生物制藥工藝學(xué)習題選擇填空

第一章生物藥物概述一、填空：1、我國藥物的三大藥源指的是化學(xué)藥物、生物藥物、中藥2、現(xiàn)代生物藥物已形成四大類型，包括基因重組多肽和蛋白質(zhì)、基因藥物、天然生化藥物、合成與部分合成的生物藥物二、 選擇題：TOC\o"1-5"\h\z1、以下能用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的藥物為 （B）A、維生素 B、生長素C、肝素D、鏈霉素2、下面哪一種藥物屬于多糖類生物藥物 （C）A、洛伐他汀 B、干擾素C、肝素D、細胞色素C3、能用于防治血栓的酶類藥物有 （D）A、SOD B、胰島素C、L-天冬酰胺酶 D、尿激酶4、環(huán)抱菌素是微生物產(chǎn)生的 （A）A、免疫抑制劑 B、酶類藥物 C、酶抑制劑 D、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素5、下列屬于多肽激素類生物藥物的是 （D）A、ATPB、四氫葉酸 C、透明質(zhì)酸 D、降鈣素6、蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造的速效胰島素機理是 （D）A.將豬胰島素B30位改造為丙氨酸，使之和人胰島素序列一致B.將A21位替換成甘氨酸，B鏈末端增加兩個精氨酸，使之在pH4溶液中可溶C.將B29位賴氨酸用長鏈脂肪酸修飾，改變其皮下擴散和吸收速度D.將人胰島素B28位與B29位氨基酸互換，使之不易形成六聚體第二章生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ)一、填空題1、從生物材料中提取天然大分子藥物時，常采用的措施有采用緩沖系統(tǒng)、添加保護劑、抑制水解酶作用等。2、生化活性物質(zhì)濃縮可采用的方法有鹽析濃縮、有機溶劑沉淀濃縮、超濾濃縮、真空減壓濃縮或薄膜濃縮、用葡聚糖凝膠濃縮、用聚乙二醇濃縮3、生化活性物質(zhì)常用的干燥方法有減壓干燥、噴霧干燥、冷凍干燥4、冷凍干燥是在低溫、低壓條件下，利用水的升華性能而進行的一種干燥方法。5、微生物菌種的分離和純化可以用的方法有平板劃線法、稀釋后涂布平板法。6、微生物菌種的自然選育是指利用微生物在一定條件下產(chǎn)生自發(fā)突變的原理，通過分離、篩選排除衰變型菌落，選擇維持原有生產(chǎn)水平的菌株。

7、誘變時選擇出發(fā)菌株時應(yīng)考慮出發(fā)菌株的穩(wěn)定性、選用具備某種優(yōu)良特性、對誘變劑敏感、菌種的生理狀態(tài)及生長發(fā)育時間等問題。8、目前常用的誘變劑可分為物理誘變因子、化學(xué)誘變劑、生物誘變因子三大類。9、常用的菌種保藏方法有：斜面低溫保藏法、液體石蠟封藏法、冷凍干燥保藏法、液氮超低溫保藏法、甘油保藏法、沙土管保藏等。10、微生物生長需要的六大營養(yǎng)要素是碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽、水。11、生物藥物制備過程中，常用的滅菌及除菌方法有：加熱滅菌、輻射滅菌（紫外殺菌）、介質(zhì)過濾除菌、化學(xué)滅菌法。12、獲得具有遺傳信息的目的基因的方法有鳥槍克隆法（DNA文庫）、cDNA文庫法、化學(xué)合成法、PCR法。13、PCR由3個基本反應(yīng)組成，即高溫變性、低溫退火、適溫延伸。14、基因工程中原核表達常用的宿主有大腸桿菌、枯草桿菌等；常用的真核表達系統(tǒng)有酵母、動物（植物）細胞等。15、大腸桿菌表達系統(tǒng)的缺點是不能進行翻譯后加工（糖基化），因而像EPO等基因的表達需使用真核（酵母）表達系統(tǒng)。16、分泌表達是指將目的基因嵌合在信號肽基因下游進行表達，從而使目的基因分泌到細胞周質(zhì)或培養(yǎng)基中。17、固定化酶常采用的方法可分為吸附、包埋、交聯(lián)、共價鍵結(jié)合四大類。18、下面酶固定化示例圖分別代表哪種固定化方法：A.吸附 B.共價鍵結(jié)合 C.交聯(lián) D.包埋二、選擇題TOC\o"1-5"\h\z1、如果想要從生物材料中提取輔酶Q10,應(yīng)該選取下面哪一種動物臟器 （D）A、胰臟 B、肝臟 C、小腸 口、心臟2、目前分離的1000多種抗生素，約2/3產(chǎn)自 （B）A、真菌 B、放線菌 C、細菌 D、病毒3、由于目的蛋白質(zhì)和雜蛋白分子量差別較大，擬根據(jù)分子量大小分離純化并獲得目的蛋白質(zhì)，可采用 （C）A、SDS凝膠電泳 B、鹽析法 C、凝膠過濾 D、吸附層析4、以下可用于生物大分子與雜質(zhì)分離并純化的方法有A、蒸餾 B、冷凍干燥 C、氣相色譜法 D、超濾TOC\o"1-5"\h\z5、分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜，目的物濃度稀，因而易采用 （A）A、分離量大分辨率低的方法 B、分離量小分辨率低的方法C、分離量小分辨率高的方法 D、各種方法都試驗一下，根據(jù)試驗結(jié)果確定6、以下可用于菌種純化的方法有 （B）A、高溫滅菌 B、平板劃線 C、富集培養(yǎng) D、誘變處理7、能夠?qū)崿F(xiàn)微生物菌種定向改造的方法是 （D）A、紫外誘變 B、自然選育 C、制備原生質(zhì)體 D、基因工程8、能夠用沙土管保存的菌種是 （C）A、大腸桿菌 B、酵母菌C、青霉菌D、乳酸桿菌9、以下關(guān)于PCR的說法錯誤的是 （C）A、PCR反應(yīng)必須要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶B、應(yīng)用PCR技術(shù)可以進行定點突變C、PCR的引物必須完全和模板互補配對D、PCR反應(yīng)中，僅介于兩引物間的DNA片段得到大量擴增第三章生物材料的預(yù)處理、細胞破碎和液?固分離（答案）一、填空題1、確定生物材料的預(yù)處理方法的依據(jù)是生物活性物質(zhì)存在方式與特點、后續(xù)操作的要求、目的物穩(wěn)定性。2、高價金屬離子的去處常用的方法：離子交換法、沉淀法。3、常用的細胞破碎方法：機械法、物理法、化學(xué)法、生物法。物理法主要包括：干燥法、反復(fù)凍融法、滲透壓沖擊法。生物法主要包括：酶解法、組織自溶法。4、常規(guī)的固液分離技術(shù)主要有過濾和離心分離等。二、問答1、簡述錯流過濾的優(yōu)點及其原因。答：①過濾收率高，由于過濾過程中，洗滌充分、合理，少量多次，故濾液稀釋量不大的情況下，獲得高達97-98%的收率。②濾液質(zhì)量好，凡體積大于膜孔的固體，包括菌體、培養(yǎng)基、雜蛋白等均不能通過膜進入濾液，大部分雜質(zhì)被排除掉，給后續(xù)分離及最終產(chǎn)品質(zhì)量均帶來好處。③減少處理步驟，鼓式真空過濾器一般需涂助濾劑，板框過濾器則需清洗，拆裝費時、費力，而錯流過濾只需在18-20h連續(xù)操作之后，用清水沿原管流洗4-6h。④對染菌罐易于批處理，也容易進行擴大生產(chǎn)。2、簡述影響液-固分離的因素。答：①微生物種類對液固分離的影響；②發(fā)酵液的粘度；③發(fā)酵液的PH、溫度和加熱時間。3、簡述離心分離法的優(yōu)缺點。答：離心分離法速度快，效率高，操作時衛(wèi)生條件好，占地面積小，能自動化、連續(xù)化和程序控制，適合于大規(guī)模的分離過程，但是設(shè)備投資費用高、耗能也較高。4、簡述細胞及蛋白質(zhì)的預(yù)處理方式。答：①加入凝聚劑；②加入絮凝劑；③變性沉淀；④吸附；⑤等電點沉淀；⑥加各種沉淀劑沉淀第四章萃取分離法（答案）、填空題1、常用的萃取方法有：單級萃取、多級錯流萃取、多級逆流萃取。2、影響溶劑萃取的因素：乳化和破乳化、PH的影響、溫度和萃取時間的影響、鹽析作用的影響、溶劑種類、用量及萃取方式的影響。3、破乳方法有：加入表面活性劑、離心、加電解質(zhì)、加熱、吸附法破乳、高壓電破乳、稀釋法、超濾、反應(yīng)萃取。4、常用的破乳劑有：陽離子表面活性劑、陰離子表面活性劑。二、名詞解釋1、液-液萃?。菏侵赣靡环N溶劑將物質(zhì)從另一種溶劑（如發(fā)酵液）中提取出來的方法，根據(jù)所用溶劑的性質(zhì)不同或萃取機制不同，可將液-液萃取分為多種類型。2、萃?。涸谌軇┹腿≈?，被提取的溶液稱為料液，其中與提取的物質(zhì)稱溶質(zhì)，而用以進行萃取的溶劑稱為萃取劑。料液與萃取劑接觸后，料液中的溶質(zhì)向萃取劑轉(zhuǎn)移的過程稱為萃取，達到萃取平衡后，大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中，這種含有溶質(zhì)的萃取劑溶液稱為萃取液，而被萃取出溶質(zhì)以后的料液稱為萃余液。3、反萃?。╯tripping）：是將萃取液與反萃取劑（含無機酸或堿的水溶液，有時也可以是水）相接觸，使某種被萃入有機相的溶質(zhì)轉(zhuǎn)入水相，可把這種過程看作萃取的逆過程。4、分配定律：即在一定溫度，一定壓力下，某一溶質(zhì)在互不能相溶的兩種溶劑間分配時，達到平衡后，在兩相中的活度之比為一常數(shù)。5、萃取因素：也稱萃取比，其定義為被萃取溶質(zhì)進入萃取相的總量與該溶質(zhì)在萃余相中總量之比，通常以E表示。6、萃取率（percentageextraction）：生產(chǎn)上常用萃取率來表示一種萃取劑對某種溶質(zhì)的萃取能力，計算萃取效果，其公式為：上取相胃溶質(zhì)吃X100%;工X100%原始料液中溶質(zhì)總量 E+17、分離因素：在同一萃取體系內(nèi)兩種溶質(zhì)在同樣條件下分配系數(shù)的比值。第五章沉淀法（答案）一.填空.固相析出法主要包括鹽析法,有機溶劑沉淀法，等電點沉淀法，結(jié)晶法及其它多種沉淀方法等。.按照一般的習慣，析出物為晶體時稱為結(jié)晶法，析出物為無定形固體則稱為沉淀法。.影響鹽析的因素有：無機鹽的種類、溶質(zhì)（蛋白質(zhì)等）種類的影響、蛋白質(zhì)濃度的影響、溫度的影響、pH的影響.結(jié)晶包括三個過程：（1）形成過飽和溶液：（2）晶核形成；（3）晶體生長。.影晶體大小的主要因素，歸納起來與過飽和度、溫度、攪拌速度、晶種等直接有關(guān)。.晶體的質(zhì)量主要是指晶體的大小、形狀和純度等3個方面二.選擇TOC\o"1-5"\h\z1、在一定的pH和溫度下改變離子強度（鹽濃度）進行鹽析，稱作 （A）A.KS鹽析法B.B鹽析法C.重復(fù)鹽析法D.分部鹽析法2、當向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時，蛋白質(zhì)溶解度 （C）A.增大B.減小C.先增大，后減小D.先減小，后增大3、鹽析法與有機溶劑沉淀法比較，其優(yōu)點是 （B）A.分辨率高 B.變性作用小C.雜質(zhì)易除D.沉淀易分離4、當向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時，蛋白質(zhì)溶解度 （C）A.增大B.減小C.先增大，后減小D.先減小，后增大5、鹽析常數(shù)Ks是生物大分子的特征常數(shù)，它與下列哪種因素關(guān)系密切。 （B）A.鹽濃度B,鹽種類C.溶質(zhì)濃度D介質(zhì)pH6、將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物，該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合，在一定條件下沉淀出來，此方法稱為 （A）A.親和沉淀B.聚合物沉淀C.金屬離子沉淀D.鹽析沉淀7、將四環(huán)素粗品溶于pH2的水中，用氨水調(diào)pH4.5—4.6,28—30℃保溫，即有四環(huán)素沉淀結(jié)晶析出。此沉淀方法稱為 （B）A.有機溶劑結(jié)晶法B.等電點法C.透析結(jié)晶法D.鹽析結(jié)晶法8、影響體大小的主要因素與下列哪些因素無關(guān) （D）A.過飽和度 B.溫度 C.攪拌速度D.飽和度9、下列沉淀試劑不屬于表面活性劑的是 （D）A.CTABB.CPCC.SDSD.PEG三名詞解釋：.鹽析法：是利用各種生物分子在濃鹽溶液中溶解度的差異，通過向溶液中引入一定數(shù)量的中性鹽，使目的物或雜蛋白以沉淀析出，達到純化目的的方法。.Ks鹽析：在一定的pH和溫度下改變離子強度（鹽濃度）進行鹽析，稱作Ks鹽析法。Ks鹽析法多用于提取液的前期分離工作。.B鹽析：在一定離子強度下僅改變pH和溫度進行鹽析，稱作B鹽析法。在分離的后期階段，為了求得較好的分辨率，或者為了達到結(jié)晶的目的，有時應(yīng)用B鹽析法。B鹽析法由于溶質(zhì)溶解度變化緩慢且變化幅度小，沉淀分辨率比KS鹽析法好。4.親和沉淀：利用親和反應(yīng)原理，將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體■配基復(fù)合物（親和沉淀劑），該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合，在一定條件下沉淀出來。第六章吸附分離法（答案）一、填空1、吸附劑按其化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為兩大類：一類是有機吸附劑，如活性炭、淀粉、大孔吸附樹脂等：另一類是無機吸附劑，如白陶土、氧化鋁、硅膠、硅藻土,等。2、常用的吸附劑有活性炭、硅膠和白陶土等。3、大孔網(wǎng)狀聚合物吸附劑是在樹脂聚合時加入惰性致孔劑，待網(wǎng)格骨架固化和鏈結(jié)構(gòu)單元形成后，用溶劑萃取或蒸餾水洗將致孔劑去掉，形成不受外界環(huán)境條件影響的孔隙，其孔徑遠大于2?4nm,可達100nm，故稱“大孔”。4、大孔網(wǎng)狀聚合物吸附劑按骨架的極性強弱，可分為非極性、中等極性、極性和強極性吸附劑四類。二、選擇題1、用大網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì)，一般用下列哪種溶液洗脫 （D）A.水B.高鹽C.低pHD.高pH2、“類似物容易吸附類似物”的原則，一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì)（B）A.極性溶劑 B.非極性溶劑 C.水D.溶劑3、“類似物容易吸附類似物”的原則，一般非極性吸附劑適宜于從下列何種溶TOC\o"1-5"\h\z劑中吸附非極性物質(zhì)。 （A）A.極性溶劑B.非極性溶劑C.三氯甲烷 D.溶劑4、下列屬于無機吸附劑的是： （A）A.白陶土B.活性炭C.淀粉D.纖維素5、活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強？ （A）A.水B.甲醇C.乙醇 0.三氯甲烷6、關(guān)于大孔樹脂洗脫條件的說法，錯誤的是： （A）A.最常用的是以高級醇、酮或其水溶液解吸。B.對弱酸性物質(zhì)可用堿來解吸。C.對弱堿性物質(zhì)可用酸來解吸。D.如吸附系在高濃度鹽類溶液中進行時，則常常僅用水洗就能解吸下來。第七章凝膠層析（答案）一、填空題1、凝膠層析的分離原理有平衡排除理論、擴散分離理論、流動分離理論。這三種分離原理是互相補充的，在通常情況下平衡排除理論起主導(dǎo)作用;擴散分離理論的作用隨流速增加而加強：只有在流速很高時流動分離理論才起作用。2、瓊脂糖凝膠的一個特征是分離的分子量范圍非常大，其分離范圍隨著凝膠濃度上升而下降，顆粒強度隨濃度上升而 提高。3、凝膠粒度的大小對分離效果有直接的影響。一般來說，細粒凝膠柱流速低，洗脫峰窄，分辨率高，多用于精制分離等。粗粒凝膠柱流速高，洗脫峰平坦，分辨率低，多用于脫鹽等。4、在作分級分離時，為了提高分辨率，多采用比樣品體積大25 倍以上的柱體積，25以上的柱比，較大吸液量、較細粒的凝膠固定相。5、溶質(zhì)通過色譜柱時造成的峰加寬效應(yīng)包括分子擴散、渦流擴散、流動相中傳質(zhì)阻力、固定相中傳質(zhì)阻力。6、葡聚糖凝膠的孔徑大小取決于交聯(lián)度，其越小，凝膠孔徑越大：而瓊脂糖凝膠的孔徑卻依賴于 瓊脂糖濃度。二、選擇題TOC\o"1-5"\h\z1、凝膠層析中，有時溶質(zhì)的Kd>1，其原因是 （B）A.凝膠排斥 B.凝膠吸附 C.柱床過長D.流速過低2、凝膠層析中，有時小分子溶質(zhì)的Kd<1，其原因是 （A）A.水合作用 B.凝膠吸附 C.柱床過長 D.流速過低3、在凝膠層析中樣品各組分最先淋出的是 （B）A.分子量最大的 B.體積最大的 C.分子量最小的 D.體積最小的4、為了進一步檢查凝膠柱的質(zhì)量，通常用一種大分子的有色物質(zhì)溶液過柱，常見的檢查物質(zhì)為藍色葡聚糖，下面不屬于它的作用的是 （C）A.觀察柱床有無溝流 B.觀察色帶是否平整C.測量流速 D.測量層析柱的外水體積5、在選用凝膠層析柱時，為了提高分辨率，宜選用的層析柱是（A）A.粗且長的 B.粗且短的 C.細且長的 D.細且短的第八章離子交換法（答案）一、填空題1、離子交換劑由惰性的不溶性載體、功能基團和平衡離子組成。 平衡離子帶正電荷為陽離子交換樹脂，平衡離子帶負電荷稱陰離子交換樹脂。2、常見的離子交換劑有離子交換樹脂,離子交換纖維素,葡聚糖凝膠離子交換劑等。3、離子交換樹脂的基本要求有有盡可能大的交換容量、有良好的交換選擇性 、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、化學(xué)動力學(xué)性能好和物理性能好。4、影響離子交換選擇性的因素主要有離子價與離子水合半徑、離子價與離子濃度—、交換環(huán)境、 樹脂結(jié)構(gòu)、偶極離子排斥等。5、請寫出下列離子交換劑的名稱和類型：CM-C的名稱是羧甲基纖維素，屬于弱酸型陽離子交換纖維素;DEAE-C的名稱是二乙基氨基乙基纖維素，屬于強堿型陰離子交換纖維素:。6、色譜聚焦（chromatofocusing）是一種高分辨的新型的蛋白質(zhì)純化技術(shù)。它是根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點，結(jié)合離子交換技術(shù)的大容量色譜，能分離幾百毫克蛋白質(zhì)樣品，洗脫峰被聚焦效應(yīng)濃縮，分辨率很高，操作簡單。7、寫出下列離子交換劑類型：732強酸型陽離子交換樹脂，724弱酸型陽離子交換樹脂，717強堿型陰離子交換樹脂，CM-C陽離子交換纖維素 .DEAE-C陰離子交換纖維素，PBE94陰離子交換劑。8、在采用多緩沖陰離子交換劑作固定相的離子交換聚焦色譜過程中，當柱中某位點之pH值下降到蛋白質(zhì)組分PI（等電點）值以下時，它因帶正電荷而下移，如果柱中有兩種蛋白組分，PI值較大（高） 者會超過另一組分，移動至柱下部pH較高 的位點進行 聚焦（交換）。9、影響離子交換選擇性的因素有 離子水合半徑 離子價與離子濃度 交換環(huán)境、 樹脂結(jié)構(gòu)、偶極離子排斥。二、選擇題1、用鈉型陽離子交換樹脂處理氨基酸時，吸附量很低，這是因為（C）A.偶極排斥 B.離子競爭 C.解離低 D.其它2、在酸性條件下用下列哪種樹脂吸附氨基酸有較大的交換容量 （C）兒羥型陰8.氯型陰^氫型陽 D/內(nèi)型陽3、在尼柯爾斯基方程式中，K值為離子交換常數(shù)，K>1說明樹脂對交換離子吸引力（）。A.小于平衡離子B.大于平衡離子 C.等于平衡離子 D.其它第九章親和純化技術(shù)（答案）一、填空題1、親和層析洗脫方法有非專一性洗脫,特殊洗脫，專一性洗脫。2、親和力大小除由親和對本身的解離常數(shù)決定外，還受許多因素的影響，其中包括親和吸附劑—微環(huán)境—、—載體空間位阻、—載體孔徑、—配基和配體的濃度、配基結(jié)構(gòu)等。3、親和層析中常用作分離酶的配基有 酶抑制劑 ，輔醯，底物和底物結(jié)構(gòu)類似物。4、親和層析中非專一性吸附有離子效應(yīng)、疏水基團、復(fù)合親和力。5、親和過濾指的是將親和層析和膜過濾技術(shù)結(jié)合運用，官包括親和錯流過濾和親和膜分離兩大方法。二、選擇題1、下面關(guān)于親和層析載體的說法錯誤的是 (B)A.載體必須能充分功能化。B.載體必須有較好的理化穩(wěn)定性和生物親和性，盡量減少非專一性吸附。C.載體必須具有高度的水不溶性和親水性。D.理想的親和層析載體外觀上應(yīng)為大小均勻的剛性小球。TOC\o"1-5"\h\z2、制備親和柱時，應(yīng)首先選用的配基是 (A)A.大分子的 B.小分子的 C.中等大小的 D.不確定3、親和層析的洗脫過程中，在流動相中加入配基的洗脫方法稱作 (C)A.陰性洗脫B.劇烈洗脫 C.競爭洗脫 D,非競爭洗脫4、親和層析的洗脫過程中，在流動相中減去配基的洗脫方法稱作 (D)A.陰性洗脫B.劇烈洗脫 C.正洗脫 D.負洗脫第十章 離心技術(shù)一、填空：1、制備型離心機的轉(zhuǎn)子有角度、水平、垂直、區(qū)帶轉(zhuǎn)子2、密度梯度的制備方法有手工制備法、梯度混合儀制備法、離心形成法反復(fù)凍融法3、梯度的取出和收集方法：取代法、穿刺法、切割法、虹吸法。二、選擇題：在離心分離過程中,若離心機的轉(zhuǎn)速為4000轉(zhuǎn)/分種,離心半徑為10厘米,則相對離心力為(A)A.1789(g)B.4000(g)C.8000(g)D.2000(g)第十一章膜分離技術(shù)一、填空1、微孔濾膜孔徑檢測方法有氣泡壓力法、細菌過濾法、水流量法。2、克服濃差極化現(xiàn)象的措施有震動、攪拌、錯流(crossflow)、切流(tangentflow)3、實驗用超濾器的類型有無攪拌式裝置， 攪拌或振動式裝置，小棒超濾器，淺道系統(tǒng)超濾裝置(中孔纖維系統(tǒng)超濾器)。二、選擇題1、透析是膜分離技術(shù)的一種，通常利用