臨床微生物學檢驗

臨床微生物學檢驗一、痰培養(yǎng)1．英文或縮寫：BacterialCultureofSputum2．標本采集及注意事項：患者清晨起床，用清水反復漱口后，用力咳深部第一口濃痰置無菌容器中盡快送檢。痰量極少者可用45℃10％氯化鈉霧化吸入導痰。直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。平吸引痰液。對重癥、難治、或伴免疫抑制、或疑似厭氧菌引起的醫(yī)院內肺部感染可采用環(huán)甲膜穿刺經氣管吸引(TTA)、經胸壁穿刺肺吸引(LA)、經纖維支氣管鏡或人工氣道作防污染雙套管毛刷(PSB)或防污染支氣管肺泡灌洗(PBAL)采集無口咽部菌群污染的痰液，進行精確的感染病原學診斷。管分泌物，粘在棉拭子上，取出檢查。厭氧菌培養(yǎng)通過氣管穿刺取痰液，采集后立即排出空氣，插入無菌的橡皮塞送檢。痰標本不能及時送檢者，可暫存4℃度生長，而肺炎球菌、葡萄球菌和流感桿菌檢出率則明顯下降。3天報告結果。正常參考值：正常人只有正常菌群生長，且正常情況下不致病。臨床意義：呼吸道的防御功能，因而招致“條件致病菌”，主要是流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌的繼發(fā)感染。肺膿腫是由多種化膿性細菌引起的，亦可由厭氧菌引起。這些細菌是正常人口咽部常居菌，當人體抵抗力下降時，趁虛而入造成肺膿腫。痰中常見致病菌革蘭陽性菌：肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、金共色葡萄球菌、厭氧性球菌、炭疽桿菌、結核分枝桿菌、白喉棒狀桿菌、假絲酵母菌、奴卡菌。革蘭陰性菌：奈瑟菌屬細菌、流感嗜血桿菌、大腸埃希菌、產氣腸桿菌、沙雷菌、肺炎二、中段尿培養(yǎng)12．標本采集及注意事項：嚴格按照以下方法操作，留取尿液并裝入無菌容器送檢，同時應遵守用藥前檢驗的原則，以提高陽性檢出率。尿液標本中不得加防腐劑及消毒劑。因標本易受污染，女性患者先用肥皂水沖洗外陰部及尿道口后再用清水沖洗，擦干，爾后留取中段尿；男性須翻轉包皮沖洗，擦干后留取中段尿。讓患者排尿，棄去前段尿，留取中段尿約10ml于無菌的試管中，立即加蓋送檢。通常應取晨起第一次尿送檢，尿標本留取后，要立即送檢或放4℃冰箱。因擱置時間長，尿中病原菌可在室溫中增殖，影響細菌計數(shù)。10ml3次尿，如果輸尿管菌數(shù)比對照尿菌數(shù)多或第3次尿中菌數(shù)比第1次多，該菌尿可能來自腎臟。反之，如果第1次尿菌數(shù)多于第3次尿中菌數(shù)，則可能來自膀胱。尿液檢查結核分枝桿菌時，可用潔凈容器，留取24小時的尿液，取其沉渣部分10-15ml送檢。有的病人由于菌量較少，不易查出，因此，檢查不出結核桿菌時，也不應該否定結核，在檢驗中要注意區(qū)別污染的恥垢分枝桿菌。3天報告結果。正常參考值：正常尿液應無菌。臨床意義：尿路結石時多發(fā)生變形桿菌感染，尿路手術及插管后繼發(fā)尿路感染多為銅綠假單胞菌。采集中段尿時，一般認為菌數(shù)在105/ml以上，即可認為是尿路感染的病原菌。尿路感染而菌數(shù)又少于105CFU/ml，見于以下情況：104/ml。pH5.0以下或pH8.5以上，則細菌發(fā)育受阻。尿頻時，膀胱內細菌停留時間短，也會使菌數(shù)少。目前認為由革蘭陰性菌引起的菌尿，其菌數(shù)均可達到105/ml以上，而球菌引起的菌尿，其菌數(shù)達到104/ml105/ml采尿時外陰部消毒劑混入尿中。尿中常見致病菌：革蘭陽性菌：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腸球菌、厭氧性鏈球菌、結核分枝桿菌革蘭陰性菌：淋病奈菌、傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產氣腸桿菌、變形桿菌、普羅威登斯菌、銅綠假單胞菌、其它非發(fā)酵菌、布魯菌、沙雷菌、陰道加德納菌等。三、血液及骨髓培養(yǎng)1．英文或縮寫：BacterialExaminationofBloodandBoneMarrow2．標本采集及注意事項：無菌操作下抽取靜脈或動脈血液5-10ml(嬰幼兒1-5ml)或骨髓1-2ml，立即注入血培養(yǎng)瓶中，輕搖混勻后送檢，不可冰箱保存。最佳取血時間是患者發(fā)熱初期1-2天內或發(fā)熱高峰時。集標本。傷寒感染時骨髓培養(yǎng)較血液培養(yǎng)陽性率高，并以病程第1周內陽性檢出率最高，為了提高陽性檢出率，建議增加采樣頻率并且多部位采樣。3結果3天報告，陰性結果7天報告。4．正常參考值：正常人血液及骨髓中無細菌、真菌生長。5．臨床意義：革蘭陰性桿菌和部分球菌。病原菌的種類與細菌入侵途徑及原發(fā)病灶有一定關系。培養(yǎng)亦可獲陽性結果。癰或膿腫繼發(fā)的敗血癥，多為金黃色葡萄球菌和溶血性鏈球菌所致。膽道、尿路、胃腸道炎癥粘膜損傷引起的敗血癥多見于大腸埃希菌，其次是變形桿菌、產氣腸桿菌、產堿桿菌等。癥兩種以上細菌和真菌同時交替引起的敗血癥亦有所見。對臨床癥狀酷似敗血癥而血培養(yǎng)多為陰性者，應注意L型細菌、真菌及病毒感染的可能性。四、腦脊液培養(yǎng)1．英文或縮寫：BacterialCultureofCSF2．標本采集及注意事項：采集標本最好在應用抗生素治療前進行。無菌手續(xù)抽取腦脊液2-5ml置無菌試管立即送檢，同時注意保溫，不可置冰箱保存。流行性腦脊髓膜炎為法定傳染病，一旦檢出腦膜炎奈瑟菌，必須按規(guī)定報告。這不僅關系到疾病的診治，而且更重要的在于控制傳染源，防止該病的傳播和流行。流感嗜血桿菌腦膜炎多見于6歲以下的幼兒，以B型多見。該菌能產生35天報告。正常參考值：正常人腦脊液中無細菌、真菌生長。臨床意義：腦膜炎相鑒別。引起化膿性腦膜炎最常見的細菌為腦膜炎奈瑟菌，其次肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌及大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌亦可見。B等，常使細菌直接進入髓腔而引起銅綠假單胞菌腦膜炎。腦膿瘍易繼發(fā)厭氧菌性腦膜炎。結核性腦膜炎常見于1-5歲的兒童，早期患者腦脊液中只有少數(shù)的結核分枝桿菌，采其沉淀物或蛋白膜涂片檢查才能檢出，涂片檢出率往往不高，細菌培養(yǎng)一般需4-6周才有結果，時間又較長。目前應用PCR技術能早期做出診斷。3-4五、穿刺液培養(yǎng)1．英文或縮寫：BacterialCultureofPunctureFluid2．標本采集及注意事項：關節(jié)腔標本采集應在患者用藥之前或停藥1-2天后進行。對疑有淋球菌性關節(jié)炎患者的關節(jié)液，采集后應立即送檢。3．檢測及報告時間：每天檢測，陽性結果3天報告，陰性結果5天報告。正常參考值：無細菌、真菌生長。臨床意義：菌培養(yǎng)和動物接種才能確診。胸膜炎以感染為多見，其中以結核性胸膜炎為最常見，其余大多為大腸埃希菌、糞腸球菌。關節(jié)囊內發(fā)生炎癥滲出可能為淋病奈瑟菌、葡萄球菌及鏈球菌感染所致。六、膿汁及創(chuàng)傷分泌物培養(yǎng)1．英文或縮寫：BacterialCultureofPyogenic2．標本采集及注意事項：封閉性膿腫：在患者病灶局部的皮膚或粘膜表面，先用碘酒消毒，再用75%酒精脫碘，以無菌干燥注射器穿刺抽取膿汁及分泌物送檢。面分泌物擦去，取深部分泌物送檢。如為瘺管亦可在無菌操作下取組織碎片。大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物：由于創(chuàng)面的部位不同，細菌種類也不同，故應用滅菌棉拭子采集多部位創(chuàng)面的膿汁或分泌物，置于滅菌試管中送檢。出血創(chuàng)傷敷用藥物在2小時內及燒傷在12小時內不應采集標本，否則獲得陽性結果的機會減少。采集標本以后及時檢查，否則應立即置于冰箱中保存，以防雜菌污染。采集標本時注意觀察膿汁及分泌物的性狀、色澤及有無惡臭味等，為培養(yǎng)和鑒定提供參考依據(jù)。天報告結果。正常參考值：正常人只有正常菌群生長，正常情況下不致病。臨床意義：從膿汁和創(chuàng)面分泌物中能夠查出的細菌種類很多。開放性病灶標本中常能分離消化球菌、梭菌、類桿菌、腸球菌及其他厭氧革蘭陰性桿菌等。某些化膿性感染常為多種細菌引起的混合感染，其中以大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌等細菌為多見。葡萄球菌、鏈球菌是引起毛囊炎、癤、癰、甲溝炎、乳腺炎和創(chuàng)傷感染的常見病原菌。破傷風桿菌引起破傷風。菌種類不盡相同，故應多部位檢查。七、咽拭子、鼻咽拭子培養(yǎng)1．英文或縮寫：SwabsCultureof2．標本采集及注意事項：建議在抗生素治療前檢驗，以提高陽性檢出率。采集標本時，患者先用清水漱口，以清晨起床后采集為宜，由醫(yī)師施行，用無菌棉拭子反復涂抹患處，置無菌試管中立即送檢，防止干燥。.懷疑百日咳鮑特菌時，可從鼻咽部采集標本，或采用咳碟法：即用表面涂有青霉素的百日咳鮑特菌培養(yǎng)基，在患者陣咳時，距口腔15cm處打開平皿，讓其對著培養(yǎng)基面咳入飛沫后送檢。后者陽性檢出率不如前者。菌者檢查，則應在咽部或扁桃體上擦拭。懷疑麻風病時，采樣者應帶好口罩和手套，將棉拭子用力擦拭鼻中隔部，直至微有出血，取鼻粘膜部分標本送檢。天報告結果。正常參考值：正常只有正常菌群生長，正常情況下不致病。臨床意義：銅綠假單胞菌引起，厭氧菌可引起副鼻竇炎。合感染。潰瘍性咽峽炎由奮森氏螺旋體和梭狀桿菌引起。風濕熱、猩紅熱及急性腎盂腎炎的標本可檢出A群鏈球菌?？焖?、準確地檢驗白喉棒狀桿菌引起的傳染病，對疾病的診治和防止傳播流行，有十分重要的意義。百日咳鮑特菌在發(fā)病初期檢出率高，3-4周后則不易檢出。八、膽汁培養(yǎng)1．英文或縮寫：BacterialCultureofBile2．標本采集及注意事項：首先用2%碘酊消毒穿刺要通過的皮膚。為ABC三部分。AB液做細菌培養(yǎng)意義較大。不易污染，適于做細菌學檢查。采集標本后立即送檢。天報告結果。正常參考值：正常人的膽汁是無菌的臨床意義：在膽道感染患者的膽汁中，主要是革蘭陰性桿菌，但混合感染較為多見。據(jù)統(tǒng)計，由一種細菌引起的感染占55.8%-65.4%，兩種細菌感染者占20.4%-30.2%。最多者可達四種細菌，膽汁中常見的細菌為大腸埃希菌。90%105/ml。BC三管膽汁中，如B管有細菌，可以提示該管來自膽囊；如A、B、C三管中均分離到細菌，經計數(shù)B管細菌數(shù)又多于A、C管，則可認為是病原菌。此外，從細菌種類可以判定是否為病原菌，如發(fā)現(xiàn)有奈瑟菌屬的細菌、草綠色鏈球菌，則可能是來自唾液的細菌；如為大腸埃希菌、克雷伯菌，且細菌計數(shù)在104/ml以上時，則常為病原菌。1．英文或縮寫：BacterialCultureof2．標本采集注意事項：自然排便采集法：自然排便后，挑取有膿血、粘液部分糞便2-3克，液狀糞便取絮狀物，置于潔凈臘紙盒中，或置于保存液或增菌液中送檢。4-5cm處，輕輕在直腸內旋轉，擦取直腸表(Cary-BlaipH7.0的磷酸鹽甘油中運送或保存。為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)。腹瀉患者應盡量在急性期采集標本(3用于厭氧菌培養(yǎng)的標本應盡量避免與空氣接觸，最好在床邊接種。3天報告結果。正常參考值：腸道中的細菌種類很多，數(shù)量也多，在糞便中約1/3菌、產氣腸桿菌、腸球菌和各種厭氧菌，不應檢出致病菌。臨床意義：狀。而另外一種情況，無痛的、水樣稀便的腹瀉癥狀是由霍亂弧菌或別的能產生類似弧菌毒素的“產腸毒素”細菌引起。腸道致病菌均能引起人類疾病，如霍亂弧菌可引起霍亂，志賀菌可引起細菌性痢疾，傷寒沙門菌可引起腸傷寒等。多種細菌或其代謝產物引起食物中毒，如沙門菌、彎曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌、蠟樣芽胞桿菌等。嗜水氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌等一些少見的致病菌，也能引起人類腹瀉及感染等。結核分枝桿菌引起的腸結核常為潰瘍性，臨床上多數(shù)病例的病變部位最先發(fā)生于回盲部，糞便的細菌學檢查對腸結核有幫助診斷作用。十、泌尿生殖器官分泌物培養(yǎng)1男性尿道及尿道口標本，先用無菌生理鹽水清洗局部后，用無菌棉拭子采取尿道口溢出的膿性分泌物或用男性拭子插入尿道口1-2cm前列腺液則需進行前列腺按摩獲取。女性，先用生理鹽水清洗尿道口，然后用無菌棉拭子擦取邊緣分泌物。陰道及宮頸口分泌物則在窺陰器下操作，用長的無菌棉簽采集分泌物。管外套以一層保護膜，插入子宮后再刺穿保護膜，抽取分泌物。組織標本：尖銳濕疣，可切取組織塊進行組織印片或制備病理切片。生殖器是開放性器官，標本采集過程中，應嚴格遵循無菌操作的原則，以減少雜菌污染。陰道內有許多正常菌群存在，采集宮頸標本時應盡量避免觸及陰道壁。多的上皮細胞。疑有厭氧菌感染時，標本采集避免與氧氣接觸，最佳方法是床邊采樣，直接作厭氧培養(yǎng)。2．檢測及報告時間：每天檢測，3天報告結果。正常參考值：正常的內生殖器應是無菌的，但外生殖器，尤其是接觸體表的部分，如男性的病原菌，多種病原微生物可引起生殖系統(tǒng)的感染。臨床意義：染。在生殖道感染中，常見的有淋病、非淋球菌性尿道炎、梅毒、尖銳濕疣、細菌性陰道炎、生殖器皰疹、軟性下疳、艾滋病等，大多數(shù)通過性接觸傳播，也有少數(shù)通過其他途徑傳播。急性淋病由淋病奈瑟菌引起。慢性淋病常合并有葡萄球菌、鏈球菌、大腸埃希菌混合感染。包皮炎常由葡萄球菌所致。子宮內膜炎多見于鏈球菌感染。子宮內膜受化膿性鏈球菌感染時，可引起產褥熱。十一、泌尿生殖器官分泌物涂片找淋球菌1．英文或縮寫：GonococcusExaminationofPyogenic2．標本采集及注意事項：分泌物或用男性拭子插入尿道口1-2cm女性先用生理鹽水清洗尿道口，然后用無菌棉拭子擦取邊緣分泌物。陰道及宮頸口分泌物則在窺陰器下操作，用長的無菌棉簽采集分泌物。3．檢驗方法：革蘭染色，顯微鏡檢查。1小時內報告。正常參考值：未檢到革蘭陰性雙球菌簡要臨床意義：檢到革蘭陰性雙球菌對淋病有輔助診斷作用。十二、痰涂片找抗酸桿菌1．英文或縮寫：Acid-fastBacilliExaminationofSputum2．標本采集及注意事項：清晨，清水反復漱口后，咳深部第一口濃痰置無菌容器中送檢。3．檢驗方法：抗酸染色，顯微鏡檢查。2小時內報告。正常參考值：未檢到抗酸桿菌。簡要臨床意義：檢到抗酸桿菌對結核分枝桿菌感染