥品生產(chǎn)工藝的全面考察。藥品生產(chǎn)中任何檢驗手段都是有局限性的，因此，嚴格控制并把握好藥品生產(chǎn)的每個過程，同時把這種細致體現(xiàn)在質(zhì)量標準及藥品檢驗中，才能生產(chǎn)出質(zhì)量無懈可擊的藥品。6從藥品審評的角度來看，藥品檢驗不僅是對于所設(shè)定的質(zhì)量檢查項目無菌檢驗的局限性？無菌生產(chǎn)工藝樣品被污染的隨機性，無法確定最差點。取樣數(shù)量的局限性，并不是每個單位制劑都能進行檢查。7無菌檢驗的局限性？無菌生產(chǎn)工藝樣品被污染的隨機性，無法確定最目的：–評估在既定無菌生產(chǎn)環(huán)境和過程控制條件下生產(chǎn)無菌產(chǎn)品的能力–證明指定的無菌工藝設(shè)計和變更是否可行–證明無菌工藝過程中的相關(guān)操作是否可行–評估無菌工藝人員的操作水平（資格確認組成部分）–證明符合GMP的要求–發(fā)現(xiàn)無菌工藝過程中潛在的微生物污染因素無菌工藝模擬的目的8目的：無菌工藝模擬的目的8

GMP對無菌工藝模擬的要求9GMP對無菌工藝模擬的要求9第四十七條無菌生產(chǎn)工藝的驗證應(yīng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型以及培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。應(yīng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對產(chǎn)品的無菌特性有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的首次驗證，每班次應(yīng)連續(xù)進行3次合格的試驗。空氣凈化系統(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗通常應(yīng)按生產(chǎn)工藝每班次半年進行1次，每次至少一批。附錄一：無菌制劑10第四十七條無菌生產(chǎn)工藝的驗證應(yīng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。附

培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標是零污染，應(yīng)遵循以下要求：（1）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品；（2）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：

1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；

2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（3)灌裝數(shù)量超過10000支時：

1.有1支污染，需調(diào)查；

2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（4）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)進行調(diào)查。附錄一：無菌制劑11培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)足以保證評價的有效性。批量較

無菌工藝模擬驗證的設(shè)計12無菌工藝模擬驗證的設(shè)計12無菌工藝模擬試驗的方法按照生產(chǎn)工藝特點一般可以分為：溶液灌裝、懸浮液制劑灌裝、凍干產(chǎn)品灌裝、粉末灌裝和無菌霜劑、乳膏劑、乳劑、凝膠灌裝等

無菌分類溶液灌裝、懸浮液制劑灌裝、凍干產(chǎn)品灌裝、粉末灌裝。13無菌工藝模擬試驗的方法按照生產(chǎn)工藝特點一般可以分為：溶液灌裝概況（凍干產(chǎn)品為例）洗瓶機干熱隧道隔離柜凍干機軋蓋機轉(zhuǎn)移瓶塞灌裝機容器14概況（凍干產(chǎn)品為例）洗瓶機干熱隧道隔離柜凍干機軋蓋機轉(zhuǎn)移瓶塞內(nèi)源性的影響因素系統(tǒng)設(shè)備工藝過程物料和中間體的質(zhì)量外源性的影響因素人員無菌工藝產(chǎn)品的無菌保證15內(nèi)源性的影響因素無菌工藝產(chǎn)品的無菌保證15工藝模擬試驗的通常流程評價結(jié)果，確定實際生產(chǎn)中（如灌裝前的調(diào)試、加入無菌原輔材料、無菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的可能性。對裝有培養(yǎng)基的密閉容器進行培養(yǎng)以檢查微生物的生長。將培養(yǎng)基暴露于設(shè)備、容器膠塞密封系統(tǒng)的表面和關(guān)鍵環(huán)境條件中，并模擬實際生產(chǎn)完成工藝操作。16工藝模擬試驗的通常流程評價結(jié)果，確定實際生產(chǎn)中（如灌裝前的調(diào)在培養(yǎng)基灌裝設(shè)計中，工藝條件的選擇應(yīng)選取合理的“最差條件”，用最差條件來對工藝流程、設(shè)備和整個體系進行挑戰(zhàn)。最差條件是指在工藝允許范圍內(nèi)正常生產(chǎn)時可能遇到的最差情況，并不包括由于偏差引起的超出工藝要求的特殊情況。如果在最差條件下能獲得好結(jié)果，說明在比最差情況要好的實際生產(chǎn)中，無菌保證的可靠性更有保證。如何進行無菌工藝模擬？最差條件---在SOP范圍內(nèi)，由工藝參數(shù)的上、下限和相關(guān)因素組成的一個或一系列條件。與理想條件相比時，最差條件使產(chǎn)品或者生產(chǎn)工藝失敗的幾率為最大，但這類最差條件不一定必然導(dǎo)致產(chǎn)品或工藝的不合格。17在培養(yǎng)基灌裝設(shè)計中，工藝條件的選擇應(yīng)選取合理的“最差條件”，3.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇3.3灌裝的持續(xù)時間3.4灌裝速度與瓶子規(guī)格3.5人員數(shù)量3.6人為干預(yù)培養(yǎng)基灌裝設(shè)計183.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇培養(yǎng)基灌裝設(shè)計183.7剔廢原則3.8儲存時間3.9環(huán)境監(jiān)測及取樣3.10驗證的頻率3.11抑菌作用的避免培養(yǎng)基灌裝設(shè)計193.7剔廢原則培養(yǎng)基灌裝設(shè)計19培養(yǎng)基的選擇適應(yīng)廣譜微生物生長，包括細菌和真菌較好的澄明度，較小的粘度易于除菌過濾常用培養(yǎng)基：大豆胰蛋白肉湯（TSB）厭氧培養(yǎng)基僅在特殊情況下使用培養(yǎng)溫度的選擇先在20~25℃最少培養(yǎng)7天，然后在30~35℃的范圍繼續(xù)培養(yǎng)7天。3.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇20培養(yǎng)基的選擇3.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇20灌裝裝量每只容器的灌裝體積不少于總?cè)莘e的1/3同樣，灌裝體積也不宜過大既要考慮到瓶倒轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)時，培養(yǎng)基可以完全接觸到容器內(nèi)表面，避免由于培養(yǎng)基灌裝量偏少造成微生物不能生長的情況出現(xiàn)，亦可保證避免空氣不足造成微生物不能生長。3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇21灌裝裝量3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇21灌裝規(guī)格的選擇一般來說培養(yǎng)基灌裝可以針對規(guī)格最大和最小的容器進行，除非其他不同規(guī)格容器的灌裝工藝有很大差別。在初始驗證時可以進行兩次最大規(guī)格容器和一次最小規(guī)格容器的灌裝挑戰(zhàn)。在以后的周期性半年度灌裝可以輪換，每次挑戰(zhàn)一種規(guī)格。3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇22灌裝規(guī)格的選擇3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇22最保守的設(shè)計：在培養(yǎng)基灌裝試驗中，模擬用時最長的瓶子滿批量生產(chǎn)所需要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班、設(shè)備維修）。其他的設(shè)計：1.在生產(chǎn)完成后接著進行無菌工藝模擬驗證2.為了減少灌裝瓶數(shù)，在每批生產(chǎn)剛開始及結(jié)束前均灌裝培養(yǎng)基，中間空運行灌裝機以達到所需要的時間在任何情況下模擬了與實際生產(chǎn)不相同的情況，都要有記錄，并解釋原因在正常生產(chǎn)過程中所需的最長時間，包括可能發(fā)生的事件，人員的換班等，應(yīng)予以模擬3.3灌裝持續(xù)時間23最保守的設(shè)計：在培養(yǎng)基灌裝試驗中，模擬用時最長的瓶子滿批量生為模擬較差條件，生產(chǎn)線運行速度及灌裝時間與產(chǎn)品生產(chǎn)批次相比，均需進行調(diào)整；

最快速度灌裝最小容器（操作困難）；

最慢速度灌裝最大容器（使暴露時間最長）。3.4灌裝速度與瓶子規(guī)格24為模擬較差條件，生產(chǎn)線運行速度及灌裝時間與產(chǎn)品生產(chǎn)批次相比，培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝不是每個人員都要參與最差條件的模擬3.5人員數(shù)量25培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)3.5人員數(shù)量25正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）非正常的（設(shè)備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）SOP中應(yīng)列出哪些干擾是容許的，非正常的干擾至少每年模擬一次干擾的次數(shù)應(yīng)該等于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)不應(yīng)挑戰(zhàn)干擾而避免干擾3.6人為干預(yù)26正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)灌裝過程中正常產(chǎn)品的灌裝裝量控制精度需要很高，但培養(yǎng)基灌裝時，只要符合最低灌裝，而不應(yīng)該丟棄。但如果密閉系統(tǒng)不完整，必須丟棄。培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當足以保證評價的有效性。在培養(yǎng)基灌裝完成后，應(yīng)對密封好的最終產(chǎn)品進行檢査。所有完好的灌裝樣品都應(yīng)培養(yǎng)，對于與密封性無關(guān)缺陷（如外觀缺陷）的灌裝樣品也應(yīng)進行培養(yǎng)，不得剔除。有密封性缺陷的樣品可作廢品剔除，但應(yīng)當記錄剔除數(shù)量和原因。在培養(yǎng)過程中，任何發(fā)現(xiàn)損壞的樣品也應(yīng)列入培養(yǎng)基灌裝的批記錄數(shù)據(jù)中。如果要將這類已培養(yǎng)的樣品從最后的結(jié)果判定計算中剔除，則必需充分說明理由，并在培養(yǎng)基灌裝報告中對偏差做出解釋。3.7剔廢原則27灌裝過程中正常產(chǎn)品的灌裝裝量控制精度需要很高，但培養(yǎng)基灌裝時灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置的最長時間1.灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料需要再滅菌（除菌）的時間間隔2.產(chǎn)品從無菌過濾到灌裝加塞完成所需要的時間3.8儲存時間如：用達到最長保存時間的灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝如：無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基模擬實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝28灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置培養(yǎng)基灌裝試驗的環(huán)境條件應(yīng)充分體現(xiàn)生產(chǎn)操作的實際情況。不應(yīng)采取特別的生產(chǎn)控制和預(yù)防措施，制造特別良好的工藝環(huán)境，這樣會導(dǎo)致不準確的評估結(jié)論，造成工藝條件良好的假象。不用人工創(chuàng)造極端的環(huán)境條件（如對凈化空調(diào)系統(tǒng)重新調(diào)整，使其在最差的狀態(tài)下運行）進行驗證，對于環(huán)境最差條件的挑戰(zhàn)應(yīng)當是在工藝允許的苛刻條件范圍內(nèi)對環(huán)境受干擾程度（如生產(chǎn)現(xiàn)場人員最多、生產(chǎn)活動頻率最高）的挑戰(zhàn)。3.9環(huán)境監(jiān)測及取樣29培養(yǎng)基灌裝試驗的環(huán)境條件應(yīng)充分體現(xiàn)生產(chǎn)操作的實際情況。不應(yīng)采新建的或生產(chǎn)工藝、設(shè)備、人員等重大變更后的無菌工藝生產(chǎn)線，必須經(jīng)至少連續(xù)三批合格的培養(yǎng)基灌裝試驗。常規(guī)生產(chǎn)條件下的再驗證頻率，培養(yǎng)基模擬試驗通常按生產(chǎn)工藝每班次半年進行1次，每次至少一批。3.10驗證的頻率30新建的或生產(chǎn)工藝、設(shè)備、人員等重大變更后的無菌工藝生產(chǎn)線，必培養(yǎng)基灌裝模擬使用促進微生物生長的培養(yǎng)基來挑戰(zhàn)評估污染風險。因此抑菌因素應(yīng)當在培養(yǎng)基灌裝時予以考慮，必須避免污染微生物在模擬過程中被殺死造成假陰性的結(jié)果。模擬試驗中需要注意的抑菌因素有溫度、培養(yǎng)基pH、消毒劑、惰性氣體和真空度等。3.11抑菌作用的避免31培養(yǎng)基灌裝模擬使用促進微生物生長的培養(yǎng)基來挑戰(zhàn)評估污染風險。物料的準備、儲存過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法配制溶液的注射用水溫度髙于70℃髙溫會抑制微生物生長將配制培養(yǎng)基的注射用水冷卻到室溫，在室溫下（20?25℃)配制正常生產(chǎn)溶液pH偏高或偏低酸性或堿性環(huán)境不利于微生物生長培養(yǎng)基的pH調(diào)整到適合微生物生長的范圍配制好的溶液在低溫下保存低溫會抑制微生物生長培養(yǎng)基在儲存容器中常溫保存32物料的準備、儲存過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風灌裝

3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法生產(chǎn)過程中使用惰性氣體(如氮氣）保護產(chǎn)品大多數(shù)需氧微生物，惰性氣體有一定的抑菌作用用壓縮空氣或空氣來代替惰性氣體培養(yǎng)基灌裝量偏少西林瓶內(nèi)壁不能被完全接觸，微生物不能生長10ml西林瓶灌裝至少2~4ml培養(yǎng)基，以保證足夠量培養(yǎng)基用于微生物和西林瓶接觸和培養(yǎng)33灌裝3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法中間過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法對設(shè)備的清洗、消毒和滅菌消毒劑會殺滅微生物對設(shè)備的清洗、消毒和滅菌在灌裝前后進行，灌裝前進行消毒要避免設(shè)備上的消毒劑殘留正常生產(chǎn)時消毒劑（如噴灑消毒酒精，對操作人員手部消毒）的使用消毒劑會殺滅微生物對于模擬試驗過程中消毒劑（如噴灑消毒酒精）的使用，應(yīng)該注意不能超出正常生產(chǎn)時的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上班次輪換，清場消毒消毒劑會殺滅微生物對于兩班次灌裝，中間不進行消毒清場。34中間過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制凍干3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法抽真空過低真空度有抑菌作用。過低真空度還會導(dǎo)致培養(yǎng)基失水灌裝好的西林瓶放人凍干機，放置適當時間后模擬凍干過程（時間需適中，防止損失過多水分而影響微生物生長的特性。在模擬凍干過程中需要抽真空引發(fā)空氣流動，再通過無菌空氣達到氣流平衡（推薦的抽真空值為至少500mbar,這樣的操作一般為2次）低溫冷凍低溫會抑制微生物生長不達到冷凍條件，保持常溫35凍干3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法

培養(yǎng)結(jié)果的評價36培養(yǎng)結(jié)果的評價36培養(yǎng)溫度應(yīng)適宜于一般微生物及環(huán)境分離菌的恢復(fù)生長。例如先在20~25℃最少培養(yǎng)7天，然后在30~35℃的范圍繼續(xù)培養(yǎng)7天。應(yīng)由經(jīng)過培訓并有檢査培養(yǎng)基灌裝瓶污染經(jīng)驗的人員對樣品進行逐個目視檢査。在檢查中，所有被懷疑受到污染的樣品，應(yīng)立即交給微生物專業(yè)人員進行鑒定處理。為檢出微生物的生長，最好用清晰透光的容器或具有類似物理性質(zhì)的容器，而不用琥珀色（黃色）或其他不透明容器。培養(yǎng)結(jié)果檢查37培養(yǎng)溫度應(yīng)適宜于一般微生物及環(huán)境分離菌的恢復(fù)生長。例如先在2（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：1.有1支污染，需調(diào)查；2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當進行調(diào)查。培養(yǎng)結(jié)果檢查38（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。培養(yǎng)結(jié)果檢查培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗：使用完成14天培養(yǎng)的灌裝前期培養(yǎng)基樣品用枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠球菌、銅綠假單胞菌、黑曲霉和環(huán)境菌作為陽性菌將每個菌種準備含<100cfu/0.1ml的菌液，每個菌種接種2支培養(yǎng)基樣品，同時并平板計數(shù)對真菌在20-25C下培養(yǎng)，對細菌在30-35C下培養(yǎng)，每天檢查，5天內(nèi)需有生長跡象培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗39培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗：培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗39

發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查40發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查40環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)，空氣懸浮粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)CIP設(shè)備，清潔、消毒程序的執(zhí)行情況培養(yǎng)基、設(shè)備和零件的滅菌工藝，滅菌釜的校正情況高效過濾器檢測(空氣懸浮粒子水平，過濾器檢漏，風速測量，密封系統(tǒng)檢查，使用年限等)除菌過濾器完好性房間氣流型式與壓差人員操作技術(shù)培訓情況發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查范圍41環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)，空氣懸浮粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查范圍以往產(chǎn)品無菌檢查實驗結(jié)果人員衛(wèi)生狀況監(jiān)測數(shù)據(jù)培養(yǎng)基灌裝實驗中的干預(yù)方式分析該區(qū)域近期是否有過維修活動，生產(chǎn)線的改造情況該生產(chǎn)線培養(yǎng)基灌封實驗歷史數(shù)據(jù)已滅菌物品的儲存條件培養(yǎng)基灌封過程中的異常事件陽性污染菌與環(huán)境監(jiān)測污染菌的鑒別發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查范圍42以往產(chǎn)品無菌檢查實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查范圍42灌裝污染曲線圖1污染可能來源于液體培養(yǎng)基

(如與培養(yǎng)基貯罐非無菌連接，在循環(huán)管路中受到污染，微生物持續(xù)繁殖)。在灌裝結(jié)束時，應(yīng)注意保持培養(yǎng)基貯罐處于無菌密閉狀態(tài)，在儲罐內(nèi)取樣測試，可以核實這樣的假設(shè)。灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)污染

率在灌裝過程中污染率上升

43灌裝污染曲線圖1污染可能來源于液體培養(yǎng)基(如與培養(yǎng)基貯罐灌裝污染曲線圖

2污染

率灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)表明污染僅發(fā)生在試驗初期，可能污染來自起始的生產(chǎn)設(shè)備中（

膠塞容器/軌道,

計量泵

/

針頭)，在灌裝過程中污染被部分或全部“清洗掉”。在灌裝過程中污染率下降

44灌裝污染曲線圖2污灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)表明污染僅發(fā)生灌裝污染曲線圖

3污染

率灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)出現(xiàn)一個尖峰（在短時段的一些產(chǎn)品被污染）可能與在灌裝過程中不正確操作或干預(yù)導(dǎo)致的污染有關(guān)。很關(guān)鍵的是必須知道被污染產(chǎn)品灌裝的準確時間，以及當時實施的干預(yù)措施（灌裝操作過程的錄像是非常有用的），樣會比較容易調(diào)查到原因。在灌裝過程中污染率出現(xiàn)尖峰45灌裝污染曲線圖3污灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)出現(xiàn)一個尖峰（灌裝污染曲線圖

4污染

率灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)同樣可能是某個如果錯誤的干預(yù)措施所造成的，不同的是該污染影響到液體的管路/回路時（如培養(yǎng)基貯罐的變化，泵或針的替換），導(dǎo)致微生物持續(xù)繁殖。污染率出現(xiàn)尖峰后，呈上升趨勢

46灌裝污染曲線圖4污灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)同樣可能是某個灌裝污染曲線圖

5污染

率灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)非常不幸的是，這種現(xiàn)象是最常出現(xiàn)的，也是最難調(diào)查的。如果這種現(xiàn)象在多次試驗中反復(fù)出現(xiàn)，可能說明這個工藝存在不確定因素，需要采取根本的措施（如

更衣/著裝、消毒劑和氣流模式的改變)。孤立事件(試驗中少數(shù)污染)47灌裝污染曲線圖5污灌裝過程(時間或灌裝數(shù)量)非常不幸的是，

模擬灌裝常見問題討論48模擬灌裝常見問題討論48如何判斷哪些灌裝樣品不需要進行培養(yǎng)？√破損，影響到密封性的樣品√完整性測試（泄漏測試）失敗的樣品√文件中明確規(guī)定予以丟棄的中控測試樣品√設(shè)備自動剔除的樣品√文件中明確規(guī)定，每次干擾后應(yīng)予手工剔除的樣品 （規(guī)定應(yīng)詳細、明確，并需證明其可操作性和穩(wěn)定可 信性）?！烫蕹臉悠窇?yīng)進行記錄注明丟棄原因常見問題49如何判斷哪些灌裝樣品不需要進行培養(yǎng)？常見問題49是否需要厭氧工藝的模擬灌裝實驗？√如果工藝中存在沖氮氣等惰性氣體操作時；√如果在培養(yǎng)基灌裝培養(yǎng)的樣品中檢出厭氧菌。常見問題50是否需要厭氧工藝的模擬灌裝實驗？常見問題50培養(yǎng)基灌裝試驗中的樣品在培養(yǎng)過程中是否需要進行翻轉(zhuǎn)？√不需要。培養(yǎng)基灌裝的樣品應(yīng)在開始培養(yǎng)前進行操作，使培養(yǎng)基充分接觸到內(nèi)部各個表面，開始培養(yǎng)后不應(yīng)再進行翻轉(zhuǎn)等干擾。常見問題51培養(yǎng)基灌裝試驗中的樣品在培養(yǎng)過程中是否需要進行翻轉(zhuǎn)？常見問題什么情況下，可以認為培養(yǎng)基灌裝試驗無效？√陽性對照失??；√工藝過程中在無菌操作區(qū)發(fā)生重大偏差，如停電，高效過濾器損壞等。常見問題52什么情況下，可以認為培養(yǎng)基灌裝試驗無效？常見問題52謝謝大家！謝謝大家！53

無菌工藝模擬—培養(yǎng)基灌裝

工藝技術(shù)部2014年12月

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無菌工藝模擬—培養(yǎng)基灌1：無菌工藝模擬的重要性2：GMP對無菌工藝模擬的要求3：無菌工藝模擬驗證的設(shè)計4：培養(yǎng)結(jié)果的評價5：發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查6：模擬灌裝常見問題討論目錄551：無菌工藝模擬的重要性目錄2

無菌工藝模擬的重要性

無菌工藝模擬的重要性56無菌工藝模擬的重要性無菌工藝模擬的重要性3定義：—無菌工藝模擬：無菌工藝模擬試驗就是指采用微生物培養(yǎng)基替代產(chǎn)品（無菌粉末分裝的培養(yǎng)基灌裝試驗實際是將產(chǎn)品替代品溶入培養(yǎng)基中，不是直接替代產(chǎn)品）對無菌工藝進行評估的驗證技術(shù)。57定義：4背景-為什么進行模擬灌裝？藥品檢驗

局限性？58背景-為什么進行模擬灌裝？藥品檢驗

局限性？5從藥品審評的角度來看，藥品檢驗不僅是對于所設(shè)定的質(zhì)量檢查項目的考核，更是對藥品生產(chǎn)工藝的全面考察。藥品生產(chǎn)中任何檢驗手段都是有局限性的，因此，嚴格控制并把握好藥品生產(chǎn)的每個過程，同時把這種細致體現(xiàn)在質(zhì)量標準及藥品檢驗中，才能生產(chǎn)出質(zhì)量無懈可擊的藥品。59從藥品審評的角度來看，藥品檢驗不僅是對于所設(shè)定的質(zhì)量檢查項目無菌檢驗的局限性？無菌生產(chǎn)工藝樣品被污染的隨機性，無法確定最差點。取樣數(shù)量的局限性，并不是每個單位制劑都能進行檢查。60無菌檢驗的局限性？無菌生產(chǎn)工藝樣品被污染的隨機性，無法確定最目的：–評估在既定無菌生產(chǎn)環(huán)境和過程控制條件下生產(chǎn)無菌產(chǎn)品的能力–證明指定的無菌工藝設(shè)計和變更是否可行–證明無菌工藝過程中的相關(guān)操作是否可行–評估無菌工藝人員的操作水平（資格確認組成部分）–證明符合GMP的要求–發(fā)現(xiàn)無菌工藝過程中潛在的微生物污染因素無菌工藝模擬的目的61目的：無菌工藝模擬的目的8

GMP對無菌工藝模擬的要求62GMP對無菌工藝模擬的要求9第四十七條無菌生產(chǎn)工藝的驗證應(yīng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的劑型以及培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。應(yīng)盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對產(chǎn)品的無菌特性有影響的關(guān)鍵操作，及生產(chǎn)中可能出現(xiàn)的各種干預(yù)和最差條件。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的首次驗證，每班次應(yīng)連續(xù)進行3次合格的試驗?？諝鈨艋到y(tǒng)、設(shè)備、生產(chǎn)工藝及人員重大變更后，應(yīng)重復(fù)進行培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗通常應(yīng)按生產(chǎn)工藝每班次半年進行1次，每次至少一批。附錄一：無菌制劑63第四十七條無菌生產(chǎn)工藝的驗證應(yīng)包括培養(yǎng)基模擬灌裝試驗。附

培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)足以保證評價的有效性。批量較小的產(chǎn)品，培養(yǎng)基灌裝的數(shù)量應(yīng)至少等于產(chǎn)品的批量。培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的目標是零污染，應(yīng)遵循以下要求：（1）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品；（2）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：

1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；

2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（3)灌裝數(shù)量超過10000支時：

1.有1支污染，需調(diào)查；

2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（4）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)進行調(diào)查。附錄一：無菌制劑64培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)足以保證評價的有效性。批量較

無菌工藝模擬驗證的設(shè)計65無菌工藝模擬驗證的設(shè)計12無菌工藝模擬試驗的方法按照生產(chǎn)工藝特點一般可以分為：溶液灌裝、懸浮液制劑灌裝、凍干產(chǎn)品灌裝、粉末灌裝和無菌霜劑、乳膏劑、乳劑、凝膠灌裝等

無菌分類溶液灌裝、懸浮液制劑灌裝、凍干產(chǎn)品灌裝、粉末灌裝。66無菌工藝模擬試驗的方法按照生產(chǎn)工藝特點一般可以分為：溶液灌裝概況（凍干產(chǎn)品為例）洗瓶機干熱隧道隔離柜凍干機軋蓋機轉(zhuǎn)移瓶塞灌裝機容器67概況（凍干產(chǎn)品為例）洗瓶機干熱隧道隔離柜凍干機軋蓋機轉(zhuǎn)移瓶塞內(nèi)源性的影響因素系統(tǒng)設(shè)備工藝過程物料和中間體的質(zhì)量外源性的影響因素人員無菌工藝產(chǎn)品的無菌保證68內(nèi)源性的影響因素無菌工藝產(chǎn)品的無菌保證15工藝模擬試驗的通常流程評價結(jié)果，確定實際生產(chǎn)中（如灌裝前的調(diào)試、加入無菌原輔材料、無菌連接、灌裝和密封）產(chǎn)品污染的可能性。對裝有培養(yǎng)基的密閉容器進行培養(yǎng)以檢查微生物的生長。將培養(yǎng)基暴露于設(shè)備、容器膠塞密封系統(tǒng)的表面和關(guān)鍵環(huán)境條件中，并模擬實際生產(chǎn)完成工藝操作。69工藝模擬試驗的通常流程評價結(jié)果，確定實際生產(chǎn)中（如灌裝前的調(diào)在培養(yǎng)基灌裝設(shè)計中，工藝條件的選擇應(yīng)選取合理的“最差條件”，用最差條件來對工藝流程、設(shè)備和整個體系進行挑戰(zhàn)。最差條件是指在工藝允許范圍內(nèi)正常生產(chǎn)時可能遇到的最差情況，并不包括由于偏差引起的超出工藝要求的特殊情況。如果在最差條件下能獲得好結(jié)果，說明在比最差情況要好的實際生產(chǎn)中，無菌保證的可靠性更有保證。如何進行無菌工藝模擬？最差條件---在SOP范圍內(nèi)，由工藝參數(shù)的上、下限和相關(guān)因素組成的一個或一系列條件。與理想條件相比時，最差條件使產(chǎn)品或者生產(chǎn)工藝失敗的幾率為最大，但這類最差條件不一定必然導(dǎo)致產(chǎn)品或工藝的不合格。70在培養(yǎng)基灌裝設(shè)計中，工藝條件的選擇應(yīng)選取合理的“最差條件”，3.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇3.3灌裝的持續(xù)時間3.4灌裝速度與瓶子規(guī)格3.5人員數(shù)量3.6人為干預(yù)培養(yǎng)基灌裝設(shè)計713.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇培養(yǎng)基灌裝設(shè)計183.7剔廢原則3.8儲存時間3.9環(huán)境監(jiān)測及取樣3.10驗證的頻率3.11抑菌作用的避免培養(yǎng)基灌裝設(shè)計723.7剔廢原則培養(yǎng)基灌裝設(shè)計19培養(yǎng)基的選擇適應(yīng)廣譜微生物生長，包括細菌和真菌較好的澄明度，較小的粘度易于除菌過濾常用培養(yǎng)基：大豆胰蛋白肉湯（TSB）厭氧培養(yǎng)基僅在特殊情況下使用培養(yǎng)溫度的選擇先在20~25℃最少培養(yǎng)7天，然后在30~35℃的范圍繼續(xù)培養(yǎng)7天。3.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇73培養(yǎng)基的選擇3.1培養(yǎng)基和培養(yǎng)溫度的選擇20灌裝裝量每只容器的灌裝體積不少于總?cè)莘e的1/3同樣，灌裝體積也不宜過大既要考慮到瓶倒轉(zhuǎn)或旋轉(zhuǎn)時，培養(yǎng)基可以完全接觸到容器內(nèi)表面，避免由于培養(yǎng)基灌裝量偏少造成微生物不能生長的情況出現(xiàn)，亦可保證避免空氣不足造成微生物不能生長。3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇74灌裝裝量3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇21灌裝規(guī)格的選擇一般來說培養(yǎng)基灌裝可以針對規(guī)格最大和最小的容器進行，除非其他不同規(guī)格容器的灌裝工藝有很大差別。在初始驗證時可以進行兩次最大規(guī)格容器和一次最小規(guī)格容器的灌裝挑戰(zhàn)。在以后的周期性半年度灌裝可以輪換，每次挑戰(zhàn)一種規(guī)格。3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇75灌裝規(guī)格的選擇3.2灌裝裝量及規(guī)格的選擇22最保守的設(shè)計：在培養(yǎng)基灌裝試驗中，模擬用時最長的瓶子滿批量生產(chǎn)所需要的時間，其中包括正常的干擾時間（換班、設(shè)備維修）。其他的設(shè)計：1.在生產(chǎn)完成后接著進行無菌工藝模擬驗證2.為了減少灌裝瓶數(shù)，在每批生產(chǎn)剛開始及結(jié)束前均灌裝培養(yǎng)基，中間空運行灌裝機以達到所需要的時間在任何情況下模擬了與實際生產(chǎn)不相同的情況，都要有記錄，并解釋原因在正常生產(chǎn)過程中所需的最長時間，包括可能發(fā)生的事件，人員的換班等，應(yīng)予以模擬3.3灌裝持續(xù)時間76最保守的設(shè)計：在培養(yǎng)基灌裝試驗中，模擬用時最長的瓶子滿批量生為模擬較差條件，生產(chǎn)線運行速度及灌裝時間與產(chǎn)品生產(chǎn)批次相比，均需進行調(diào)整；

最快速度灌裝最小容器（操作困難）；

最慢速度灌裝最大容器（使暴露時間最長）。3.4灌裝速度與瓶子規(guī)格77為模擬較差條件，生產(chǎn)線運行速度及灌裝時間與產(chǎn)品生產(chǎn)批次相比，培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)無菌區(qū)工作人員至少每年參與一次培養(yǎng)基灌裝不是每個人員都要參與最差條件的模擬3.5人員數(shù)量78培養(yǎng)基灌裝時模擬無菌區(qū)可能容納最多的人數(shù)3.5人員數(shù)量25正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)測）非正常的（設(shè)備故障，灌裝線堵塞，軌道調(diào)節(jié)，拆卸/替換破損的部件）SOP中應(yīng)列出哪些干擾是容許的，非正常的干擾至少每年模擬一次干擾的次數(shù)應(yīng)該等于正常生產(chǎn)時發(fā)生的次數(shù)不應(yīng)挑戰(zhàn)干擾而避免干擾3.6人為干預(yù)79正常的（灌裝線裝配，稱量調(diào)節(jié)，加膠塞，處理倒瓶，取樣，環(huán)境監(jiān)灌裝過程中正常產(chǎn)品的灌裝裝量控制精度需要很高，但培養(yǎng)基灌裝時，只要符合最低灌裝，而不應(yīng)該丟棄。但如果密閉系統(tǒng)不完整，必須丟棄。培養(yǎng)基灌裝容器的數(shù)量應(yīng)當足以保證評價的有效性。在培養(yǎng)基灌裝完成后，應(yīng)對密封好的最終產(chǎn)品進行檢査。所有完好的灌裝樣品都應(yīng)培養(yǎng)，對于與密封性無關(guān)缺陷（如外觀缺陷）的灌裝樣品也應(yīng)進行培養(yǎng)，不得剔除。有密封性缺陷的樣品可作廢品剔除，但應(yīng)當記錄剔除數(shù)量和原因。在培養(yǎng)過程中，任何發(fā)現(xiàn)損壞的樣品也應(yīng)列入培養(yǎng)基灌裝的批記錄數(shù)據(jù)中。如果要將這類已培養(yǎng)的樣品從最后的結(jié)果判定計算中剔除，則必需充分說明理由，并在培養(yǎng)基灌裝報告中對偏差做出解釋。3.7剔廢原則80灌裝過程中正常產(chǎn)品的灌裝裝量控制精度需要很高，但培養(yǎng)基灌裝時灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置的最長時間1.灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料需要再滅菌（除菌）的時間間隔2.產(chǎn)品從無菌過濾到灌裝加塞完成所需要的時間3.8儲存時間如：用達到最長保存時間的灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料參與培養(yǎng)基灌裝如：無菌過濾后存放在儲罐內(nèi)的培養(yǎng)基模擬實際生產(chǎn)時產(chǎn)品的最大儲存時間后再灌裝81灌裝設(shè)備、灌裝部件、儲罐、無菌物料、藥液在實際灌裝前能夠放置培養(yǎng)基灌裝試驗的環(huán)境條件應(yīng)充分體現(xiàn)生產(chǎn)操作的實際情況。不應(yīng)采取特別的生產(chǎn)控制和預(yù)防措施，制造特別良好的工藝環(huán)境，這樣會導(dǎo)致不準確的評估結(jié)論，造成工藝條件良好的假象。不用人工創(chuàng)造極端的環(huán)境條件（如對凈化空調(diào)系統(tǒng)重新調(diào)整，使其在最差的狀態(tài)下運行）進行驗證，對于環(huán)境最差條件的挑戰(zhàn)應(yīng)當是在工藝允許的苛刻條件范圍內(nèi)對環(huán)境受干擾程度（如生產(chǎn)現(xiàn)場人員最多、生產(chǎn)活動頻率最高）的挑戰(zhàn)。3.9環(huán)境監(jiān)測及取樣82培養(yǎng)基灌裝試驗的環(huán)境條件應(yīng)充分體現(xiàn)生產(chǎn)操作的實際情況。不應(yīng)采新建的或生產(chǎn)工藝、設(shè)備、人員等重大變更后的無菌工藝生產(chǎn)線，必須經(jīng)至少連續(xù)三批合格的培養(yǎng)基灌裝試驗。常規(guī)生產(chǎn)條件下的再驗證頻率，培養(yǎng)基模擬試驗通常按生產(chǎn)工藝每班次半年進行1次，每次至少一批。3.10驗證的頻率83新建的或生產(chǎn)工藝、設(shè)備、人員等重大變更后的無菌工藝生產(chǎn)線，必培養(yǎng)基灌裝模擬使用促進微生物生長的培養(yǎng)基來挑戰(zhàn)評估污染風險。因此抑菌因素應(yīng)當在培養(yǎng)基灌裝時予以考慮，必須避免污染微生物在模擬過程中被殺死造成假陰性的結(jié)果。模擬試驗中需要注意的抑菌因素有溫度、培養(yǎng)基pH、消毒劑、惰性氣體和真空度等。3.11抑菌作用的避免84培養(yǎng)基灌裝模擬使用促進微生物生長的培養(yǎng)基來挑戰(zhàn)評估污染風險。物料的準備、儲存過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法配制溶液的注射用水溫度髙于70℃髙溫會抑制微生物生長將配制培養(yǎng)基的注射用水冷卻到室溫，在室溫下（20?25℃)配制正常生產(chǎn)溶液pH偏高或偏低酸性或堿性環(huán)境不利于微生物生長培養(yǎng)基的pH調(diào)整到適合微生物生長的范圍配制好的溶液在低溫下保存低溫會抑制微生物生長培養(yǎng)基在儲存容器中常溫保存85物料的準備、儲存過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風灌裝

3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法生產(chǎn)過程中使用惰性氣體(如氮氣）保護產(chǎn)品大多數(shù)需氧微生物，惰性氣體有一定的抑菌作用用壓縮空氣或空氣來代替惰性氣體培養(yǎng)基灌裝量偏少西林瓶內(nèi)壁不能被完全接觸，微生物不能生長10ml西林瓶灌裝至少2~4ml培養(yǎng)基，以保證足夠量培養(yǎng)基用于微生物和西林瓶接觸和培養(yǎng)86灌裝3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法中間過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法對設(shè)備的清洗、消毒和滅菌消毒劑會殺滅微生物對設(shè)備的清洗、消毒和滅菌在灌裝前后進行，灌裝前進行消毒要避免設(shè)備上的消毒劑殘留正常生產(chǎn)時消毒劑（如噴灑消毒酒精，對操作人員手部消毒）的使用消毒劑會殺滅微生物對于模擬試驗過程中消毒劑（如噴灑消毒酒精）的使用，應(yīng)該注意不能超出正常生產(chǎn)時的使用頻率，不能將消毒劑直接接觸到培養(yǎng)基上班次輪換，清場消毒消毒劑會殺滅微生物對于兩班次灌裝，中間不進行消毒清場。87中間過程3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制凍干3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法抽真空過低真空度有抑菌作用。過低真空度還會導(dǎo)致培養(yǎng)基失水灌裝好的西林瓶放人凍干機，放置適當時間后模擬凍干過程（時間需適中，防止損失過多水分而影響微生物生長的特性。在模擬凍干過程中需要抽真空引發(fā)空氣流動，再通過無菌空氣達到氣流平衡（推薦的抽真空值為至少500mbar,這樣的操作一般為2次）低溫冷凍低溫會抑制微生物生長不達到冷凍條件，保持常溫88凍干3.11抑菌作用的避免（凍干產(chǎn)品為例）風險點解釋控制方法

培養(yǎng)結(jié)果的評價89培養(yǎng)結(jié)果的評價36培養(yǎng)溫度應(yīng)適宜于一般微生物及環(huán)境分離菌的恢復(fù)生長。例如先在20~25℃最少培養(yǎng)7天，然后在30~35℃的范圍繼續(xù)培養(yǎng)7天。應(yīng)由經(jīng)過培訓并有檢査培養(yǎng)基灌裝瓶污染經(jīng)驗的人員對樣品進行逐個目視檢査。在檢查中，所有被懷疑受到污染的樣品，應(yīng)立即交給微生物專業(yè)人員進行鑒定處理。為檢出微生物的生長，最好用清晰透光的容器或具有類似物理性質(zhì)的容器，而不用琥珀色（黃色）或其他不透明容器。培養(yǎng)結(jié)果檢查90培養(yǎng)溫度應(yīng)適宜于一般微生物及環(huán)境分離菌的恢復(fù)生長。例如先在2（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。（二）灌裝數(shù)量在5000至10000支時：1.有1支污染，需調(diào)查，可考慮重復(fù)試驗；2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（三）灌裝數(shù)量超過10000支時：1.有1支污染，需調(diào)查；2.有2支污染，需調(diào)查后，進行再驗證。（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當進行調(diào)查。培養(yǎng)結(jié)果檢查91（一）灌裝數(shù)量少于5000支時，不得檢出污染品。培養(yǎng)結(jié)果檢查培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗：使用完成14天培養(yǎng)的灌裝前期培養(yǎng)基樣品用枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠球菌、銅綠假單胞菌、黑曲霉和環(huán)境菌作為陽性菌將每個菌種準備含<100cfu/0.1ml的菌液，每個菌種接種2支培養(yǎng)基樣品，同時并平板計數(shù)對真菌在20-25C下培養(yǎng)，對細菌在30-35C下培養(yǎng)，每天檢查，5天內(nèi)需有生長跡象培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗92培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗：培養(yǎng)基靈敏度檢查實驗39

發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查93發(fā)現(xiàn)污染后調(diào)查40環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)，空氣懸浮粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)CIP設(shè)備，清潔、消毒程序的執(zhí)行情況培養(yǎng)基、設(shè)備和零件的滅菌工藝，滅菌釜的校正情況高效過濾器檢測(空氣懸浮粒子水平，過濾器檢漏，風速測量，密封系統(tǒng)檢查，使用年