動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)和操作技術(shù)課件

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本知識(shí)與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和固定方法二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)方法三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的去毛方法（自學(xué)）六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血方法（自學(xué)）七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法（自學(xué)）一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿和固定方法

1.小鼠捉拿時(shí)先用右手將鼠尾抓住提起，放在較粗糙的臺(tái)面或鼠籠上，在其向前爬行時(shí)，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚，將其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手無(wú)名指壓緊尾和后肢，右手即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。取尾血及尾靜脈注射時(shí)，可將小鼠固定在金屬或木制的固定器上。2.大鼠大鼠兇猛，實(shí)驗(yàn)時(shí)可戴帆布手套，用右手將大鼠尾抓住提起，放在較粗糙的臺(tái)面或鼠籠上，抓住鼠尾向后輕拉，左手抓緊兩耳和頭頸部皮膚，余下三指緊捏鼠背部皮膚，如果大鼠后肢掙扎厲害，可將鼠尾放在小指和無(wú)名指之間夾住，將整個(gè)鼠固定在左手中，右手進(jìn)行操作。手術(shù)或解剖——固定板取尾血或尾靜脈注射——固定盒3.家兔一手抓住兔頸部的被毛與皮膚，另一手托其臀部或腹部，使其軀干的重量大部分集中在手上。家兔麻醉后固定方式分仰臥位和俯臥位，仰臥位固定時(shí)，四肢用粗棉線固定，頭用家兔頭固定夾固定或用棉線鉤住家兔門(mén)齒后再固定在家兔臺(tái)頭端鐵柱上；進(jìn)行頭顱部手術(shù)時(shí)，多采用仰臥位固定配合馬蹄形固定器進(jìn)行固定。二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)方法染色法耳緣剪孔法掛牌法烙印法小鼠的編號(hào)方法編號(hào)原則：先左后右，從前到后3、掛牌法：耳標(biāo)簽、項(xiàng)圈、腿圈，中、大型動(dòng)物4、烙印法：刺號(hào)鉗，中、大型動(dòng)物三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥方法1.注射法給藥2.攝入法給藥3.涂布法給藥家兔耳緣靜脈注射將動(dòng)物固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，剪去耳緣部位的被毛，用乙醇輕輕擦拭，耳緣靜脈即清晰可見(jiàn)。用左手食指和中指夾住靜脈近心端，拇指和小指夾住耳緣部分，以左手無(wú)名指和小指放在耳下作墊，待靜脈充盈后，右手持注射器使針頭盡量由靜脈遠(yuǎn)心端刺入，順血管方向平行、向心端刺入約1cm。注射完畢抽出針頭，用棉球壓迫注射部位數(shù)分鐘，以免出血。尾靜脈注射鼠尾靜脈有3根，兩側(cè)及背側(cè)各1根，左、右兩側(cè)尾靜脈較易固定，應(yīng)優(yōu)先選擇。注射時(shí)，先將鼠固定在鼠筒內(nèi)或扣在燒杯中，露出尾部組織，用45～50℃溫水浸泡鼠尾l～2min或用75％乙醇溶液反復(fù)擦拭，以達(dá)到消毒、擴(kuò)張血管和軟化表皮角質(zhì)的目的。注意藥液推入靜脈時(shí)是否通暢，若阻力較大，注射部位皮下發(fā)白，表示針頭未刺入靜脈內(nèi)，應(yīng)換部位重新注射；若推入藥液順利無(wú)阻，則表明已刺入靜脈內(nèi)，應(yīng)把針頭和鼠尾固定好，不要晃動(dòng)，緩緩將藥液推入，注射完畢，用棉球在注射部位輕輕揉壓，使血液及藥液不致回流而漏出。2、攝入法給藥自動(dòng)口服給藥強(qiáng)制灌胃給藥經(jīng)直腸給藥小鼠灌胃法按正確方法用左手抓取和固定動(dòng)物。使腹部朝上，頸部拉直固定后，右手持持接灌胃針的注射器吸取藥液（或事先將藥液吸好），將針頭從口角插入口腔內(nèi)，然后用灌胃針頭壓其頭部，使口腔與食管成一直線，再將灌胃針頭沿上腭壁輕輕進(jìn)入，轉(zhuǎn)動(dòng)針頭刺激動(dòng)物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若動(dòng)物掙扎厲害，應(yīng)退出后灌胃針，待動(dòng)物安靜后重新插入。切不可強(qiáng)行插入，以免損傷食道或誤入氣管導(dǎo)致動(dòng)物死亡。當(dāng)感覺(jué)有落空感時(shí)表明灌胃針可能進(jìn)入胃內(nèi)，向外抽動(dòng)注射器活塞，感覺(jué)有負(fù)壓說(shuō)明灌胃針未插入氣管，此時(shí)可將藥液灌入。成年小鼠插管深度一般是：3cm小鼠灌胃量：0.1～0.3ml/10g體重大鼠灌胃法大鼠灌胃量：1～2ml/100g體重兔灌胃法操作方法：1.固定2.插管3.給藥兔灌胃法操作方法：1.固定：動(dòng)物取直立或平臥體位，固定動(dòng)物頭部。直立位需2人合作，一人取坐位，將兔的軀體和下肢夾在兩腿之間，左手緊握雙耳固定頭部，右手抓住前肢，將兔固定于豎立體位。另一人將開(kāi)口器橫放于兔口中，讓動(dòng)物咬住開(kāi)口器，即可開(kāi)始插入灌胃管。兔灌胃法操作方法：2.插管：將灌胃管由開(kāi)口器的中央孔插入，沿上顎壁推進(jìn)約15cm。

插管過(guò)程中可將灌胃管的另一端放于一杯清水中，若連續(xù)有氣泡，說(shuō)明插入呼吸道，應(yīng)立即拔出灌胃管，重新操作；若無(wú)氣泡，說(shuō)明沒(méi)有插入氣管，即可開(kāi)始注藥。沿上顎壁推進(jìn)約15cm檢查插入部位兔灌胃法操作方法：3.給藥：灌注藥后可用少量清水將灌胃管里的藥全部沖入胃內(nèi)，以保證灌入藥的劑量準(zhǔn)確。灌胃完畢后，先退出胃管，后退出開(kāi)口器。兔灌胃法關(guān)鍵詞：固定，插入（沿上顎壁），檢查四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法全身麻醉法吸入法，注射法局部麻醉法浸潤(rùn)麻醉，表面麻醉1.全身麻醉法（1）吸入法——吸入性麻醉藥采用乙醚三氟乙烷氯仿（2）注射法——非吸入性麻醉藥采用巴比妥類藥物氯胺酮烏拉坦水合氯醛針對(duì)不同的動(dòng)物，選擇不同的麻醉藥物、實(shí)施不同的麻醉方法。

麻醉藥物應(yīng)用原則：

依據(jù)動(dòng)物體重計(jì)算麻醉藥物的劑量；

依據(jù)動(dòng)物生命體征的變化控制給藥的速度；

掌握寧少勿多、分階段給藥的方式。麻醉具體操作：家兔全身麻醉麻醉劑：3%戊巴比妥鈉，1ml/kg前1/2快速推入，以求動(dòng)物能順利、快速地渡過(guò)興奮期；后1/2速度宜慢，且邊注射邊注意觀察動(dòng)物的生命體征變化，當(dāng)確定已達(dá)到麻醉效果時(shí)，即停止給藥，不必急于將剩余的麻醉藥物全部推入麻醉成功標(biāo)志角膜反射遲鈍肢體肌肉松弛疼痛反射消失2.局部麻醉法

1%鹽酸普魯卡因局部浸潤(rùn)麻醉0.02～2％鹽酸可卡因表面麻醉五、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的去毛方法（自學(xué)）六、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血方法（自學(xué)）家兔、大鼠、小鼠七、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處死方法（自學(xué)）蛙類、大鼠、小鼠、家兔第三節(jié)機(jī)能實(shí)驗(yàn)常用手術(shù)方法一、常用手術(shù)器械二、常用手術(shù)插管技術(shù)氣管插管術(shù)頸動(dòng)脈插管術(shù)頸靜脈插管術(shù)

導(dǎo)尿管插管術(shù)胃管插管術(shù)一、常用手術(shù)器械簡(jiǎn)介眼科剪眼科鑷組織鑷止血鉗組織剪粗剪刀

1.手術(shù)刀：由刀片和刀柄組成，可分為大、中、小號(hào)不同類型。大號(hào)手術(shù)刀主要用于切開(kāi)皮膚；中號(hào)手術(shù)刀用于臟器組織的切割手術(shù)；小號(hào)手術(shù)刀主要用于特殊部位的組織切割。安裝時(shí)，先用持針器（或直型止血鉗）夾住刀片，左手握住刀柄，按刀片上的空隙對(duì)準(zhǔn)刀柄上的槽隙，順勢(shì)推入即可。持弓式持弓式：以右手中指、無(wú)名指按壓在手術(shù)刀柄的外側(cè)緣，拇指放在刀柄的內(nèi)側(cè)緣，食指按壓在刀片后1／3處。這種持刀法，適用于切開(kāi)皮膚。執(zhí)筆式：即以持筆的手法握住刀柄，適用于小范圍內(nèi)的組織切開(kāi)，具有很大的隨意性，既可作垂直切割，又可作水平切割。2.組織鑷可分為組織鑷和眼科組織鑷。組織鑷在實(shí)驗(yàn)操作中的主要作用是鉗夾組織及分離組織和筋膜。眼科鑷在機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)中一般用于分離血管。正確使用組織鑷的手法是：以食指、中指放于器械的外側(cè)緣，拇指放于內(nèi)側(cè)緣，集3指的力量實(shí)施操作動(dòng)作，而且適用于左右手的同時(shí)操作。3.止血鉗：主要用于止血和分離組織。正確的使用方法是：以拇指、中指（或無(wú)名指）分別套人止血鉗的套扣內(nèi)，控制止血鉗展開(kāi)的力度，以食指放在止血鉗的關(guān)節(jié)部位，控制止血鉗的方向和鉗夾組織部位的準(zhǔn)確性。切忌左右手分別抓住止血鉗的套扣部位，用兩手的合力進(jìn)行止血或分離組織。4.組織剪二、常用手術(shù)插管技術(shù)氣管插管術(shù)頸動(dòng)脈插管術(shù)頸靜脈插管術(shù)尿道插管術(shù)插管技術(shù)的基本步驟1.動(dòng)物的麻醉固定。2.插管部位皮膚去毛，被皮。3.皮膚切開(kāi)。4.皮下組織結(jié)構(gòu)的分離。5.目標(biāo)器官或組織結(jié)構(gòu)的游離。6.導(dǎo)管的插入或固定。迷走神經(jīng)交感神經(jīng)減壓神經(jīng)氣管插管：由頸正中剪開(kāi)一約６cm的口，鈍性分離皮下筋膜分離出氣管，穿線備用；在甲狀軟骨下方第3-4個(gè)環(huán)狀軟骨上作一倒“T”形切口，插入“Y”形氣管插管，并用線固定好頸部手術(shù)、氣管插管頸動(dòng)脈插管技術(shù)１、沿頸正中線從甲狀軟骨下到胸骨上沿作一約６cm的口。2、鈍性分離皮下筋膜。3、分離一側(cè)頸總動(dòng)脈，穿雙線備用。4、結(jié)扎遠(yuǎn)心端，在距結(jié)扎線約2-3cm處用動(dòng)脈夾夾閉頸總動(dòng)脈近心端。5、在靠近結(jié)扎線處用眼科剪剪一“v”形切口，切口大小約為動(dòng)脈口徑的1/3－1/2。6、將連接好壓力換能器的動(dòng)脈插管灌滿肝素，向近心端插入動(dòng)脈插管，并用線結(jié)扎牢固。7、打開(kāi)換能器開(kāi)關(guān)，觀察并記錄結(jié)果。頸動(dòng)脈插管動(dòng)脈插管和血壓換能器內(nèi)注滿肝素生理鹽水以排氣抗凝

頸靜脈插管技術(shù)１、由頸正中剪開(kāi)一約６cm的口。2、鈍性分離皮下筋膜。3、辨認(rèn)、分離一側(cè)頸外靜脈。4、穿雙線，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，近心端用動(dòng)脈夾夾閉。5、用