白血病分子診斷技術(shù)(咸陽)課件

白血病分子診斷技術(shù)康圣環(huán)球醫(yī)學(xué)特檢集團(tuán)周榮技術(shù)支持：800-810-0579白血病分子診斷技術(shù)康圣環(huán)球醫(yī)學(xué)特檢集團(tuán)技術(shù)支持：800-81WH0血液腫瘤分類方案（1999年）新分類方案的基本原則是：結(jié)合形態(tài)學(xué)、免疫表型、遺傳改變和臨床特征來鑒定疾病的“真實(shí)本質(zhì)”。提供了疾病分類與治療選擇和預(yù)后判斷的較明確關(guān)聯(lián)性，開啟了血液腫瘤靶向性治療和個性化方案的新時代。形態(tài)學(xué)免疫學(xué)細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)支持：800-810-0579WH0血液腫瘤分類方案（1999年）新分類方案的基本原則是：WH0血液腫瘤分類方案（2008年）組織蛋白細(xì)胞基因技術(shù)支持：800-810-0579WH0血液腫瘤分類方案（2008年）組織蛋白細(xì)胞基因技術(shù)支持白血病分子診斷的意義精確診斷準(zhǔn)確預(yù)后指導(dǎo)治療科研資料白血病初發(fā)MICM診斷系統(tǒng)診斷異常標(biāo)記殘留監(jiān)測靶向治療技術(shù)支持：800-810-0579白血病分子診斷的意義精確診斷白血病初發(fā)MICM診斷系統(tǒng)診斷異WHO血液腫瘤新分類實(shí)驗技術(shù)平臺實(shí)施WHO血液腫瘤新分類方案高度依賴流式細(xì)胞、細(xì)胞遺傳和分子生物學(xué)實(shí)驗技術(shù)平臺以及更為重要的掌握這類實(shí)驗技能并具有血液腫瘤專業(yè)知識的血液病理學(xué)醫(yī)師。遺傳工作站流式細(xì)胞基因平臺技術(shù)支持：800-810-0579WHO血液腫瘤新分類實(shí)驗技術(shù)平臺實(shí)施WHO血基因檢測

——融合基因基因突變技術(shù)支持：800-810-0579基因檢測技術(shù)支持：800-810-0579“二次打擊”學(xué)說D.GaryGillilandBestPractice&ResearchClinicalHaematology.2003;16:409-417基因突變?nèi)诤匣虬籽“l(fā)生技術(shù)支持：800-810-0579“二次打擊”學(xué)說D.GaryGillilandBestCMLIndicationsforDiagnosticTestsMilestonesandMonitoringinPatientswithCMLTreatedwithImatinib(2008ASHEducationProgramBookp420)Test Indication PhysicalExam Diagnosis/Staging Everythreemonthuntilresolutionofsplenomegaly SuspectedprogressionorresistanceCompleteBloodCount Diagnosis/Staging Every1-2weeksuntilbloodcounthavestabilized,thenat6weeksintervals SuspectedprogressionorresistanceBoneMarrowKaryotyping Diagnosis/Staging 6,12,18monthsoruntilcompletecytogeneticresponse SuspectedprogressionorresistanceQuantitativePCRforBcr-AblEverythreemonthsonceCCyR(completecytogeneticresponse) documentedFISHforBCR-ABL UncertainDiagnosis(typicalclinicalpresentation,butmetaphase(peripheralblood) cytogeneticsnotsuccessful,orPhchromosomenegative) Every3monthsifnoaccesstohighquantitativePCRmonitoringQualitative(lowsensitivity) UncertainDiagnosis(typicalclinicalpresentation,butmetaphasePCRforBCR-ABL cytogeneticsnotsuccessful,orPhchromosomenegative)BCR-ABLKinaseMutationScreenSuspectedprogressionorresistance

技術(shù)支持：800-810-0579CMLIndicationsforDiagnosticMolecularMeasurementsofTreatmentResponse—ClinicalApplication(2008ASHEducationProgramBookp367)

Application Action

Detectpoorearlytreatmentresponse Treatmentintensification

Detectgoodearlytreatmentresponse Treatmentdeintensification

Detectrelapse Treatmentintensification PrepareforHSCT MeasureMRDbeforeHSCT OptimizetimingofHSCTMeasureMRDafterHSCT Modulateimmunosupression DLI,etc.MeasureMRDatendofclinicaltrial Evaluatetheresultofnovelanti- ALLagentsortherapy

技術(shù)支持：800-810-0579MolecularMeasurementsofTrea分子診斷在白血病診斷中的應(yīng)用提供早期輔助診斷及預(yù)后判斷對治療過程進(jìn)行跟蹤進(jìn)行白血病治療后的微小殘留檢測技術(shù)支持：800-810-0579分子診斷在白血病診斷中的應(yīng)用提供早期輔助診斷及預(yù)后判斷技術(shù)支各病例中的具體應(yīng)用AMLCML

ALLCLL

淋巴瘤技術(shù)支持：800-810-0579各病例中的具體應(yīng)用AML技術(shù)支持：800-810-0579AML病例中應(yīng)用t(8;21)(q22;q22)AML1-ETOt(15;17)(q22;q21)PML-RARainv(16)(p13;q22)CBFB-MYH11AML融合基因全套檢測FLT3基因突變檢測NPM1基因突變檢測c-kit/D816V突變檢測CEBPA基因突變檢測WT1基因表達(dá)定量檢測技術(shù)支持：800-810-0579AML病例中應(yīng)用t(8;21)(q22;q22)AML1-t(8;21)(q22;q22)AML1-ETO融合基因t(8;21)出現(xiàn)在大約7%的AML病例中，在年青的患者中更為常見。其主要出現(xiàn)在AML-M2這一亞型中，大約有20-40%的病例具有t(8;21)。AML1-ETO融合基因出現(xiàn)在所有的t(8;21)陽性的AML中，同時也出現(xiàn)在具有復(fù)雜易位的t(8;21)陰性的AML病例中。t(8;21)易位是一個較好的標(biāo)志。技術(shù)支持：800-810-0579t(8;21)(q22;q22)AML1-ETO融合基因技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579PML-RARα

APL是一類臨床兇險的急性白血病，常見廣泛的嚴(yán)重的出血，以顱內(nèi)出血最為嚴(yán)重。1、t（15;17)，是APL特有的遺傳學(xué)標(biāo)志。（70%-90%的APL存在）2、由于PML基因上融合位點(diǎn)的不同，分為bcr1(55%)、bcr2(4%)、bcr3(40%)三種融合型。3、PML-RARa融合基因（+）的患者，可使用全反式維甲酸并提示預(yù)后復(fù)發(fā)。該基因陽性的病人，可用于療效監(jiān)測和微小殘留的檢測。技術(shù)支持：800-810-0579PML-RARα技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579inv(16)(p13;q22)CBFB-MYH11融合基因Inv(16)(p13;q22)或t(16;16)(p13;q22)通常見于AML-M4Eo亞型，占總AML患者的10%。inv(16)(p13;q22)的病人通常有較好的預(yù)后。技術(shù)支持：800-810-0579inv(16)(p13;q22)CBFB-MYH11融技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579AML相關(guān)基因全套篩查MLL/AF6MLL/AF9MLL/AF10MLL/AF17MLL/ELLdupMLLAML1/ETOPML/RARaPLZF/RARaNPM/RARaCBFB/MYH11NPM/MLF1TLS/ERGDEK/CANEVI1Hox11技術(shù)支持：800-810-0579AML相關(guān)基因全套篩查MLL/AF6MLL/AF9MLL/A技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579基因突變檢測

——AML患者預(yù)后判斷

C-Kit、FLT3、NPM1、CEBPA染色體核型正常的AML患者CEBPA(15%)技術(shù)支持：800-810-0579基因突變檢測染色體核型正常的AML患者CEBPA(15%)技MolecularMarkersadditionaltocytogeneticswithindependentprognosticsignificancesasregardingremissiondurationorsurvivalinAMLofadultsAML:ChallengeofCapturingDieseaseVariety(2008ASHEducationProgramBookp3)Prognosis Gene Genemutationwith CEPBAmutfavorableimpact NMP1mutbutFLD3-ITDnegGenemutationwith KITunfavorableimpact FLD3-ITDbutnoNMP1mut MLL-PTD*(5-10%ofnormalkaryotypeAML) WT-1*

*amongnormalkaryotypeAML

技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579預(yù)后判斷基因突變好CEBPA（+）FLT3（-）/NPM1（+）差FLT3（+）/NPM1（-）C-Kit（+）AML患者4種基因突變檢測小結(jié)技術(shù)支持：800-810-0579預(yù)后判斷基因突變好CEBPA（+）FLT3（-）/NPM1（WT1定量檢測

——MDS/AML監(jiān)測指標(biāo)WT1基因在AML和MDS病人中經(jīng)常異常高表達(dá)，與AML和MDS的發(fā)生和進(jìn)展，以及兇險判斷，療效跟蹤和預(yù)后復(fù)發(fā)判斷有非常密切的關(guān)系。通過定量PCR檢測WT1的表達(dá)能夠有助于AML和MDS病人的風(fēng)險判斷，療效跟蹤和預(yù)后復(fù)發(fā)的判斷。技術(shù)支持：800-810-0579WT1定量檢測

——MDS/AML技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579WT1在正常標(biāo)本和AML病例中的表達(dá)情況正常骨髓患者骨髓技術(shù)支持：800-810-0579WT1在正常標(biāo)本和AML病例中的表達(dá)情況正常骨髓患者骨髓技術(shù)技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579基因檢測——CMPD診斷CMPD相關(guān)異常（外周血象、骨髓象）陰性陽性JAK2基因突變陰性陽性PV、ET、CMFHES/CEL、SMCML診斷可能BCR/ABL融合基因（FISH、PCR）技術(shù)支持：800-810-0579基因檢測CMPD相關(guān)異常（外周血象、骨髓象）陰性陽性JAK2

在WHO2008分類系統(tǒng)中，將有無JAK2突變列為主要的診斷指標(biāo)：

如果JAK2突變陽性，血紅蛋白增加，骨髓紅系細(xì)胞明顯增加，就可以診斷真性紅細(xì)胞增多癥（PV），即使患者就診時血紅蛋白低于以往WHO所規(guī)定的指標(biāo)值，但卻持續(xù)超過正常值20g/l，也可以確診PV。如果JAK2突變陽性，血小板僅僅持續(xù)大于450*109/L，骨髓巨核細(xì)胞增生，可以診斷原發(fā)性血小板增多（ET）。PV/ET診斷技術(shù)支持：800-810-0579在WHO2008分類系統(tǒng)中，將有無JAK2突變列為主要的診FIP1L1-PDGFRA部分高嗜酸性粒細(xì)胞綜合征（HES）患者含有FIP1L1-PDGFRA融合基因，F(xiàn)IP1L1-PDGFRA有持續(xù)活化的酪氨酸激酶活性，對酪氨酸激酶抑制劑非常敏感，可用格列衛(wèi)治療。ETV6-PDGFRB有少部分CMPD病例（BCR-ABL陰性）的PDGFRB基因持續(xù)性活化表達(dá)，格列衛(wèi)能夠特異性的抑制ETV6-PDGFRB的酪氨酸激酶活性，攜帶該融合基因的CMPD病例可以選擇格列衛(wèi)治療。技術(shù)支持：800-810-0579FIP1L1-PDGFRA技術(shù)支持：800-810-0579CML病例中的應(yīng)用BCR-ABL融合基因檢測：t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLp210t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLp230BCR-ABL融合基因ABL激酶突變檢測技術(shù)支持：800-810-0579CML病例中的應(yīng)用BCR-ABL融合基因檢測：技術(shù)支持：8BCR-ABL融合基因超過95%的CML病例中存在BCR-ABL融合基因

P210型M-bcr（絕大多數(shù)）

b3-a2（55%）b2-a2（40%）b3-a2和b2-a2（5%）b3-a3（罕見）b2-a3（罕見）p230型u-bcr

e19-a2（罕見）技術(shù)支持：800-810-0579BCR-ABL融合基因超過95%的CML病例中存定性檢測：RT-PCR定量檢測：QRT-PCR技術(shù)支持：800-810-0579定性檢測：RT-PCR定量檢測：QRT-PCR技術(shù)支持：80定性檢測報告模板技術(shù)支持：800-810-0579定性檢測報告模板技術(shù)支持：800-810-0579定量檢測報告技術(shù)支持：800-810-0579定量檢測報告技術(shù)支持：800-810-0579BCR-ABL融合基因ABL激酶突變檢測ABL激酶突變會引起伊馬替尼治療耐藥

T315I

耐藥機(jī)制:T315突變后不能與伊馬替尼形成關(guān)鍵性的氫鍵，可完全阻斷伊馬替尼與ABL激酶區(qū)的結(jié)合,從而耐藥。

P環(huán)的突變(244-255)

耐藥機(jī)制：如Y253F／H、E255K／V、Q252H、G250E等通過改變ABL激酶的空間構(gòu)象，亦可阻礙伊馬替尼與之結(jié)合。技術(shù)支持：800-810-0579BCR-ABL融合基因ABL激酶突變檢測ABL激

A環(huán)突變(381-402)一般提高用藥量可以降低耐藥程度。

其它突變對于耐藥程度較弱的突變，如M244V、G250E、F317L、E355G、F359V及V379I等，通過提高藥物劑量，可以克服耐藥。技術(shù)支持：800-810-0579A環(huán)突變(381-402)技術(shù)支持：800-810報告模板技術(shù)支持：800-810-0579報告模板技術(shù)支持：800-810-0579ALL病例中應(yīng)用t(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLALL相關(guān)基因全套檢測技術(shù)支持：800-810-0579ALL病例中應(yīng)用t(1;19)(q23;p13)E2At(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1融合基因t(1;19)(q23;p13)易位可以在5-6%的兒童ALL病例和3%的成人ALL病例檢測到。這一易位幾乎全部出現(xiàn)在前B細(xì)胞ALL病例中。攜帶有該易位的病人，其臨床癥狀都比較兇險。技術(shù)支持：800-810-0579t(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1融合基t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4融合基因在50-70%的嬰幼兒ALL和將近5%的小兒和成人ALL病例中有MLL-AF4融合基因。t(4;11)(q21;q23)與前B-ALL相關(guān)。在嬰幼兒ALL中MLL-AF4融合基因被認(rèn)為是預(yù)后不好的標(biāo)志。在成人ALL中也是一個壞的標(biāo)志，但對于成人ALL，該融合基因的存在似乎能增強(qiáng)高劑量的阿糖胞苷（Ara-c）的療效。技術(shù)支持：800-810-0579t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4融合基因t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1融合基因t(12;21)(p13;q22)是兒童ALL中最為常見的易位，幾乎25%的小兒ALL有該易位。其主要的陽性病人出現(xiàn)在1-12歲之間，其中2-5歲這個年齡段最多。所有的病例其免疫分型都是前B細(xì)胞ALL。t(12;21)陽性的病人都有較好的預(yù)后，其復(fù)發(fā)的時間也會較晚。技術(shù)支持：800-810-0579t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1融合基因t(9;22)(q34;q11)BCR-ABL融合基因Ph染色體在5%的小兒ALL和20-50%（隨年齡增加比例也增加）的成人ALL中也可見。在Ph+的ALL中40%的BCR-ABL融合基因是p210型的，60%是p190型的。在ALL中，PH陽性和隨之出現(xiàn)的BCR-ABL融合基因是一個非常不好的標(biāo)志。技術(shù)支持：800-810-0579t(9;22)(q34;q11)BCR-ABL融合基因ALL相關(guān)基因全套檢測MLL/AFXMLL/AF1PMLL/AF4MLL/AF6dupMLLMLL/ENLE2A/PBX1BCR/ABL（p210）E2A/HLFBCR/ABL（p190）SIL/TAL1TEL/AML1TLS/ERGTEL/ABLHOX1144ALL相關(guān)基因全套檢測MLL/AFXMLL/AF1PMLL/技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579CLL病例中的應(yīng)用IgVH基因重排檢測：

IgVH突變狀態(tài)：按照細(xì)胞IgVH的突變狀態(tài)可以將CLL分為突變的CLL（M-CLL）與未突變的CLL(U-CLL)。前者預(yù)后較好。而后者則疾病進(jìn)展快，生存期短。技術(shù)支持：800-810-0579CLL病例中的應(yīng)用IgVH基因重排檢測：技術(shù)支持：8IgVH基因重排陽性的CLL患者預(yù)后較好技術(shù)支持：800-810-0579IgVH基因重排陽性的CLL患者預(yù)后較好技術(shù)支持：800-8融合基因套系臨床意義白血病31種融合基因篩查ALL、AML、CML、MDS等的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測AML16種融合基因篩查AML的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測ALL15種融合基因篩查ALL的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測融合基因套系技術(shù)支持：800-810-0579融合基因套系臨床意義白血病31種融合基因篩查ALL、AML、白血病31種融合基因篩查

技術(shù)支持：800-810-0579白血病31種融合基因篩查

技術(shù)支持：800-810-0579其它檢測項目TCR/IgH重排BCL-1/JH、BCL-2/JH檢測技術(shù)支持：800-810-0579其它檢測項目TCR/IgH重排技術(shù)支持：800-810-05IGH與TCR重排淋巴細(xì)胞克隆性的檢測對鑒別良、惡性淋巴細(xì)胞增生有重要的參考價值。單克隆重排：淋巴細(xì)胞異常標(biāo)志多克隆性重排：淋巴細(xì)胞正常生長發(fā)育IgH基因TCR基因T細(xì)胞B細(xì)胞重排成熟B細(xì)胞成熟T細(xì)胞技術(shù)支持：800-810-0579IGH與TCR重排淋巴細(xì)胞克隆性的檢測對鑒別良、惡性淋巴細(xì)胞ALL、CLL、淋巴瘤輔助診斷CLL預(yù)后判斷技術(shù)支持：800-810-0579ALL、CLL、技術(shù)支持：800-810-0579ALL、CLL、淋巴瘤輔助診斷技術(shù)支持：800-810-0579ALL、CLL、技術(shù)支持：800-810-0579BCL-1/JH檢測BCL-1/JH[t(11;14)(q13;q32)]基因重排主要發(fā)生在套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）當(dāng)中,在60-70%的MCL病例中有該易位的存在，檢測BCL-1/JH基因重排可幫助鑒別診斷套細(xì)胞淋巴瘤。技術(shù)支持：800-810-0579BCL-1/JH檢測BCL-1/JH技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579BCL-2/JHt(14;18)易位是B細(xì)胞淋巴瘤的特有性變異，90%的濾泡性淋巴瘤和20-30%的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤含有此易位。BCL-2/JH檢測技術(shù)支持：800-810-0579BCL-2/JHt(14;18)易位是B細(xì)胞淋巴瘤技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579標(biāo)本要求骨髓2-3ml或外周血3-5mL（復(fù)發(fā)和微小殘留的檢測：骨髓2-3ml）EDTA抗凝（紫頭管），4℃，24h內(nèi)送檢。技術(shù)支持：800-810-0579標(biāo)本要求骨髓2-3ml或外周血3-5mL技術(shù)支持：800-8

細(xì)胞遺傳學(xué)

——染色體核型分析FISH技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579染色體核型分析適應(yīng)癥1.造血系統(tǒng)疾病初診2.末次化療結(jié)束兩周以上意義

對惡性血液病的診斷，分類分型，治療方案選擇，療效評估和預(yù)后預(yù)測方面都有重要的價值。46，XY技術(shù)支持：800-810-0579染色體核型分析適應(yīng)癥46，XY技術(shù)支持：800-810-05t(9;22)(q34;q11),約占95%CML

Ph染色體

染色體核型分析——診斷技術(shù)支持：800-810-0579t(9;22)(q34;q11),約占95%CML

P8三體 ——單獨(dú)或附加異常，較多見于M1，M4，

M5，預(yù)后差或中等46,XY,+8技術(shù)支持：800-810-05798三體 ——單獨(dú)或附加異常，較多見于M1，M4，46,XY,

FISH檢測熒光標(biāo)記的DNA探針原位雜交熒光顯微鏡檢測技術(shù)支持：800-810-0579FISH檢測熒光標(biāo)記的DNA探針原位雜交熒光顯FISH相對于染色體檢測，靈敏度高，特異性高?？梢詮浹a(bǔ)染色體不足，染色體檢測為陰性，F(xiàn)ISH可能為陽性。

患者用藥后，染色體陽性率較低，F(xiàn)ISH可提高檢出率。

染色體核型與FISH技術(shù)支持：800-810-0579FISH相對于染色體檢測，靈敏度高，特異性高?？梢詮浹a(bǔ)染變異型Ｐh（復(fù)雜遮蔽型）易位FISH探針：BCR/ABL

檢測結(jié)果nucish9q34(ABL×2),22q34(BCR×2)(ABLconBCR×1)[200/400]技術(shù)支持：800-810-0579變異型Ｐh（復(fù)雜遮蔽型）易位FISH探針：BCR/ABL正常FISH組合結(jié)果，中位生存期約為111個月。FISH探針套系：CLL各探針中位生存期（月）p53基因缺失32ATM缺失7912號三體11413q14133RB1缺失133技術(shù)支持：800-810-0579FISH探針套系：CLL各探針中位生存期（月）p53基因缺失FISH探針套系：MM各探針中位生存期（月）P53缺失24.7RB1缺失42.3D13S319缺失42.31q21位點(diǎn)擴(kuò)增提示預(yù)后差I(lǐng)gH基因重排輔助診斷技術(shù)支持：800-810-0579FISH探針套系：MM各探針中位生存期（月）P53缺失24.FISH探針套系：MDS預(yù)后各探針中位生存期（月）好5q->24中+818差-7/7q-<1220q-技術(shù)支持：800-810-0579FISH探針套系：MDS預(yù)后各探針中位生存期（月）好5q->標(biāo)本要求骨髓3－5ml，肝素鈉抗凝綠頭管。全血3-5ml（外周血原始細(xì)胞>30%），肝素鈉抗凝，48小時內(nèi)，4℃送檢，詳細(xì)填寫申請單。

技術(shù)支持：800-810-0579標(biāo)本要求技術(shù)支持：800-810-057970病例一：AML病例資料：女，3歲，2009.6初發(fā)FCM印象：在CD45/SSC點(diǎn)圖上設(shè)門分析，原始細(xì)胞分布區(qū)域可見異常細(xì)胞群體，約占有核細(xì)胞的26%，主要表達(dá)HLA-DR、CD13、CD15、CD33、CD34、CD38、CD117，（CD19+2.27%）。淋巴細(xì)胞比例降低。提示：急性髓系細(xì)胞白血?。ˋML-M2可能）?；颍篈ML1/ETO陽性。技術(shù)支持：800-810-057970病例一：AML病例資料：女，3歲，2009.6712009.7化療D33：FCM：可見殘留，CD33+CD19+細(xì)胞約占0.04%?；颍篈ML1/ETO陽性。技術(shù)支持：800-810-0579712009.7化療D33：技術(shù)支持：800-81722009.9D70：FCM：未做。基因：AML1/ETO陰性。2010.3D245：FCM：未見免疫表型明顯異常的細(xì)胞。基因：AML1/ETO陰性。技術(shù)支持：800-810-0579722009.9D70：技術(shù)支持：800-810-05773病例資料：病人陳某，2008年2月在協(xié)和醫(yī)院確診CML。BCR-ABL定量檢測為陽性。格列衛(wèi)治療。00.1110100初發(fā)3個月8個月19個月13個月BCR-ABL/ABL(%)<0.1MMR病例二：CML技術(shù)支持：800-810-057973病例資料：00.1110100初發(fā)3個月8個月19個月1技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579海南北京黑龍江吉林遼寧內(nèi)蒙古天津河北山東山西陜西新疆臺灣西藏青海江西河南安徽湖南浙江甘肅寧夏重慶云南福建廣東香港廣西四川貴州上海江蘇湖北海南北京黑龍江吉林遼寧內(nèi)蒙古天津河北山東山西陜西新疆臺灣西藏謝謝大家！關(guān)注健康關(guān)注康圣環(huán)球技術(shù)支持：800-810-0579謝謝大家！關(guān)注健康關(guān)注康圣環(huán)球技術(shù)支持：800-810-78/10/2978/10/29白血病分子診斷技術(shù)康圣環(huán)球醫(yī)學(xué)特檢集團(tuán)周榮技術(shù)支持：800-810-0579白血病分子診斷技術(shù)康圣環(huán)球醫(yī)學(xué)特檢集團(tuán)技術(shù)支持：800-81WH0血液腫瘤分類方案（1999年）新分類方案的基本原則是：結(jié)合形態(tài)學(xué)、免疫表型、遺傳改變和臨床特征來鑒定疾病的“真實(shí)本質(zhì)”。提供了疾病分類與治療選擇和預(yù)后判斷的較明確關(guān)聯(lián)性，開啟了血液腫瘤靶向性治療和個性化方案的新時代。形態(tài)學(xué)免疫學(xué)細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)支持：800-810-0579WH0血液腫瘤分類方案（1999年）新分類方案的基本原則是：WH0血液腫瘤分類方案（2008年）組織蛋白細(xì)胞基因技術(shù)支持：800-810-0579WH0血液腫瘤分類方案（2008年）組織蛋白細(xì)胞基因技術(shù)支持白血病分子診斷的意義精確診斷準(zhǔn)確預(yù)后指導(dǎo)治療科研資料白血病初發(fā)MICM診斷系統(tǒng)診斷異常標(biāo)記殘留監(jiān)測靶向治療技術(shù)支持：800-810-0579白血病分子診斷的意義精確診斷白血病初發(fā)MICM診斷系統(tǒng)診斷異WHO血液腫瘤新分類實(shí)驗技術(shù)平臺實(shí)施WHO血液腫瘤新分類方案高度依賴流式細(xì)胞、細(xì)胞遺傳和分子生物學(xué)實(shí)驗技術(shù)平臺以及更為重要的掌握這類實(shí)驗技能并具有血液腫瘤專業(yè)知識的血液病理學(xué)醫(yī)師。遺傳工作站流式細(xì)胞基因平臺技術(shù)支持：800-810-0579WHO血液腫瘤新分類實(shí)驗技術(shù)平臺實(shí)施WHO血基因檢測

——融合基因基因突變技術(shù)支持：800-810-0579基因檢測技術(shù)支持：800-810-0579“二次打擊”學(xué)說D.GaryGillilandBestPractice&ResearchClinicalHaematology.2003;16:409-417基因突變?nèi)诤匣虬籽“l(fā)生技術(shù)支持：800-810-0579“二次打擊”學(xué)說D.GaryGillilandBestCMLIndicationsforDiagnosticTestsMilestonesandMonitoringinPatientswithCMLTreatedwithImatinib(2008ASHEducationProgramBookp420)Test Indication PhysicalExam Diagnosis/Staging Everythreemonthuntilresolutionofsplenomegaly SuspectedprogressionorresistanceCompleteBloodCount Diagnosis/Staging Every1-2weeksuntilbloodcounthavestabilized,thenat6weeksintervals SuspectedprogressionorresistanceBoneMarrowKaryotyping Diagnosis/Staging 6,12,18monthsoruntilcompletecytogeneticresponse SuspectedprogressionorresistanceQuantitativePCRforBcr-AblEverythreemonthsonceCCyR(completecytogeneticresponse) documentedFISHforBCR-ABL UncertainDiagnosis(typicalclinicalpresentation,butmetaphase(peripheralblood) cytogeneticsnotsuccessful,orPhchromosomenegative) Every3monthsifnoaccesstohighquantitativePCRmonitoringQualitative(lowsensitivity) UncertainDiagnosis(typicalclinicalpresentation,butmetaphasePCRforBCR-ABL cytogeneticsnotsuccessful,orPhchromosomenegative)BCR-ABLKinaseMutationScreenSuspectedprogressionorresistance

技術(shù)支持：800-810-0579CMLIndicationsforDiagnosticMolecularMeasurementsofTreatmentResponse—ClinicalApplication(2008ASHEducationProgramBookp367)

Application Action

Detectpoorearlytreatmentresponse Treatmentintensification

Detectgoodearlytreatmentresponse Treatmentdeintensification

Detectrelapse Treatmentintensification PrepareforHSCT MeasureMRDbeforeHSCT OptimizetimingofHSCTMeasureMRDafterHSCT Modulateimmunosupression DLI,etc.MeasureMRDatendofclinicaltrial Evaluatetheresultofnovelanti- ALLagentsortherapy

技術(shù)支持：800-810-0579MolecularMeasurementsofTrea分子診斷在白血病診斷中的應(yīng)用提供早期輔助診斷及預(yù)后判斷對治療過程進(jìn)行跟蹤進(jìn)行白血病治療后的微小殘留檢測技術(shù)支持：800-810-0579分子診斷在白血病診斷中的應(yīng)用提供早期輔助診斷及預(yù)后判斷技術(shù)支各病例中的具體應(yīng)用AMLCML

ALLCLL

淋巴瘤技術(shù)支持：800-810-0579各病例中的具體應(yīng)用AML技術(shù)支持：800-810-0579AML病例中應(yīng)用t(8;21)(q22;q22)AML1-ETOt(15;17)(q22;q21)PML-RARainv(16)(p13;q22)CBFB-MYH11AML融合基因全套檢測FLT3基因突變檢測NPM1基因突變檢測c-kit/D816V突變檢測CEBPA基因突變檢測WT1基因表達(dá)定量檢測技術(shù)支持：800-810-0579AML病例中應(yīng)用t(8;21)(q22;q22)AML1-t(8;21)(q22;q22)AML1-ETO融合基因t(8;21)出現(xiàn)在大約7%的AML病例中，在年青的患者中更為常見。其主要出現(xiàn)在AML-M2這一亞型中，大約有20-40%的病例具有t(8;21)。AML1-ETO融合基因出現(xiàn)在所有的t(8;21)陽性的AML中，同時也出現(xiàn)在具有復(fù)雜易位的t(8;21)陰性的AML病例中。t(8;21)易位是一個較好的標(biāo)志。技術(shù)支持：800-810-0579t(8;21)(q22;q22)AML1-ETO融合基因技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579PML-RARα

APL是一類臨床兇險的急性白血病，常見廣泛的嚴(yán)重的出血，以顱內(nèi)出血最為嚴(yán)重。1、t（15;17)，是APL特有的遺傳學(xué)標(biāo)志。（70%-90%的APL存在）2、由于PML基因上融合位點(diǎn)的不同，分為bcr1(55%)、bcr2(4%)、bcr3(40%)三種融合型。3、PML-RARa融合基因（+）的患者，可使用全反式維甲酸并提示預(yù)后復(fù)發(fā)。該基因陽性的病人，可用于療效監(jiān)測和微小殘留的檢測。技術(shù)支持：800-810-0579PML-RARα技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579inv(16)(p13;q22)CBFB-MYH11融合基因Inv(16)(p13;q22)或t(16;16)(p13;q22)通常見于AML-M4Eo亞型，占總AML患者的10%。inv(16)(p13;q22)的病人通常有較好的預(yù)后。技術(shù)支持：800-810-0579inv(16)(p13;q22)CBFB-MYH11融技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579AML相關(guān)基因全套篩查MLL/AF6MLL/AF9MLL/AF10MLL/AF17MLL/ELLdupMLLAML1/ETOPML/RARaPLZF/RARaNPM/RARaCBFB/MYH11NPM/MLF1TLS/ERGDEK/CANEVI1Hox11技術(shù)支持：800-810-0579AML相關(guān)基因全套篩查MLL/AF6MLL/AF9MLL/A技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579基因突變檢測

——AML患者預(yù)后判斷

C-Kit、FLT3、NPM1、CEBPA染色體核型正常的AML患者CEBPA(15%)技術(shù)支持：800-810-0579基因突變檢測染色體核型正常的AML患者CEBPA(15%)技MolecularMarkersadditionaltocytogeneticswithindependentprognosticsignificancesasregardingremissiondurationorsurvivalinAMLofadultsAML:ChallengeofCapturingDieseaseVariety(2008ASHEducationProgramBookp3)Prognosis Gene Genemutationwith CEPBAmutfavorableimpact NMP1mutbutFLD3-ITDnegGenemutationwith KITunfavorableimpact FLD3-ITDbutnoNMP1mut MLL-PTD*(5-10%ofnormalkaryotypeAML) WT-1*

*amongnormalkaryotypeAML

技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579預(yù)后判斷基因突變好CEBPA（+）FLT3（-）/NPM1（+）差FLT3（+）/NPM1（-）C-Kit（+）AML患者4種基因突變檢測小結(jié)技術(shù)支持：800-810-0579預(yù)后判斷基因突變好CEBPA（+）FLT3（-）/NPM1（WT1定量檢測

——MDS/AML監(jiān)測指標(biāo)WT1基因在AML和MDS病人中經(jīng)常異常高表達(dá)，與AML和MDS的發(fā)生和進(jìn)展，以及兇險判斷，療效跟蹤和預(yù)后復(fù)發(fā)判斷有非常密切的關(guān)系。通過定量PCR檢測WT1的表達(dá)能夠有助于AML和MDS病人的風(fēng)險判斷，療效跟蹤和預(yù)后復(fù)發(fā)的判斷。技術(shù)支持：800-810-0579WT1定量檢測

——MDS/AML技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579WT1在正常標(biāo)本和AML病例中的表達(dá)情況正常骨髓患者骨髓技術(shù)支持：800-810-0579WT1在正常標(biāo)本和AML病例中的表達(dá)情況正常骨髓患者骨髓技術(shù)技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579基因檢測——CMPD診斷CMPD相關(guān)異常（外周血象、骨髓象）陰性陽性JAK2基因突變陰性陽性PV、ET、CMFHES/CEL、SMCML診斷可能BCR/ABL融合基因（FISH、PCR）技術(shù)支持：800-810-0579基因檢測CMPD相關(guān)異常（外周血象、骨髓象）陰性陽性JAK2

在WHO2008分類系統(tǒng)中，將有無JAK2突變列為主要的診斷指標(biāo)：

如果JAK2突變陽性，血紅蛋白增加，骨髓紅系細(xì)胞明顯增加，就可以診斷真性紅細(xì)胞增多癥（PV），即使患者就診時血紅蛋白低于以往WHO所規(guī)定的指標(biāo)值，但卻持續(xù)超過正常值20g/l，也可以確診PV。如果JAK2突變陽性，血小板僅僅持續(xù)大于450*109/L，骨髓巨核細(xì)胞增生，可以診斷原發(fā)性血小板增多（ET）。PV/ET診斷技術(shù)支持：800-810-0579在WHO2008分類系統(tǒng)中，將有無JAK2突變列為主要的診FIP1L1-PDGFRA部分高嗜酸性粒細(xì)胞綜合征（HES）患者含有FIP1L1-PDGFRA融合基因，F(xiàn)IP1L1-PDGFRA有持續(xù)活化的酪氨酸激酶活性，對酪氨酸激酶抑制劑非常敏感，可用格列衛(wèi)治療。ETV6-PDGFRB有少部分CMPD病例（BCR-ABL陰性）的PDGFRB基因持續(xù)性活化表達(dá)，格列衛(wèi)能夠特異性的抑制ETV6-PDGFRB的酪氨酸激酶活性，攜帶該融合基因的CMPD病例可以選擇格列衛(wèi)治療。技術(shù)支持：800-810-0579FIP1L1-PDGFRA技術(shù)支持：800-810-0579CML病例中的應(yīng)用BCR-ABL融合基因檢測：t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLp210t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLp230BCR-ABL融合基因ABL激酶突變檢測技術(shù)支持：800-810-0579CML病例中的應(yīng)用BCR-ABL融合基因檢測：技術(shù)支持：8BCR-ABL融合基因超過95%的CML病例中存在BCR-ABL融合基因

P210型M-bcr（絕大多數(shù)）

b3-a2（55%）b2-a2（40%）b3-a2和b2-a2（5%）b3-a3（罕見）b2-a3（罕見）p230型u-bcr

e19-a2（罕見）技術(shù)支持：800-810-0579BCR-ABL融合基因超過95%的CML病例中存定性檢測：RT-PCR定量檢測：QRT-PCR技術(shù)支持：800-810-0579定性檢測：RT-PCR定量檢測：QRT-PCR技術(shù)支持：80定性檢測報告模板技術(shù)支持：800-810-0579定性檢測報告模板技術(shù)支持：800-810-0579定量檢測報告技術(shù)支持：800-810-0579定量檢測報告技術(shù)支持：800-810-0579BCR-ABL融合基因ABL激酶突變檢測ABL激酶突變會引起伊馬替尼治療耐藥

T315I

耐藥機(jī)制:T315突變后不能與伊馬替尼形成關(guān)鍵性的氫鍵，可完全阻斷伊馬替尼與ABL激酶區(qū)的結(jié)合,從而耐藥。

P環(huán)的突變(244-255)

耐藥機(jī)制：如Y253F／H、E255K／V、Q252H、G250E等通過改變ABL激酶的空間構(gòu)象，亦可阻礙伊馬替尼與之結(jié)合。技術(shù)支持：800-810-0579BCR-ABL融合基因ABL激酶突變檢測ABL激

A環(huán)突變(381-402)一般提高用藥量可以降低耐藥程度。

其它突變對于耐藥程度較弱的突變，如M244V、G250E、F317L、E355G、F359V及V379I等，通過提高藥物劑量，可以克服耐藥。技術(shù)支持：800-810-0579A環(huán)突變(381-402)技術(shù)支持：800-810報告模板技術(shù)支持：800-810-0579報告模板技術(shù)支持：800-810-0579ALL病例中應(yīng)用t(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1t(9;22)(q34;q11)BCR-ABLALL相關(guān)基因全套檢測技術(shù)支持：800-810-0579ALL病例中應(yīng)用t(1;19)(q23;p13)E2At(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1融合基因t(1;19)(q23;p13)易位可以在5-6%的兒童ALL病例和3%的成人ALL病例檢測到。這一易位幾乎全部出現(xiàn)在前B細(xì)胞ALL病例中。攜帶有該易位的病人，其臨床癥狀都比較兇險。技術(shù)支持：800-810-0579t(1;19)(q23;p13)E2A-PBX1融合基t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4融合基因在50-70%的嬰幼兒ALL和將近5%的小兒和成人ALL病例中有MLL-AF4融合基因。t(4;11)(q21;q23)與前B-ALL相關(guān)。在嬰幼兒ALL中MLL-AF4融合基因被認(rèn)為是預(yù)后不好的標(biāo)志。在成人ALL中也是一個壞的標(biāo)志，但對于成人ALL，該融合基因的存在似乎能增強(qiáng)高劑量的阿糖胞苷（Ara-c）的療效。技術(shù)支持：800-810-0579t(4;11)(q21;q23)MLL-AF4融合基因t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1融合基因t(12;21)(p13;q22)是兒童ALL中最為常見的易位，幾乎25%的小兒ALL有該易位。其主要的陽性病人出現(xiàn)在1-12歲之間，其中2-5歲這個年齡段最多。所有的病例其免疫分型都是前B細(xì)胞ALL。t(12;21)陽性的病人都有較好的預(yù)后，其復(fù)發(fā)的時間也會較晚。技術(shù)支持：800-810-0579t(12;21)(p13;q22)TEL-AML1融合基因t(9;22)(q34;q11)BCR-ABL融合基因Ph染色體在5%的小兒ALL和20-50%（隨年齡增加比例也增加）的成人ALL中也可見。在Ph+的ALL中40%的BCR-ABL融合基因是p210型的，60%是p190型的。在ALL中，PH陽性和隨之出現(xiàn)的BCR-ABL融合基因是一個非常不好的標(biāo)志。技術(shù)支持：800-810-0579t(9;22)(q34;q11)BCR-ABL融合基因ALL相關(guān)基因全套檢測MLL/AFXMLL/AF1PMLL/AF4MLL/AF6dupMLLMLL/ENLE2A/PBX1BCR/ABL（p210）E2A/HLFBCR/ABL（p190）SIL/TAL1TEL/AML1TLS/ERGTEL/ABLHOX11122ALL相關(guān)基因全套檢測MLL/AFXMLL/AF1PMLL/技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579CLL病例中的應(yīng)用IgVH基因重排檢測：

IgVH突變狀態(tài)：按照細(xì)胞IgVH的突變狀態(tài)可以將CLL分為突變的CLL（M-CLL）與未突變的CLL(U-CLL)。前者預(yù)后較好。而后者則疾病進(jìn)展快，生存期短。技術(shù)支持：800-810-0579CLL病例中的應(yīng)用IgVH基因重排檢測：技術(shù)支持：8IgVH基因重排陽性的CLL患者預(yù)后較好技術(shù)支持：800-810-0579IgVH基因重排陽性的CLL患者預(yù)后較好技術(shù)支持：800-8融合基因套系臨床意義白血病31種融合基因篩查ALL、AML、CML、MDS等的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測AML16種融合基因篩查AML的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測ALL15種融合基因篩查ALL的輔助診斷、預(yù)后判斷和療效監(jiān)測融合基因套系技術(shù)支持：800-810-0579融合基因套系臨床意義白血病31種融合基因篩查ALL、AML、白血病31種融合基因篩查

技術(shù)支持：800-810-0579白血病31種融合基因篩查

技術(shù)支持：800-810-0579其它檢測項目TCR/IgH重排BCL-1/JH、BCL-2/JH檢測技術(shù)支持：800-810-0579其它檢測項目TCR/IgH重排技術(shù)支持：800-810-05IGH與TCR重排淋巴細(xì)胞克隆性的檢測對鑒別良、惡性淋巴細(xì)胞增生有重要的參考價值。單克隆重排：淋巴細(xì)胞異常標(biāo)志多克隆性重排：淋巴細(xì)胞正常生長發(fā)育IgH基因TCR基因T細(xì)胞B細(xì)胞重排成熟B細(xì)胞成熟T細(xì)胞技術(shù)支持：800-810-0579IGH與TCR重排淋巴細(xì)胞克隆性的檢測對鑒別良、惡性淋巴細(xì)胞ALL、CLL、淋巴瘤輔助診斷CLL預(yù)后判斷技術(shù)支持：800-810-0579ALL、CLL、技術(shù)支持：800-810-0579ALL、CLL、淋巴瘤輔助診斷技術(shù)支持：800-810-0579ALL、CLL、技術(shù)支持：800-810-0579BCL-1/JH檢測BCL-1/JH[t(11;14)(q13;q32)]基因重排主要發(fā)生在套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）當(dāng)中,在60-70%的MCL病例中有該易位的存在，檢測BCL-1/JH基因重排可幫助鑒別診斷套細(xì)胞淋巴瘤。技術(shù)支持：800-810-0579BCL-1/JH檢測BCL-1/JH技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579BCL-2/JHt(14;18)易位是B細(xì)胞淋巴瘤的特有性變異，90%的濾泡性淋巴瘤和20-30%的彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤含有此易位。BCL-2/JH檢測技術(shù)支持：800-810-0579BCL-2/JHt(14;18)易位是B細(xì)胞淋巴瘤技術(shù)支持：800-810-0579技術(shù)支持：800-810-0579標(biāo)本要求骨髓2-3ml或外周血3-5mL（復(fù)發(fā)和微小殘留的檢測：骨髓2-3ml）EDTA抗凝（紫頭管），4