纖維素（CLL）含量檢測試劑盒說明書-微量法UPLC-MS-4117

電話：400-998-2324郵箱：service_uplc_ms@163.com網(wǎng)址：本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！-上海液質(zhì)檢測技術(shù)有限公司第第頁纖維素（CLL）含量檢測試劑盒說明書微量法UPLC-MS-4117100T/96S試劑名稱規(guī)格保存條件提取液一液體400mL×1瓶（自備）2-8℃保存提取液二液體100mL×1瓶2-8℃保存試劑一粉劑×2瓶2-8℃保存試劑二液體10mL×1瓶2-8℃保存標(biāo)準(zhǔn)品粉劑×1支2-8℃保存溶液的配制：1400320mL80mL125mL2mg1mL10mg/mL32.5mL2-8℃纖維素是由β-D-葡萄糖單元以β-1,4-糖苷鍵連接而成的直鏈多聚體，通常與半纖維素、果膠及木質(zhì)素結(jié)合在纖維素在酸性條件下加熱能分解成β-D-葡萄糖。在強(qiáng)酸作用條件下利用與蒽酮顯色劑測定纖維素含量。\Cellulose

H2SO4

β-D-Glucose

H2SO4

5-Hydroxymethylfurfura5-Hydroxymethylfurfura+Anthrone FurfuralDerivatives（620nm）最低檢出限：0.0037mg/mL線性范圍：0.00391-0.3mg/mL注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測。/96/EP一、樣本處理（可適當(dāng)調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn)）1、細(xì)胞壁物質(zhì)（CWM）的提?。?mL25℃10min1.5L2n0002離心01mL（156000g，25℃10min（2min均可CW2。2、纖維素的提?。悍Q取烘干的CM約5（30.5LP0.5mL。緩慢0.75mL冰水浴30min8000g，4℃10min20注意：1.2.在提取纖維素的過程中，首先，置于冰水浴中的EP管需要固定，不要上下左右浮動，一方面保障自身安全，另一方面防止冰水混合物進(jìn)入EP管造成試驗(yàn)誤差；再者，加入濃硫酸時(shí)，建議槍頭伸入樣本液面以下，緩慢加入，防止液面沸騰及樣本碳化。二、測定步驟1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。210mg/mL0.1250.06250.031250.0156250.00780.0039mg/mL3、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋表序號稀釋前濃度（mg/mL）標(biāo)準(zhǔn)液體積（μL）蒸餾水體積（μL）稀釋后濃度（mg/mL）110100900121503500.12530.1252002000.062540.06252002000.0312550.031252002000.01562560.0156252002000.007870.00782002000.0039實(shí)驗(yàn)中每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)管需150μL標(biāo)準(zhǔn)溶液。4、操作表(在1.5mL離心管中)：試劑名稱（μL）測定管標(biāo)準(zhǔn)管空白管樣本150--標(biāo)準(zhǔn)溶液-150-蒸餾水--150工作液353535濃硫酸31531531595℃10min（200μL96620nm處吸光值A(chǔ)，分別記為AA空白管。計(jì)算ΔA=A測定管-A空白管，ΔA標(biāo)準(zhǔn)=A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管1-2）。三、纖維素含量計(jì)算1ΔAΔA）帶入公式計(jì)算樣本濃度（x，mg/mL）2、纖維素含量的計(jì)算：纖維素（mg/g質(zhì)量）=x×V提取×20×（W2÷W3）÷W1÷1.11=22.52×x×W2÷W3÷W1（CWM）（mg/g111100V1.25mL（0.5mL+0.75mL）；20（CWM）質(zhì)量，g。1、如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測定。2、濃硫酸具有強(qiáng)腐蝕性，操作時(shí)各個(gè)步驟均需特別注意：纖維素提取在加入濃硫酸時(shí)，建議槍頭伸入樣本液面以