制藥過程在線分析方法課件

第三章制藥過程在線分析方法第一節(jié)流動注射分析法第二節(jié)近紅外光譜分析法第一節(jié)流動注射分析法

FlowInjectionAnalysis，F(xiàn)IA

1974年，丹麥化學家魯齊卡和漢森提出的一種新型的連續(xù)流動分析技術(shù)。把一定體積的試樣溶液注入到一個流動著的載流（試劑溶液或水）中，試樣在載流中分散而形成濃度梯度，同時與試劑混合、反應，再進入到流通檢測器進行檢測?；诨瘜W分析可以在非平衡的動態(tài)條件下進行的假設(shè)，擺脫了化學反應必須在穩(wěn)態(tài)條件下進行且必須反應完全的傳統(tǒng)觀念。FIA的特點：（1）分析速度快、分析精密度高。100~300個樣品/小時;相對標準偏差一般可達1％以內(nèi)（2）設(shè)備簡單且操作簡便，易于自動連續(xù)分析。流動注射技術(shù)把傳統(tǒng)光譜、電化學分析法等分析流程管道化，除去了原來分析中大量而繁瑣的手工操作，由間歇式流程過渡到連續(xù)自動分析，不僅大大提高了分析效率，還避免了在操作中人為的差錯。（3）試劑、試樣用量少，適用性較廣。25~100μl（4）微管道系統(tǒng)的出現(xiàn)，微型化。

μTAS（微型全分析系統(tǒng)）

Lab-on-a-chip（芯片實驗室）硫氰酸汞分光光度法測定Cl-含量試劑：Hg(SCN)2+Fe3+

原理：2Cl-+Hg(SCN)2→HgCl2+2SCN-3SCN-+Fe3+

→Fe(SCN2+)3(橙紅色)受控分散流動注射分光光度法測定Cl-含量進樣時的試樣塞5～75μg/ml4次28次測定共耗時14min注樣時間間隔30s進樣頻率：120個樣品/小時混合總是不完全的流速不變，狀態(tài)重現(xiàn)受控分散低(D為1～3)：將樣品嚴格而準確地運載到檢測裝置中(D為3～10)：當待測物必須與載液混合并發(fā)生反應時高(D>10)：當樣品必須被稀釋到測量范圍內(nèi)時分散系數(shù)2、基本原理2、進樣閥“采樣”位置時，樣品被泵吸入定量取樣孔內(nèi)；“注入”位置時，注入載流中。4、檢測器

FIA實際上可以與任何類型的檢測器相匹配，如AAS、AES、分光光度計、熒光光度計、電化學系統(tǒng)、折射儀等。流通池型檢測器動態(tài)測定體積盡可能小三、流動注射技術(shù)簡介

1、單道流動注射分析法僅適用于單一試劑試劑即載流，消耗大2、多道流動注射分析法

均勻混合靈敏度提高多個試劑循序加入3、合并帶法

特點：大大的節(jié)省試劑

4、停流法

適用于化學反應緩慢的分析體系5、流動注射溶劑萃取法

第二節(jié)近紅外光譜分析法NearInfra-redSpectrum，NIR一、近紅外光譜

780~2500nm

基頻分子振動的倍頻與合頻光譜，包含豐富的含氫基團（C-H,O-H,N-H,S-H等）的特征信息。特點（1）吸收強度較弱 常量分析（0.1%-100%）（2）譜帶較寬且重疊嚴重二、分析方法1、定性分析方法光譜匹配法供試品光譜X標準光譜Y標準光譜：n批常規(guī)產(chǎn)品的平均光譜應用：（1）鑒別

M.I.0.9980

（2）純度檢查匹配指數(shù)計算的矢量表示[例]氨芐青霉素三水合物的鑒別β-內(nèi)酰胺類化合物的光譜匹配指數(shù)（M.I.）30500三種硬脂醇樣品的光譜匹配指數(shù)2、定量分析方法化學計量學方法：回歸、人工神經(jīng)網(wǎng)絡等回歸方程C=F0+F1A1+F2A2+…+FnAn校正系數(shù)特征波長校正系數(shù)的確定：（1）多元線性回歸法（MLR）（2）主成分回歸法（PCR）（3）偏最小二乘法（PLS）過程：收集有代表性的樣品建模預測[例]Otipax滴耳劑中5種組分的定量分析主藥：安替比林、利多卡因溶劑：乙醇、甘油抗氧劑：硫代硫酸鈉方法：建模：分別精密稱取5種組分的對照品，按處方量的±25%量配制成25種不同濃度的混合對照溶液，在1100~2500nm波長區(qū)間每隔4nm間隔掃描，收集漫反射的數(shù)據(jù)，計有351個波長處的數(shù)據(jù)，轉(zhuǎn)換為吸收度的形式，用MLR處理，與濃度建立線性回歸方程。樣品測定：取市售滴耳劑樣品進行測定，代入回歸方程計算出各組分的濃度。三、近紅外光譜分析法的特點（1）適應的樣品類型范圍相當廣泛，對樣品的外觀寬容度大，不需稱樣，一般也不需任何前處理。透射測定法、漫透射測定法、反射測定法光源強度大，檢測器靈敏度高，檢測信噪比高。（2）實時在線、無損檢測，一般2~3分鐘。（3）多功能性，一次檢測即可得到多種組分的濃度和多種物化性質(zhì)；采用多路開關(guān)或傳輸技術(shù)，可以用一臺NIR儀器進行多點監(jiān)測。（4）成本低、無污染，此外，完成回歸建模后，不再需要特別熟練的分析技術(shù)人員。四、應用近紅外光譜分析技術(shù)正在掀起一場分析效率革命，已被廣泛應用到石油化工、農(nóng)業(yè)、食品、造紙、醫(yī)藥臨床等領(lǐng)域，成為一種比較成熟的分析手段。如：(1)快速分析各種油品的組成及各種物化性質(zhì)；

(2)快速無損測定谷物、麥子、大豆等農(nóng)作物中蛋白質(zhì)、脂肪、水等含量和硬度等性質(zhì)；

(3)快速無損測定蔬菜、水果等的品質(zhì)（維生素C的含量及甜度、脆度等）；

(4)快速無損檢測活體血色素、血糖、膽固醇等；

(5)制糖、發(fā)酵等過程的在線檢測；……近紅外光譜分析技術(shù)在醫(yī)藥行業(yè)中的應用：（1）藥物及其制劑的水分測定；“近紅外水分分析儀”可以測定絕大多數(shù)粉末狀、小顆粒藥品原料藥與制劑中水分的含量，精度0.3~0.5%，測定時間小于1s。對于水分含量為0~5%的物質(zhì)，測定精度優(yōu)于0.15%，與恒重法測定結(jié)果一致。（2）原料藥及其制劑生產(chǎn)過程的質(zhì)量控制；在無損狀態(tài)下分析原料藥及制劑的晶型、狀態(tài)、密度等，以確定生產(chǎn)條件與工藝的優(yōu)化。直接在生產(chǎn)線上對每個片劑和膠囊進行NIR分析已有采用，美國有些制藥企業(yè)采用NIR分析作為質(zhì)量控制的標準。（3）藥品的定性、定量分析3、附錄（Appendix）

九項指導原則：“藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導原