醫(yī)學(xué)課件醫(yī)學(xué)免疫學(xué)微生物學(xué)2桿菌

腸桿菌科..1腸桿菌科（Enterobacteriaceae）細(xì)菌

是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭陰性桿菌，常寄居在人和動(dòng)物的腸道內(nèi)，亦存在于土壤、水和腐物中。目前已有44個(gè)屬，170多個(gè)種。但該科引起人類95％以上感染的菌種卻不到20個(gè)。.腸桿菌科（Enterobacteriaceae）細(xì)菌2

腸桿菌科的細(xì)菌與醫(yī)學(xué)的關(guān)系可分為三種情況：

①致病菌：有少數(shù)細(xì)菌總是引起人類疾病，如傷寒沙門(mén)菌、志賀菌、鼠疫耶爾森菌等；

②機(jī)會(huì)致病菌：一部分細(xì)菌屬于正常菌群，但當(dāng)宿主免疫力降低或細(xì)菌移位至腸道以外部位時(shí)，即可引起機(jī)會(huì)性感染，如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等；

③由正常菌群轉(zhuǎn)變而來(lái)的致病菌：如引起胃腸炎的大腸埃希菌，即是由于獲得位于質(zhì)粒、噬菌體或毒力島上的毒力因子基因后而成為致病菌。.腸桿菌科的細(xì)菌與醫(yī)學(xué)的關(guān)系可分為三種情況：3共同特性

1、形態(tài)與染色：G-，桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛、菌毛，少數(shù)有莢膜。

2、培養(yǎng)特性：兼性厭氧或需氧，營(yíng)養(yǎng)要求低，普通平板上可生長(zhǎng)，有些菌株可產(chǎn)生β溶血環(huán)。

3、生化反應(yīng)活潑鑒別腸道致病菌與非致病菌—乳糖發(fā)酵試驗(yàn)

腸道致病菌—陰性，不分解乳糖

腸道非致病菌—陽(yáng)性，分解乳糖.共同特性1、形態(tài)與染色：G-，桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛、菌4共同特性4、抗原結(jié)構(gòu)：菌體(O)抗原

鞭毛(H)抗原

莢膜或包膜(K)抗原菌毛抗原如大腸埃希菌血清型表示方式：O：K：H例如：O111：K58：H25、抵抗力：不強(qiáng)6、變異：極易變異，耐藥性轉(zhuǎn)移（最常見(jiàn)）。.共同特性4、抗原結(jié)構(gòu)：菌體(O)抗原.5

腸桿菌科細(xì)菌革蘭染色.

腸桿菌科細(xì)菌革蘭染色.6抗原結(jié)構(gòu).抗原結(jié)構(gòu).7埃希菌屬Escherichia

埃希菌屬（Escherichia）有6個(gè)種，只有大腸埃希菌（E.coli）是臨床最常見(jiàn)、最重要的一個(gè)菌種。

①大腸埃希菌是腸道中重要的正常菌群；②在宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸外組織器官后即可成為機(jī)會(huì)致病菌，引起腸道外感染；③一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導(dǎo)致人類胃腸炎；④在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)中常被用作糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)指標(biāo)。.埃希菌屬Escherichia埃希菌屬（Es8形態(tài)染色G－，0.4-0.7μm1-3μm短桿菌，多數(shù)菌株有周身鞭毛，有菌毛，無(wú)芽胞，兼性厭氧。能發(fā)酵葡萄糖等多種糖類，產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。絕大多數(shù)菌株發(fā)酵乳糖。IMViC試驗(yàn)結(jié)果為“＋＋－－”。有O、H和K三種抗原。能產(chǎn)生大腸菌素（colicine）。

.形態(tài)染色.9..10培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高生化反應(yīng)活潑，發(fā)酵多種糖類絕大多數(shù)發(fā)酵乳糖吲哚、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽（IMViC）試驗(yàn)結(jié)果為++--抗原結(jié)構(gòu)O抗原：菌體抗原，170多種H抗原：鞭毛抗原，56種以上K抗原：莢膜抗原，100種以上O111：K58：H2.培養(yǎng)特性與生化反應(yīng).11IMViC試驗(yàn)1、吲哚試驗(yàn)大腸桿菌→色氨酸→吲哚+試劑→玫瑰吲哚2、甲基紅試驗(yàn)3、VP實(shí)驗(yàn)4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)總結(jié)：IMViC試驗(yàn)大腸桿菌++--

產(chǎn)氣桿菌--++

VP吲哚甲基紅枸櫞酸鹽利用試驗(yàn).IMViC試驗(yàn)1、吲哚試驗(yàn)VP吲哚甲基紅枸櫞酸鹽利用試驗(yàn).12..13致病物質(zhì)

菌毛、定居因子抗原粘附在腸道及尿道粘膜上皮細(xì)胞K抗原（莢膜抗原）與侵襲力有關(guān)抗吞噬與抗補(bǔ)體的溶菌作用

外毒素腸毒素(外毒素)：不耐熱腸毒素（LT）、耐熱腸毒素（ST）細(xì)胞毒素：志賀樣毒素內(nèi)毒素（LPS）與感染特征和嚴(yán)重程度有關(guān)；Vero細(xì)胞：非洲綠猴腎細(xì)胞，是在細(xì)胞培養(yǎng)中常用的一個(gè)細(xì)胞系。.致病物質(zhì)Vero細(xì)胞：非洲綠猴腎細(xì)胞，是在細(xì)胞培養(yǎng)中常用的14

所致疾病腸道外感染

泌尿道感染最多見(jiàn)

化膿性感染機(jī)體抵抗力降低、外傷如燒傷感染、膽囊炎、腹膜炎、腦膜炎及敗血癥等腹瀉.所致疾病腸道外感染.15

引起腹瀉的大腸埃希菌腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌enterotoxigenicE.coli

ETEC腸侵襲型大腸埃希菌enteroinvasiveE.coli

EIEC腸致病型大腸埃希菌enteropathogenicE.coli

EPEC腸出血型大腸埃希菌enterohemorrhagicE.coli

EHEC腸集聚型大腸埃希菌enteroaggregativeE.coli

EAggEC.

引起腹瀉的大腸埃希菌腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌entero16腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（ETEC）致病物質(zhì)腸毒素菌毛粘附素內(nèi)毒素K抗原所致疾病5歲以下嬰幼兒腹瀉旅游者腹瀉水樣便，惡心、嘔吐，腹痛，低熱.腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（ETEC）.17腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）

致病物質(zhì)不產(chǎn)生腸毒素侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞并在其中生長(zhǎng)繁殖所致疾病主要侵犯較大兒童和成人腹瀉呈膿血便，有里急后重致病類似菌痢，較少見(jiàn)診斷EIEC無(wú)動(dòng)力、生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu).腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）.18腸致病型大腸埃希菌（EPEC）致病物質(zhì)不產(chǎn)生腸毒素及其他外毒素?zé)o侵襲力所致疾病嬰幼兒腹瀉.腸致病型大腸埃希菌（EPEC）.19腸出血型大腸埃希菌（EHEC）亦稱為vero毒素大腸埃希菌致病物質(zhì)菌毛：粘附作用毒素：vero毒素所致疾病出血性結(jié)腸炎溶血性尿毒綜合征.腸出血型大腸埃希菌（EHEC）亦稱為vero毒素大腸埃希菌20E.coli0157型1982年，美國(guó)有兩個(gè)州發(fā)生吃漢堡而生病的案例。在這些食物中發(fā)現(xiàn)O157型E.coli。O157型E.coli可產(chǎn)生毒素，造成腸出血。通?；颊咴谝恢軆?nèi)可復(fù)原。約有7%患者可因嚴(yán)重失血而致死。O157，1996年（日本）感染萬(wàn)人completed.E.coli0157型1982年，美國(guó)有兩個(gè)州發(fā)生吃漢堡21腸集聚型大腸埃希菌（EAggEC）

致病物質(zhì)毒素：腸集聚耐熱毒素（EAST）粘附素所致疾病引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便.腸集聚型大腸埃希菌（EAggEC）.22引起腹瀉的大腸埃希菌

菌株作用部位疾病與癥狀致病機(jī)制ETEC小腸旅行者腹瀉；嬰幼兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)LT和（或）ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)EIEC大腸水樣便，繼以少量血便，腹痛，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞28ac、29、112ac、1244、152、164、167EPEC小腸嬰兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細(xì)胞2、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、158EHEC大腸水樣便，繼以大量出血，劇烈腹痛，低熱或無(wú)，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜溶原性噬菌體編碼SLT-I或SLT-II，中斷蛋白質(zhì)合成157、26、111EAggEC小腸嬰兒腹瀉；持續(xù)性水樣便，嘔吐，脫水，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)集聚性粘附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收并產(chǎn)生毒素42、44、3、86等常見(jiàn)O血清型6、8、15、25、27、78、148、159.引起腹瀉的大腸埃希菌菌株作用部位疾病與癥狀致23微生物學(xué)檢查法臨床標(biāo)本的檢查標(biāo)本

分離培養(yǎng)與鑒定腸道外感染涂片染色檢查分離培養(yǎng)鑒定腸道內(nèi)感染

ETECEIECEPECEHECEAggEC

衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查大腸菌群指數(shù)每1000毫升樣品中的

大腸菌群近似數(shù)細(xì)菌總數(shù)大腸菌群：指在37℃，24小時(shí)內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣需氧和兼性厭氧的腸道桿菌，包括埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬及腸桿菌屬等。衛(wèi)生學(xué)國(guó)家強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)：飲用水、飲料小于100個(gè)/ml大腸桿菌數(shù)：飲用水3個(gè)/ml，飲料小于5個(gè)/ml，藥物不得檢出大腸桿菌.微生物學(xué)檢查法臨床標(biāo)本的檢查衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)24防治原則疫苗免疫預(yù)防已在畜牧業(yè)領(lǐng)域中開(kāi)展了廣泛研究大腸埃希菌很多菌株都已獲得耐一種或幾種抗生素的質(zhì)粒，耐藥性非常普遍。進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。.防治原則疫苗免疫預(yù)防已在畜牧業(yè)領(lǐng)域中開(kāi)展了廣泛研究.25志賀菌屬(痢疾桿菌)引起細(xì)菌性痢疾，通稱痢疾桿菌；.志賀菌屬(痢疾桿菌)引起細(xì)菌性痢疾，通稱痢疾桿菌；.26

G－短小桿菌。無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，有菌毛。一、生物學(xué)性狀.G－短小桿菌。無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，27

分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。除宋內(nèi)志賀菌個(gè)別菌株外，均不發(fā)酵乳糖。動(dòng)力陰性。志賀菌屬細(xì)菌有O和K兩種抗原。O抗原是分類的依據(jù)，藉以將志賀菌屬分為4群和40余血清型（包括亞型）：A群即痢疾志賀菌（S.dysenteriae）B群即福氏志賀菌（S.flexneri）C群即鮑氏志賀菌（S.boydii）D群即宋內(nèi)志賀菌（S.sonnei）志賀菌的抵抗力比其它腸道桿菌弱。.分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。除宋內(nèi)志賀菌個(gè)別菌株外，均不28

致病性與免疫性1、致病物質(zhì)菌毛：細(xì)菌通過(guò)菌毛粘附于回腸末端及結(jié)腸粘膜的上皮細(xì)胞表面，穿入細(xì)胞內(nèi)繁殖→炎癥內(nèi)毒素：LPS外毒素：志賀毒素（ST），具有細(xì)胞毒、神經(jīng)毒、腸毒性。.致病性與免疫性1、致病物質(zhì).29致病機(jī)理

痢疾桿菌胃小腸粘附回、結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)繁殖炎癥

局部：壞死、炎癥粘液膿血便

內(nèi)毒素刺激腸壁植物神經(jīng)腹痛，里急后重

毒素吸收入血毒血癥（發(fā)熱，休克）

外毒素：毒性強(qiáng)，A群產(chǎn)生，具有神經(jīng)毒性、細(xì)胞毒性、腸毒性

菌毛.致病機(jī)理痢疾桿菌胃小腸粘附回、結(jié)腸粘膜302、所致疾病細(xì)菌性痢疾--菌痢傳染源：病人、帶菌者。傳染途徑：糞-口。癥狀：（1）急性菌?。喊l(fā)熱、腹痛腹瀉、里急后重、膿血粘液便（2）急性中毒型菌痢：多見(jiàn)于兒童，全身中毒癥狀明顯，腸道癥狀不明顯（3）慢性菌?。杭毙灾委煵粡氐邹D(zhuǎn)為慢性.2、所致疾病.31三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本取膿血粘便，新鮮，不與尿混合，立即送檢→選擇或鑒別培養(yǎng)基→生化反應(yīng)鑒定→血清學(xué)鑒定。急性中毒型菌痢取肛門(mén)拭子。.三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本取膿血粘便，新鮮，不與尿混合，立即送檢→32沙門(mén)菌屬(Salmonella)

僅少數(shù)對(duì)人致病，引起：

傷寒

副傷寒

食物中毒

敗血癥.沙門(mén)菌屬(Salmonella)僅少數(shù)對(duì)人致病，引起：.33

沙門(mén)菌屬（Salmonella）分兩個(gè)種，即腸道沙門(mén)菌（S.enterica）和邦戈沙門(mén)菌(S.bongori)。

血清型現(xiàn)已達(dá)2500多種。沙門(mén)菌血清型的正確命名方法：腸道沙門(mén)菌腸道亞種傷寒血清型（Salmonella,entericasubspecies,entericaserotype,Typhi）,并可縮寫(xiě)為傷寒血清型沙門(mén)菌（SalmonellaTyphi）。

沙門(mén)菌屬中少數(shù)血清型是人的病原菌，引起腸熱癥。絕大多數(shù)血清型宿主范圍廣泛，家畜、家禽、野生脊椎動(dòng)物及冷血?jiǎng)游?、軟體動(dòng)物、環(huán)形動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物（包括蒼蠅）等均可帶菌，其中部分沙門(mén)菌是人畜共患病的病原菌，可引起人類食物中毒或敗血癥。.沙門(mén)菌屬（Salmonella）分兩個(gè)種，即腸34形態(tài)染色G-桿菌

周身鞭毛，有菌毛

一般無(wú)莢膜。均無(wú)芽孢。培養(yǎng)和生化反應(yīng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高不分解乳糖一、生物學(xué)性狀.形態(tài)染色一、生物學(xué)性狀.35培養(yǎng)與生化反應(yīng)肉湯培養(yǎng)基中加入膽汁或膽鹽，可促其生長(zhǎng)葡萄糖分解試驗(yàn)：鑒別傷寒、副傷寒桿菌H2S試驗(yàn)：鑒別副傷寒甲、乙桿菌抗原構(gòu)造與分類成分相應(yīng)抗體

菌體(O)抗原：脂多糖IgM

鞭毛(H)抗原:鞭毛蛋白質(zhì)IgG

Vi（包繞于O抗原之外，抗原性弱，該菌存在抗體存在，該菌消失抗體消失，故可作傷寒沙門(mén)菌帶菌指標(biāo)）---檢查傷寒帶菌者兼性厭氧，不發(fā)酵乳糖。對(duì)葡萄糖、除傷寒沙門(mén)菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其它沙門(mén)菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。.培養(yǎng)與生化反應(yīng)兼性厭氧，不發(fā)酵乳糖。對(duì)葡萄糖、除傷寒沙門(mén)菌產(chǎn)361、菌體抗原O（O抗原） 脂多糖 穩(wěn)定、耐熱，特異性低，為沙門(mén)菌共有，

2、鞭毛抗原H（H抗原） 蛋白質(zhì) 不穩(wěn)定，不耐熱，特異性高，可鑒別傷寒桿菌與副傷寒桿菌及副傷寒桿菌的分型

O抗體，IgM，早現(xiàn)早退H抗體，IgG，遲現(xiàn)遲退.1、菌體抗原OO抗體，IgM，早現(xiàn)早退H抗體，IgG，遲現(xiàn)遲373、表面抗原capsularVi（Vi抗原，包繞于O抗原之外，不耐熱）①與毒性有關(guān)：抗吞噬作用，與致病性有關(guān) ②新分離菌才有，抗原性弱。Vi抗體：體內(nèi)有菌時(shí)產(chǎn)生，無(wú)菌時(shí)消失，可作為傷寒帶菌者指標(biāo).3、表面抗原capsularViVi抗體：體內(nèi)有菌時(shí)產(chǎn)生，38

抵抗力較差水中能存活2-3W糞便中可活1-2個(gè)月冰凍土壤中可過(guò)冬耐受膽鹽、煌綠及其他染料對(duì)熱耐力差5％石炭酸5min殺死.抵抗力.39二、致病性與免疫性1、致病物質(zhì)侵襲力菌毛、Vi抗原內(nèi)毒素：大部分內(nèi)毒素引起WBC↑，但傷寒桿菌內(nèi)毒素引起WBC↓腸毒素：水樣腹瀉.二、致病性與免疫性1、致病物質(zhì).40腸熱癥（即傷寒、副傷寒）：傷寒桿菌傷寒甲、乙、丙型副傷寒桿菌副傷寒傳染源：病人，帶菌者傳染途徑：糞-口途徑2、所致疾病—（1）腸熱癥

.腸熱癥（即傷寒、副傷寒）：2、所致疾病—

41傷寒沙門(mén)菌小腸腸系膜淋巴結(jié)初次菌血癥肝、脾、腎、膽囊、骨髓的巨噬C內(nèi)繁殖菌血癥發(fā)熱、腎和其他器官感染膽囊集合淋巴結(jié)潰瘍和炎癥腹瀉，腸出血，腸穿孔膽囊炎或帶菌狀態(tài)淋巴結(jié)胸導(dǎo)管膽汁膽汁.傷寒沙門(mén)菌小腸腸系膜淋巴結(jié)初次菌血癥肝、脾、腎、菌血癥發(fā)熱、42胃淋巴管胸導(dǎo)管發(fā)熱、全身不適乏力，血培（+）出現(xiàn)抗體病菌小腸粘膜上皮，巨噬C吞噬腸壁、腸系膜淋巴結(jié)血流（第①次菌血癥bacteriomia）第1周.胃淋巴管胸導(dǎo)管發(fā)熱、全身不適乏力，血培（+）出現(xiàn)抗體病菌小腸43第4周恢復(fù)期肝脾腫大皮膚玫瑰疹菌-腎-尿（尿檢菌）菌-膽囊-糞便（糞檢菌）小腸腸壁Ⅳ超敏反應(yīng)腸壞死、穿孔持續(xù)發(fā)熱，相對(duì)緩脈，WBC下降，表情淡漠、全身中毒癥狀全身、器官和組織再次入血（第②次菌血癥）第2、3周.第4周恢復(fù)期肝脾腫大菌-腎-尿（尿檢菌）菌-膽44玫瑰疹.玫瑰疹.45..46

鼠傷寒桿菌，豬霍亂桿菌，腸炎桿菌等污染食物引起多為集體食物中毒細(xì)菌一般不入血潛伏期4-24h，嘔吐，

腹痛，腹瀉，發(fā)熱。(2)胃腸炎（食物中毒）. (2)胃腸炎（食物中毒）.47癥狀：進(jìn)入血流--高熱寒戰(zhàn)、厭食及貧血

進(jìn)入組織器官—廣泛感染，腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、腎盂腎炎、心內(nèi)膜炎、(3)敗血癥腸熱病后可獲得牢固免疫力免疫性.癥狀：進(jìn)入血流--高熱寒戰(zhàn)、厭食及貧血(3)敗血癥腸熱病后48(4)無(wú)癥狀帶菌者：3-5%的人病后可隨糞便排菌，成為傷寒帶菌者（傳染源）值得注意.值得注意.49傷寒瑪麗（TyphoidMary）：本名瑪麗·馬倫（MaryMallon，1869年9月23日－1938年11月11日），愛(ài)爾蘭人，1883年獨(dú)自移民至美國(guó)，是美國(guó)第一位被發(fā)現(xiàn)的傷寒健康帶原者。瑪麗是一個(gè)廚師，并因此造成53人感染、3人死亡，但她堅(jiān)決否認(rèn)這項(xiàng)事實(shí)，也拒絕停止下廚，因此兩度遭公共衛(wèi)生的主管機(jī)關(guān)隔離，最后于隔離期間去世?，旣愒斐傻膯?wèn)題，部分原因是由于她不顧一切地否認(rèn)自身的處境，即使身上帶有足以致命的病原體，她仍保持健康狀態(tài)，且毫無(wú)感染過(guò)傷寒的紀(jì)錄。但有些學(xué)者的研究認(rèn)為，傷寒瑪麗所受待遇，與因其低下階層愛(ài)爾蘭裔移民的出身背景以致遭歧視不無(wú)關(guān)系。過(guò)去有段時(shí)間，人們以“傷寒瑪麗”稱呼類似瑪麗·馬倫這種身為帶菌者卻拒絕采取適當(dāng)防范措施的人，由于該詞具有部分歧視、諷刺意味，現(xiàn)在一般將帶有病原體卻無(wú)癥狀的人稱為“帶菌者”。.傷寒瑪麗（TyphoidMary）：本名瑪麗·馬倫（Mar50..51三、微生物學(xué)檢查病原菌檢查：腸熱癥根據(jù)病程不同，取標(biāo)本1W

取血，1-3W取骨髓液，2W起糞便，3W起取尿液分離培養(yǎng)與鑒定血、骨髓液→增菌→SS培養(yǎng)基／EMB鑒別培養(yǎng)基→37℃24h→無(wú)色半透明乳糖不發(fā)酵菌落→雙糖或三糖培養(yǎng)基→生化反應(yīng)／玻片凝集試驗(yàn)何為EMB瓊脂培養(yǎng)基？.三、微生物學(xué)檢查病原菌檢查：何為EMB瓊脂培養(yǎng)基？.52

EMB瓊脂培養(yǎng)基EMB（EosinMethyleneBlue）瓊脂培養(yǎng)基

伊紅美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基的簡(jiǎn)稱。是為了觀察某種糖被分解后是否產(chǎn)生酸的一種培養(yǎng)基。此培養(yǎng)基含有酩蛋白樣的氨基酸混合物、酵母浸液、適量的無(wú)機(jī)鹽、0.04％的伊紅Y、0.0065％的美藍(lán)和供作試驗(yàn)的糖。

用此培養(yǎng)基進(jìn)行平面培養(yǎng)時(shí)，若糖被分解，菌落成深紫色；若不被分解，則成淺粉色。1947年列德堡（J．Lederberg）用大腸桿菌進(jìn)行接合實(shí)驗(yàn)時(shí)，曾用這種培養(yǎng)基檢測(cè)各種糖的發(fā)酵性。以后被用來(lái)進(jìn)行大腸桿菌的許多遺傳實(shí)驗(yàn)。.EMB瓊脂培養(yǎng)基EMB（EosinMethy53SS培養(yǎng)基↓EMB培養(yǎng)基↑.SS培養(yǎng)基↓EMB培養(yǎng)基↑.54血清學(xué)診斷（肥達(dá)試驗(yàn)widaltest）原理：已知抗原測(cè)未知抗體，定量凝集試驗(yàn)用已知的傷寒桿菌H抗原O抗原+患者血清副傷寒桿菌H抗原定量凝集反應(yīng)→測(cè)定病人血清中相應(yīng)抗體及其含量，以輔助診斷腸熱癥（概念）.血清學(xué)診斷（肥達(dá)試驗(yàn)widaltest）原理：已知抗原測(cè)未55O（菌體）抗原凝集試驗(yàn).O（菌體）抗原凝集試驗(yàn).56H（鞭毛）抗原凝集試驗(yàn).H（鞭毛）抗原凝集試驗(yàn).57我國(guó)標(biāo)準(zhǔn) 廣州地區(qū) 傷寒桿菌O ≥1:80 ≥1:160 傷寒桿菌H ≥1:160≥1:160 甲型副傷寒桿菌H ≥1:80 ≥1:160 乙型副傷寒桿菌H ≥1:80 ≥1:160 結(jié)果判斷若兩次試驗(yàn)效價(jià)上升或超過(guò)4倍則更有意義.我國(guó)標(biāo)準(zhǔn) 廣州地區(qū) 結(jié)果判斷58四、防治原則Vi莢膜多糖疫苗。.四、防治原則Vi莢膜多糖疫苗。.59Keywords沙門(mén)氏菌內(nèi)毒素傷寒副傷寒二次菌血癥細(xì)胞免疫食物中毒、敗血癥肥達(dá)反應(yīng)志賀菌痢疾桿菌（不入血流）細(xì)菌性痢疾內(nèi)毒素菌毛外毒素大腸埃希菌腸內(nèi)感染腸外感染衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)指示菌.Keywords沙門(mén)氏菌內(nèi)毒素傷寒副傷寒二次菌血癥60其他菌屬一、克雷伯菌屬二、變形桿菌屬三、腸桿菌屬四、沙雷菌屬五、枸櫞酸桿菌屬六、摩根菌屬.其他菌屬一、克雷伯菌屬.61腸桿菌科..62腸桿菌科（Enterobacteriaceae）細(xì)菌

是一大群生物學(xué)性狀相似的革蘭陰性桿菌，常寄居在人和動(dòng)物的腸道內(nèi)，亦存在于土壤、水和腐物中。目前已有44個(gè)屬，170多個(gè)種。但該科引起人類95％以上感染的菌種卻不到20個(gè)。.腸桿菌科（Enterobacteriaceae）細(xì)菌63

腸桿菌科的細(xì)菌與醫(yī)學(xué)的關(guān)系可分為三種情況：

①致病菌：有少數(shù)細(xì)菌總是引起人類疾病，如傷寒沙門(mén)菌、志賀菌、鼠疫耶爾森菌等；

②機(jī)會(huì)致病菌：一部分細(xì)菌屬于正常菌群，但當(dāng)宿主免疫力降低或細(xì)菌移位至腸道以外部位時(shí)，即可引起機(jī)會(huì)性感染，如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌等；

③由正常菌群轉(zhuǎn)變而來(lái)的致病菌：如引起胃腸炎的大腸埃希菌，即是由于獲得位于質(zhì)粒、噬菌體或毒力島上的毒力因子基因后而成為致病菌。.腸桿菌科的細(xì)菌與醫(yī)學(xué)的關(guān)系可分為三種情況：64共同特性

1、形態(tài)與染色：G-，桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛、菌毛，少數(shù)有莢膜。

2、培養(yǎng)特性：兼性厭氧或需氧，營(yíng)養(yǎng)要求低，普通平板上可生長(zhǎng)，有些菌株可產(chǎn)生β溶血環(huán)。

3、生化反應(yīng)活潑鑒別腸道致病菌與非致病菌—乳糖發(fā)酵試驗(yàn)

腸道致病菌—陰性，不分解乳糖

腸道非致病菌—陽(yáng)性，分解乳糖.共同特性1、形態(tài)與染色：G-，桿菌，無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛、菌65共同特性4、抗原結(jié)構(gòu)：菌體(O)抗原

鞭毛(H)抗原

莢膜或包膜(K)抗原菌毛抗原如大腸埃希菌血清型表示方式：O：K：H例如：O111：K58：H25、抵抗力：不強(qiáng)6、變異：極易變異，耐藥性轉(zhuǎn)移（最常見(jiàn)）。.共同特性4、抗原結(jié)構(gòu)：菌體(O)抗原.66

腸桿菌科細(xì)菌革蘭染色.

腸桿菌科細(xì)菌革蘭染色.67抗原結(jié)構(gòu).抗原結(jié)構(gòu).68埃希菌屬Escherichia

埃希菌屬（Escherichia）有6個(gè)種，只有大腸埃希菌（E.coli）是臨床最常見(jiàn)、最重要的一個(gè)菌種。

①大腸埃希菌是腸道中重要的正常菌群；②在宿主免疫力下降或細(xì)菌侵入腸外組織器官后即可成為機(jī)會(huì)致病菌，引起腸道外感染；③一些血清型的大腸埃希菌具有致病性，能導(dǎo)致人類胃腸炎；④在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)中常被用作糞便污染的衛(wèi)生學(xué)檢測(cè)指標(biāo)。.埃希菌屬Escherichia埃希菌屬（Es69形態(tài)染色G－，0.4-0.7μm1-3μm短桿菌，多數(shù)菌株有周身鞭毛，有菌毛，無(wú)芽胞，兼性厭氧。能發(fā)酵葡萄糖等多種糖類，產(chǎn)酸并產(chǎn)氣。絕大多數(shù)菌株發(fā)酵乳糖。IMViC試驗(yàn)結(jié)果為“＋＋－－”。有O、H和K三種抗原。能產(chǎn)生大腸菌素（colicine）。

.形態(tài)染色.70..71培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高生化反應(yīng)活潑，發(fā)酵多種糖類絕大多數(shù)發(fā)酵乳糖吲哚、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽（IMViC）試驗(yàn)結(jié)果為++--抗原結(jié)構(gòu)O抗原：菌體抗原，170多種H抗原：鞭毛抗原，56種以上K抗原：莢膜抗原，100種以上O111：K58：H2.培養(yǎng)特性與生化反應(yīng).72IMViC試驗(yàn)1、吲哚試驗(yàn)大腸桿菌→色氨酸→吲哚+試劑→玫瑰吲哚2、甲基紅試驗(yàn)3、VP實(shí)驗(yàn)4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)總結(jié)：IMViC試驗(yàn)大腸桿菌++--

產(chǎn)氣桿菌--++

VP吲哚甲基紅枸櫞酸鹽利用試驗(yàn).IMViC試驗(yàn)1、吲哚試驗(yàn)VP吲哚甲基紅枸櫞酸鹽利用試驗(yàn).73..74致病物質(zhì)

菌毛、定居因子抗原粘附在腸道及尿道粘膜上皮細(xì)胞K抗原（莢膜抗原）與侵襲力有關(guān)抗吞噬與抗補(bǔ)體的溶菌作用

外毒素腸毒素(外毒素)：不耐熱腸毒素（LT）、耐熱腸毒素（ST）細(xì)胞毒素：志賀樣毒素內(nèi)毒素（LPS）與感染特征和嚴(yán)重程度有關(guān)；Vero細(xì)胞：非洲綠猴腎細(xì)胞，是在細(xì)胞培養(yǎng)中常用的一個(gè)細(xì)胞系。.致病物質(zhì)Vero細(xì)胞：非洲綠猴腎細(xì)胞，是在細(xì)胞培養(yǎng)中常用的75

所致疾病腸道外感染

泌尿道感染最多見(jiàn)

化膿性感染機(jī)體抵抗力降低、外傷如燒傷感染、膽囊炎、腹膜炎、腦膜炎及敗血癥等腹瀉.所致疾病腸道外感染.76

引起腹瀉的大腸埃希菌腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌enterotoxigenicE.coli

ETEC腸侵襲型大腸埃希菌enteroinvasiveE.coli

EIEC腸致病型大腸埃希菌enteropathogenicE.coli

EPEC腸出血型大腸埃希菌enterohemorrhagicE.coli

EHEC腸集聚型大腸埃希菌enteroaggregativeE.coli

EAggEC.

引起腹瀉的大腸埃希菌腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌entero77腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（ETEC）致病物質(zhì)腸毒素菌毛粘附素內(nèi)毒素K抗原所致疾病5歲以下嬰幼兒腹瀉旅游者腹瀉水樣便，惡心、嘔吐，腹痛，低熱.腸產(chǎn)毒素型大腸埃希菌（ETEC）.78腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）

致病物質(zhì)不產(chǎn)生腸毒素侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞并在其中生長(zhǎng)繁殖所致疾病主要侵犯較大兒童和成人腹瀉呈膿血便，有里急后重致病類似菌痢，較少見(jiàn)診斷EIEC無(wú)動(dòng)力、生化反應(yīng)和抗原結(jié)構(gòu).腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）.79腸致病型大腸埃希菌（EPEC）致病物質(zhì)不產(chǎn)生腸毒素及其他外毒素?zé)o侵襲力所致疾病嬰幼兒腹瀉.腸致病型大腸埃希菌（EPEC）.80腸出血型大腸埃希菌（EHEC）亦稱為vero毒素大腸埃希菌致病物質(zhì)菌毛：粘附作用毒素：vero毒素所致疾病出血性結(jié)腸炎溶血性尿毒綜合征.腸出血型大腸埃希菌（EHEC）亦稱為vero毒素大腸埃希菌81E.coli0157型1982年，美國(guó)有兩個(gè)州發(fā)生吃漢堡而生病的案例。在這些食物中發(fā)現(xiàn)O157型E.coli。O157型E.coli可產(chǎn)生毒素，造成腸出血。通?；颊咴谝恢軆?nèi)可復(fù)原。約有7%患者可因嚴(yán)重失血而致死。O157，1996年（日本）感染萬(wàn)人completed.E.coli0157型1982年，美國(guó)有兩個(gè)州發(fā)生吃漢堡82腸集聚型大腸埃希菌（EAggEC）

致病物質(zhì)毒素：腸集聚耐熱毒素（EAST）粘附素所致疾病引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便.腸集聚型大腸埃希菌（EAggEC）.83引起腹瀉的大腸埃希菌

菌株作用部位疾病與癥狀致病機(jī)制ETEC小腸旅行者腹瀉；嬰幼兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)LT和（或）ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)EIEC大腸水樣便，繼以少量血便，腹痛，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞28ac、29、112ac、1244、152、164、167EPEC小腸嬰兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細(xì)胞2、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、158EHEC大腸水樣便，繼以大量出血，劇烈腹痛，低熱或無(wú)，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜溶原性噬菌體編碼SLT-I或SLT-II，中斷蛋白質(zhì)合成157、26、111EAggEC小腸嬰兒腹瀉；持續(xù)性水樣便，嘔吐，脫水，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)集聚性粘附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收并產(chǎn)生毒素42、44、3、86等常見(jiàn)O血清型6、8、15、25、27、78、148、159.引起腹瀉的大腸埃希菌菌株作用部位疾病與癥狀致84微生物學(xué)檢查法臨床標(biāo)本的檢查標(biāo)本

分離培養(yǎng)與鑒定腸道外感染涂片染色檢查分離培養(yǎng)鑒定腸道內(nèi)感染

ETECEIECEPECEHECEAggEC

衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查大腸菌群指數(shù)每1000毫升樣品中的

大腸菌群近似數(shù)細(xì)菌總數(shù)大腸菌群：指在37℃，24小時(shí)內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣需氧和兼性厭氧的腸道桿菌，包括埃希菌屬、枸櫞酸桿菌屬、克雷伯菌屬及腸桿菌屬等。衛(wèi)生學(xué)國(guó)家強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌總數(shù)：飲用水、飲料小于100個(gè)/ml大腸桿菌數(shù)：飲用水3個(gè)/ml，飲料小于5個(gè)/ml，藥物不得檢出大腸桿菌.微生物學(xué)檢查法臨床標(biāo)本的檢查衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)85防治原則疫苗免疫預(yù)防已在畜牧業(yè)領(lǐng)域中開(kāi)展了廣泛研究大腸埃希菌很多菌株都已獲得耐一種或幾種抗生素的質(zhì)粒，耐藥性非常普遍。進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。.防治原則疫苗免疫預(yù)防已在畜牧業(yè)領(lǐng)域中開(kāi)展了廣泛研究.86志賀菌屬(痢疾桿菌)引起細(xì)菌性痢疾，通稱痢疾桿菌；.志賀菌屬(痢疾桿菌)引起細(xì)菌性痢疾，通稱痢疾桿菌；.87

G－短小桿菌。無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，有菌毛。一、生物學(xué)性狀.G－短小桿菌。無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，無(wú)莢膜，88

分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。除宋內(nèi)志賀菌個(gè)別菌株外，均不發(fā)酵乳糖。動(dòng)力陰性。志賀菌屬細(xì)菌有O和K兩種抗原。O抗原是分類的依據(jù)，藉以將志賀菌屬分為4群和40余血清型（包括亞型）：A群即痢疾志賀菌（S.dysenteriae）B群即福氏志賀菌（S.flexneri）C群即鮑氏志賀菌（S.boydii）D群即宋內(nèi)志賀菌（S.sonnei）志賀菌的抵抗力比其它腸道桿菌弱。.分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。除宋內(nèi)志賀菌個(gè)別菌株外，均不89

致病性與免疫性1、致病物質(zhì)菌毛：細(xì)菌通過(guò)菌毛粘附于回腸末端及結(jié)腸粘膜的上皮細(xì)胞表面，穿入細(xì)胞內(nèi)繁殖→炎癥內(nèi)毒素：LPS外毒素：志賀毒素（ST），具有細(xì)胞毒、神經(jīng)毒、腸毒性。.致病性與免疫性1、致病物質(zhì).90致病機(jī)理

痢疾桿菌胃小腸粘附回、結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)繁殖炎癥

局部：壞死、炎癥粘液膿血便

內(nèi)毒素刺激腸壁植物神經(jīng)腹痛，里急后重

毒素吸收入血毒血癥（發(fā)熱，休克）

外毒素：毒性強(qiáng)，A群產(chǎn)生，具有神經(jīng)毒性、細(xì)胞毒性、腸毒性

菌毛.致病機(jī)理痢疾桿菌胃小腸粘附回、結(jié)腸粘膜912、所致疾病細(xì)菌性痢疾--菌痢傳染源：病人、帶菌者。傳染途徑：糞-口。癥狀：（1）急性菌?。喊l(fā)熱、腹痛腹瀉、里急后重、膿血粘液便（2）急性中毒型菌痢：多見(jiàn)于兒童，全身中毒癥狀明顯，腸道癥狀不明顯（3）慢性菌?。杭毙灾委煵粡氐邹D(zhuǎn)為慢性.2、所致疾病.92三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本取膿血粘便，新鮮，不與尿混合，立即送檢→選擇或鑒別培養(yǎng)基→生化反應(yīng)鑒定→血清學(xué)鑒定。急性中毒型菌痢取肛門(mén)拭子。.三、微生物學(xué)檢查標(biāo)本取膿血粘便，新鮮，不與尿混合，立即送檢→93沙門(mén)菌屬(Salmonella)

僅少數(shù)對(duì)人致病，引起：

傷寒

副傷寒

食物中毒

敗血癥.沙門(mén)菌屬(Salmonella)僅少數(shù)對(duì)人致病，引起：.94

沙門(mén)菌屬（Salmonella）分兩個(gè)種，即腸道沙門(mén)菌（S.enterica）和邦戈沙門(mén)菌(S.bongori)。

血清型現(xiàn)已達(dá)2500多種。沙門(mén)菌血清型的正確命名方法：腸道沙門(mén)菌腸道亞種傷寒血清型（Salmonella,entericasubspecies,entericaserotype,Typhi）,并可縮寫(xiě)為傷寒血清型沙門(mén)菌（SalmonellaTyphi）。

沙門(mén)菌屬中少數(shù)血清型是人的病原菌，引起腸熱癥。絕大多數(shù)血清型宿主范圍廣泛，家畜、家禽、野生脊椎動(dòng)物及冷血?jiǎng)游?、軟體動(dòng)物、環(huán)形動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物（包括蒼蠅）等均可帶菌，其中部分沙門(mén)菌是人畜共患病的病原菌，可引起人類食物中毒或敗血癥。.沙門(mén)菌屬（Salmonella）分兩個(gè)種，即腸95形態(tài)染色G-桿菌

周身鞭毛，有菌毛

一般無(wú)莢膜。均無(wú)芽孢。培養(yǎng)和生化反應(yīng)兼性厭氧營(yíng)養(yǎng)要求不高不分解乳糖一、生物學(xué)性狀.形態(tài)染色一、生物學(xué)性狀.96培養(yǎng)與生化反應(yīng)肉湯培養(yǎng)基中加入膽汁或膽鹽，可促其生長(zhǎng)葡萄糖分解試驗(yàn)：鑒別傷寒、副傷寒桿菌H2S試驗(yàn)：鑒別副傷寒甲、乙桿菌抗原構(gòu)造與分類成分相應(yīng)抗體

菌體(O)抗原：脂多糖IgM

鞭毛(H)抗原:鞭毛蛋白質(zhì)IgG

Vi（包繞于O抗原之外，抗原性弱，該菌存在抗體存在，該菌消失抗體消失，故可作傷寒沙門(mén)菌帶菌指標(biāo)）---檢查傷寒帶菌者兼性厭氧，不發(fā)酵乳糖。對(duì)葡萄糖、除傷寒沙門(mén)菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣外，其它沙門(mén)菌均產(chǎn)酸產(chǎn)氣。.培養(yǎng)與生化反應(yīng)兼性厭氧，不發(fā)酵乳糖。對(duì)葡萄糖、除傷寒沙門(mén)菌產(chǎn)971、菌體抗原O（O抗原） 脂多糖 穩(wěn)定、耐熱，特異性低，為沙門(mén)菌共有，

2、鞭毛抗原H（H抗原） 蛋白質(zhì) 不穩(wěn)定，不耐熱，特異性高，可鑒別傷寒桿菌與副傷寒桿菌及副傷寒桿菌的分型

O抗體，IgM，早現(xiàn)早退H抗體，IgG，遲現(xiàn)遲退.1、菌體抗原OO抗體，IgM，早現(xiàn)早退H抗體，IgG，遲現(xiàn)遲983、表面抗原capsularVi（Vi抗原，包繞于O抗原之外，不耐熱）①與毒性有關(guān)：抗吞噬作用，與致病性有關(guān) ②新分離菌才有，抗原性弱。Vi抗體：體內(nèi)有菌時(shí)產(chǎn)生，無(wú)菌時(shí)消失，可作為傷寒帶菌者指標(biāo).3、表面抗原capsularViVi抗體：體內(nèi)有菌時(shí)產(chǎn)生，99

抵抗力較差水中能存活2-3W糞便中可活1-2個(gè)月冰凍土壤中可過(guò)冬耐受膽鹽、煌綠及其他染料對(duì)熱耐力差5％石炭酸5min殺死.抵抗力.100二、致病性與免疫性1、致病物質(zhì)侵襲力菌毛、Vi抗原內(nèi)毒素：大部分內(nèi)毒素引起WBC↑，但傷寒桿菌內(nèi)毒素引起WBC↓腸毒素：水樣腹瀉.二、致病性與免疫性1、致病物質(zhì).101腸熱癥（即傷寒、副傷寒）：傷寒桿菌傷寒甲、乙、丙型副傷寒桿菌副傷寒傳染源：病人，帶菌者傳染途徑：糞-口途徑2、所致疾病—（1）腸熱癥

.腸熱癥（即傷寒、副傷寒）：2、所致疾病—

102傷寒沙門(mén)菌小腸腸系膜淋巴結(jié)初次菌血癥肝、脾、腎、膽囊、骨髓的巨噬C內(nèi)繁殖菌血癥發(fā)熱、腎和其他器官感染膽囊集合淋巴結(jié)潰瘍和炎癥腹瀉，腸出血，腸穿孔膽囊炎或帶菌狀態(tài)淋巴結(jié)胸導(dǎo)管膽汁膽汁.傷寒沙門(mén)菌小腸腸系膜淋巴結(jié)初次菌血癥肝、脾、腎、菌血癥發(fā)熱、103胃淋巴管胸導(dǎo)管發(fā)熱、全身不適乏力，血培（+）出現(xiàn)抗體病菌小腸粘膜上皮，巨噬C吞噬腸壁、腸系膜淋巴結(jié)血流（第①次菌血癥bacteriomia）第1周.胃淋巴管胸導(dǎo)管發(fā)熱、全身不適乏力，血培（+）出現(xiàn)抗體病菌小腸104第4周恢復(fù)期肝脾腫大皮膚玫瑰疹菌-腎-尿（尿檢菌）菌-膽囊-糞便（糞檢菌）小腸腸壁Ⅳ超敏反應(yīng)腸壞死、穿孔持續(xù)發(fā)熱，相對(duì)緩脈，WBC下降，表情淡漠、全身中毒癥狀全身、器官和組織再次入血（第②次菌血癥）第2、3周.第4周恢復(fù)期肝脾腫大菌-腎-尿（尿檢菌）菌-膽105玫瑰疹.玫瑰疹.106..107

鼠傷寒桿菌，豬霍亂桿菌，腸炎桿菌等污染食物引起多為集體食物中毒細(xì)菌一般不入血潛伏期4-24h，嘔吐，

腹痛，腹瀉，發(fā)熱。(2)胃腸炎（食物中毒）. (2)胃腸炎（食物中毒）.108癥狀：進(jìn)入