基因毒性雜質(zhì)優(yōu)質(zhì)推薦課件

基因毒性雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)1一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略二、痕量雜質(zhì)定量分析方法的建立提

綱三、案例分析與討論四、未知雜質(zhì)分離鑒定案例分析一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略二、痕量雜質(zhì)定量分析方法的建立2一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略1.藥品雜質(zhì)研究的法規(guī)依據(jù)2.藥品雜質(zhì)評(píng)估一般步驟3.藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析4.藥品雜質(zhì)毒性判別方法5.藥品雜質(zhì)研究限度策略6.藥品雜質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的分析方法建立策略一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略36雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或者影響藥物的穩(wěn)定性、療效，甚至對(duì)人體的健康有害的物質(zhì)產(chǎn)品質(zhì)量重點(diǎn)關(guān)注雜質(zhì)：工藝雜質(zhì)、

降解雜質(zhì)安全性重點(diǎn)關(guān)注高毒性雜質(zhì)：致癌、致突變類雜雜質(zhì)中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典、日本藥典等各國(guó)藥典ICH

Q3A(R2):

新型原料藥中的雜質(zhì)問(wèn)題

(2006.10)ICH

Q3B(R2):

新型藥品中的雜質(zhì)問(wèn)題

(2006.06)ICH

Q3C(R6):雜質(zhì)：殘留溶劑的指導(dǎo)原則

(2016.10)ICH

Q3D:元素雜質(zhì)的指導(dǎo)原則

(2014.12)ICH

Q11:原料藥開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)（化學(xué)實(shí)體和生物技術(shù)生物實(shí)體藥物）(2012.05)ICH

M7(R1):評(píng)估和控制藥物中DNA

反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)以限制潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)

(2017.03)化學(xué)藥品注射劑與包裝材料相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（塑料、玻璃、彈性體密封件）雜質(zhì)研究相關(guān)法規(guī)1.藥品雜質(zhì)研究的法規(guī)依據(jù)重點(diǎn)關(guān)注：法規(guī)適用范圍6雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或者影響藥物的穩(wěn)定性、療效，42.藥品雜質(zhì)評(píng)估一般步驟①雜質(zhì)引入方式③限度制定已有研究的文獻(xiàn)報(bào)道警示結(jié)構(gòu)提示計(jì)算機(jī)模擬毒性評(píng)估體外點(diǎn)突變和染色體畸變?cè)囼?yàn)動(dòng)物毒性評(píng)估起始物料及其雜質(zhì)溶劑及其雜質(zhì)中間體反應(yīng)副產(chǎn)物輔料雜質(zhì)降解雜質(zhì)生產(chǎn)設(shè)備引入包裝材料引入環(huán)境污染引入一般雜質(zhì)致癌致畸雜質(zhì)PDE控制（存在報(bào)道）PDE控制

（存在報(bào)道）TTC控制ICHQ3

A/B/C/D②雜質(zhì)毒性分類判定致癌、致突變2.藥品雜質(zhì)評(píng)估一般步驟①③已有研究的文獻(xiàn)報(bào)道起始物料及其雜5關(guān)于PDE法與TTC法PDE法適用于有閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)；已有證據(jù)表明，該物質(zhì)只有在超過(guò)一定限度時(shí)才會(huì)產(chǎn)生遺傳毒性。雜質(zhì)安全性限度的確定可以參照殘留溶劑限度的計(jì)算方法，根據(jù)相關(guān)動(dòng)物的無(wú)可見(jiàn)效應(yīng)劑量（No-ObservedEffectLevel）計(jì)算其可接受的日暴露量（PermissibleDailyExposure）,再根據(jù)藥品的最大日劑量計(jì)算出雜質(zhì)的接受限度。關(guān)于PDE法與TTC法PDE法6關(guān)于PDE法與TTC法TTC法無(wú)閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)；引入了毒理學(xué)關(guān)注的閾值（ThresholdofToxicologicalConcern）。TTC是在接受患者終生用藥的癌癥發(fā)生概率不超過(guò)10萬(wàn)分之一的基礎(chǔ)上，從高濃度下進(jìn)行的致癌性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)線性外推倒極低濃度得到的一個(gè)理論值。對(duì)于無(wú)閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)，如果每日攝入量低于1.5ug，那么患者因服藥導(dǎo)致癌癥發(fā)生的額外風(fēng)險(xiǎn)可以忽略不記。關(guān)于PDE法與TTC法TTC法78按屬性有機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì)按來(lái)源工藝雜質(zhì)降解雜質(zhì)3.藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析路線1路線2路線3溶劑1，催化劑A+B C(A’) 時(shí)間、溫度、pH… (C’)SI

溶劑雜質(zhì)溶劑2，試劑RI

試劑雜質(zhì)DS(DS’)(D1,D2…)(BP1,BP2…)輔料制劑(D3,D4,E11,E12,…)容器中的浸出物A，B=起始物料C =中間體R =試劑/催化劑DS =藥用輔料A’ =潛在的起始物料雜質(zhì)產(chǎn)生C’和DS’BP =反應(yīng)副產(chǎn)物D =降解產(chǎn)物SIRIIE=溶劑雜質(zhì)=試劑雜質(zhì)=輔料雜質(zhì)EI

輔料雜質(zhì)8按屬性有機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì)按來(lái)源工藝雜質(zhì)降解雜質(zhì)3.藥品雜質(zhì)來(lái)89藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析-容器中的浸出物來(lái)源9藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析-容器中的浸出物來(lái)源910藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源常見(jiàn)報(bào)道高毒性雜質(zhì)具有警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)10藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源常見(jiàn)報(bào)道高毒性雜質(zhì)1011藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)毒理學(xué)計(jì)算軟件各類毒理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)已有文獻(xiàn)報(bào)道獲取TD50、NOEL、ADI、PMTDINOEL值與致癌致畸沒(méi)有必然聯(lián)系查詢的毒性研究文獻(xiàn)全面性以及毒性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的解讀需要專家的確認(rèn)TheCarcinogenicPotencyDatabase

(CPDB)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織食品添加劑專家委員會(huì)評(píng)價(jià)（JECFA）加利福尼亞州65號(hào)提案(安全飲用水和有毒物質(zhì)強(qiáng)制法令)歐洲化學(xué)品管理局（ECHA）11藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)TheCarci1112常見(jiàn)物質(zhì)的PDE數(shù)值舉例在檢索劑量數(shù)據(jù)前需要全面檢索該物質(zhì)是否有致癌致畸性，例如氯乙酸CPDB數(shù)據(jù)TD50顯示陰性鹽酸鹽的藥物在重結(jié)晶過(guò)程中的接觸醇類容易產(chǎn)生氯代烷烴，單一鹵代物在M7中有36ug/day指導(dǎo)規(guī)則關(guān)注環(huán)氧丙醇、環(huán)氧氯丙烷、3-氯-1,2-丙二醇三者之間的轉(zhuǎn)化關(guān)系毒性數(shù)據(jù)會(huì)被不斷的更新，更多的研究數(shù)據(jù)會(huì)被不斷的上傳NameCASPDE(ug/day)Note氯甲烷74-87-31361ICH

M7氯乙烷75-00-31810ICH

M7氯異丙烷75-29-655500ECHA氯乙酸79-11-83000ECHA/CPDB甲醛50-00-01.35or

10000CPDB/ICH

M7乙醛75-07-0153CPDB丙二醛542-78-9122CPDB（鈉鹽）環(huán)氧丙醇556-52-54ICH

M7環(huán)氧氯丙烷106-89-82.96CPDB（TD50）3-氯-1,2-丙二醇96-24-2PMTDI

：4ug/kg/dayWHO/FAO1,3-二氯-2-丙醇96-23-110NTP12常見(jiàn)物質(zhì)的PDE數(shù)值舉例在檢索劑量數(shù)據(jù)前需要全面檢索該物1213最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度界定限度≤2g0.05%0.10%或1.0mg（取最小值）0.15%或1.0mg（取最小值）>2g0.03%0.05%0.05%報(bào)告限度最大日劑量≤1g>1g限

度0.1%0.05%最大日劑量<1mg1～10mg>10mg

～2g>2g鑒定限度限

度1.0%或5ug(取最小值)0.5%或20ug(取最小值)0.2%或2mg(取最小值)0.10%最大日劑量<10mg10～100mg>100mg～2g>2g界定限度限

度1.0%或50ug

(取最小值)0.5%或200ug(取最小值)0.2%或3mg(取最小值)0.15%原料藥Q3A藥物雜質(zhì)的控制限度計(jì)算（）制劑Q3B新藥與仿制藥研究策略有顯著差異限度=PDE/日最大劑量PDE=TD50*體重/50000PDE=NOEL*體重/(F1*F2*F3*F4*F5)限度=TTC/日最大劑量由ppm推算NOEL

（ICH

Q3C）由LD50推算NOEL其他ICHQ3&M713最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度界定限度≤2g0.05%0.11314PDE法計(jì)算限度實(shí)例(以三乙胺濃度限度計(jì)算為例)

（錯(cuò)誤案例解析）公式1.

NOEL=LD50×70/2000（該公式來(lái)源于EMEA關(guān)于清潔驗(yàn)證的指導(dǎo)原則）公式解釋：NOEL（NOAEL）數(shù)據(jù)如果能直接查到就不需要計(jì)算了，直接進(jìn)入到第2個(gè)公式；其中60是指的人體平均體重為60Kg；2000是一個(gè)安全系數(shù)。查詢美國(guó)TOXNET數(shù)據(jù)庫(kù)，大鼠經(jīng)口的LD50=460mg/Kg，則NOEL=460×70/2000=16.1mg/Kg/day

（錯(cuò)誤推算）PDE=NOEL（mg/Kg/day）×Weight

Adjustment（Kg）/(F1×F2×F3×F4×F5)PDE=16.1

mg/Kg/day×50Kg/(5×10×5×1×1)=3.22mg/day濃度限度（％）＝PDE（mg/day）/（1000×dose（g/day））×100％對(duì)于原料藥而言，dose均定為10g/day濃度限度（％）=3.22/(1000×10)

×100％=0.0322%（322ppm）F1：種屬之間的換算系數(shù)，代表由物種差異推導(dǎo)的變異系數(shù)，與體表面積相關(guān)F1=5:從大鼠劑量推斷人用劑量的系數(shù)；F1=12:從小鼠劑量推斷人用劑量的系數(shù)F1=2:從狗劑量推斷人用劑量的系數(shù)；F1=2.5:從兔劑量推斷人用劑量的系數(shù)F1=3:從猴子劑量推斷人用劑量的系數(shù)；F1=10:從其他動(dòng)物劑量推斷人用劑量的系數(shù)對(duì)于三乙胺，上述LD50是以大鼠為試驗(yàn)得來(lái)的數(shù)據(jù)，所以F1=5。F2：代表個(gè)體間的變異系數(shù)，其值為F2=10；F3：為短期接觸急性毒性研究的可變系數(shù)：F3=1，研究時(shí)間至少為動(dòng)物壽命的一半（鼠、兔1年，貓、狗、猴7年）F3=1，器官形成的整個(gè)過(guò)程的生殖研究F3=2，對(duì)嚙齒類動(dòng)物６個(gè)月研究或非嚙齒類動(dòng)物3-5年的研究F3=5，對(duì)嚙齒類動(dòng)物３個(gè)月研究或非嚙齒類動(dòng)物２年的研究F3=10，更短時(shí)間的研究。在所有情況下，對(duì)研究時(shí)間介于上述時(shí)間點(diǎn)之間的研究，應(yīng)用較大的系數(shù)，如對(duì)嚙齒類動(dòng)物９個(gè)月毒性研究，其系數(shù)用２。以上大鼠經(jīng)口的LD50值為急毒數(shù)據(jù)，根據(jù)歐盟數(shù)據(jù)經(jīng)驗(yàn)，這個(gè)研究時(shí)間在3-6個(gè)月之間，因此，F(xiàn)3=5。F4：產(chǎn)生嚴(yán)重毒性情況的系數(shù)，如非遺傳致癌毒性、神經(jīng)毒性或致畸性，研究生殖毒性時(shí)，用以下系數(shù)：F4=1

與母體毒性有關(guān)的胎兒毒性;

F4=５

無(wú)母體毒性的胎兒毒性F4=５

受母體毒性影響的致畸反應(yīng);

F4=10

無(wú)母體毒性影響的致畸反應(yīng)因?yàn)槿野窞榉菄?yán)重毒性，所以這里F4=1。F5：一個(gè)可變系數(shù)，用在無(wú)毒性反應(yīng)的劑量（NOEL）值時(shí)F5=1foraNOEL；F5=1-5foraNOAEL；F5=5-10foraLOEL；F5=10foraLowest-observed-adverse-effectlevel

(LOAEL)因?yàn)镹OEL已經(jīng)確定，所以這里F5=1。當(dāng)研究沒(méi)有區(qū)分NOAEL和NOEL，且依據(jù)確定的PDE值選擇劑量時(shí)毒性不被認(rèn)為是“副作用”，則使用F5等于1，NOAEL用于多數(shù)元素的口服PDE值設(shè)定。三乙胺在ICH

Q

3C中屬于三類溶劑，限度：

0.514PDE法計(jì)算限度實(shí)例(以三乙胺濃度限度計(jì)算為例)（錯(cuò)誤1415由LD50推算PDE值建議《原料藥工廠中清潔驗(yàn)證指南》一文中的NOEL

的單位是mg/天，而不是上文公式中的mg/kg/天LD50計(jì)算NOEL的公式：NOEL=LD50×70/2000，公式中的70是歐洲人的評(píng)價(jià)體重如果需要用LD50計(jì)算NOEL用于計(jì)算PDE，推薦公式應(yīng)該是NOEL=LD50/2000

（見(jiàn)參考文獻(xiàn)）不推薦在基因毒物質(zhì)研究中使用推薦在包材研究的劑量計(jì)算中使用參考文獻(xiàn)：

D.W.

Layton;B.J.

Mallon;D.H.

Rosenblatt;M.J.

Small

Deriving

allowable

daily

intakes

for

systemic

toxicants

lacking

chronic

toxicity

data.RegulatoryToxicology&Pharmacology,1987,7(1)

:96-11215由LD50推算PDE值建議《原料藥工廠中清潔驗(yàn)證指南》一15藥品雜質(zhì)引入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估常見(jiàn)已知雜質(zhì)引入途徑起始物料及已知雜質(zhì)中間體試劑&溶劑&催化劑反應(yīng)副產(chǎn)物、降解雜質(zhì)常見(jiàn)未知雜質(zhì)引入途徑起始物料引入未知雜質(zhì)、起始物料雜質(zhì)產(chǎn)生的雜質(zhì)、生產(chǎn)設(shè)備引入的雜質(zhì)包材浸出物雜質(zhì)環(huán)境引入雜質(zhì)（生產(chǎn)用水等）需要重點(diǎn)做風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作藥品雜質(zhì)引入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估常見(jiàn)已知雜質(zhì)引入途徑常見(jiàn)未知雜質(zhì)引入途徑16關(guān)于PDE法與TTC法管不住外包項(xiàng)目 6氯代丙醇響應(yīng)低，耐用性差當(dāng)使用多孔填充材料作為固定相時(shí)，分子排阻色譜（Sizeexclusion chromatography，SEC）和相互作用色譜潛在及未知雜質(zhì)研究策略討論5種測(cè)定甲磺酸酯分析方法比較LD50計(jì)算NOEL的公式：NOEL=LD50×70/2000，公式中的70是歐洲人的評(píng)價(jià)體重具有合適的樣品制備方式：直接溶解、溶解后沉淀、液液萃取、固體液萃取似是老生常談的雜質(zhì)研究對(duì)于無(wú)閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)，如果每日攝入量低于1.“請(qǐng)補(bǔ)充提供或說(shuō)明雜質(zhì)檢查方法與限度修改(制訂)的依據(jù)…”雜質(zhì)研究≠有關(guān)物質(zhì)檢查！ICHQ3D:元素雜質(zhì)的指導(dǎo)原則(2014.通則0531 超臨界流體色譜法《原料藥工廠中清潔驗(yàn)證指南》一文中的NOEL的單位是mg/天，而不是上文公式中的“請(qǐng)結(jié)合本產(chǎn)品及起始原料工藝對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行補(bǔ)充研究…”PDE控制（存在報(bào)道）歐洲化學(xué)品管理局（ECHA）符合資質(zhì)的對(duì)照品：適合包裝、有COA安全性重點(diǎn)關(guān)注高毒性雜質(zhì)：致癌、致突變類雜雜質(zhì)17已知雜質(zhì)研究策略討論結(jié)構(gòu)已知的雜質(zhì)研究：起始物料及其已知雜質(zhì)、中間體、試劑、反應(yīng)副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物根據(jù)工藝路線梳理出產(chǎn)品待研究的雜質(zhì)清單進(jìn)行毒性雜質(zhì)評(píng)估分類：文獻(xiàn)報(bào)道、軟件預(yù)測(cè)根據(jù)各國(guó)藥典及ICH

QA\B\C規(guī)則分別建立有關(guān)物質(zhì)和溶劑殘留方法建立滿足專屬性和靈敏度的方法（LOQ<30%限度濃度），收集多批次API中目標(biāo)雜質(zhì)含量基于已有的有關(guān)物質(zhì)方法和溶劑殘留方法，增加供試品濃度或改變檢測(cè)器基于雜質(zhì)檢出情況制定雜質(zhì)添加實(shí)驗(yàn)，考察工藝的雜質(zhì)的去除能力基于雜質(zhì)分類、毒性評(píng)估、產(chǎn)品檢出情況制定方法學(xué)驗(yàn)證策略及產(chǎn)品控制策略關(guān)于PDE法與TTC法17已知雜質(zhì)研究策略討論結(jié)構(gòu)已知的雜質(zhì)1718潛在及未知雜質(zhì)研究策略討論潛在及未知雜質(zhì)來(lái)源：起始物料引入未知雜質(zhì)、溶劑中雜質(zhì)、包材浸出物雜質(zhì)、輔料引入雜質(zhì)、生產(chǎn)設(shè)備引入根據(jù)供應(yīng)商提供的工藝路線梳理雜質(zhì)清單及潛在雜質(zhì)，分別對(duì)元素雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)進(jìn)行分類研究針對(duì)元素雜質(zhì)采取ICPMS全質(zhì)量數(shù)掃描（69種）和

35種元素半定量掃描針對(duì)揮發(fā)及半揮發(fā)雜質(zhì)采用GCMS進(jìn)行全質(zhì)量數(shù)掃描（譜庫(kù)匹配）及半定量分析（SIM模式）針對(duì)不揮發(fā)雜質(zhì)采用LCMS

或

LC-MSMS進(jìn)行全質(zhì)量數(shù)掃描及半定量分析（SIM模式）購(gòu)買疑似或近似雜質(zhì)進(jìn)行分析比對(duì)，確定研究目標(biāo)根據(jù)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)評(píng)估雜質(zhì)的毒性，確定雜質(zhì)的研究限度對(duì)比多批次中起始物料及其關(guān)聯(lián)的原料藥中雜質(zhì)的檢出情況根據(jù)雜質(zhì)的來(lái)源風(fēng)險(xiǎn)及檢出情況，制定雜質(zhì)的控制策略18潛在及未知雜質(zhì)研究策略討論潛在及未知雜質(zhì)來(lái)源：起始物料引18二、痕量雜質(zhì)分析方法的建立1.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)2.基于結(jié)構(gòu)特性的分析方法決策思路3.痕量分析方法建立步驟4.痕量物質(zhì)定量方法的要素二、痕量雜質(zhì)分析方法的建立1.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)191.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)含量低，選擇性要求高，高靈敏度的儀器（GC-MS，LC-MSMS、ICPMS

等）雜質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性和差異大，需要多種分析手段和方法樣品基質(zhì)復(fù)雜，需要合適的前處理方法進(jìn)行分離，純化，富集有些雜質(zhì)具有“亞穩(wěn)定性”的化學(xué)結(jié)構(gòu)，在樣品準(zhǔn)備，制備和分析過(guò)程中容易發(fā)生轉(zhuǎn)化需要有經(jīng)驗(yàn)的分析科學(xué)家好的分析方法簡(jiǎn)單容易操作，成本低通用性穩(wěn)定性容易技術(shù)轉(zhuǎn)移1.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)好的分析方法202.基于結(jié)構(gòu)特性的分析方法決策思路易揮發(fā)分子?是GC條件穩(wěn)定?否是HPLC條件穩(wěn)定嗎?是HPLC/UVHPLC/MS否化學(xué)衍生后引入質(zhì)譜或紫外檢測(cè)儀敏感基團(tuán):GC/MS,

LC/UV,

LC/MS等方法否HPLC條件下穩(wěn)定嗎?否是堿性酸性富含雜原中性分子,羥基,羰基,醚,酯等等富含共軛鍵分子(+)電噴離子化/質(zhì)譜(-)電噴離子化/質(zhì)譜化學(xué)電離/質(zhì)譜UV/質(zhì)譜如不能達(dá)到檢測(cè)靈敏度HS/GC/FID/MS如不能達(dá)到檢測(cè)靈敏度如不能達(dá)到檢測(cè)靈敏度2.基于結(jié)構(gòu)特性的分析方法決策思路易揮發(fā)分子?是GC條件穩(wěn)定213.痕量分析方法建立步驟色譜分離技術(shù)氣相色譜液相色譜離子色譜毛細(xì)管電泳檢測(cè)手段氫火焰(FID)紫外(UV)電子捕獲(ECD)EI質(zhì)譜(MS)ESI/APCI質(zhì)譜(MS/MS)熒光檢測(cè)(FLD)氮化學(xué)檢測(cè)器（CND）樣品制備技術(shù)直接溶解溶解后析出化學(xué)衍生法液-液萃取固相萃取選擇何種組合的分析方法取決于：API性質(zhì)（溶解性、化學(xué)活性）目標(biāo)物性質(zhì)（極性與揮發(fā)性、結(jié)構(gòu)特征）檢測(cè)器極限雜質(zhì)溶液穩(wěn)定性3.痕量分析方法建立步驟色譜分離技術(shù)氣相色譜檢測(cè)手段氫火焰(224.痕量物質(zhì)定量方法的要素待測(cè)物限度=對(duì)照品濃度/樣品濃度符合資質(zhì)的對(duì)照品：適合包裝、有COA有代表性的樣品：中試樣品、驗(yàn)證批次樣品適合的色譜系統(tǒng)：各目標(biāo)雜質(zhì)及樣品可以有效分離適合的檢測(cè)器：具有高專屬性、高靈敏度適合的溶媒：色譜系統(tǒng)兼容、溶液穩(wěn)定性、溶解能力具有合適的樣品制備方式：直接溶解、溶解后沉淀、液液萃取、固體液萃取分析方法核心：準(zhǔn)確度、耐用性4.痕量物質(zhì)定量方法的要素待測(cè)物限度=對(duì)照品濃度/樣品濃度符23三、案例分析與討論5種測(cè)定甲磺酸酯分析方法比較5種測(cè)定水合肼分析方法比較3種測(cè)定氯代丙醇分析方法比較三、案例分析與討論5種測(cè)定甲磺酸酯分析方法比較24基因毒雜質(zhì)開(kāi)發(fā)實(shí)例——甲磺酸甲酯等儀器設(shè)備樣品處理及進(jìn)樣發(fā)生LOQ方法缺點(diǎn)LCMS三甲胺衍生后直接進(jìn)樣1ng/ml存在基質(zhì)不適用及潛在假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)LC/MS/MS直接溶解進(jìn)樣10

ng/ml設(shè)備昂貴，不易獲取GC-MS衍生后頂空進(jìn)樣10

ng/ml存在基質(zhì)不適用及潛在假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)溶解后直接進(jìn)樣20

ng/ml靈敏度低、基質(zhì)效應(yīng)強(qiáng)、耐用性差液液萃取后直接進(jìn)樣20

ng/ml操作較為繁瑣，局限于水溶性樣品ORSOR'O

I+OR' RSOI基因毒雜質(zhì)開(kāi)發(fā)實(shí)例——甲磺酸甲酯等儀器設(shè)備樣品處理及進(jìn)樣發(fā)生25基因毒雜質(zhì)開(kāi)發(fā)實(shí)例——肼常用分析方法樣品處理LOQ方法缺點(diǎn)IC直接進(jìn)樣50ng/ml設(shè)備不通用、靈敏度低

專屬性差HILIC/LC/MS直接進(jìn)樣1ng/ml質(zhì)量數(shù)過(guò)小，方法穩(wěn)定性不好LC/MS苯甲醛衍生后直接進(jìn)樣5ng/ml衍生萃取操作比較繁瑣LLE+GCMS苯甲醛衍生后，液液萃取后直接進(jìn)樣10ng/ml衍生萃取操作比較繁瑣LLE+HPLC/UV苯甲醛衍生后，液液萃取后直接進(jìn)樣5ng/ml衍生萃取操作比較繁瑣HO+H2NH2NONN+H2NNH2H基因毒雜質(zhì)開(kāi)發(fā)實(shí)例——肼常用分析方法樣品處理LOQ方法缺點(diǎn)I26-1B（Ir、Rh、Ru、Os）建立滿足專屬性和靈敏度的方法（LOQ<30%限度濃度），收集多批次API中目標(biāo)雜質(zhì)含量10)ICHQ3B(R2):新型藥品中的雜質(zhì)問(wèn)題(2006.管不住外包項(xiàng)目 6賦值-QNMR（400M核磁）對(duì)于原料藥而言，dose均定為10g/dayF5=5-10foraLOEL；F3：為短期接觸急性毒性研究的可變系數(shù)：雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或者影響藥物的穩(wěn)定性、療效，甚至對(duì)人體的健康有害的物質(zhì)Rosenblatt;M.Liquid Chromatography at Critical Condition，LCCC“請(qǐng)補(bǔ)充提供或說(shuō)明雜質(zhì)檢查方法與限度修改(制訂)的依據(jù)…”取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%；需要重點(diǎn)做風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作PDE=TD50*體重/500005ug，那么患者因服藥導(dǎo)致癌癥發(fā)生的額外風(fēng)險(xiǎn)可以忽略不記?；瘜W(xué)衍生后引入質(zhì)譜或紫外檢測(cè)儀敏感基團(tuán):根據(jù)雜質(zhì)的來(lái)源風(fēng)險(xiǎn)及檢出情況，制定雜質(zhì)的控制策略電感耦合等離子體質(zhì)譜法uv 檢測(cè)限 工藝雜質(zhì)基因毒雜質(zhì)開(kāi)發(fā)實(shí)例——氯代丙醇測(cè)定常用分析方法樣品處理LOQ方法缺點(diǎn)GCMS氯代丙醇直接進(jìn)樣30

ng/ml氯代丙醇響應(yīng)低，耐用性差衍生GC/MS七氟丁酰基咪唑衍生后直接進(jìn)樣5

ng/ml衍生操作繁瑣衍生LC/MS二甲胺衍生后直接進(jìn)樣1

ng/ml衍生操作繁瑣-1B（Ir、Rh、Ru、Os）基因毒雜質(zhì)開(kāi)發(fā)實(shí)例——氯代27制劑中兩個(gè)未知雜質(zhì)的分離及鑒定四、未知雜質(zhì)分離鑒定案例分析制劑中兩個(gè)未知雜質(zhì)的分離及鑒定四、未知雜質(zhì)分離鑒定案例分析28項(xiàng)目介紹項(xiàng)目背景: 某制劑樣品在穩(wěn)定性研究過(guò)程中出現(xiàn)的兩個(gè)降解雜質(zhì)色譜條件: C18, 40mM磷酸鹽水溶液/甲醇=23：77研究步驟:分析方法轉(zhuǎn)換，置換成質(zhì)譜兼容流動(dòng)相液質(zhì)聯(lián)用分析, 獲取雜質(zhì)分子量及獲取制備中控方法制劑樣品提取有效成分，利用制備液相分離雜質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定（TOF-MS、超低溫探頭600M

核磁）雜質(zhì)定向合成賦值-QNMR（400M核磁）相對(duì)校正因子測(cè)定項(xiàng)目介紹29定位MS（ESI-）分析方法轉(zhuǎn)換定位MS分析方法轉(zhuǎn)換30甲醇萃取、過(guò)濾常溫旋干甲醇復(fù)溶、制備樣品處理與制備分離冷凍干燥色譜定位、質(zhì)譜確認(rèn)甲醇萃取、過(guò)濾常溫旋干甲醇復(fù)溶樣品處理與制備分離冷凍干31分子量結(jié)合API結(jié)構(gòu)推論雜質(zhì)結(jié)構(gòu)通過(guò)TOFMS和核磁得到驗(yàn)證雜質(zhì)A：次甲基氧化生成醇雜質(zhì)B：2號(hào)位甲甲基氧化成醛QNMR定量雜質(zhì)A：89.5%；雜質(zhì)B：85.6%未知雜質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定分子量結(jié)合API結(jié)構(gòu)推論雜質(zhì)結(jié)構(gòu)QNMR定量雜質(zhì)A：8932找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……234說(shuō)不清依據(jù)緣由5管不住外包項(xiàng)目

6

1找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)2333高比例發(fā)補(bǔ)的幾條意見(jiàn)你有木有接到過(guò)這類令人心塞的發(fā)補(bǔ)通知？“請(qǐng)結(jié)合本產(chǎn)品及起始原料工藝對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行補(bǔ)充研究…”“請(qǐng)補(bǔ)充提供或說(shuō)明雜質(zhì)檢查方法與限度修改(制訂)的依

據(jù)…”“請(qǐng)使用專屬性更強(qiáng)靈敏度更高的方法對(duì)本品與原研的

雜質(zhì)譜進(jìn)行重新研究…”高比例發(fā)補(bǔ)的幾條意見(jiàn)你有木有接到過(guò)這類令人心塞的發(fā)補(bǔ)通知？341找不見(jiàn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……24說(shuō)不清依據(jù)緣由5管不住外包項(xiàng)目

6

311找不見(jiàn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)235雜質(zhì)研究≠有關(guān)物質(zhì)檢查！1有關(guān)物質(zhì)－起始原料－中間體、副產(chǎn)物異構(gòu)體和聚合物多晶型－降解產(chǎn)物異構(gòu)體和聚合物多晶型3外源污染物－微生物－微粒物質(zhì)-農(nóng)藥殘留－非法添加物2無(wú)關(guān)雜質(zhì)－試劑配位體、無(wú)機(jī)鹽、溶劑－重金屬催化劑－過(guò)濾介質(zhì)、活性炭-酶殘留雜質(zhì)研究≠有關(guān)物質(zhì)檢查！1有關(guān)物質(zhì)3外源污染物2無(wú)關(guān)雜質(zhì)36通則0531 超臨界流體色譜法2000是一個(gè)安全系數(shù)。1,3-二氯-2-丙醇根據(jù)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)評(píng)估雜質(zhì)的毒性，確定雜質(zhì)的研究限度在檢索劑量數(shù)據(jù)前需要全面檢索該物質(zhì)是否有致癌致畸性，例如氯乙酸CPDB數(shù)據(jù)TD50顯示陰性制劑中兩個(gè)未知雜質(zhì)的分離及鑒定質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)/方法與質(zhì)量的關(guān)系當(dāng)研究沒(méi)有區(qū)分NOAEL和NOEL，且依據(jù)確定的PDE值選擇劑量時(shí)毒性不被認(rèn)為是“副作用”，則使用F5等氯代丙醇響應(yīng)低，耐用性差2015年版藥典注射劑通則整合后補(bǔ)充的這個(gè)項(xiàng)目給你什么提示？＜2小時(shí)改換溶劑或明確給出Rosenblatt;M.已有證據(jù)表明，該物質(zhì)只有在超過(guò)一定限度時(shí)才會(huì)產(chǎn)生遺傳毒性。F5=5-10foraLOEL；R =試劑/催化劑DS =藥用輔料分析方法轉(zhuǎn)換，置換成質(zhì)譜兼容流動(dòng)相雜質(zhì)與主成分結(jié)構(gòu)性質(zhì)差異很大國(guó)外使用TLC補(bǔ)充檢測(cè)三唑侖/七氟烷/十一烯酸歐洲化學(xué)品管理局（ECHA）有否漏檢雜質(zhì)有否需校正雜質(zhì)重組人生長(zhǎng)激素紅霉素/麥迪霉素硫酸魚精蛋白/肝素鈉阿奇霉素/右旋糖酐鐵三唑侖/七氟烷/十一烯酸重組發(fā)酵提取半合成合成更有新型生物技術(shù)/細(xì)胞產(chǎn)品通則0531 超臨界流體色譜法重組人生長(zhǎng)激素紅霉素/麥迪霉素37多、全大、雜多、全38農(nóng)藥殘留菌體蛋白殘留酶培養(yǎng)液雜質(zhì)農(nóng)藥殘留菌體蛋白殘留酶培養(yǎng)液雜質(zhì)39元素（重金屬）雜質(zhì)? 1類金屬雜質(zhì)（原料藥）-

1A

（

Pt、Pd

）-

1B（Ir、Rh、Ru、Os）-

1C（Mo、Ni、Cr、V）元素（重金屬）雜質(zhì)? 1類金屬雜質(zhì)（原料藥）40修訂通則新增方法2341 農(nóng)藥殘留量測(cè)定法本方法為質(zhì)譜法（通則0431）測(cè)定中藥材中的農(nóng)藥殘留量。氣相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法提供了多品種通用的色譜及質(zhì)譜條件僅僅中藥材有農(nóng)藥殘留問(wèn)題？修訂通則新增方法2341 農(nóng)藥殘留量測(cè)定法材中的農(nóng)藥殘留量。41各國(guó)藥典列出的雜質(zhì)與你產(chǎn)品的關(guān)系？曾見(jiàn)到有企業(yè)CTD格式申報(bào)資料中雜質(zhì)分析章節(jié)讓人不知所云的神段子：國(guó)內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)目前未收載指定相關(guān)雜質(zhì)，USP中收載有3個(gè)雜質(zhì)，EP中收載有5個(gè)特定雜質(zhì)，其中2個(gè)與USP不同，國(guó)內(nèi)可以購(gòu)買到EP的5種雜質(zhì)對(duì)照品。呃...我弱弱的問(wèn)您一句您想說(shuō)什么？“請(qǐng)結(jié)合本產(chǎn)品及起始原料工藝對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行補(bǔ)充研究…”各國(guó)藥典列出的雜質(zhì)與你產(chǎn)品的關(guān)系？曾見(jiàn)到有企業(yè)CTD格式申報(bào)42雜質(zhì)研究怎樣突出自己特色？中間體副產(chǎn)物A+B→C; C+D→EA+B→C A+B’→C’以合成路線為線索，順藤摸瓜列表自家工藝雜質(zhì)！理論分析與實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)相結(jié)合！！以終為始確定重點(diǎn)！?。?

物料殘留（反應(yīng)物，試劑，溶劑，催化劑）A（1mol）+B（2mol）→C（1mol）+B（1mol）雜質(zhì)研究怎樣突出自己特色？中間體A+B→C; C+D→E以合43列表自家產(chǎn)品中所有潛在雜質(zhì)并分析來(lái)龍去脈雜質(zhì)名稱

引入點(diǎn)

去除方式

監(jiān)控方法

預(yù)估量

屬性A

合成第一步

反應(yīng)完全TLC

檢測(cè)限

工藝雜質(zhì)過(guò)程中檢測(cè) 以下

起始原料B合成第一步水洗3次

uv

檢測(cè)限

工藝雜質(zhì)過(guò)程中檢測(cè) 以下 起始原料合成第二步完C 合成第一步

HPLC

工藝雜質(zhì)全 過(guò)程中檢測(cè) 中間體B' 合成第一步 反應(yīng)結(jié)束或水洗工藝雜質(zhì)原料引入C'Chp.和USP中的雜質(zhì)1合成第一步合成第二步HPLC過(guò)程中檢測(cè)+終產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中檢查工藝雜質(zhì)副產(chǎn)物/熱降解物“請(qǐng)結(jié)合本產(chǎn)品及起始原料工藝對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行補(bǔ)充研究…”列表自家產(chǎn)品中所有潛在雜質(zhì)并分析來(lái)龍去脈雜質(zhì)名稱 441找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……24說(shuō)不清依據(jù)緣由

5管不住外包項(xiàng)目

6311找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)245檢測(cè)的方法因雜而異檢測(cè)的方法因雜而異46質(zhì)量數(shù)過(guò)小，方法穩(wěn)定性不好過(guò)程中檢測(cè) 以下 起始原料針對(duì)元素雜質(zhì)采取ICPMS全質(zhì)量數(shù)掃描（69種）和35種元素半定量掃描-1B（Ir、Rh、Ru、Os）似是老生常談的雜質(zhì)研究“請(qǐng)使用專屬性更強(qiáng)靈敏度更高的方法對(duì)本品與原研的雜質(zhì)譜進(jìn)行重新研究…”F5=1-5foraNOAEL；關(guān)于PDE法與TTC法三唑侖/七氟烷/十一烯酸急毒數(shù)據(jù)，根據(jù)歐盟數(shù)據(jù)經(jīng)驗(yàn)，這個(gè)研究時(shí)間在3-6個(gè)月之間，因此，F(xiàn)3=5。液質(zhì)聯(lián)用分析, 獲取雜質(zhì)分子量及獲取制備中控方法全 過(guò)程中檢測(cè) 中間體雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或者影響藥物的穩(wěn)定性、療效，甚至對(duì)人體的健康有害的物質(zhì)5種測(cè)定甲磺酸酯分析方法比較TTC是在接受患者終生用藥的癌癥發(fā)生概率不超過(guò)10萬(wàn)分之一的基礎(chǔ)上，從高濃度下進(jìn)行的致癌性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)線性外推倒極低濃度得到的一個(gè)理論值。以超臨界流體作為流動(dòng)相。以超臨界流體作為流動(dòng)相。各國(guó)藥典列出的雜質(zhì)與你產(chǎn)品的關(guān)系？……210nm254nmR =試劑/催化劑DS =藥用輔料原研標(biāo)準(zhǔn)EP7.0USP34JP15雜質(zhì)譜研究梯度洗脫色譜條件………210nm254nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)梯度洗脫色譜條件………210nm254nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)梯度洗脫色譜條件……210nm254nm雙波長(zhǎng)檢測(cè)等度洗脫色譜條件………210nm檢測(cè)等度洗脫色譜條件………210nm單波長(zhǎng)檢測(cè)“請(qǐng)使用專屬性更強(qiáng)靈敏度更高的方法對(duì)本品與原研的雜質(zhì)譜進(jìn)行重新研究…”雜質(zhì)與主成分結(jié)構(gòu)性質(zhì)差異很大國(guó)外使用TLC補(bǔ)充檢測(cè)怎么判定你所用的方法不夠好？-根據(jù)文獻(xiàn)質(zhì)量數(shù)過(guò)小，方法穩(wěn)定性不好原研標(biāo)準(zhǔn)EP7.0USP34JP147怎么判定你所用的方法不夠好？-根據(jù)試驗(yàn)物質(zhì)平衡考察/靈敏度試驗(yàn)/專屬性試驗(yàn)有否漏檢雜質(zhì)

有否需校正雜質(zhì)

需否補(bǔ)充方法怎么判定你所用的方法不夠好？-根據(jù)試驗(yàn)48根據(jù)組成根據(jù)結(jié)構(gòu)根據(jù)性質(zhì)/需求/法規(guī)怎么判定你所用的方法不夠好？-綜合分析根據(jù)組成怎么判定你所用的方法不夠好？49舉一反三觸類旁通2015年版藥典注射劑通則整合后補(bǔ)充的這個(gè)項(xiàng)目給你什么提示？舉一反三觸類旁通2015年版藥典注射劑通則整合后補(bǔ)充的這個(gè)50通則中新增的儀器與技術(shù)通則0412電感耦合等離子體質(zhì)譜法重金屬及有害元素山楂照鉛、鎘、砷、汞、銅測(cè)定法（通則2321原子吸收分光光度法或電感耦合等離子體質(zhì)譜法）測(cè)定，鉛不得過(guò)5mg/kg;鎘不得過(guò)0.

3mg/kg;砷不得過(guò)2mg/kg；汞不得過(guò)

0.2mg/kg；銅不得過(guò)20mg/kg。通則中新增的儀器與技術(shù)通則0412電感耦合等離子體質(zhì)譜法重金51中藥注射劑已經(jīng)在精密測(cè)定按日服藥量限定金屬雜質(zhì)，連化妝品都開(kāi)始用ICP-MS檢測(cè)鉛汞砷鎘嘍！而化藥的靜脈注射劑重金屬就一直用目視判斷總量粗測(cè)？！重金屬雜質(zhì)監(jiān)控是不是該升升級(jí)啦？中藥注射劑已經(jīng)在精密測(cè)定按日服藥量限定金屬雜質(zhì)，連化妝品都52基因毒性雜質(zhì)優(yōu)質(zhì)推薦課件53新增通則中涉及的儀器與技術(shù)通則0531 超臨界流體色譜法supercriticalfluid

chromatography,SFC超臨界流體色譜儀很多部件類似髙效液相色譜儀以超臨界流體作為流動(dòng)相。分析速度比HPLC提高3-10倍，溶劑成本是HPLC的1/3-1/40，除可連接UV,DAD以及MS檢測(cè)器外還可以連接氣相的FID檢測(cè)器對(duì)手性化合物具有更好的分離能力新增通則中涉及的儀器與技術(shù)通則0531 超臨界流體色譜法su54新增通則中涉及的儀器與技術(shù)0532 臨界點(diǎn)色譜法Liquid Chromatography at Critical Condition，LCCC儀器同HPLC當(dāng)使用多孔填充材料作為固定相時(shí)，分子排阻色譜（Sizeexclusion chromatography，SEC）和相互作用色譜（Interaction chromatography，IC）的分離機(jī)制在分離聚合物時(shí)同時(shí)發(fā)生作用。在某個(gè)特殊色譜條件（固定相、流動(dòng)相的組成、溫度）下，存在兩種分離機(jī)制的臨界點(diǎn)，被稱為焓熵互補(bǔ)點(diǎn)或色譜臨界條件（critical

conditions）或臨界吸附點(diǎn)（criticaladsorption point，CAP）。是對(duì)聚合物進(jìn)行分離的一種色譜技術(shù)。新增通則中涉及的儀器與技術(shù)0532 臨界點(diǎn)色譜法55與時(shí)俱進(jìn)實(shí)事求是接軌國(guó)際體現(xiàn)特色整體著眼細(xì)節(jié)入手與時(shí)俱進(jìn)實(shí)事求是56TheCarcinogenicPotencyDatabase(CPDB)全 過(guò)程中檢測(cè) 中間體痕量物質(zhì)定量方法的要素異構(gòu)體和聚合物多晶型藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源NOEL值與致癌致畸沒(méi)有必然聯(lián)系限度=PDE/日最大劑量F5=1foraNOEL；基于雜質(zhì)分類、毒性評(píng)估、產(chǎn)品檢出情況制定方法學(xué)驗(yàn)證策略及產(chǎn)品控制策略新藥與仿制藥研究策略有顯著差異10)ICHQ3B(R2):新型藥品中的雜質(zhì)問(wèn)題(2006.四、未知雜質(zhì)分離鑒定案例分析當(dāng)研究沒(méi)有區(qū)分NOAEL和NOEL，且依據(jù)確定的PDE值選擇劑量時(shí)毒性不被認(rèn)為是“副作用”，則使用F5等 現(xiàn)在提倡配定量限或限度1/10溶液公式解釋：NOEL（NOAEL）數(shù)據(jù)如果能直接查到就不需要計(jì)算了，直接進(jìn)入到第2個(gè)公式；含量低，選擇性要求高，高靈敏度的儀器（GC-MS，取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%；ICHM7(R1):評(píng)估和控制藥物中DNA反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)以限制潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)(2017.現(xiàn)在改為配定量限或限度1/10溶液基于已有的有關(guān)物質(zhì)方法和溶劑殘留方法，增加供試品濃度或改變檢測(cè)器1找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不對(duì)研究方法寫不好質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……23

4說(shuō)不清依據(jù)緣由5管不住外包項(xiàng)目

6TheCarcinogenicPotencyDatab57質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)/方法與質(zhì)量的關(guān)系美女與旗袍肥肥與束身衣質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)/方法與質(zhì)量的關(guān)系美女與旗袍肥肥與束身衣58需要嚴(yán)控的毒性雜質(zhì)可以寬管的有效雜質(zhì)校正因子差異大的雜質(zhì)以及你想重點(diǎn)精密管控的雜質(zhì)！需要嚴(yán)控的毒性雜質(zhì)校正因子差異大的雜質(zhì)59結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果寫好標(biāo)準(zhǔn)溶劑選擇的依據(jù)＞8小時(shí)標(biāo)準(zhǔn)中一般不需提示＜4小時(shí)需提示“臨用現(xiàn)配”或“立即進(jìn)樣”＜2小時(shí)改換溶劑或明確給出“該溶液配制后應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)使用”結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果寫好標(biāo)準(zhǔn)溶劑選擇的依據(jù)60采用外標(biāo)法時(shí)，通常取各品種項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，RSD2.0在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中如果沒(méi)有明確規(guī)定，就是≤2.0注意：不要自己難為自己哦！應(yīng)給予微量物質(zhì)檢測(cè)較寬松的指標(biāo)！特別是在定量限附近時(shí)！要連續(xù)進(jìn)樣不能拼湊哦！重復(fù)性（RSD）的要求采用外標(biāo)法時(shí)，通常取各品種項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除61<有關(guān)物質(zhì)>原來(lái)大多藥典標(biāo)準(zhǔn)取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%；現(xiàn)在改為配定量限或限度1/10溶液取靈敏度溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的信噪比約為10（或大于10）；關(guān)于靈敏度測(cè)試<有關(guān)物質(zhì)>原來(lái)大多藥典標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于靈敏度測(cè)試62

<有關(guān)物質(zhì)>原來(lái)大多標(biāo)準(zhǔn)

取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%；

現(xiàn)在提倡配定量限或限度1/10溶液

取靈敏度溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的信噪比約為10（或大于10）；關(guān)于靈敏度測(cè)試 <有關(guān)物質(zhì)>原來(lái)大多標(biāo)準(zhǔn)關(guān)于靈敏度測(cè)試631找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)似是老生常談的雜質(zhì)研究-還有哪些困惑與問(wèn)題？看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……234說(shuō)不清依據(jù)緣由5管不住外包項(xiàng)目

61找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)似是老生常談的雜64優(yōu)秀的申報(bào)資料-是能成功傳遞大量信息的研發(fā)思路研發(fā) 實(shí)驗(yàn)水平 方法實(shí)驗(yàn)結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果研發(fā)理念優(yōu)秀的申報(bào)資料-是能成功傳遞大量信息的研發(fā)研發(fā) 實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)論65缺依據(jù)少過(guò)程無(wú)數(shù)據(jù)缺主觀臆斷別問(wèn)我根據(jù)什么常見(jiàn)問(wèn)題-錯(cuò)缺淺亂亂雜散無(wú)章沒(méi)鏈接沒(méi)邏輯慢慢品來(lái)細(xì)細(xì)找東一句西一行考驗(yàn)?zāi)銣\蜻蜓點(diǎn)水想說(shuō)信你很困難

誰(shuí)說(shuō)我沒(méi)跟你講只能發(fā)補(bǔ)問(wèn)明白點(diǎn)兩句藏八句讓人猜缺依據(jù)缺別問(wèn)我根據(jù)什么常見(jiàn)問(wèn)題-錯(cuò)缺淺亂亂淺蜻蜓點(diǎn)水想說(shuō)信你66HowWhyWhereHowmuch雜質(zhì)研究要解決的問(wèn)題絕不僅限于雜質(zhì)檢測(cè)！What如何檢測(cè)與監(jiān)控？為什么除不掉/能除掉？怎么引入的？雜質(zhì)都是啥？限度訂多少？HowWhyWhereHowmuch雜質(zhì)研究要解決的問(wèn)題67創(chuàng)建思路摸索過(guò)程細(xì)節(jié)考究新方法新建立方法必有內(nèi)容創(chuàng)建思路摸索過(guò)程細(xì)節(jié)考究新方法新建立方法必有內(nèi)容68變更前缺點(diǎn)-必要性變更依據(jù)變更的驗(yàn)證-正確性前后的比較-優(yōu)越性方法與限度變更時(shí)以下內(nèi)容提供了嗎？變更前缺點(diǎn)-必要性方法與限度變更時(shí)69雜質(zhì)譜比較四方面結(jié)論你給沒(méi)給？雜質(zhì)組成是否一致有否新增雜質(zhì)能否橋接安全性資料可否照搬方法與限度雜質(zhì)譜比較四方面結(jié)論你給沒(méi)給？雜質(zhì)組成是否一致70生產(chǎn)質(zhì)控水平-講難度企業(yè)成本利益-算己賬安全有效與科學(xué)合理性呢？限度制訂說(shuō)明常見(jiàn)問(wèn)題-強(qiáng)調(diào)困難不講科學(xué)生產(chǎn)質(zhì)控水平-講難度限度制訂說(shuō)明常見(jiàn)問(wèn)題-強(qiáng)調(diào)困難不講科學(xué)711找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)似是老生常談的雜質(zhì)研究-還有哪些困惑與問(wèn)題？看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……23

034說(shuō)不清依據(jù)緣由5管不住外包項(xiàng)目

61找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)似是老生常談的雜72實(shí)驗(yàn)記錄-不完備實(shí)驗(yàn)圖譜-無(wú)解析雜質(zhì)對(duì)照-缺工藝實(shí)驗(yàn)記錄-不完備731找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)似是老生常談的雜質(zhì)研究-還有哪些困惑與問(wèn)題？看不懂發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)……23034說(shuō)不清依據(jù)緣由5管不住外包項(xiàng)目

61找不準(zhǔn)研究對(duì)象選不好研究方法寫不細(xì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)似是老生常談的雜74高比例發(fā)補(bǔ)的幾條意見(jiàn)你有木有接到過(guò)這類令人心塞的發(fā)補(bǔ)通知？

“請(qǐng)結(jié)合本產(chǎn)品及起始原料工藝對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行補(bǔ)充研究…”“請(qǐng)補(bǔ)充提供或說(shuō)明雜質(zhì)檢查方法與限度修改(制訂)的依據(jù)…”“請(qǐng)使用專屬性更強(qiáng)靈敏度更高的方法對(duì)本品與原研的雜質(zhì)譜進(jìn)行重新研究…”發(fā)補(bǔ)意見(jiàn)你都該怎么理解如何回復(fù)？高比例發(fā)補(bǔ)的幾條意見(jiàn)你有木有接到過(guò)這類令人心塞的發(fā)補(bǔ)通知？75常見(jiàn)物質(zhì)的PDE數(shù)值舉例針對(duì)揮發(fā)及半揮發(fā)雜質(zhì)采用GCMS進(jìn)行全質(zhì)量數(shù)掃描（譜庫(kù)匹配）及半定量分析（SIM模式）異構(gòu)體和聚合物多晶型現(xiàn)在改為配定量限或限度1/10溶液2000是一個(gè)安全系數(shù)。PDE(ug/day)路線1路線2路線3以超臨界流體作為流動(dòng)相。樣品基質(zhì)復(fù)雜，需要合適的前處理方法進(jìn)行分離，純化，富集3-氯-1,2-丙二醇PDE控制（存在報(bào)道）限度=PDE/日最大劑量分析方法核心：準(zhǔn)確度、耐用性制劑樣品提取有效成分，利用制備液相分離雜質(zhì)在所有情況下，對(duì)研究時(shí)間介于上述時(shí)間點(diǎn)之間的研究，應(yīng)用較大的系數(shù)，如對(duì)嚙齒類動(dòng)物９個(gè)月毒性研究，其系數(shù)用２。通則0531 超臨界流體色譜法似是老生常談的雜質(zhì)研究5ug，那么患者因服藥導(dǎo)致癌癥發(fā)生的額外風(fēng)險(xiǎn)可以忽略不記。結(jié)構(gòu)鑒定（TOF-MS、超低溫探頭600M核磁）怎么判定你所用的方法不夠好？謝謝常見(jiàn)物質(zhì)的PDE數(shù)值舉例謝謝76基因毒性雜質(zhì)基因毒性雜質(zhì)77一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略二、痕量雜質(zhì)定量分析方法的建立提

綱三、案例分析與討論四、未知雜質(zhì)分離鑒定案例分析一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略二、痕量雜質(zhì)定量分析方法的建立78一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略1.藥品雜質(zhì)研究的法規(guī)依據(jù)2.藥品雜質(zhì)評(píng)估一般步驟3.藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析4.藥品雜質(zhì)毒性判別方法5.藥品雜質(zhì)研究限度策略6.藥品雜質(zhì)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的分析方法建立策略一、藥品雜質(zhì)研究評(píng)估策略796雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或者影響藥物的穩(wěn)定性、療效，甚至對(duì)人體的健康有害的物質(zhì)產(chǎn)品質(zhì)量重點(diǎn)關(guān)注雜質(zhì)：工藝雜質(zhì)、

降解雜質(zhì)安全性重點(diǎn)關(guān)注高毒性雜質(zhì)：致癌、致突變類雜雜質(zhì)中國(guó)藥典、美國(guó)藥典、歐洲藥典、日本藥典等各國(guó)藥典ICH

Q3A(R2):

新型原料藥中的雜質(zhì)問(wèn)題

(2006.10)ICH

Q3B(R2):

新型藥品中的雜質(zhì)問(wèn)題

(2006.06)ICH

Q3C(R6):雜質(zhì)：殘留溶劑的指導(dǎo)原則

(2016.10)ICH

Q3D:元素雜質(zhì)的指導(dǎo)原則

(2014.12)ICH

Q11:原料藥開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)（化學(xué)實(shí)體和生物技術(shù)生物實(shí)體藥物）(2012.05)ICH

M7(R1):評(píng)估和控制藥物中DNA

反應(yīng)性（致突變）雜質(zhì)以限制潛在的致癌風(fēng)險(xiǎn)

(2017.03)化學(xué)藥品注射劑與包裝材料相容性研究技術(shù)指導(dǎo)原則（塑料、玻璃、彈性體密封件）雜質(zhì)研究相關(guān)法規(guī)1.藥品雜質(zhì)研究的法規(guī)依據(jù)重點(diǎn)關(guān)注：法規(guī)適用范圍6雜質(zhì)是指藥物中存在的無(wú)治療作用或者影響藥物的穩(wěn)定性、療效，802.藥品雜質(zhì)評(píng)估一般步驟①雜質(zhì)引入方式③限度制定已有研究的文獻(xiàn)報(bào)道警示結(jié)構(gòu)提示計(jì)算機(jī)模擬毒性評(píng)估體外點(diǎn)突變和染色體畸變?cè)囼?yàn)動(dòng)物毒性評(píng)估起始物料及其雜質(zhì)溶劑及其雜質(zhì)中間體反應(yīng)副產(chǎn)物輔料雜質(zhì)降解雜質(zhì)生產(chǎn)設(shè)備引入包裝材料引入環(huán)境污染引入一般雜質(zhì)致癌致畸雜質(zhì)PDE控制（存在報(bào)道）PDE控制

（存在報(bào)道）TTC控制ICHQ3

A/B/C/D②雜質(zhì)毒性分類判定致癌、致突變2.藥品雜質(zhì)評(píng)估一般步驟①③已有研究的文獻(xiàn)報(bào)道起始物料及其雜81關(guān)于PDE法與TTC法PDE法適用于有閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)；已有證據(jù)表明，該物質(zhì)只有在超過(guò)一定限度時(shí)才會(huì)產(chǎn)生遺傳毒性。雜質(zhì)安全性限度的確定可以參照殘留溶劑限度的計(jì)算方法，根據(jù)相關(guān)動(dòng)物的無(wú)可見(jiàn)效應(yīng)劑量（No-ObservedEffectLevel）計(jì)算其可接受的日暴露量（PermissibleDailyExposure）,再根據(jù)藥品的最大日劑量計(jì)算出雜質(zhì)的接受限度。關(guān)于PDE法與TTC法PDE法82關(guān)于PDE法與TTC法TTC法無(wú)閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)；引入了毒理學(xué)關(guān)注的閾值（ThresholdofToxicologicalConcern）。TTC是在接受患者終生用藥的癌癥發(fā)生概率不超過(guò)10萬(wàn)分之一的基礎(chǔ)上，從高濃度下進(jìn)行的致癌性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)線性外推倒極低濃度得到的一個(gè)理論值。對(duì)于無(wú)閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)，如果每日攝入量低于1.5ug，那么患者因服藥導(dǎo)致癌癥發(fā)生的額外風(fēng)險(xiǎn)可以忽略不記。關(guān)于PDE法與TTC法TTC法838按屬性有機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì)按來(lái)源工藝雜質(zhì)降解雜質(zhì)3.藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析路線1路線2路線3溶劑1，催化劑A+B C(A’) 時(shí)間、溫度、pH… (C’)SI

溶劑雜質(zhì)溶劑2，試劑RI

試劑雜質(zhì)DS(DS’)(D1,D2…)(BP1,BP2…)輔料制劑(D3,D4,E11,E12,…)容器中的浸出物A，B=起始物料C =中間體R =試劑/催化劑DS =藥用輔料A’ =潛在的起始物料雜質(zhì)產(chǎn)生C’和DS’BP =反應(yīng)副產(chǎn)物D =降解產(chǎn)物SIRIIE=溶劑雜質(zhì)=試劑雜質(zhì)=輔料雜質(zhì)EI

輔料雜質(zhì)8按屬性有機(jī)雜質(zhì)無(wú)機(jī)雜質(zhì)按來(lái)源工藝雜質(zhì)降解雜質(zhì)3.藥品雜質(zhì)來(lái)849藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析-容器中的浸出物來(lái)源9藥品雜質(zhì)來(lái)源途徑分析-容器中的浸出物來(lái)源8510藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源常見(jiàn)報(bào)道高毒性雜質(zhì)具有警示結(jié)構(gòu)雜質(zhì)10藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源常見(jiàn)報(bào)道高毒性雜質(zhì)8611藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)毒理學(xué)計(jì)算軟件各類毒理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)已有文獻(xiàn)報(bào)道獲取TD50、NOEL、ADI、PMTDINOEL值與致癌致畸沒(méi)有必然聯(lián)系查詢的毒性研究文獻(xiàn)全面性以及毒性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的解讀需要專家的確認(rèn)TheCarcinogenicPotencyDatabase

(CPDB)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織食品添加劑專家委員會(huì)評(píng)價(jià)（JECFA）加利福尼亞州65號(hào)提案(安全飲用水和有毒物質(zhì)強(qiáng)制法令)歐洲化學(xué)品管理局（ECHA）11藥物雜質(zhì)致癌致畸信息獲取來(lái)源毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)TheCarci8712常見(jiàn)物質(zhì)的PDE數(shù)值舉例在檢索劑量數(shù)據(jù)前需要全面檢索該物質(zhì)是否有致癌致畸性，例如氯乙酸CPDB數(shù)據(jù)TD50顯示陰性鹽酸鹽的藥物在重結(jié)晶過(guò)程中的接觸醇類容易產(chǎn)生氯代烷烴，單一鹵代物在M7中有36ug/day指導(dǎo)規(guī)則關(guān)注環(huán)氧丙醇、環(huán)氧氯丙烷、3-氯-1,2-丙二醇三者之間的轉(zhuǎn)化關(guān)系毒性數(shù)據(jù)會(huì)被不斷的更新，更多的研究數(shù)據(jù)會(huì)被不斷的上傳NameCASPDE(ug/day)Note氯甲烷74-87-31361ICH

M7氯乙烷75-00-31810ICH

M7氯異丙烷75-29-655500ECHA氯乙酸79-11-83000ECHA/CPDB甲醛50-00-01.35or

10000CPDB/ICH

M7乙醛75-07-0153CPDB丙二醛542-78-9122CPDB（鈉鹽）環(huán)氧丙醇556-52-54ICH

M7環(huán)氧氯丙烷106-89-82.96CPDB（TD50）3-氯-1,2-丙二醇96-24-2PMTDI

：4ug/kg/dayWHO/FAO1,3-二氯-2-丙醇96-23-110NTP12常見(jiàn)物質(zhì)的PDE數(shù)值舉例在檢索劑量數(shù)據(jù)前需要全面檢索該物8813最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度界定限度≤2g0.05%0.10%或1.0mg（取最小值）0.15%或1.0mg（取最小值）>2g0.03%0.05%0.05%報(bào)告限度最大日劑量≤1g>1g限

度0.1%0.05%最大日劑量<1mg1～10mg>10mg

～2g>2g鑒定限度限

度1.0%或5ug(取最小值)0.5%或20ug(取最小值)0.2%或2mg(取最小值)0.10%最大日劑量<10mg10～100mg>100mg～2g>2g界定限度限

度1.0%或50ug

(取最小值)0.5%或200ug(取最小值)0.2%或3mg(取最小值)0.15%原料藥Q3A藥物雜質(zhì)的控制限度計(jì)算（）制劑Q3B新藥與仿制藥研究策略有顯著差異限度=PDE/日最大劑量PDE=TD50*體重/50000PDE=NOEL*體重/(F1*F2*F3*F4*F5)限度=TTC/日最大劑量由ppm推算NOEL

（ICH

Q3C）由LD50推算NOEL其他ICHQ3&M713最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度界定限度≤2g0.05%0.18914PDE法計(jì)算限度實(shí)例(以三乙胺濃度限度計(jì)算為例)

（錯(cuò)誤案例解析）公式1.

NOEL=LD50×70/2000（該公式來(lái)源于EMEA關(guān)于清潔驗(yàn)證的指導(dǎo)原則）公式解釋：NOEL（NOAEL）數(shù)據(jù)如果能直接查到就不需要計(jì)算了，直接進(jìn)入到第2個(gè)公式；其中60是指的人體平均體重為60Kg；2000是一個(gè)安全系數(shù)。查詢美國(guó)TOXNET數(shù)據(jù)庫(kù)，大鼠經(jīng)口的LD50=460mg/Kg，則NOEL=460×70/2000=16.1mg/Kg/day

（錯(cuò)誤推算）PDE=NOEL（mg/Kg/day）×Weight

Adjustment（Kg）/(F1×F2×F3×F4×F5)PDE=16.1

mg/Kg/day×50Kg/(5×10×5×1×1)=3.22mg/day濃度限度（％）＝PDE（mg/day）/（1000×dose（g/day））×100％對(duì)于原料藥而言，dose均定為10g/day濃度限度（％）=3.22/(1000×10)

×100％=0.0322%（322ppm）F1：種屬之間的換算系數(shù)，代表由物種差異推導(dǎo)的變異系數(shù)，與體表面積相關(guān)F1=5:從大鼠劑量推斷人用劑量的系數(shù)；F1=12:從小鼠劑量推斷人用劑量的系數(shù)F1=2:從狗劑量推斷人用劑量的系數(shù)；F1=2.5:從兔劑量推斷人用劑量的系數(shù)F1=3:從猴子劑量推斷人用劑量的系數(shù)；F1=10:從其他動(dòng)物劑量推斷人用劑量的系數(shù)對(duì)于三乙胺，上述LD50是以大鼠為試驗(yàn)得來(lái)的數(shù)據(jù)，所以F1=5。F2：代表個(gè)體間的變異系數(shù)，其值為F2=10；F3：為短期接觸急性毒性研究的可變系數(shù)：F3=1，研究時(shí)間至少為動(dòng)物壽命的一半（鼠、兔1年，貓、狗、猴7年）F3=1，器官形成的整個(gè)過(guò)程的生殖研究F3=2，對(duì)嚙齒類動(dòng)物６個(gè)月研究或非嚙齒類動(dòng)物3-5年的研究F3=5，對(duì)嚙齒類動(dòng)物３個(gè)月研究或非嚙齒類動(dòng)物２年的研究F3=10，更短時(shí)間的研究。在所有情況下，對(duì)研究時(shí)間介于上述時(shí)間點(diǎn)之間的研究，應(yīng)用較大的系數(shù)，如對(duì)嚙齒類動(dòng)物９個(gè)月毒性研究，其系數(shù)用２。以上大鼠經(jīng)口的LD50值為急毒數(shù)據(jù)，根據(jù)歐盟數(shù)據(jù)經(jīng)驗(yàn)，這個(gè)研究時(shí)間在3-6個(gè)月之間，因此，F(xiàn)3=5。F4：產(chǎn)生嚴(yán)重毒性情況的系數(shù)，如非遺傳致癌毒性、神經(jīng)毒性或致畸性，研究生殖毒性時(shí)，用以下系數(shù)：F4=1

與母體毒性有關(guān)的胎兒毒性;

F4=５

無(wú)母體毒性的胎兒毒性F4=５

受母體毒性影響的致畸反應(yīng);

F4=10

無(wú)母體毒性影響的致畸反應(yīng)因?yàn)槿野窞榉菄?yán)重毒性，所以這里F4=1。F5：一個(gè)可變系數(shù)，用在無(wú)毒性反應(yīng)的劑量（NOEL）值時(shí)F5=1foraNOEL；F5=1-5foraNOAEL；F5=5-10foraLOEL；F5=10foraLowest-observed-adverse-effectlevel

(LOAEL)因?yàn)镹OEL已經(jīng)確定，所以這里F5=1。當(dāng)研究沒(méi)有區(qū)分NOAEL和NOEL，且依據(jù)確定的PDE值選擇劑量時(shí)毒性不被認(rèn)為是“副作用”，則使用F5等于1，NOAEL用于多數(shù)元素的口服PDE值設(shè)定。三乙胺在ICH

Q

3C中屬于三類溶劑，限度：

0.514PDE法計(jì)算限度實(shí)例(以三乙胺濃度限度計(jì)算為例)（錯(cuò)誤9015由LD50推算PDE值建議《原料藥工廠中清潔驗(yàn)證指南》一文中的NOEL

的單位是mg/天，而不是上文公式中的mg/kg/天LD50計(jì)算NOEL的公式：NOEL=LD50×70/2000，公式中的70是歐洲人的評(píng)價(jià)體重如果需要用LD50計(jì)算NOEL用于計(jì)算PDE，推薦公式應(yīng)該是NOEL=LD50/2000

（見(jiàn)參考文獻(xiàn)）不推薦在基因毒物質(zhì)研究中使用推薦在包材研究的劑量計(jì)算中使用參考文獻(xiàn)：

D.W.

Layton;B.J.

Mallon;D.H.

Rosenblatt;M.J.

Small

Deriving

allowable

daily

intakes

for

systemic

toxicants

lacking

chronic

toxicity

data.RegulatoryToxicology&Pharmacology,1987,7(1)

:96-11215由LD50推算PDE值建議《原料藥工廠中清潔驗(yàn)證指南》一91藥品雜質(zhì)引入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估常見(jiàn)已知雜質(zhì)引入途徑起始物料及已知雜質(zhì)中間體試劑&溶劑&催化劑反應(yīng)副產(chǎn)物、降解雜質(zhì)常見(jiàn)未知雜質(zhì)引入途徑起始物料引入未知雜質(zhì)、起始物料雜質(zhì)產(chǎn)生的雜質(zhì)、生產(chǎn)設(shè)備引入的雜質(zhì)包材浸出物雜質(zhì)環(huán)境引入雜質(zhì)（生產(chǎn)用水等）需要重點(diǎn)做風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工作藥品雜質(zhì)引入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估常見(jiàn)已知雜質(zhì)引入途徑常見(jiàn)未知雜質(zhì)引入途徑92關(guān)于PDE法與TTC法管不住外包項(xiàng)目 6氯代丙醇響應(yīng)低，耐用性差當(dāng)使用多孔填充材料作為固定相時(shí)，分子排阻色譜（Sizeexclusion chromatography，SEC）和相互作用色譜潛在及未知雜質(zhì)研究策略討論5種測(cè)定甲磺酸酯分析方法比較LD50計(jì)算NOEL的公式：NOEL=LD50×70/2000，公式中的70是歐洲人的評(píng)價(jià)體重具有合適的樣品制備方式：直接溶解、溶解后沉淀、液液萃取、固體液萃取似是老生常談的雜質(zhì)研究對(duì)于無(wú)閾值效應(yīng)的遺傳毒性雜質(zhì)，如果每日攝入量低于1.“請(qǐng)補(bǔ)充提供或說(shuō)明雜質(zhì)檢查方法與限度修改(制訂)的依據(jù)…”雜質(zhì)研究≠有關(guān)物質(zhì)檢查！ICHQ3D:元素雜質(zhì)的指導(dǎo)原則(2014.通則0531 超臨界流體色譜法《原料藥工廠中清潔驗(yàn)證指南》一文中的NOEL的單位是mg/天，而不是上文公式中的“請(qǐng)結(jié)合本產(chǎn)品及起始原料工藝對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行補(bǔ)充研究…”PDE控制（存在報(bào)道）歐洲化學(xué)品管理局（ECHA）符合資質(zhì)的對(duì)照品：適合包裝、有COA安全性重點(diǎn)關(guān)注高毒性雜質(zhì)：致癌、致突變類雜雜質(zhì)17已知雜質(zhì)研究策略討論結(jié)構(gòu)已知的雜質(zhì)研究：起始物料及其已知雜質(zhì)、中間體、試劑、反應(yīng)副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物根據(jù)工藝路線梳理出產(chǎn)品待研究的雜質(zhì)清單進(jìn)行毒性雜質(zhì)評(píng)估分類：文獻(xiàn)報(bào)道、軟件預(yù)測(cè)根據(jù)各國(guó)藥典及ICH

QA\B\C規(guī)則分別建立有關(guān)物質(zhì)和溶劑殘留方法建立滿足專屬性和靈敏度的方法（LOQ<30%限度濃度），收集多批次API中目標(biāo)雜質(zhì)含量基于已有的有關(guān)物質(zhì)方法和溶劑殘留方法，增加供試品濃度或改變檢測(cè)器基于雜質(zhì)檢出情況制定雜質(zhì)添加實(shí)驗(yàn)，考察工藝的雜質(zhì)的去除能力基于雜質(zhì)分類、毒性評(píng)估、產(chǎn)品檢出情況制定方法學(xué)驗(yàn)證策略及產(chǎn)品控制策略關(guān)于PDE法與TTC法17已知雜質(zhì)研究策略討論結(jié)構(gòu)已知的雜質(zhì)9318潛在及未知雜質(zhì)研究策略討論潛在及未知雜質(zhì)來(lái)源：起始物料引入未知雜質(zhì)、溶劑中雜質(zhì)、包材浸出物雜質(zhì)、輔料引入雜質(zhì)、生產(chǎn)設(shè)備引入根據(jù)供應(yīng)商提供的工藝路線梳理雜質(zhì)清單及潛在雜質(zhì)，分別對(duì)元素雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)進(jìn)行分類研究針對(duì)元素雜質(zhì)采取ICPMS全質(zhì)量數(shù)掃描（69種）和

35種元素半定量掃描針對(duì)揮發(fā)及半揮發(fā)雜質(zhì)采用GCMS進(jìn)行全質(zhì)量數(shù)掃描（譜庫(kù)匹配）及半定量分析（SIM模式）針對(duì)不揮發(fā)雜質(zhì)采用LCMS

或

LC-MSMS進(jìn)行全質(zhì)量數(shù)掃描及半定量分析（SIM模式）購(gòu)買疑似或近似雜質(zhì)進(jìn)行分析比對(duì)，確定研究目標(biāo)根據(jù)雜質(zhì)結(jié)構(gòu)評(píng)估雜質(zhì)的毒性，確定雜質(zhì)的研究限度對(duì)比多批次中起始物料及其關(guān)聯(lián)的原料藥中雜質(zhì)的檢出情況根據(jù)雜質(zhì)的來(lái)源風(fēng)險(xiǎn)及檢出情況，制定雜質(zhì)的控制策略18潛在及未知雜質(zhì)研究策略討論潛在及未知雜質(zhì)來(lái)源：起始物料引94二、痕量雜質(zhì)分析方法的建立1.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)2.基于結(jié)構(gòu)特性的分析方法決策思路3.痕量分析方法建立步驟4.痕量物質(zhì)定量方法的要素二、痕量雜質(zhì)分析方法的建立1.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)951.痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)與目標(biāo)痕量雜質(zhì)分析的挑戰(zhàn)含量低，選擇性要求高，高靈敏度的儀器（GC-MS，LC-MSMS、ICPMS

等）雜質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性和差異大，需要多種分析手段和方法樣品基質(zhì)復(fù)雜，需要合適的前處理方法進(jìn)行分離，純化，富集有些雜質(zhì)具有“