單克隆抗體制備課件

合肥十三中王立新合肥十三中王立新1

2002年１２月３０日，

兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”—黃花煙草和革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時(shí)在“產(chǎn)房”—電融合儀內(nèi)孕育新生命。一段時(shí)間后，我國(guó)首批”太空娃娃”終于順利誕生。對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞融合率大大提高。STS“太空婚禮”2002年１２月３０日，兩場(chǎng)籌備了102太空中處于失重狀態(tài)，不同種細(xì)胞（原生質(zhì)體）更容易親近為什么在太空，細(xì)胞的原生質(zhì)體融合率會(huì)大大上升？太空中處于失重狀態(tài)，不同種細(xì)胞（原生質(zhì)體）更容易親近為什么在3神舟放飛強(qiáng)國(guó)夢(mèng)神舟放飛強(qiáng)國(guó)夢(mèng)4“太空婚禮”科研項(xiàng)目一：“太空婚禮”科研項(xiàng)目二：

挑戰(zhàn)自我植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)“太空婚禮”科研項(xiàng)目一：“太空婚禮”科研項(xiàng)目二：挑戰(zhàn)自我植物5(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖6AB同核體同核體異核體（雜交細(xì)胞）人工誘導(dǎo)AAABBB還有3個(gè)3個(gè)以上細(xì)胞的融合-------AABBBAAB同核體同核體異核體（雜交細(xì)胞）人工誘導(dǎo)AAABBB還有37“太空婚禮”植物科研項(xiàng)目計(jì)劃書(shū)

項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交原理融合前處理促融方法用途細(xì)胞膜流動(dòng)性、細(xì)胞全能性酶解法去壁物理法化學(xué)法克服遠(yuǎn)緣雜交障礙獲得具優(yōu)良性狀的雜種植株“太空婚禮”植物科研項(xiàng)目計(jì)劃書(shū)

項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交原理融合前8請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合內(nèi)容

問(wèn)題：1、什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？

2、它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步？

3、它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合內(nèi)容9鼠B淋巴細(xì)胞鼠骨髓瘤細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.1動(dòng)物細(xì)胞融合的概念雜交瘤細(xì)胞

動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）是指（在一定的條件下）兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞（該單核細(xì)胞稱(chēng)為雜交細(xì)胞）的過(guò)程。鼠B淋巴細(xì)胞鼠骨髓瘤細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.1動(dòng)物細(xì)胞融合的概念雜交10

問(wèn)題：1、它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步？

2、它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？單克隆抗體制備課件111.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性保留促融合活性過(guò)程1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理為什么滅活的病毒能作誘121.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性131.3動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用1.3動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用14

問(wèn)題：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點(diǎn)？主要分布在哪里？1、抗體問(wèn)題：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用15

一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗原分子刺激淋巴細(xì)胞，說(shuō)的也就是抗原決定簇刺激B淋巴細(xì)胞，使其分裂分化出特異性的漿細(xì)胞，分泌特異性抗體。一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗162、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種漿細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原2、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)：多17讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念發(fā)現(xiàn)：在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。3、單克隆抗體的概念單:單個(gè)細(xì)胞克隆:無(wú)性繁殖單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念發(fā)現(xiàn)：在動(dòng)物發(fā)生免疫18提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：所學(xué)哪種細(xì)胞可以無(wú)限增殖？問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：所學(xué)哪種細(xì)胞可以19

一個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞（只分泌一種特異性抗體）雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)4、單克隆抗體的制備方案動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖的細(xì)胞一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞（能無(wú)限增殖）+一個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞雜交瘤動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)4、單克隆20制備單克隆抗體1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)制備單克隆抗體1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒215、單克隆抗體制備過(guò)程步驟5、單克隆抗體制備過(guò)程步驟22注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.注射抗原的目的是什么？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩23注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩24注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.若細(xì)胞兩兩融合后，有幾種融合情況？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩25注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.第一次篩選出的雜交瘤細(xì)胞為何需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專(zhuān)一抗體檢測(cè)？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩265.實(shí)際操作中如何經(jīng)過(guò)兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞？

5.實(shí)際操作中如何經(jīng)過(guò)兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)27效應(yīng)B細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1多種雜交瘤細(xì)胞符合要求的雜交瘤細(xì)胞抗原-抗體雜交法

篩選2（有限稀釋?zhuān)┗脽羝?4克隆化體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體?？寺⌒?yīng)B細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)287、單克隆抗體的突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高、產(chǎn)量大、容易大規(guī)模生產(chǎn)

6、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖7、單克隆抗體的突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高298、單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速8、單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用30運(yùn)載藥物

(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)治療疾病治療疾病31動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1、動(dòng)物細(xì)胞融合：（1）概念：（2）誘導(dǎo)劑：（3）主要用途：（4）意義：2、單克隆抗體：（1）制備（2）特點(diǎn)（3）應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1、動(dòng)物細(xì)胞融合：2、單克隆抗體：32現(xiàn)在你能主持“太空婚禮”動(dòng)物科研項(xiàng)目了嗎？

項(xiàng)目原理融合前處理促融方法用途膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖物理、化學(xué)、生物法

單克隆抗體的制備小鼠免疫處理、細(xì)胞分散有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防現(xiàn)在你能主持“太空婚禮”動(dòng)物科研項(xiàng)目了嗎？

項(xiàng)目原理融合前處33下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖思考訓(xùn)練：下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖思考訓(xùn)練：34（1）（）技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2）在圖中HAT培養(yǎng)上，未有融合的（）和融合的（）都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合親本細(xì)胞具有同種細(xì)胞核的細(xì)胞（1）（35（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最主要的優(yōu)點(diǎn)是：（）特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制36（4）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速（）特點(diǎn)，又具備淋巴細(xì)胞的（）特點(diǎn)，經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行（）和（），經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。最后將雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或小鼠腹腔內(nèi)增殖，從（）或（）中，就可以提取出大量的單克隆抗體了。大量增殖分泌專(zhuān)一抗體克隆化培養(yǎng)抗體檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液小鼠的腹水（4）選出的雜交瘤細(xì)胞既具備骨髓瘤細(xì)胞的迅速（37（5）淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物（）中的（）細(xì)胞分化、發(fā)育而來(lái)。（6）雜交瘤細(xì)胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的方式（）骨髓造血干細(xì)胞主動(dòng)運(yùn)輸（5）淋巴細(xì)胞是由動(dòng)物（）中的（38課后作業(yè)

通過(guò)報(bào)刊、雜志、互聯(lián)網(wǎng)或其他媒體搜集資料，了解細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體的新進(jìn)展，就自己感興趣的領(lǐng)域，自定選題，寫(xiě)一篇綜述報(bào)告。參考選題：1、1984年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)

2、單克隆抗體的種類(lèi)；

3、單克隆抗體與疾病診斷；

4、生物導(dǎo)彈；

課后作業(yè)通過(guò)報(bào)刊、雜志、互聯(lián)網(wǎng)或其他媒體搜集資料，了39單克隆抗體的制備

看書(shū)上53頁(yè)圖，討論：?jiǎn)慰怪苽溥^(guò)程分哪幾步？請(qǐng)用箭頭把代表單克隆抗體制備過(guò)程步驟圖解的字母按正確順序連接起來(lái)。順序是

單克隆抗體的制備

看書(shū)上53頁(yè)圖，討論：?jiǎn)慰怪苽?0有限稀釋法稀釋多次稀釋將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測(cè)抗體。常用的方法有：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫熒光測(cè)定。有限稀釋法稀釋將培養(yǎng)皿孔內(nèi)的上清液取出，檢測(cè)抗體。常用的方法41謝謝!謝謝!42合肥十三中王立新合肥十三中王立新43

2002年１２月３０日，

兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行，植物細(xì)胞“新人”—黃花煙草和革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時(shí)在“產(chǎn)房”—電融合儀內(nèi)孕育新生命。一段時(shí)間后，我國(guó)首批”太空娃娃”終于順利誕生。對(duì)照實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，細(xì)胞融合率大大提高。STS“太空婚禮”2002年１２月３０日，兩場(chǎng)籌備了1044太空中處于失重狀態(tài)，不同種細(xì)胞（原生質(zhì)體）更容易親近為什么在太空，細(xì)胞的原生質(zhì)體融合率會(huì)大大上升？太空中處于失重狀態(tài)，不同種細(xì)胞（原生質(zhì)體）更容易親近為什么在45神舟放飛強(qiáng)國(guó)夢(mèng)神舟放飛強(qiáng)國(guó)夢(mèng)46“太空婚禮”科研項(xiàng)目一：“太空婚禮”科研項(xiàng)目二：

挑戰(zhàn)自我植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)“太空婚禮”科研項(xiàng)目一：“太空婚禮”科研項(xiàng)目二：挑戰(zhàn)自我植物47(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖48AB同核體同核體異核體（雜交細(xì)胞）人工誘導(dǎo)AAABBB還有3個(gè)3個(gè)以上細(xì)胞的融合-------AABBBAAB同核體同核體異核體（雜交細(xì)胞）人工誘導(dǎo)AAABBB還有349“太空婚禮”植物科研項(xiàng)目計(jì)劃書(shū)

項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交原理融合前處理促融方法用途細(xì)胞膜流動(dòng)性、細(xì)胞全能性酶解法去壁物理法化學(xué)法克服遠(yuǎn)緣雜交障礙獲得具優(yōu)良性狀的雜種植株“太空婚禮”植物科研項(xiàng)目計(jì)劃書(shū)

項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交原理融合前50請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合內(nèi)容

問(wèn)題：1、什么是動(dòng)物細(xì)胞融合？

2、它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步？

3、它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？請(qǐng)同學(xué)們閱讀課本P52動(dòng)物細(xì)胞融合內(nèi)容51鼠B淋巴細(xì)胞鼠骨髓瘤細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.1動(dòng)物細(xì)胞融合的概念雜交瘤細(xì)胞

動(dòng)物細(xì)胞融合（細(xì)胞雜交）是指（在一定的條件下）兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞（該單核細(xì)胞稱(chēng)為雜交細(xì)胞）的過(guò)程。鼠B淋巴細(xì)胞鼠骨髓瘤細(xì)胞人工誘導(dǎo)1.1動(dòng)物細(xì)胞融合的概念雜交52

問(wèn)題：1、它相當(dāng)于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程的哪一步？

2、它們的過(guò)程、基本原理、誘導(dǎo)融合方法和意義是否相同？單克隆抗體制備課件531.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理為什么滅活的病毒能作誘導(dǎo)劑？滅活喪失感染性保留促融合活性過(guò)程1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理為什么滅活的病毒能作誘541.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性1.2動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程、誘導(dǎo)方法與原理原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性551.3動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用1.3動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用56

問(wèn)題：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用的特點(diǎn)？主要分布在哪里？1、抗體問(wèn)題：抗體由什么細(xì)胞產(chǎn)生？其化學(xué)本質(zhì)是什么？與抗原作用57

一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗原分子刺激淋巴細(xì)胞，說(shuō)的也就是抗原決定簇刺激B淋巴細(xì)胞，使其分裂分化出特異性的漿細(xì)胞，分泌特異性抗體。一個(gè)天然抗原物質(zhì)可有多種和多個(gè)決定簇。教材中所說(shuō)的抗582、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。多種漿細(xì)胞動(dòng)物體內(nèi)多種抗體抗原2、抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法從血清中分離抗體該法制備抗體的特點(diǎn)：多59讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念發(fā)現(xiàn)：在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過(guò)程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬(wàn)種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖，即克隆。3、單克隆抗體的概念單:單個(gè)細(xì)胞克隆:無(wú)性繁殖單克隆抗體:單個(gè)細(xì)胞克隆產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一特異性強(qiáng)的抗體讀下面一段文字資料，找出單克隆抗體的概念發(fā)現(xiàn)：在動(dòng)物發(fā)生免疫60提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：所學(xué)哪種細(xì)胞可以無(wú)限增殖？問(wèn)題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？提示1：對(duì)B細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)可行嗎？提示2：所學(xué)哪種細(xì)胞可以61

一個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞（只分泌一種特異性抗體）雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)4、單克隆抗體的制備方案動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體

既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量繁殖的細(xì)胞一個(gè)骨髓瘤細(xì)胞（能無(wú)限增殖）+一個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞雜交瘤動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)4、單克隆62制備單克隆抗體1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)制備單克隆抗體1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒635、單克隆抗體制備過(guò)程步驟5、單克隆抗體制備過(guò)程步驟64注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.注射抗原的目的是什么？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩65注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.誘導(dǎo)細(xì)胞融合的手段有哪些？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩66注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.若細(xì)胞兩兩融合后，有幾種融合情況？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩67注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1抗原-抗體雜交法克隆化單克隆抗體

篩選2（有限稀釋?zhuān)?.第一次篩選出的雜交瘤細(xì)胞為何需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和專(zhuān)一抗體檢測(cè)？注射抗原效應(yīng)B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合多種雜交細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基篩685.實(shí)際操作中如何經(jīng)過(guò)兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞？

5.實(shí)際操作中如何經(jīng)過(guò)兩次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)69效應(yīng)B細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞瘤-瘤細(xì)胞選擇性培養(yǎng)基

篩選1多種雜交瘤細(xì)胞符合要求的雜交瘤細(xì)胞抗原-抗體雜交法

篩選2（有限稀釋?zhuān)┗脽羝?4克隆化體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體?？寺⌒?yīng)B細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射抗原骨髓瘤細(xì)胞融合B-B細(xì)胞雜交瘤細(xì)707、單克隆抗體的突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高、產(chǎn)量大、容易大規(guī)模生產(chǎn)

6、原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖7、單克隆抗體的突出優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、純度高718、單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速8、單克隆抗體的應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用72運(yùn)載藥物

(“生物導(dǎo)彈”—單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭)治療疾病治療疾病73動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1、動(dòng)物細(xì)胞融合：（1）概念：（2）誘導(dǎo)劑：（3）主要用途：（4）意義：2、單克隆抗體：（1）制備（2）特點(diǎn)（3）應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1、動(dòng)物細(xì)胞融合：2、單克隆抗體：74現(xiàn)在你能主持“太空婚禮”動(dòng)物科研項(xiàng)目了嗎？

項(xiàng)目原理融合前處理促融方法用途膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖物理、化學(xué)、生物法

單克隆抗體的制備小鼠免疫處理、細(xì)胞分散有助于疾病的診斷、治療、預(yù)防現(xiàn)在你能主持“太空婚禮”動(dòng)物科研項(xiàng)目了嗎？

項(xiàng)目原理融合前處75下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖思考訓(xùn)練：下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖思考訓(xùn)練：76（1）（）技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。（2）在圖中HAT培養(yǎng)上，未有融合的（）和融合的（）都會(huì)死亡，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合親本細(xì)胞具有同種細(xì)胞核的細(xì)胞（1）（77（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最主要的優(yōu)點(diǎn)是：（