神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療課件

神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療（優(yōu)選）神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療2（優(yōu)選）神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療2腦水腫3腦水腫3氧自由基引起腦切片水分含量增加大鼠斷頭，用腦的皮質切片進行體外腦水腫實驗發(fā)現，當在腦切片的培養(yǎng)液中加入一種外源性氧自由基產生劑黃嘌呤氧化酶時，腦組織過氧化物和水分含量均增加4氧自由基引起腦切片水分含量增加大鼠斷頭，用腦的皮質切片進行體嬰兒原發(fā)性腦水腫中，有并發(fā)癥的水腫呈現較高的自由基濃度水腫患兒中，有炎癥或者出血性并發(fā)癥的水腫，丙二醛和自由基濃度顯著高于單純的水腫有出血性并發(fā)癥水腫的病情最嚴重。Aref'evaIA,DemchukML,ArtarianAA,MirsadykovDA,PromyslovMSh.StudyoffreeradicaloxidationoflipidsincerebrospinalfluidofhydrocephalicchildrenVoprMedKhim.1998Jul-Aug;44(4):388-92俄羅斯5嬰兒原發(fā)性腦水腫中，有并發(fā)癥的水腫呈現較高的自由基濃度水腫患自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并且降低急性期死亡率嚴重頸內動脈梗塞患者，依達拉奉+甘油n=30,甘油組n=31治療后2天，CT檢查梗死體積(P<0.02)中線位移(P<0.02)顯著小于對照組治療組出血性轉變顯著低于對照組(P<0.03).第57天依達拉奉組梗死體積(P<0.0001)中線位移(P<0.0001)顯著小于第2天的情況。14天內，治療組死亡6個人死于中風(20%)，對照組14個人(45%)，具有顯著差異(P<0.03).ToyodaK,FujiiK,KamouchiM,NakaneH,ArihiroS,OkadaY,IbayashiS,IidaM.Freeradicalscavenger,edaravone,instrokewithinternalcarotidarteryocclusion.JNeurolSci.2004Jun15;221(1-2):11-7.日本6自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并顱腦損傷7顱腦損傷7貓冷凍性腦損傷試驗,Ortege(1972)在貓的冰凍性腦損傷中，應用一種自由基清除劑對苯二胺后，腦水腫明顯減輕腦水腫的產生與自由基相關。8貓冷凍性腦損傷試驗,Ortege(1972)在貓的冰凍性其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。PetersonSL,MorrowD,LiuS,LiuKJ.1984Feb;14(2):142-6.抗壞血酸減少意味著自由基增加，消耗了抗氧化劑血漿TRAP*(M)抗氧化劑減少腦缺血及再灌注的損傷自由基有損傷丙二醛(Malondialdehyde，MDA)是脂質過氧化反應的分解產物BrauRH,Garcia-CastineirasS,RifkinsonN.高血壓大鼠tPA引起出血模型梗死后6小時使用tPA，24小時后引起腦出血。VE預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋亡2圖嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者(>65歲)比較未經治療和經VE或硒鹽治療的小鼠之血腦屏障狀況。自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并且降低急性期死亡率多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步2004Jul9;75(8):979-89美國WatsonBDetal,1984.2003Apr10;100(15):1324-6,1329-30.*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOH貓腦液壓沖擊性損傷試驗Kontos用NBT(四唑氮藍)法檢測氧自由基給予SOD則抑制氧自由基產生nm/(min.cm2)9其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。貓腦液壓沖硫代巴比妥酸比色法檢測Wistar大鼠落體撞擊腦損傷時的氧自由基反應丙二醛(nmol/mg)10硫代巴比妥酸比色法檢測Wistar大鼠落體撞擊腦損傷時的氧自腦損傷患者腦脊液中抗壞血酸

水平降低自由基增加41名不同神經功能障礙患者的腦脊液的抗壞血酸分析18名沒有明顯神經功能異常的患者(背痛/坐骨神經痛)患者腦脊液的抗壞血酸濃度作為基準值，結果發(fā)現，下列三組患者腦脊液中抗壞血酸濃度顯著降低頭部創(chuàng)傷患者顱內壓增高(非感染性腦水腫)患者腦腫瘤患者可能的解釋抗壞血酸減少意味著自由基增加，消耗了抗氧化劑某些損傷(創(chuàng)傷、缺血或腫瘤)之后，自由基對中樞神經系統(tǒng)產生損傷BrauRH,Garcia-CastineirasS,RifkinsonN.Cerebrospinalfluidascorbicacidlevelsinneurologicaldisorders.Neurosurgery.1984Feb;14(2):142-6.

11腦損傷患者腦脊液中抗壞血酸

水平降低自由基增加41名不同神經腦損傷后立即形成自由基對象腦損傷動物模型方法在不同時間測量不同部位的MDA*濃度結果腦前葉、 頂葉、 腦干濃度比假手術組分別高 36.7%, 41.8%, 35.1%(p<0.0001).損傷后逐步增加，4小時達峰，然后逐步降低，24小時后與假手術組對比，仍然具有顯著性損傷后立即產生MDA,表明腦損傷迅速形成自由基。丙二醛(Malondialdehyde，MDA)是脂質過氧化反應的分解產物HsiangJN,WangJY,IpSM,NgHK,StadlinA,YuAL,PoonWS.Thetimecourseandregionalvariationsoflipidperoxidationafterdiffusebraininjuryinrats.ActaNeurochir(Wien).1997;139(5):464-8.香港12腦損傷后立即形成自由基對象腦損傷動物模型HsiangJN,氧自由基是顱腦繼發(fā)性損傷的主要因素方法通過測量41名顱腦損傷患者的血漿TBARS*水平觀察其脂質過氧化物濃度結果損傷后24小時，血漿脂質過氧化物明顯增加，損傷程度越嚴重，血漿脂質過氧化物濃度越高，愈后越差在2472小時內，死亡患者血漿內脂質過氧化物濃度顯著增加；而存活者的濃度相對平穩(wěn)氧自由基增加顱腦損傷程度，也是顱腦繼發(fā)性損傷的主要因素*TBARS,Thiobarbituricacidreactivesubstances，硫代巴比妥酸反應物質,為脂質過氧化作用的主要產物LiuJMTheroleofoxygenfreeradicalsincraniocerebralinjury,中國外科雜志.1990Jul;28(7):430-2,447我國,二軍大長海醫(yī)院13氧自由基是顱腦繼發(fā)性損傷的主要因素方法通過測量41名顱腦損傷腦出血14腦出血14腦出血后自由基反應增強，使腦出血后腦水腫的一個重要原因海馬MDA(丙二醛)在腦出血后明顯升高，并隨時間的延長而逐漸升高；海馬MDA的升高早于水腫的產生自由基增高幅度越大，水腫越嚴重自由基升高的水平與水腫的程度保持一致15腦出血后自由基反應增強，使腦出血后腦水腫的一個重要原因海馬M*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOH,1998,Yoshidaetal.1984Feb;14(2):142-6.*TBARS,Thiobarbituricacidreactivesubstances，硫代巴比妥酸反應物質,為脂質過氧化作用的主要產物急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現,1998,Yoshidaetal.腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關細胞質多巴胺容易自動氧化和引起酶的降解，多巴胺未能進入囊泡，引發(fā)氧化應激。4,7,10,14或21天進行血管造影，每組4只。對高血壓大鼠模型，一組單獨使用tPA，另一組使用tPA和自由基清除劑。在貓的冰凍性腦損傷中，應用一種自由基清除劑對苯二胺后，腦水腫明顯減輕急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現與對照組相比，顯著改善行為評分SmithR,LothariusJ,BrundinP.StudyoffreeradicaloxidationoflipidsincerebrospinalfluidofhydrocephalicchildrenVoprMedKhim.0001)顯著小于第2天的情況。ToyodaK,FujiiK,KamouchiM,NakaneH,ArihiroS,OkadaY,IbayashiS,IidaM.細胞質多巴胺容易自動氧化和引起酶的降解，多巴胺未能進入囊泡，引發(fā)氧化應激。超氧化物水平增加(化學發(fā)光技術)4圖自由基清除劑降低tPA引起的出血高血壓大鼠tPA引起出血模型梗死后6小時使用tPA，24小時后引起腦出血。與未進行tPA治療的大鼠相比，tPA顯著增加出血量(+85%)，但是，針對正常大鼠的類似研究顯示，tPA引起的出血發(fā)生率和出血量都不顯著高血壓梗死模型大鼠缺血6小時后再灌注沒有引起出血；聯(lián)合使用tPA和再灌注則顯著增加出血量對高血壓大鼠模型，一組單獨使用tPA，另一組使用tPA和自由基清除劑。結果，tPA引起的出血被自由基清除劑降低40%，梗塞癥狀和神經功能缺損也降低。結論高血壓與tPA引起的出血密切相關tPA增強再灌注引起的出血自由基清除劑減輕與tPA引起的出血AsahiM,AsahiK,WangX,LoEH.Reductionoftissueplasminogenactivator-inducedhemorrhageandbraininjurybyfreeradicalspintrappingafterembolicfocalcerebralischemiainrats.JCerebBloodFlowMetab.2000Mar;20(3):452-7.美國16*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhyd“自由基清除劑抑制腦組織的自由基損傷，因而能保護腦血管的完整性，從而減輕出血”對象/方法兔子顱內出血模型，自由基清除劑MDL101,002結果自由基清除劑顯著降低出血量與對照組相比，顯著改善行為評分推論自由基清除劑抑制腦組織的自由基損傷，因而能保護腦血管的完整性，從而減輕出血。HuB,LiuC,ZivinJA.Reductionofintracerebralhemorrhaginginarabbitembolicstrokemodel.Neurology.1999Dec10;53(9):2140-5美國17“自由基清除劑抑制腦組織的自由基損傷，因而能保護腦血管的完整蛛網膜下腔出血18蛛網膜下腔出血18蛛網膜下腔出血后的血管痙攣期產生大量自由基和脂質過氧化物對象蛛網膜下腔出血模型狗，n=20，對照組(非SAH模型)n=4；方法4,7,10,14或21天進行血管造影，每組4只。靜脈注射水楊酸(100mg/kg)，用微型透析管對腦脊液分析2,3/2,5二羥基苯甲酸(DHBA)，間接測量自由基變化。試驗動物處死時，測量腦橋部分離的蛛網膜凝血和基底動脈丙二醛水平結果蛛網膜下腔出血后414天產生明顯的血管痙攣丙二醛濃度只在蛛網膜下腔出血后4天顯著增加(p<0.0001)二羥基苯甲酸在蛛網膜下腔出血后4天顯著增加(p<0.05)基底動脈丙二醛水平和血管痙攣之間存在明顯相關；腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關MacdonaldRL,MartonLS,AndrusPK,HallED,JohnsL,SajdakMTimecourseofproductionofhydroxylfreeradicalaftersubarachnoidhemorrhageindogs.LifeSci.2004Jul9;75(8):979-89美國19蛛網膜下腔出血后的血管痙攣期產生大量自由基和脂質過氧化物對象自由基清除劑顯著改善蛛網膜下腔出血動物的行為評分，顯著降低血腦屏障通透性方法蛛網膜下腔出血模型小鼠(n=10)，5分鐘、6小時、12小時后給予生理鹽水或者不同濃度的自由基清除劑AVS。測量小鼠的行為。應用伊文氏藍(Evansblue)染色法觀察血腦屏障通透性。將其結果與假手術組比較。結果自由基清除劑顯著改善小鼠的平衡行為(p<0.01)顯著降低血腦屏障通透性(p<0.01)治療效果有劑量相關性治療窗為蛛網膜下腔出血后612小時ImperatoreC,GermanoA,d‘AvellaD,TomaselloF,CostaG.EffectsoftheradicalscavengerAVSonbehavioralandBBBchangesafterexperimentalsubarachnoidhemorrhage.LifeSci.2000Jan21;66(9):779-90意大利20自由基清除劑顯著改善蛛網膜下腔出血動物的行為評分，顯著降低血腦梗死21腦梗死21急性腦梗死自由基增加動物研究嚴重缺血30分鐘后再灌注，多聚不飽和脂肪酸的共軛雙鍵增加1缺血再灌注后蛋白質氧化增加2圖缺血/再灌注時，抗氧化劑水平降低，提示自由基消耗3VCVE輔酶9超氧化物水平增加(化學發(fā)光技術)4圖WatsonBDetal,1984.FukuyamaNetal,1998Flamm..1978;KinutaYetal.,1989;RanjanA.etal.,1993OriotD.etal.,1995;KatzLMetal.,1998,Yoshidaetal.,1982;KinutaYetal.,1989PetersO.etal.,199622急性腦梗死自由基增加動物研究嚴重缺血30分鐘后再灌注，多聚不缺血區(qū)再灌注后蛋白質氧化增加

缺血再灌注產生自由基3-N酪氨酸1/總酪氨酸%假手術組 缺血2小時 蛋白質氧化標志物N-甲基-L-精氨酸(L-NMMA)(NO生物合成抑制劑)缺血2小時后灌注3小時L-NMMA2****++*P<0,05與非梗死相比++P<0,05與缺血2小時后的缺血邊緣區(qū)比較非缺血區(qū)缺血區(qū)核心缺血區(qū)邊緣23缺血區(qū)再灌注后蛋白質氧化增加

缺血再灌注產生自由基3-N酪氨再灌注后缺血陰影區(qū)超氧化物

(自由基)增加(n=18)6005004003002001000100200分鐘缺血1小時后再灌注腦缺血對照超氧化物化學發(fā)光計數PetersO.etal.,199624再灌注后缺血陰影區(qū)超氧化物

(自由基)增加(n=18)600急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現中風患者VA,VC,VE和類胡蘿卜素的水平低于健康人1腦缺血2天之后，TBARS3顯著增加2Lin,1975;HumeR.,1982;ChangC-Y,1998;ElKossiMMH,ZakharyMM,2000SharpeP.C.etal.,1994TBARS,Thiobarbituricacid-reactivesubstances，硫代巴比妥酸反應物質,為脂質過氧化作用的主要產物。25急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現中風患者VA,VC,VE和類胡蘿大面積皮質梗死患者(n=32)血漿膽固醇酯過氧化物*顯著增加，說明腦缺血后產生大量自由基，并且延遲1周以上*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOHPolidoriMC,FreiB,CherubiniA,NellesG,RordorfG,KeaneyJFJr,SchwammL,MecocciP,KoroshetzWJ,BealMF.Increasedplasmalevelsoflipidhydroperoxidesinpatientswithischemicstroke.FreeRadicBiolMed.1998Sep;25(4-5):561-7急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現皮質梗死腔隙性梗死26大面積皮質梗死患者(n=32)血漿膽固醇酯過氧化物*顯著增加自由基對腦缺血及再灌注的損傷動物研究抗氧化劑減少腦缺血及再灌注的損傷自由基有損傷VC,VE減小大鼠及靈長類動物缺血和再灌注后的梗死面積和神經損傷1VE預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋亡2圖VE缺乏的大鼠更容易受到脂類氧化的損傷3經修飾過的SOD(可透過BBB)可減輕缺血引起的腦損傷4RanjanAetal.,1993;HenryPT,ChandyMJ,1998,vanderWorpH.B.etal.,1998TagamiM.etal.,1999YoshidaS.etal.,1985LiuT.H.etal.,1989，ImazuimiS.etal.,199027自由基對腦缺血及再灌注的損傷動物研究抗氧化劑減少腦缺血及再灌抗氧化劑預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋亡神經元調亡/1000+VE+VE+VE+VE普通大鼠具有中風傾向的高血壓大鼠*P<0.01CI腦梗死6R:再灌注6天；9R:再灌注9天；**TagamiM.etal.,199928抗氧化劑預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOHBrauRH,Garcia-CastineirasS,RifkinsonN.損傷后逐步增加，4小時達峰，然后逐步降低，24小時后與假手術組對比，仍然具有顯著性結果腦前葉、 頂葉、 腦干濃度比假手術組分別高RanjanAetal.急性腦梗死自由基增加動物研究結果，tPA引起的出血被自由基清除劑降低40%，梗塞癥狀和神經功能缺損也降低。多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步拳王阿里，患有帕金森癥其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。自由基在癲癇患者血腦屏障的破壞中具有重要作用Lin,1975;HumeR.,1998,Yoshidaetal.腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關KoutsilieriE,SchellerC,GrunblattE,NaraK,LiJ,RiedererP.1978;KinutaYetal.2000Mar;20(3):452-7.水腫患兒中，有炎癥或者出血性并發(fā)癥的水腫，丙二醛和自由基濃度顯著高于單純的水腫Neurosurgery.自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并且降低急性期死亡率自由基損傷破壞戊四唑引起的癲癇之小鼠的血腦屏障自由基對腦缺血及再灌注的損傷臨床發(fā)現一些流行病學現實，飲食中或者血液中VC、VE和類胡蘿卜素水平較低，中風危險性增加急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比1圖嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者2LeinonenJ.S.etal.,2000CherubiniA.etal.200029*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhyd急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比543210-1-2-3700 900 1100 1300 1500 1700梗死容積(logcm3)血漿TRAP*(M)*TRAP(totalperoxylradicaltrappingpotentialofserum),衡量血液中抗氧化劑清除自由基的能力LeinonenJ.S.etal.,200030急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比57嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者(>65歲)400030002000100000h6h24h3d5d7d紅細胞SOD活性(U/gHb)穩(wěn)定組(n=13)惡化組(n=25)P<0.01CherubiniA.etal.200031嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者(>65歲)4000帕金森癥拳王阿里，患有帕金森癥教皇保羅2世(2002年，82歲)，患有帕金森癥和關節(jié)炎32帕金森癥拳王阿里，患有帕金森癥教皇保羅2世(2002年，82氧化應激(oxidativestress)參與帕金森癥的證據氧化應激參與生理性衰老有大量的證據表明，與同齡的健康人相比，帕金森患者的氧化應激顯著增加氧化應激是帕金森癥的早期特點帕金森癥模型試驗顯示有氧化應激和多巴胺神經元惡化。毒素引起的神經元惡化可被抗氧化劑所抑制。帕金森患者大腦有激活的微型神經膠質細胞(可釋放自由基和炎性物質)存在氧化應激還激活細胞死亡程序，包括凋亡KoutsilieriE,SchellerC,GrunblattE,NaraK,LiJ,RiedererP.FreeradicalsinParkinson‘sdisease.JNeurol.2002Sep;249Suppl2:II1-5.德國33氧化應激(oxidativestress)參與帕金森癥的證多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步過去的5年里，發(fā)現了5種不同的與一種稀發(fā)家族性帕金森病相關的基因變異。其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。這種蛋白功能障礙引起細胞質多巴胺水平增加，細胞質多巴胺容易自動氧化和引起酶的降解，多巴胺未能進入囊泡，引發(fā)氧化應激。多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步SmithR,LothariusJ,BrundinP.Freeradicalsandailingproteins--theculpritsbehindParkinsondisease?Lakartidningen.2003Apr10;100(15):1324-6,1329-30.瑞典34多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步過去的5癲癇35癲癇35癲癇病人發(fā)作期血中脂質過氧化物增加40例癲癇病人比較發(fā)作期、間隙期脂質過氧化物(LPO)，并與健康正常參考值對照癲癇發(fā)作時LPO高于正常參考值36癲癇病人發(fā)作期血中脂質過氧化物增加40例癲癇病人36自由基在癲癇患者血腦屏障的破壞中具有重要作用目的戊四唑引起的癲癇之小鼠的血腦屏障通透性增加。比較未經治療和經VE或硒鹽治療的小鼠之血腦屏障狀況。方法應用伊文氏藍(Evansblue)染色法(2%,4ml/kg)顯示血腦屏障破壞狀況。I:對照(n=24); II:戊四唑引起的癲癇(n=12);III:VE(70mg/kg)+癲癇(n=12); IV:硒(4pp)+癲癇(n=12).結果在癲癇小鼠中觀察到伊文氏藍染色的球蛋白外滲，尤其在丘腦核、腦干、枕葉和前葉皮層。 伊文氏藍染色平均值分別為(mg%腦組織) 對照組 0.28+/0.04； 癲癇組 1.6+/0.2(P<0.01，與對照組相比) VE組/硒組 1.2+/0.1(P<0.05，與對照組/非治療組相比)自由基損傷破壞戊四唑引起的癲癇之小鼠的血腦屏障OztasB,KilicS,DuralE,IspirT.Influenceofantioxidantsontheblood-brainbarrierpermeabilityduringepilepticseizures.JNeurosciRes.2001Nov15;66(4):674-8.土耳其37自由基在癲癇患者血腦屏障的破壞中具有重要作用目的戊四唑引起的癲癇后在腦局部地區(qū)產生自由基羥基溴乙非啶被自由基氧化生成溴乙非啶，可以用數碼圖像法和熒光顯微鏡法測量經匹魯卡品鋰鹽致癲癇模型小鼠中溴乙非啶濃度。在小鼠致癲癇之前1小時靜脈或腹部注射羥基溴乙非啶，在細胞中觀察到溴乙非啶熒光標記，對照組中未觀察到，說明癲癇產生過氧化物。頂皮質區(qū)、梨形皮質區(qū)、圍鼻皮質區(qū)、杏仁外側核,丘腦內側核和丘腦背外側核觀察到顯著增加的溴乙非啶熒光標記。PetersonSL,MorrowD,LiuS,LiuKJ.Hydroethidinedetectionofsuperoxideproductionduringthelithium-pilocarpinemodelofstatusepilepticus.EpilepsyRes.2002May;49(3):226-38.美國38癲癇后在腦局部地區(qū)產生自由基羥基溴乙非啶被自由基氧化生成溴乙腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關假手術組 缺血2小時自由基對腦缺血及再灌注的損傷臨床發(fā)現抗壞血酸減少意味著自由基增加，消耗了抗氧化劑損傷后逐步增加，4小時達峰，然后逐步降低，24小時后與假手術組對比，仍然具有顯著性++P<0,05與缺血2小時后的缺血邊緣區(qū)比較顯著降低血腦屏障通透性(p<0.二羥基苯甲酸在蛛網膜下腔出血后4天顯著增加(p<0.方法通過測量41名顱腦損傷患者的血漿TBARS*水平觀察其脂質過氧化物濃度中風患者VA,VC,VE和類胡蘿卜素的水平低于健康人1蛛網膜下腔出血后414天產生明顯的血管痙攣,1995;KatzLMetal.2000Mar;20(3):452-7.02)中線位移(P<0.超氧化物水平增加(化學發(fā)光技術)4圖14天內，治療組死亡6個人死于中風(20%)，對照組14個人(45%)，具有顯著差異(P<0.腦水腫的產生與自由基相關。腦炎39腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關腦炎39神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療（優(yōu)選）神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療41（優(yōu)選）神經系統(tǒng)損傷與自由基關系及抗自由基治療2腦水腫42腦水腫3氧自由基引起腦切片水分含量增加大鼠斷頭，用腦的皮質切片進行體外腦水腫實驗發(fā)現，當在腦切片的培養(yǎng)液中加入一種外源性氧自由基產生劑黃嘌呤氧化酶時，腦組織過氧化物和水分含量均增加43氧自由基引起腦切片水分含量增加大鼠斷頭，用腦的皮質切片進行體嬰兒原發(fā)性腦水腫中，有并發(fā)癥的水腫呈現較高的自由基濃度水腫患兒中，有炎癥或者出血性并發(fā)癥的水腫，丙二醛和自由基濃度顯著高于單純的水腫有出血性并發(fā)癥水腫的病情最嚴重。Aref'evaIA,DemchukML,ArtarianAA,MirsadykovDA,PromyslovMSh.StudyoffreeradicaloxidationoflipidsincerebrospinalfluidofhydrocephalicchildrenVoprMedKhim.1998Jul-Aug;44(4):388-92俄羅斯44嬰兒原發(fā)性腦水腫中，有并發(fā)癥的水腫呈現較高的自由基濃度水腫患自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并且降低急性期死亡率嚴重頸內動脈梗塞患者，依達拉奉+甘油n=30,甘油組n=31治療后2天，CT檢查梗死體積(P<0.02)中線位移(P<0.02)顯著小于對照組治療組出血性轉變顯著低于對照組(P<0.03).第57天依達拉奉組梗死體積(P<0.0001)中線位移(P<0.0001)顯著小于第2天的情況。14天內，治療組死亡6個人死于中風(20%)，對照組14個人(45%)，具有顯著差異(P<0.03).ToyodaK,FujiiK,KamouchiM,NakaneH,ArihiroS,OkadaY,IbayashiS,IidaM.Freeradicalscavenger,edaravone,instrokewithinternalcarotidarteryocclusion.JNeurolSci.2004Jun15;221(1-2):11-7.日本45自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并顱腦損傷46顱腦損傷7貓冷凍性腦損傷試驗,Ortege(1972)在貓的冰凍性腦損傷中，應用一種自由基清除劑對苯二胺后，腦水腫明顯減輕腦水腫的產生與自由基相關。47貓冷凍性腦損傷試驗,Ortege(1972)在貓的冰凍性其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。PetersonSL,MorrowD,LiuS,LiuKJ.1984Feb;14(2):142-6.抗壞血酸減少意味著自由基增加，消耗了抗氧化劑血漿TRAP*(M)抗氧化劑減少腦缺血及再灌注的損傷自由基有損傷丙二醛(Malondialdehyde，MDA)是脂質過氧化反應的分解產物BrauRH,Garcia-CastineirasS,RifkinsonN.高血壓大鼠tPA引起出血模型梗死后6小時使用tPA，24小時后引起腦出血。VE預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋亡2圖嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者(>65歲)比較未經治療和經VE或硒鹽治療的小鼠之血腦屏障狀況。自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并且降低急性期死亡率多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步2004Jul9;75(8):979-89美國WatsonBDetal,1984.2003Apr10;100(15):1324-6,1329-30.*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOH貓腦液壓沖擊性損傷試驗Kontos用NBT(四唑氮藍)法檢測氧自由基給予SOD則抑制氧自由基產生nm/(min.cm2)48其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。貓腦液壓沖硫代巴比妥酸比色法檢測Wistar大鼠落體撞擊腦損傷時的氧自由基反應丙二醛(nmol/mg)49硫代巴比妥酸比色法檢測Wistar大鼠落體撞擊腦損傷時的氧自腦損傷患者腦脊液中抗壞血酸

水平降低自由基增加41名不同神經功能障礙患者的腦脊液的抗壞血酸分析18名沒有明顯神經功能異常的患者(背痛/坐骨神經痛)患者腦脊液的抗壞血酸濃度作為基準值，結果發(fā)現，下列三組患者腦脊液中抗壞血酸濃度顯著降低頭部創(chuàng)傷患者顱內壓增高(非感染性腦水腫)患者腦腫瘤患者可能的解釋抗壞血酸減少意味著自由基增加，消耗了抗氧化劑某些損傷(創(chuàng)傷、缺血或腫瘤)之后，自由基對中樞神經系統(tǒng)產生損傷BrauRH,Garcia-CastineirasS,RifkinsonN.Cerebrospinalfluidascorbicacidlevelsinneurologicaldisorders.Neurosurgery.1984Feb;14(2):142-6.

50腦損傷患者腦脊液中抗壞血酸

水平降低自由基增加41名不同神經腦損傷后立即形成自由基對象腦損傷動物模型方法在不同時間測量不同部位的MDA*濃度結果腦前葉、 頂葉、 腦干濃度比假手術組分別高 36.7%, 41.8%, 35.1%(p<0.0001).損傷后逐步增加，4小時達峰，然后逐步降低，24小時后與假手術組對比，仍然具有顯著性損傷后立即產生MDA,表明腦損傷迅速形成自由基。丙二醛(Malondialdehyde，MDA)是脂質過氧化反應的分解產物HsiangJN,WangJY,IpSM,NgHK,StadlinA,YuAL,PoonWS.Thetimecourseandregionalvariationsoflipidperoxidationafterdiffusebraininjuryinrats.ActaNeurochir(Wien).1997;139(5):464-8.香港51腦損傷后立即形成自由基對象腦損傷動物模型HsiangJN,氧自由基是顱腦繼發(fā)性損傷的主要因素方法通過測量41名顱腦損傷患者的血漿TBARS*水平觀察其脂質過氧化物濃度結果損傷后24小時，血漿脂質過氧化物明顯增加，損傷程度越嚴重，血漿脂質過氧化物濃度越高，愈后越差在2472小時內，死亡患者血漿內脂質過氧化物濃度顯著增加；而存活者的濃度相對平穩(wěn)氧自由基增加顱腦損傷程度，也是顱腦繼發(fā)性損傷的主要因素*TBARS,Thiobarbituricacidreactivesubstances，硫代巴比妥酸反應物質,為脂質過氧化作用的主要產物LiuJMTheroleofoxygenfreeradicalsincraniocerebralinjury,中國外科雜志.1990Jul;28(7):430-2,447我國,二軍大長海醫(yī)院52氧自由基是顱腦繼發(fā)性損傷的主要因素方法通過測量41名顱腦損傷腦出血53腦出血14腦出血后自由基反應增強，使腦出血后腦水腫的一個重要原因海馬MDA(丙二醛)在腦出血后明顯升高，并隨時間的延長而逐漸升高；海馬MDA的升高早于水腫的產生自由基增高幅度越大，水腫越嚴重自由基升高的水平與水腫的程度保持一致54腦出血后自由基反應增強，使腦出血后腦水腫的一個重要原因海馬M*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOH,1998,Yoshidaetal.1984Feb;14(2):142-6.*TBARS,Thiobarbituricacidreactivesubstances，硫代巴比妥酸反應物質,為脂質過氧化作用的主要產物急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現,1998,Yoshidaetal.腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關細胞質多巴胺容易自動氧化和引起酶的降解，多巴胺未能進入囊泡，引發(fā)氧化應激。4,7,10,14或21天進行血管造影，每組4只。對高血壓大鼠模型，一組單獨使用tPA，另一組使用tPA和自由基清除劑。在貓的冰凍性腦損傷中，應用一種自由基清除劑對苯二胺后，腦水腫明顯減輕急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現與對照組相比，顯著改善行為評分SmithR,LothariusJ,BrundinP.StudyoffreeradicaloxidationoflipidsincerebrospinalfluidofhydrocephalicchildrenVoprMedKhim.0001)顯著小于第2天的情況。ToyodaK,FujiiK,KamouchiM,NakaneH,ArihiroS,OkadaY,IbayashiS,IidaM.細胞質多巴胺容易自動氧化和引起酶的降解，多巴胺未能進入囊泡，引發(fā)氧化應激。超氧化物水平增加(化學發(fā)光技術)4圖自由基清除劑降低tPA引起的出血高血壓大鼠tPA引起出血模型梗死后6小時使用tPA，24小時后引起腦出血。與未進行tPA治療的大鼠相比，tPA顯著增加出血量(+85%)，但是，針對正常大鼠的類似研究顯示，tPA引起的出血發(fā)生率和出血量都不顯著高血壓梗死模型大鼠缺血6小時后再灌注沒有引起出血；聯(lián)合使用tPA和再灌注則顯著增加出血量對高血壓大鼠模型，一組單獨使用tPA，另一組使用tPA和自由基清除劑。結果，tPA引起的出血被自由基清除劑降低40%，梗塞癥狀和神經功能缺損也降低。結論高血壓與tPA引起的出血密切相關tPA增強再灌注引起的出血自由基清除劑減輕與tPA引起的出血AsahiM,AsahiK,WangX,LoEH.Reductionoftissueplasminogenactivator-inducedhemorrhageandbraininjurybyfreeradicalspintrappingafterembolicfocalcerebralischemiainrats.JCerebBloodFlowMetab.2000Mar;20(3):452-7.美國55*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhyd“自由基清除劑抑制腦組織的自由基損傷，因而能保護腦血管的完整性，從而減輕出血”對象/方法兔子顱內出血模型，自由基清除劑MDL101,002結果自由基清除劑顯著降低出血量與對照組相比，顯著改善行為評分推論自由基清除劑抑制腦組織的自由基損傷，因而能保護腦血管的完整性，從而減輕出血。HuB,LiuC,ZivinJA.Reductionofintracerebralhemorrhaginginarabbitembolicstrokemodel.Neurology.1999Dec10;53(9):2140-5美國56“自由基清除劑抑制腦組織的自由基損傷，因而能保護腦血管的完整蛛網膜下腔出血57蛛網膜下腔出血18蛛網膜下腔出血后的血管痙攣期產生大量自由基和脂質過氧化物對象蛛網膜下腔出血模型狗，n=20，對照組(非SAH模型)n=4；方法4,7,10,14或21天進行血管造影，每組4只。靜脈注射水楊酸(100mg/kg)，用微型透析管對腦脊液分析2,3/2,5二羥基苯甲酸(DHBA)，間接測量自由基變化。試驗動物處死時，測量腦橋部分離的蛛網膜凝血和基底動脈丙二醛水平結果蛛網膜下腔出血后414天產生明顯的血管痙攣丙二醛濃度只在蛛網膜下腔出血后4天顯著增加(p<0.0001)二羥基苯甲酸在蛛網膜下腔出血后4天顯著增加(p<0.05)基底動脈丙二醛水平和血管痙攣之間存在明顯相關；腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關MacdonaldRL,MartonLS,AndrusPK,HallED,JohnsL,SajdakMTimecourseofproductionofhydroxylfreeradicalaftersubarachnoidhemorrhageindogs.LifeSci.2004Jul9;75(8):979-89美國58蛛網膜下腔出血后的血管痙攣期產生大量自由基和脂質過氧化物對象自由基清除劑顯著改善蛛網膜下腔出血動物的行為評分，顯著降低血腦屏障通透性方法蛛網膜下腔出血模型小鼠(n=10)，5分鐘、6小時、12小時后給予生理鹽水或者不同濃度的自由基清除劑AVS。測量小鼠的行為。應用伊文氏藍(Evansblue)染色法觀察血腦屏障通透性。將其結果與假手術組比較。結果自由基清除劑顯著改善小鼠的平衡行為(p<0.01)顯著降低血腦屏障通透性(p<0.01)治療效果有劑量相關性治療窗為蛛網膜下腔出血后612小時ImperatoreC,GermanoA,d‘AvellaD,TomaselloF,CostaG.EffectsoftheradicalscavengerAVSonbehavioralandBBBchangesafterexperimentalsubarachnoidhemorrhage.LifeSci.2000Jan21;66(9):779-90意大利59自由基清除劑顯著改善蛛網膜下腔出血動物的行為評分，顯著降低血腦梗死60腦梗死21急性腦梗死自由基增加動物研究嚴重缺血30分鐘后再灌注，多聚不飽和脂肪酸的共軛雙鍵增加1缺血再灌注后蛋白質氧化增加2圖缺血/再灌注時，抗氧化劑水平降低，提示自由基消耗3VCVE輔酶9超氧化物水平增加(化學發(fā)光技術)4圖WatsonBDetal,1984.FukuyamaNetal,1998Flamm..1978;KinutaYetal.,1989;RanjanA.etal.,1993OriotD.etal.,1995;KatzLMetal.,1998,Yoshidaetal.,1982;KinutaYetal.,1989PetersO.etal.,199661急性腦梗死自由基增加動物研究嚴重缺血30分鐘后再灌注，多聚不缺血區(qū)再灌注后蛋白質氧化增加

缺血再灌注產生自由基3-N酪氨酸1/總酪氨酸%假手術組 缺血2小時 蛋白質氧化標志物N-甲基-L-精氨酸(L-NMMA)(NO生物合成抑制劑)缺血2小時后灌注3小時L-NMMA2****++*P<0,05與非梗死相比++P<0,05與缺血2小時后的缺血邊緣區(qū)比較非缺血區(qū)缺血區(qū)核心缺血區(qū)邊緣62缺血區(qū)再灌注后蛋白質氧化增加

缺血再灌注產生自由基3-N酪氨再灌注后缺血陰影區(qū)超氧化物

(自由基)增加(n=18)6005004003002001000100200分鐘缺血1小時后再灌注腦缺血對照超氧化物化學發(fā)光計數PetersO.etal.,199663再灌注后缺血陰影區(qū)超氧化物

(自由基)增加(n=18)600急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現中風患者VA,VC,VE和類胡蘿卜素的水平低于健康人1腦缺血2天之后，TBARS3顯著增加2Lin,1975;HumeR.,1982;ChangC-Y,1998;ElKossiMMH,ZakharyMM,2000SharpeP.C.etal.,1994TBARS,Thiobarbituricacid-reactivesubstances，硫代巴比妥酸反應物質,為脂質過氧化作用的主要產物。64急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現中風患者VA,VC,VE和類胡蘿大面積皮質梗死患者(n=32)血漿膽固醇酯過氧化物*顯著增加，說明腦缺血后產生大量自由基，并且延遲1周以上*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOHPolidoriMC,FreiB,CherubiniA,NellesG,RordorfG,KeaneyJFJr,SchwammL,MecocciP,KoroshetzWJ,BealMF.Increasedplasmalevelsoflipidhydroperoxidesinpatientswithischemicstroke.FreeRadicBiolMed.1998Sep;25(4-5):561-7急性腦梗死自由基增加臨床發(fā)現皮質梗死腔隙性梗死65大面積皮質梗死患者(n=32)血漿膽固醇酯過氧化物*顯著增加自由基對腦缺血及再灌注的損傷動物研究抗氧化劑減少腦缺血及再灌注的損傷自由基有損傷VC,VE減小大鼠及靈長類動物缺血和再灌注后的梗死面積和神經損傷1VE預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋亡2圖VE缺乏的大鼠更容易受到脂類氧化的損傷3經修飾過的SOD(可透過BBB)可減輕缺血引起的腦損傷4RanjanAetal.,1993;HenryPT,ChandyMJ,1998,vanderWorpH.B.etal.,1998TagamiM.etal.,1999YoshidaS.etal.,1985LiuT.H.etal.,1989，ImazuimiS.etal.,199066自由基對腦缺血及再灌注的損傷動物研究抗氧化劑減少腦缺血及再灌抗氧化劑預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋亡神經元調亡/1000+VE+VE+VE+VE普通大鼠具有中風傾向的高血壓大鼠*P<0.01CI腦梗死6R:再灌注6天；9R:再灌注9天；**TagamiM.etal.,199967抗氧化劑預防有中風傾向的高血壓大鼠因短暫缺血引起的神經細胞凋*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhydroperoxides,CEOOH)是脂質過氧化特異性標志;年輕健康人群中未檢測到CEOOHBrauRH,Garcia-CastineirasS,RifkinsonN.損傷后逐步增加，4小時達峰，然后逐步降低，24小時后與假手術組對比，仍然具有顯著性結果腦前葉、 頂葉、 腦干濃度比假手術組分別高RanjanAetal.急性腦梗死自由基增加動物研究結果，tPA引起的出血被自由基清除劑降低40%，梗塞癥狀和神經功能缺損也降低。多巴胺引起的氧化應激可能是帕金森病發(fā)病機理的最后一步拳王阿里，患有帕金森癥其中一種變異蛋白()與突觸變形性和囊泡功能相關。自由基在癲癇患者血腦屏障的破壞中具有重要作用Lin,1975;HumeR.,1998,Yoshidaetal.腦脊液二羥基苯甲酸水平與血管痙攣也存在明顯相關KoutsilieriE,SchellerC,GrunblattE,NaraK,LiJ,RiedererP.1978;KinutaYetal.2000Mar;20(3):452-7.水腫患兒中，有炎癥或者出血性并發(fā)癥的水腫，丙二醛和自由基濃度顯著高于單純的水腫Neurosurgery.自由基清除劑依達拉奉顯著抑制嚴重頸內動脈梗塞患者的腦水腫，并且降低急性期死亡率自由基損傷破壞戊四唑引起的癲癇之小鼠的血腦屏障自由基對腦缺血及再灌注的損傷臨床發(fā)現一些流行病學現實，飲食中或者血液中VC、VE和類胡蘿卜素水平較低，中風危險性增加急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比1圖嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者2LeinonenJ.S.etal.,2000CherubiniA.etal.200068*血漿膽固醇酯(cholesterylesterhyd急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比543210-1-2-3700 900 1100 1300 1500 1700梗死容積(logcm3)血漿TRAP*(M)*TRAP(totalperoxylradicaltrappingpotentialofserum),衡量血液中抗氧化劑清除自由基的能力LeinonenJ.S.etal.,200069急性腦梗死的缺血容積和神經損傷程度與血漿抗氧化能力成反比57嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者(>65歲)400030002000100000h6h24h3d5d7d紅細胞SOD活性(U/gHb)穩(wěn)定組(n=13)惡化組(n=25)P<0.01CherubiniA.etal.200070嚴重腦梗死患者SOD活性顯著低于輕微患者(>65歲)4000帕金森癥拳王阿里，患有帕金森癥教皇保羅2世(2002年，82歲)，患有帕金森癥和關節(jié)炎71帕金森癥拳王阿里，患有帕金森癥教皇保羅2世(2002年，82氧化應激(oxidativestress)參與帕金森癥的證據氧化應激參與生理性衰老