生化基礎知識-比色法_第1頁
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文檔簡介

比色法原理(分光光度法)第一頁,共二十五頁。多么美麗五彩斑斕的春天啊第二頁,共二十五頁。為什么上述溶液呈現不同的顏色?第三頁,共二十五頁。自然光-赤橙黃綠青藍紫第四頁,共二十五頁。波長決定顏色第五頁,共二十五頁。光譜-連續(xù)不同波長光的集合第六頁,共二十五頁。物質對不同波長光的選擇性吸收第七頁,共二十五頁。由于物質對不同波長光的選擇性吸收而引起,物質呈現的是被吸收顏色的互補色。單色光互補光復色光第八頁,共二十五頁?,F在知道她的秘密了嗎?第九頁,共二十五頁。腦筋急轉彎1、紅光照射紅色溶液,看透過什么色?2、紅光照射綠色溶液,看透過什么色?第十頁,共二十五頁。透光度(透射比)Transmittance透光度定義:T取值為0.0%~100.0%全部吸收T=0.0%全部透過T=100.0%吸光度定義:第十一頁,共二十五頁。T、A與顏色的關系---------------------透光率(T)吸光度(A)---------------------10.0000.750.1250.50.3010.250.6020.170.7700.11.0000.051.3010.012.0000.0013.000---------------------?第十二頁,共二十五頁。測量物質光吸收的裝置-比色計第十三頁,共二十五頁。比色計或分光光度計第十四頁,共二十五頁。物質的光吸收曲線-定性分析第十五頁,共二十五頁。吸光度與光徑的關系第十六頁,共二十五頁。吸光度與濃度的關系第十七頁,共二十五頁。朗伯-比爾定律:A=-lgT=KCL第十八頁,共二十五頁。透光度(transmittance,T,透射率)T=It/I0吸光度(absorbance,A)光密度(opticaldensity,D或OD)A=-lgT=lgI0/ItLamb-beer定律:A=KCLK為吸光系數,C為濃度,L為光徑cm摩爾吸光系數ε:當C=1mol/L,L=1cm,A=ε第十九頁,共二十五頁。比色定量——與標準濃度物質溶液比較第二十頁,共二十五頁。目視比色法觀察方向空白c1c2c3c4第二十一頁,共二十五頁。比色計或分光光度計第二十二頁,共二十五頁。比色法成立的基礎有色或有吸收單色光第二十三頁,共二十五頁。比色法郎伯-比爾定律物質的選擇性光吸收光美麗的大自然第二十四頁,共二十五頁。內容梗概比色法原理。由于物質對不同波長光的選擇性吸收而引起,物質呈現的是被吸收顏色的互補色。透光度(透射比)Transmittance。T取值為0.0%~100.0%。T=100.0%。---------------------。10.000。0.11.000。0.012.000。0.0013.000。朗伯-比爾定律:A=-lgT=KCL。透光度(transmittance,T,透

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