教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件

2、培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備2、培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備1培養(yǎng)基的滅菌滅菌：利用物理或化學(xué)方法殺滅或除去物料及設(shè)備中一切有生命物質(zhì)的過程。

培養(yǎng)基的滅菌滅菌：利用物理或化學(xué)方法殺滅或除去物料及設(shè)備中一2發(fā)酵工業(yè)需純種培養(yǎng)，若在培養(yǎng)過程中污染雜菌，則會導(dǎo)致：①基質(zhì)或產(chǎn)物因雜菌的消耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降；②產(chǎn)物的提取或分離困難，造成收率降低或使產(chǎn)品的質(zhì)量下降；③改變反應(yīng)介質(zhì)的pH，使生物反應(yīng)發(fā)生變化；④分解產(chǎn)物，使生產(chǎn)過程失??；⑤發(fā)生噬菌體污染，使生產(chǎn)過程失敗。對大部分微生物的培養(yǎng)，均需嚴(yán)格的滅菌。發(fā)酵工業(yè)需純種培養(yǎng)，若在培養(yǎng)過程中污染雜菌，則會導(dǎo)致：①基質(zhì)3滅菌方法常用的滅菌方法有：（1）化學(xué)試劑滅菌：常用試劑有甲醛、氯、高錳酸鉀、環(huán)氧乙烷等；（2）射線滅菌：x-射線、β-射線、紫外線；（3）干熱滅菌；（4）濕熱滅菌；（5）過濾除菌對于液體培養(yǎng)基，我國仍采用蒸汽加熱滅菌的較多。滅菌方法常用的滅菌方法有：4液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備微生物的受熱死滅過程屬于一級反應(yīng)，所以：上式積分：得：

對數(shù)殘留公式與理論滅菌時(shí)間培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備微生物的受熱死滅過程屬于一級反應(yīng)，5液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備將上式代入，得：

培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)滅菌溫度與菌死亡的反應(yīng)速率常數(shù)的關(guān)系液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備將上式代入，得：培養(yǎng)基熱滅菌的動6培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備細(xì)菌死亡的活化能與培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞的活化能細(xì)菌死亡(kJ/mol)酶、蛋白質(zhì)或維生素破壞葡萄糖破壞活化能E4.187×(50～100)4.187×(2～26)4.187×24可見，細(xì)胞死亡的活化能比培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分破壞的活化能大得多，所以細(xì)菌的死亡速率要比營養(yǎng)成分的破壞速率快得多。采用濕熱法對液體培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，采用高溫短時(shí)間的滅菌方法，以減少營養(yǎng)成分的破壞。培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備細(xì)菌死亡的7

培養(yǎng)基及發(fā)酵設(shè)備的滅菌

分批滅菌（實(shí)罐滅菌或?qū)嵪┛展逌缇障?/p>

連續(xù)滅菌（連消）過濾器及管道滅菌培養(yǎng)基及發(fā)酵設(shè)備的滅菌分批滅菌（實(shí)罐滅菌或?qū)嵪?（一）實(shí)罐滅菌的計(jì)算又稱：間歇滅菌、分批滅菌、實(shí)消將培養(yǎng)基置于發(fā)酵罐中用蒸汽加熱，達(dá)到預(yù)定滅菌溫度后，維持一定時(shí)間，再冷卻到發(fā)酵溫度，然后接種發(fā)酵，又稱分批滅菌。（一）實(shí)罐滅菌的計(jì)算又稱：間歇滅菌、分批滅菌、實(shí)消9

分批滅菌（實(shí)罐滅菌）要保證分批滅菌的成功，必須有：1.內(nèi)部結(jié)構(gòu)合理，焊縫及軸封裝置可靠，蛇管無穿孔現(xiàn)象的發(fā)酵罐；2.壓力穩(wěn)定的蒸汽；3.合理的操作方法。分批滅菌（實(shí)罐滅菌）要保證分批滅菌的成功，必須有：101．實(shí)罐滅菌前的準(zhǔn)備

為了保證滅菌的成功，在實(shí)罐滅菌前，除培養(yǎng)基配制要注意溶解均一，不要含有結(jié)塊、結(jié)團(tuán)物或異物外，檢查發(fā)酵罐的嚴(yán)密性尤為重要，特別要檢查與發(fā)酵罐直接相連的閥門的嚴(yán)密性。1．實(shí)罐滅菌前的準(zhǔn)備為了保證滅菌的成功，在實(shí)罐滅菌前112．實(shí)罐滅菌操作過程

根據(jù)實(shí)罐滅菌過程，用表壓0.3～0.4MPa的飽和蒸汽把培養(yǎng)基先加熱升溫到滅菌溫度，保溫維持一段時(shí)間，再冷卻降溫到發(fā)酵溫度。2．實(shí)罐滅菌操作過程根據(jù)實(shí)罐滅菌過程，用表壓0.3～0.412實(shí)罐滅菌操作過程

升溫階段保溫階段培養(yǎng)基冷卻階段實(shí)罐滅菌操作過程升溫階段13實(shí)罐滅菌過程中要牢記：凡是與培養(yǎng)基接觸的管道都要進(jìn)蒸汽，凡是不與培養(yǎng)基接觸的管道都要排汽。實(shí)罐滅菌過程中要牢記：凡是與培養(yǎng)基接觸的管道都要進(jìn)蒸汽，14實(shí)罐滅菌的質(zhì)量優(yōu)劣判別標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基滅菌后達(dá)到無菌要求；營養(yǎng)成分破壞少；滅菌后培養(yǎng)基體積與計(jì)料體積相符；泡沫要少。實(shí)罐滅菌的質(zhì)量優(yōu)劣判別標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基滅菌后達(dá)到無菌要求；15

在高溫滅菌時(shí)糖類物質(zhì)容易被破壞且易和有機(jī)氮源相結(jié)合，并產(chǎn)生氨基糖，而對微生物會產(chǎn)生一定的毒性，嚴(yán)重時(shí)將會抑制微生物的生長發(fā)育，破壞整個(gè)發(fā)酵代謝過程。特別注意在高溫滅菌時(shí)糖類物質(zhì)容易被破壞且易和有機(jī)氮源相結(jié)合，并產(chǎn)生163．培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算在工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)中通常不考慮培養(yǎng)基由室溫升至121℃和由121℃冷卻到發(fā)酵培養(yǎng)溫度這兩個(gè)階段的滅菌效應(yīng)，只是把保溫維持階段看作是培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌的時(shí)間。3．培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算在工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)中通常不考慮培養(yǎng)17培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算18培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算發(fā)酵罐體積在40m3以下，可以不考慮加熱升溫階段的滅菌效應(yīng)，這樣可以避免復(fù)雜的變溫滅菌過程的計(jì)算。在滅菌操作時(shí)不要人為地再延長滅菌時(shí)間作為安全系數(shù)，這樣會導(dǎo)致培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞過大。培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算發(fā)酵罐體積在40m3以下，可以不考慮19

分批滅菌（實(shí)罐滅菌）滅菌時(shí)間的計(jì)算例：有一發(fā)酵罐，內(nèi)裝培養(yǎng)基40m3，在121℃的溫度下進(jìn)行實(shí)罐滅菌。設(shè)每毫升培養(yǎng)基含有耐熱菌的芽孢2×107個(gè)，在121℃時(shí)的滅菌速率常數(shù)為0.0287s-1。試求滅菌失敗的機(jī)率為0.001所需的時(shí)間。解：分批滅菌（實(shí)罐滅菌）滅菌時(shí)間的計(jì)算20若考慮加熱升溫階段的滅菌效應(yīng)升溫階段培養(yǎng)基升溫至T2時(shí)菌的總數(shù)由N0減少至NP若考慮加熱升溫階段的滅菌效應(yīng)升溫階段培養(yǎng)基升溫至T2時(shí)菌的總21培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算22培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段間接加熱培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段間接加熱23培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段24培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段直接加熱培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段直接加熱25培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段26培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段27培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算冷卻階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算冷卻階段28冷卻水流量的計(jì)算冷卻水流量的計(jì)算29冷卻時(shí)間的計(jì)算冷卻時(shí)間的計(jì)算30冷卻時(shí)間的計(jì)算冷卻時(shí)間的計(jì)算31教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件32教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件33教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件34教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件35教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件36教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件37（二）連續(xù)滅菌的設(shè)備及計(jì)算將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置輸送的同時(shí)進(jìn)行加熱、保溫和冷卻而進(jìn)行滅菌。工廠里也稱連消。（二）連續(xù)滅菌的設(shè)備及計(jì)算將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝38連續(xù)滅菌流程的優(yōu)點(diǎn)（1）提高產(chǎn)量，設(shè)備利用率高。（2）與分批滅菌比較，培養(yǎng)液受熱時(shí)間短，培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分破壞較少。（3）產(chǎn)品質(zhì)量較易控制；蒸汽負(fù)荷均衡，操作方便。（4）降低了勞動強(qiáng)度，適用于自動控制。連續(xù)滅菌流程的優(yōu)點(diǎn)（1）提高產(chǎn)量，設(shè)備利用率高。39連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備培養(yǎng)基連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備由配料罐（池）、送料泵、預(yù)熱罐、連消泵、加熱器、維持罐和冷卻器7個(gè)關(guān)鍵設(shè)備組成連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備培養(yǎng)基連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備由配料罐（池）、送料泵40連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備流程連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備流程41滅菌時(shí)間的計(jì)算例：有一發(fā)酵罐，內(nèi)裝培養(yǎng)基40m2，在131℃的溫度下進(jìn)行連續(xù)滅菌。設(shè)每毫升培養(yǎng)基含有耐熱菌的芽孢2×107個(gè)，在131℃時(shí)的滅菌速率常數(shù)為0.25s-1。試求滅菌失敗的機(jī)率為0.001所需的時(shí)間。解：

連續(xù)滅菌流程滅菌時(shí)間的計(jì)算連續(xù)滅菌流程42連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備1、配料罐：用于培養(yǎng)基的配制2、預(yù)熱罐：定容和預(yù)熱預(yù)熱目的：使培養(yǎng)基在后續(xù)的加熱過程中能快速升溫到指定的滅菌溫度，同時(shí)避免過多的蒸餾水進(jìn)入培養(yǎng)基，減少震動和噪聲。連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備1、配料罐：用于培養(yǎng)基的配制43

3.連消泵輸送培養(yǎng)基的泵一般可采用離心泵、旋渦泵、往復(fù)泵等。連續(xù)滅菌系統(tǒng)要求流量穩(wěn)定，故目前比較理想的連消泵是螺條泵。3.連消泵輸送培養(yǎng)基的泵一般可采用離心泵、旋渦泵、往復(fù)泵等444、加熱器目的：使培養(yǎng)基在較短的時(shí)間（20－30s）快速升溫。目前加熱器使用得最廣泛的加熱器有塔式加熱器和噴射式加熱器。4、加熱器目的：使培養(yǎng)基在較短的時(shí)間（20－30s）快速升溫45塔式加熱器

又稱連消塔、連消器，這是一種汽液混合型加熱裝置

塔式加熱器又稱連消塔、連消器，這是一種汽液混合型加熱裝置46塔式加熱器的設(shè)計(jì)a．加熱蒸汽的用量：塔式加熱器的設(shè)計(jì)a．加熱蒸汽的用量：47b．塔式加熱器蒸汽導(dǎo)入管徑

b．塔式加熱器蒸汽導(dǎo)入管徑48c.加熱塔塔身內(nèi)徑

c.加熱塔塔身內(nèi)徑49d．加熱塔有效塔高

H=ωmτ=0.1τd．加熱塔有效塔高H=ωmτ=0.1τ50e．蒸汽導(dǎo)入管上的開孔與小孔數(shù)

蒸汽導(dǎo)入管的小孔與管壁的夾角呈45o，小孔直徑可取5～8mm。小孔總面積=蒸汽導(dǎo)入管截面積的80％～100％e．蒸汽導(dǎo)入管上的開孔與小孔數(shù)蒸汽導(dǎo)入管的小孔與管壁的夾角51（2）噴射式加熱器

噴射式加熱器的特點(diǎn)是蒸汽和物料密切混合、加熱在瞬間內(nèi)完成。1.噴嘴2.吸入口3.吸入室4.混合噴嘴5.混合段6.擴(kuò)大管（2）噴射式加熱器噴射式加熱器的特點(diǎn)是蒸汽和物料密切混合、52噴射式加熱器混合式連消塔

連消加熱器

噴射式加熱器混合式連消塔連消加熱器53噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)

噴射式加熱器設(shè)計(jì)中，噴嘴的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵。根據(jù)物料流量計(jì)算出噴嘴直徑后，按比例確定其他各部尺寸。噴嘴直徑太小會引起堵塞，一般應(yīng)大于10mm。延長混合段的長度有利于蒸汽與物料的混合。噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)噴射式加熱器設(shè)計(jì)中，噴嘴的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵54噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)

a．加熱塔內(nèi)物料流量b．連消塔的容積V=（Vm＋VS）·τ噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)a．加熱塔內(nèi)物料流量555.保溫設(shè)備（維持設(shè)備）

目的：將培養(yǎng)基維持滅菌溫度一段時(shí)間，是殺滅微生物的主要過程。5.保溫設(shè)備（維持設(shè)備）目的：將培養(yǎng)基維持滅菌溫度一段時(shí)56（1）維持罐（1）維持罐57

（2）管式維持器

可克服維持設(shè)備中物料的返混現(xiàn)象。管式維持器外形酷似噴淋換熱器，外壁包裹保溫層。管式維持器的長度與管徑由保溫滅菌時(shí)間及培養(yǎng)基的流量確定。培養(yǎng)基在管式維持器中的流速可取0.3～0.6m/s，要保證培養(yǎng)基在管式維持器中流動處于活塞流狀態(tài)。（2）管式維持器可克服維持設(shè)備中物料的返混現(xiàn)象。58（3）維持設(shè)備的計(jì)算與設(shè)計(jì)

①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)

a．維持罐要做得瘦長些，一般取H/D=2.0～2.5最佳。設(shè)備外壁要有保溫層。b．物料在維持罐中停留的時(shí)間：根據(jù)計(jì)算得到的理論滅菌時(shí)間×（3～5）倍。在設(shè)計(jì)中一般取3倍。（3）維持設(shè)備的計(jì)算與設(shè)計(jì)①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)59①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．維持罐容積①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．維持罐容積60②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)

a．要使培養(yǎng)基在管道內(nèi)處于平推流（或稱活塞流）狀態(tài)，Re＞10000。一般要求培養(yǎng)基流速處于0.25～0.6m/s。b．根據(jù)培養(yǎng)基的流量與培養(yǎng)基在管道里的流速，即可計(jì)算出管道的直徑，并根據(jù)無縫鋼管規(guī)格進(jìn)行圓整。②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)a．要使培養(yǎng)基在管道內(nèi)處于平推流（61②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．培養(yǎng)基理論滅菌時(shí)間：d．求取管式維持器的長度。在Pe＞1000的前提下可取較小的值。e．設(shè)備制造完成經(jīng)密封性試驗(yàn)后，外置保溫層。②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．培養(yǎng)基理論滅菌時(shí)間：62

6、降溫設(shè)備（冷卻設(shè)備）

保溫后的培養(yǎng)基需迅速降溫至接近培養(yǎng)溫度（40－45℃）。冷卻設(shè)備要求嚴(yán)密性好，冷卻效率高。6、降溫設(shè)備（冷卻設(shè)備）保溫后的培養(yǎng)基需迅速降溫至接近培63（1）噴淋冷卻器（1）噴淋冷卻器64

這種設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單、清理維修方便，管外結(jié)的水垢可以定期鏟除，料液不易染菌，冷卻液呈膜狀沿管子外壁向下流動。噴淋冷卻器這種設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單、清理維修方便，管外結(jié)的水垢可以定期鏟除，65（2）螺旋板式換熱器

傳熱效率高，結(jié)構(gòu)緊湊，可縮短冷卻時(shí)間，降低冷卻水用量，還可在室內(nèi)安裝，效果也很好。

（2）螺旋板式換熱器傳熱效率高，結(jié)構(gòu)緊湊，可縮短冷卻時(shí)間66（3）真空冷卻器工作原理：在真空下，高溫培養(yǎng)基中的水分立即汽化，使培養(yǎng)基本身溫度下降。培養(yǎng)基最終被冷卻溫度取決于設(shè)備操作的真空度。本設(shè)備安裝高度大于10m（3）真空冷卻器工作原理：在真空下，高溫培養(yǎng)基中的水分立即汽67液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備真空冷卻器真空冷卻裝置圖12345為了更完全地從料液中分離蒸汽，真空冷卻器中蒸汽上升速度不應(yīng)超過1m／s，醪液在下降管中流速為0.8～0.5m／s。液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備真空冷卻器真空冷卻裝置圖123468真空冷卻器的計(jì)算例題：已知從汽液分離器排除頂糊化醪量為12000kg/h,其比熱容為3.6kJ/（kg.K）,溫度為100℃，要求冷卻至65℃，計(jì)算真空冷卻器的基本尺寸。解：（1）真空冷卻器內(nèi)產(chǎn)生的二次蒸汽量：查水蒸氣表和二次蒸汽在65℃時(shí)的汽化潛熱r＝2343.4kJ/kg,故真空冷卻器內(nèi)產(chǎn)生的二次蒸汽量為：真空冷卻器的計(jì)算例題：已知從汽液分離器排除頂糊化醪量為12069真空冷卻器的計(jì)算與65℃相對應(yīng)的真空度為76.3kPa（572mmHg）,在此溫度下蒸汽的密度為0.1611kg/m3,則二次蒸汽的體積流量為：

（2）真空冷卻器的直徑和高度：取器內(nèi)二次蒸汽的上升速度不超過1m/s，則真空冷卻器的直徑D：一般真空冷卻器的徑高比為為：1：1.5～2，現(xiàn)取D：H=1：1.5，則真空冷卻器的圓柱部分高H：真空冷卻器的計(jì)算與65℃相對應(yīng)的真空度為76.3kPa（5770（3）醪液下降管（排醪管）的直徑：設(shè)糊化醪液密度＝1090kg/m3，取醪液在排醪管內(nèi)下降為1m/s，則醪液下降管管徑D:可選用φ68mm×4mm的無縫鋼管。

（4）醪液下降管的長度：選用L=8m。

真空冷卻器的計(jì)算（3）醪液下降管（排醪管）的直徑：設(shè)糊化醪液密度＝1090k711.連消器——噴淋冷卻流程其設(shè)備主要是連消器，附屬裝置（設(shè)備）是配料池、送料泵、維持罐和噴淋冷卻器。特點(diǎn)：熱效率高，無菌程度高，適用范圍廣；熱和冷卻水消耗量大。連續(xù)滅菌流程1.連消器——噴淋冷卻流程其設(shè)備主要是連消器，附屬72連消器——噴淋冷卻流程

1.料液罐2.連消泵3.連消塔4.維持罐5.噴淋冷卻器

連消器——噴淋冷卻流程1.料液罐2.連消泵3.連消塔4732.噴射加熱——真空冷卻流程噴射加熱——真空冷卻流程是一種噴射加熱、管道維持，真空冷卻的連續(xù)滅菌流程。2.噴射加熱——真空冷卻流程噴射加熱——真空冷卻流程是一種74噴射加熱連續(xù)滅菌流程

噴射加熱連續(xù)滅菌流程75噴射加熱連續(xù)滅菌溫度時(shí)間關(guān)系圖

噴射加熱連續(xù)滅菌溫度時(shí)間關(guān)系圖76特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：加熱和冷卻在瞬間完成，營養(yǎng)成分破壞最少；由于采用管道維持，可以保證物料先進(jìn)先出，避免過熱。缺點(diǎn)：此流程操作難度較大，需要使蒸汽的壓力和流量以及培養(yǎng)基的流量比較穩(wěn)定。由于真空的影響，在蒸發(fā)室下面要裝一臺出料泵，或?qū)⒄舭l(fā)室置于離發(fā)酵罐液面10m以上的高處。特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：加熱和冷卻在瞬間完成，營養(yǎng)成分破壞最少；由于采用管773.板式換熱器的滅菌流程培養(yǎng)液在設(shè)備中同時(shí)完成預(yù)熱、加熱滅菌、維持及冷卻的過程。3.板式換熱器的滅菌流程培養(yǎng)液在設(shè)備中同時(shí)完成預(yù)熱、加熱滅菌78采用螺旋板換熱器綜合利用熱能的連消工藝

配料罐打料泵流量計(jì)換熱器B換熱器A加熱器管式維持器采用螺旋板換熱器綜合利用熱能的連消工藝配料罐打料泵流量計(jì)79特點(diǎn)：利用薄板換熱器進(jìn)行連續(xù)滅菌時(shí)，加熱和冷卻培養(yǎng)液所需的時(shí)間比使用噴射式連續(xù)滅菌稍長，但滅菌周期則較間歇滅菌小得多。由于待滅菌培養(yǎng)液的預(yù)熱過程同時(shí)為滅菌培養(yǎng)液的冷卻過程，所以節(jié)約了加熱蒸汽及冷卻水的消耗。特點(diǎn)：利用薄板換熱器進(jìn)行連續(xù)滅菌時(shí)，加熱和冷卻培養(yǎng)液所需的時(shí)80板式熱交換器連續(xù)滅菌溫度時(shí)間關(guān)系圖

板式熱交換器連續(xù)滅菌溫度時(shí)間關(guān)系圖81

82復(fù)習(xí)題1.實(shí)罐滅菌的操作過程2.畫出連消塔加熱的培養(yǎng)液連續(xù)加熱滅菌流程示意圖。3.畫出噴射加熱連續(xù)滅菌流程示意圖.4.畫出薄板換熱器連續(xù)滅菌流程示意圖。5.三種連續(xù)滅菌流程的特點(diǎn)是什么？6.雙酶糖化法的工藝流程及主要設(shè)備？復(fù)習(xí)題1.實(shí)罐滅菌的操作過程832、酶解設(shè)備酶解分為液化和糖化兩步。（1）液化升溫液化法、高溫液化法和噴射液化法。2、酶解設(shè)備84噴射液化器構(gòu)造示意圖

噴射液化器噴射液化器構(gòu)造示意圖噴射液化器85教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件86（2）糖化（2）糖化872、培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備2、培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備88培養(yǎng)基的滅菌滅菌：利用物理或化學(xué)方法殺滅或除去物料及設(shè)備中一切有生命物質(zhì)的過程。

培養(yǎng)基的滅菌滅菌：利用物理或化學(xué)方法殺滅或除去物料及設(shè)備中一89發(fā)酵工業(yè)需純種培養(yǎng)，若在培養(yǎng)過程中污染雜菌，則會導(dǎo)致：①基質(zhì)或產(chǎn)物因雜菌的消耗而損失，造成生產(chǎn)能力的下降；②產(chǎn)物的提取或分離困難，造成收率降低或使產(chǎn)品的質(zhì)量下降；③改變反應(yīng)介質(zhì)的pH，使生物反應(yīng)發(fā)生變化；④分解產(chǎn)物，使生產(chǎn)過程失??；⑤發(fā)生噬菌體污染，使生產(chǎn)過程失敗。對大部分微生物的培養(yǎng)，均需嚴(yán)格的滅菌。發(fā)酵工業(yè)需純種培養(yǎng)，若在培養(yǎng)過程中污染雜菌，則會導(dǎo)致：①基質(zhì)90滅菌方法常用的滅菌方法有：（1）化學(xué)試劑滅菌：常用試劑有甲醛、氯、高錳酸鉀、環(huán)氧乙烷等；（2）射線滅菌：x-射線、β-射線、紫外線；（3）干熱滅菌；（4）濕熱滅菌；（5）過濾除菌對于液體培養(yǎng)基，我國仍采用蒸汽加熱滅菌的較多。滅菌方法常用的滅菌方法有：91液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備微生物的受熱死滅過程屬于一級反應(yīng)，所以：上式積分：得：

對數(shù)殘留公式與理論滅菌時(shí)間培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備微生物的受熱死滅過程屬于一級反應(yīng)，92液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備將上式代入，得：

培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)滅菌溫度與菌死亡的反應(yīng)速率常數(shù)的關(guān)系液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備將上式代入，得：培養(yǎng)基熱滅菌的動93培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備細(xì)菌死亡的活化能與培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞的活化能細(xì)菌死亡(kJ/mol)酶、蛋白質(zhì)或維生素破壞葡萄糖破壞活化能E4.187×(50～100)4.187×(2～26)4.187×24可見，細(xì)胞死亡的活化能比培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分破壞的活化能大得多，所以細(xì)菌的死亡速率要比營養(yǎng)成分的破壞速率快得多。采用濕熱法對液體培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，采用高溫短時(shí)間的滅菌方法，以減少營養(yǎng)成分的破壞。培養(yǎng)基熱滅菌的動力學(xué)液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備細(xì)菌死亡的94

培養(yǎng)基及發(fā)酵設(shè)備的滅菌

分批滅菌（實(shí)罐滅菌或?qū)嵪┛展逌缇障?/p>

連續(xù)滅菌（連消）過濾器及管道滅菌培養(yǎng)基及發(fā)酵設(shè)備的滅菌分批滅菌（實(shí)罐滅菌或?qū)嵪?5（一）實(shí)罐滅菌的計(jì)算又稱：間歇滅菌、分批滅菌、實(shí)消將培養(yǎng)基置于發(fā)酵罐中用蒸汽加熱，達(dá)到預(yù)定滅菌溫度后，維持一定時(shí)間，再冷卻到發(fā)酵溫度，然后接種發(fā)酵，又稱分批滅菌。（一）實(shí)罐滅菌的計(jì)算又稱：間歇滅菌、分批滅菌、實(shí)消96

分批滅菌（實(shí)罐滅菌）要保證分批滅菌的成功，必須有：1.內(nèi)部結(jié)構(gòu)合理，焊縫及軸封裝置可靠，蛇管無穿孔現(xiàn)象的發(fā)酵罐；2.壓力穩(wěn)定的蒸汽；3.合理的操作方法。分批滅菌（實(shí)罐滅菌）要保證分批滅菌的成功，必須有：971．實(shí)罐滅菌前的準(zhǔn)備

為了保證滅菌的成功，在實(shí)罐滅菌前，除培養(yǎng)基配制要注意溶解均一，不要含有結(jié)塊、結(jié)團(tuán)物或異物外，檢查發(fā)酵罐的嚴(yán)密性尤為重要，特別要檢查與發(fā)酵罐直接相連的閥門的嚴(yán)密性。1．實(shí)罐滅菌前的準(zhǔn)備為了保證滅菌的成功，在實(shí)罐滅菌前982．實(shí)罐滅菌操作過程

根據(jù)實(shí)罐滅菌過程，用表壓0.3～0.4MPa的飽和蒸汽把培養(yǎng)基先加熱升溫到滅菌溫度，保溫維持一段時(shí)間，再冷卻降溫到發(fā)酵溫度。2．實(shí)罐滅菌操作過程根據(jù)實(shí)罐滅菌過程，用表壓0.3～0.499實(shí)罐滅菌操作過程

升溫階段保溫階段培養(yǎng)基冷卻階段實(shí)罐滅菌操作過程升溫階段100實(shí)罐滅菌過程中要牢記：凡是與培養(yǎng)基接觸的管道都要進(jìn)蒸汽，凡是不與培養(yǎng)基接觸的管道都要排汽。實(shí)罐滅菌過程中要牢記：凡是與培養(yǎng)基接觸的管道都要進(jìn)蒸汽，101實(shí)罐滅菌的質(zhì)量優(yōu)劣判別標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基滅菌后達(dá)到無菌要求；營養(yǎng)成分破壞少；滅菌后培養(yǎng)基體積與計(jì)料體積相符；泡沫要少。實(shí)罐滅菌的質(zhì)量優(yōu)劣判別標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基滅菌后達(dá)到無菌要求；102

在高溫滅菌時(shí)糖類物質(zhì)容易被破壞且易和有機(jī)氮源相結(jié)合，并產(chǎn)生氨基糖，而對微生物會產(chǎn)生一定的毒性，嚴(yán)重時(shí)將會抑制微生物的生長發(fā)育，破壞整個(gè)發(fā)酵代謝過程。特別注意在高溫滅菌時(shí)糖類物質(zhì)容易被破壞且易和有機(jī)氮源相結(jié)合，并產(chǎn)生1033．培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算在工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)中通常不考慮培養(yǎng)基由室溫升至121℃和由121℃冷卻到發(fā)酵培養(yǎng)溫度這兩個(gè)階段的滅菌效應(yīng)，只是把保溫維持階段看作是培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌的時(shí)間。3．培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算在工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)中通常不考慮培養(yǎng)104培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算105培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算發(fā)酵罐體積在40m3以下，可以不考慮加熱升溫階段的滅菌效應(yīng)，這樣可以避免復(fù)雜的變溫滅菌過程的計(jì)算。在滅菌操作時(shí)不要人為地再延長滅菌時(shí)間作為安全系數(shù)，這樣會導(dǎo)致培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞過大。培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌時(shí)間的計(jì)算發(fā)酵罐體積在40m3以下，可以不考慮106

分批滅菌（實(shí)罐滅菌）滅菌時(shí)間的計(jì)算例：有一發(fā)酵罐，內(nèi)裝培養(yǎng)基40m3，在121℃的溫度下進(jìn)行實(shí)罐滅菌。設(shè)每毫升培養(yǎng)基含有耐熱菌的芽孢2×107個(gè)，在121℃時(shí)的滅菌速率常數(shù)為0.0287s-1。試求滅菌失敗的機(jī)率為0.001所需的時(shí)間。解：分批滅菌（實(shí)罐滅菌）滅菌時(shí)間的計(jì)算107若考慮加熱升溫階段的滅菌效應(yīng)升溫階段培養(yǎng)基升溫至T2時(shí)菌的總數(shù)由N0減少至NP若考慮加熱升溫階段的滅菌效應(yīng)升溫階段培養(yǎng)基升溫至T2時(shí)菌的總108培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算109培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段間接加熱培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段間接加熱110培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段111培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段直接加熱培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算升溫階段直接加熱112培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段113培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算保溫階段114培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算冷卻階段培養(yǎng)基實(shí)罐滅菌過程的熱量計(jì)算冷卻階段115冷卻水流量的計(jì)算冷卻水流量的計(jì)算116冷卻時(shí)間的計(jì)算冷卻時(shí)間的計(jì)算117冷卻時(shí)間的計(jì)算冷卻時(shí)間的計(jì)算118教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件119教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件120教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件121教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件122教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件123教學(xué)培養(yǎng)基準(zhǔn)備及培養(yǎng)基的滅菌設(shè)備課件124（二）連續(xù)滅菌的設(shè)備及計(jì)算將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝置輸送的同時(shí)進(jìn)行加熱、保溫和冷卻而進(jìn)行滅菌。工廠里也稱連消。（二）連續(xù)滅菌的設(shè)備及計(jì)算將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐等培養(yǎng)裝125連續(xù)滅菌流程的優(yōu)點(diǎn)（1）提高產(chǎn)量，設(shè)備利用率高。（2）與分批滅菌比較，培養(yǎng)液受熱時(shí)間短，培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分破壞較少。（3）產(chǎn)品質(zhì)量較易控制；蒸汽負(fù)荷均衡，操作方便。（4）降低了勞動強(qiáng)度，適用于自動控制。連續(xù)滅菌流程的優(yōu)點(diǎn)（1）提高產(chǎn)量，設(shè)備利用率高。126連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備培養(yǎng)基連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備由配料罐（池）、送料泵、預(yù)熱罐、連消泵、加熱器、維持罐和冷卻器7個(gè)關(guān)鍵設(shè)備組成連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備培養(yǎng)基連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備由配料罐（池）、送料泵127連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備流程連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備流程128滅菌時(shí)間的計(jì)算例：有一發(fā)酵罐，內(nèi)裝培養(yǎng)基40m2，在131℃的溫度下進(jìn)行連續(xù)滅菌。設(shè)每毫升培養(yǎng)基含有耐熱菌的芽孢2×107個(gè)，在131℃時(shí)的滅菌速率常數(shù)為0.25s-1。試求滅菌失敗的機(jī)率為0.001所需的時(shí)間。解：

連續(xù)滅菌流程滅菌時(shí)間的計(jì)算連續(xù)滅菌流程129連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備1、配料罐：用于培養(yǎng)基的配制2、預(yù)熱罐：定容和預(yù)熱預(yù)熱目的：使培養(yǎng)基在后續(xù)的加熱過程中能快速升溫到指定的滅菌溫度，同時(shí)避免過多的蒸餾水進(jìn)入培養(yǎng)基，減少震動和噪聲。連續(xù)滅菌系統(tǒng)設(shè)備1、配料罐：用于培養(yǎng)基的配制130

3.連消泵輸送培養(yǎng)基的泵一般可采用離心泵、旋渦泵、往復(fù)泵等。連續(xù)滅菌系統(tǒng)要求流量穩(wěn)定，故目前比較理想的連消泵是螺條泵。3.連消泵輸送培養(yǎng)基的泵一般可采用離心泵、旋渦泵、往復(fù)泵等1314、加熱器目的：使培養(yǎng)基在較短的時(shí)間（20－30s）快速升溫。目前加熱器使用得最廣泛的加熱器有塔式加熱器和噴射式加熱器。4、加熱器目的：使培養(yǎng)基在較短的時(shí)間（20－30s）快速升溫132塔式加熱器

又稱連消塔、連消器，這是一種汽液混合型加熱裝置

塔式加熱器又稱連消塔、連消器，這是一種汽液混合型加熱裝置133塔式加熱器的設(shè)計(jì)a．加熱蒸汽的用量：塔式加熱器的設(shè)計(jì)a．加熱蒸汽的用量：134b．塔式加熱器蒸汽導(dǎo)入管徑

b．塔式加熱器蒸汽導(dǎo)入管徑135c.加熱塔塔身內(nèi)徑

c.加熱塔塔身內(nèi)徑136d．加熱塔有效塔高

H=ωmτ=0.1τd．加熱塔有效塔高H=ωmτ=0.1τ137e．蒸汽導(dǎo)入管上的開孔與小孔數(shù)

蒸汽導(dǎo)入管的小孔與管壁的夾角呈45o，小孔直徑可取5～8mm。小孔總面積=蒸汽導(dǎo)入管截面積的80％～100％e．蒸汽導(dǎo)入管上的開孔與小孔數(shù)蒸汽導(dǎo)入管的小孔與管壁的夾角138（2）噴射式加熱器

噴射式加熱器的特點(diǎn)是蒸汽和物料密切混合、加熱在瞬間內(nèi)完成。1.噴嘴2.吸入口3.吸入室4.混合噴嘴5.混合段6.擴(kuò)大管（2）噴射式加熱器噴射式加熱器的特點(diǎn)是蒸汽和物料密切混合、139噴射式加熱器混合式連消塔

連消加熱器

噴射式加熱器混合式連消塔連消加熱器140噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)

噴射式加熱器設(shè)計(jì)中，噴嘴的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵。根據(jù)物料流量計(jì)算出噴嘴直徑后，按比例確定其他各部尺寸。噴嘴直徑太小會引起堵塞，一般應(yīng)大于10mm。延長混合段的長度有利于蒸汽與物料的混合。噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)噴射式加熱器設(shè)計(jì)中，噴嘴的設(shè)計(jì)是關(guān)鍵141噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)

a．加熱塔內(nèi)物料流量b．連消塔的容積V=（Vm＋VS）·τ噴射式加熱器的計(jì)算設(shè)計(jì)a．加熱塔內(nèi)物料流量1425.保溫設(shè)備（維持設(shè)備）

目的：將培養(yǎng)基維持滅菌溫度一段時(shí)間，是殺滅微生物的主要過程。5.保溫設(shè)備（維持設(shè)備）目的：將培養(yǎng)基維持滅菌溫度一段時(shí)143（1）維持罐（1）維持罐144

（2）管式維持器

可克服維持設(shè)備中物料的返混現(xiàn)象。管式維持器外形酷似噴淋換熱器，外壁包裹保溫層。管式維持器的長度與管徑由保溫滅菌時(shí)間及培養(yǎng)基的流量確定。培養(yǎng)基在管式維持器中的流速可取0.3～0.6m/s，要保證培養(yǎng)基在管式維持器中流動處于活塞流狀態(tài)。（2）管式維持器可克服維持設(shè)備中物料的返混現(xiàn)象。145（3）維持設(shè)備的計(jì)算與設(shè)計(jì)

①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)

a．維持罐要做得瘦長些，一般取H/D=2.0～2.5最佳。設(shè)備外壁要有保溫層。b．物料在維持罐中停留的時(shí)間：根據(jù)計(jì)算得到的理論滅菌時(shí)間×（3～5）倍。在設(shè)計(jì)中一般取3倍。（3）維持設(shè)備的計(jì)算與設(shè)計(jì)①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)146①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．維持罐容積①維持罐的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．維持罐容積147②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)

a．要使培養(yǎng)基在管道內(nèi)處于平推流（或稱活塞流）狀態(tài)，Re＞10000。一般要求培養(yǎng)基流速處于0.25～0.6m/s。b．根據(jù)培養(yǎng)基的流量與培養(yǎng)基在管道里的流速，即可計(jì)算出管道的直徑，并根據(jù)無縫鋼管規(guī)格進(jìn)行圓整。②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)a．要使培養(yǎng)基在管道內(nèi)處于平推流（148②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．培養(yǎng)基理論滅菌時(shí)間：d．求取管式維持器的長度。在Pe＞1000的前提下可取較小的值。e．設(shè)備制造完成經(jīng)密封性試驗(yàn)后，外置保溫層。②管式維持器的計(jì)算與設(shè)計(jì)c．培養(yǎng)基理論滅菌時(shí)間：149

6、降溫設(shè)備（冷卻設(shè)備）

保溫后的培養(yǎng)基需迅速降溫至接近培養(yǎng)溫度（40－45℃）。冷卻設(shè)備要求嚴(yán)密性好，冷卻效率高。6、降溫設(shè)備（冷卻設(shè)備）保溫后的培養(yǎng)基需迅速降溫至接近培150（1）噴淋冷卻器（1）噴淋冷卻器151

這種設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單、清理維修方便，管外結(jié)的水垢可以定期鏟除，料液不易染菌，冷卻液呈膜狀沿管子外壁向下流動。噴淋冷卻器這種設(shè)備結(jié)構(gòu)簡單、清理維修方便，管外結(jié)的水垢可以定期鏟除，152（2）螺旋板式換熱器

傳熱效率高，結(jié)構(gòu)緊湊，可縮短冷卻時(shí)間，降低冷卻水用量，還可在室內(nèi)安裝，效果也很好。

（2）螺旋板式換熱器傳熱效率高，結(jié)構(gòu)緊湊，可縮短冷卻時(shí)間153（3）真空冷卻器工作原理：在真空下，高溫培養(yǎng)基中的水分立即汽化，使培養(yǎng)基本身溫度下降。培養(yǎng)基最終被冷卻溫度取決于設(shè)備操作的真空度。本設(shè)備安裝高度大于10m（3）真空冷卻器工作原理：在真空下，高溫培養(yǎng)基中的水分立即汽154液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備真空冷卻器真空冷卻裝置圖12345為了更完全地從料液中分離蒸汽，真空冷卻器中蒸汽上升速度不應(yīng)超過1m／s，醪液在下降管中流速為0.8～0.5m／s。液體培養(yǎng)基的制備及殺菌設(shè)備真空冷卻器真空冷卻裝置圖1234155真空冷卻器的計(jì)算例題：已知從汽液分離器排除頂糊化醪量為12000kg/h,其比熱容為3.6kJ/（kg.K）,溫度為100℃，要求冷卻至65℃，計(jì)算真空冷卻器的基本尺寸。解：（1）真空冷卻器內(nèi)產(chǎn)生的二次蒸汽量：查水蒸氣表和二次蒸汽在65℃時(shí)的汽化潛熱r＝2343.4kJ/kg,故真空冷卻器內(nèi)產(chǎn)生的二次蒸汽量為：真空冷卻器的計(jì)算例題：已知從汽液分離器排除頂糊化醪量為120156真空冷卻器的計(jì)算與65℃相對應(yīng)的真空度為76.3kPa（572mmHg）,在此溫度下蒸汽的密度為0.1611kg/m3,則二次蒸汽的體積流量為：

（2）真空冷卻器