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關(guān)于發(fā)芽試驗和品種真實性鑒定第一頁,共九十一頁,2022年,8月28日第三節(jié)種子發(fā)芽試驗種子發(fā)芽試驗基本知識常用儀器設(shè)備標準發(fā)芽試驗程序第二頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽試驗:是測定種子批的最大發(fā)芽潛力,據(jù)此可比較不同種子批的質(zhì)量,也可估測田間播種價值。發(fā)芽:在實驗室內(nèi)幼苗出現(xiàn)和生長達到一定階段,幼苗的主要構(gòu)造表明在田間的適宜條件下能進一步生長成為正常的植株。名詞解釋第三頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽力指種子在適宜條件下發(fā)芽并長成正常植株的能力,通常用發(fā)芽勢和發(fā)芽率表示。發(fā)芽勢指在種子發(fā)芽試驗初期長成的正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。第四頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽率:在規(guī)定的條件和時間內(nèi)長成的正常幼苗數(shù)占供檢種子數(shù)的百分率。試驗樣品來源必須是凈種子??梢詮膬舳确治龊蟮膬舴N子中隨機數(shù)取,也可以從送驗樣品中直接隨機數(shù)取。第五頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗的主要構(gòu)造根系、中軸、子葉、胚芽鞘正常幼苗不正常幼苗復(fù)胚單位指能夠產(chǎn)生一株以上幼苗的種子單位第六頁,共九十一頁,2022年,8月28日未發(fā)芽種子指在規(guī)定試驗條件下,在試驗?zāi)┢谌圆荒馨l(fā)芽的種子新鮮未發(fā)芽種子在發(fā)芽試驗條件下,既非硬實又不發(fā)芽,但保持清潔和堅硬,具有成苗潛力的種子硬實種皮不透水的種子第七頁,共九十一頁,2022年,8月28日
發(fā)芽條件種子萌發(fā)的外界條件:
1、足夠的水分
水分可使種子內(nèi)部的酶或植物激素活化,促進貯藏物質(zhì)的轉(zhuǎn)化,加強呼吸作用,增加能量供給,促進細胞的生長,從而促進種子的萌發(fā)。敏感型(水分一多則發(fā)芽差,甚至不發(fā)芽)種子:大豆、西瓜、棉花、菠菜。不敏感型種子:水稻、玉米。潤濕發(fā)芽床的水:不含有機和無機雜質(zhì),無毒,。第八頁,共九十一頁,2022年,8月28日2、適當?shù)臏囟?/p>
三基點溫度、恒溫和變溫3、充足的氧氣4、光照需光型種子:發(fā)芽時須有紅光或白熾光。如:茼蒿。需暗型種子:發(fā)芽時須黑暗條件。如:黑種草。不敏感型種子:光照或黑暗條件下均可。大多數(shù)種子。第九頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽試驗儀器設(shè)備發(fā)芽箱、發(fā)芽室、數(shù)種設(shè)備、發(fā)芽容器發(fā)芽床第十頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽箱和發(fā)芽室發(fā)芽箱——提供種子發(fā)芽所需的溫度、濕度或水分、光照等條件的設(shè)備?!案伞毙桶l(fā)芽箱,只控制溫度不控制濕度(恒溫和變溫兩種)“濕”型發(fā)芽箱,既控制溫度又控制濕度。第十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日第十二頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽室(人工氣候室)可以認為是一種改進的大型發(fā)芽箱,其構(gòu)造原理與發(fā)芽箱相似,只不過是容量擴大,在其四周置有發(fā)芽架。第十三頁,共九十一頁,2022年,8月28日數(shù)種設(shè)備1.活動數(shù)種板(大粒種子、脫絨棉子)
大粒種子可手工數(shù)取。2.真空數(shù)種器(小、中粒種子)第十四頁,共九十一頁,2022年,8月28日第十五頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽器皿要求:透明、保濕、無毒,具有一定的空間,確保一定的氧氣,使用前要清洗和消毒。第十六頁,共九十一頁,2022年,8月28日第十七頁,共九十一頁,2022年,8月28日發(fā)芽床的選擇:1、紙床:小、中粒種子TP;中粒種子BP;褶裥紙PP——使用TP或BP發(fā)芽的,可用此代替。紙床要求:持水力強、無毒、無病菌、韌性好。第十八頁,共九十一頁,2022年,8月28日2、砂床:中、大粒種子S;對水分敏感的小、中粒種子TS;活力較差的種子。由于紙床污染,對已有病菌的種子鑒定困難;為了研究目的和證實有疑問的幼苗。砂床要求:洗滌;消毒(130
~170℃烘干2h);過篩(砂粒);PH值6.0~7.5;無毒。砂床可重復(fù)使用(洗凈、消毒),包衣種子不可以。砂床使用時須提前加水攪拌均勻,再加入發(fā)芽盒中。不可先干砂入盒再加水。第十九頁,共九十一頁,2022年,8月28日3、土壤床:當紙床或砂床上的幼苗出現(xiàn)中毒癥狀或?qū)τ酌玷b定發(fā)生懷疑;為了比較或研究目的。土壤床要求:疏松、不結(jié)塊、無大顆粒;消毒(130
~170℃烘干2h);基本不含混入的種子、細菌、真菌、線蟲;無毒。土壤床一般不重復(fù)使用。第二十頁,共九十一頁,2022年,8月28日種子標準發(fā)芽試驗程序選用和準備發(fā)芽床數(shù)取試驗樣品置床和貼標簽(破除休眠)在規(guī)定條件下發(fā)芽條件控制與觀察記載(重新試驗)結(jié)果計算結(jié)果報告和核查第二十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日種子發(fā)芽實驗的方法步驟
----標準法準備發(fā)芽床從凈種子中數(shù)取一定數(shù)量種子小粒100×4,大粒50×4制床置于適宜條件下發(fā)芽每天檢查并在初期(3-5天)進行鑒定計數(shù)第二十二頁,共九十一頁,2022年,8月28日末期(7-10天)鑒定并記載正常幼苗、不正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽、腐爛霉變等死種子數(shù)。計算發(fā)芽勢=×100%初次計數(shù)的正常幼苗數(shù)
供試種子數(shù)發(fā)芽率=×100%末次計數(shù)的正常幼苗數(shù)供試種子數(shù)第二十三頁,共九十一頁,2022年,8月28日試樣來源和數(shù)量除委托檢驗外,試驗樣品來源必須是凈種子。隨機數(shù)取400粒小、中粒種子100粒*4;大粒種子50粒*8;特大粒的種子25粒*16。復(fù)胚種子單位可視為單粒種子進行試驗,不需弄破(分開),但芫荽例外。第二十四頁,共九十一頁,2022年,8月28日置床、貼標簽種子均勻分布。種子之間留有1~5倍間距,以防發(fā)霉種子的相互感染和保持足夠的生長空間。標簽,注明樣品編號、品種名稱、重復(fù)序號和置床日期等。第二十五頁,共九十一頁,2022年,8月28日檢查管理種子發(fā)芽期間,應(yīng)進行適當?shù)臋z查管理,以保持適宜的發(fā)芽條件。發(fā)芽床應(yīng)始終保持濕潤。溫度應(yīng)保持在所需溫度的±2℃范圍內(nèi)。如發(fā)現(xiàn)霉菌滋生,應(yīng)及時取出洗滌去霉。當發(fā)霉種子超過5%時,應(yīng)更換發(fā)芽床,以免霉菌傳開如發(fā)現(xiàn)腐爛死亡種子,則應(yīng)及時將其除去并記載。還應(yīng)注意通氣,避免因缺氧而使正常發(fā)芽受影響。第二十六頁,共九十一頁,2022年,8月28日鑒定幼苗和觀察計數(shù)每株幼苗都必須按規(guī)定的標準進行鑒定。鑒定要在主要構(gòu)造已發(fā)育到一定時期時進行。根據(jù)種的不同,試驗中絕大部分幼苗應(yīng)達到:子葉從種皮中伸出(如萵苣屬)、初生葉展開(如菜豆屬)、葉片從胚芽鞘中伸出(如小麥屬)。在初次計數(shù)時,應(yīng)把發(fā)育良好的正常幼苗從發(fā)芽床中揀出,對可疑的或損傷、畸形或不均衡的幼苗,通常到末次計數(shù)。嚴重腐爛的幼苗或發(fā)霉的死種子應(yīng)及時從發(fā)芽床中除去,并隨時增加計數(shù)。第二十七頁,共九十一頁,2022年,8月28日末次計數(shù)時,按正常幼苗、不正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實和死種子分類計數(shù)和記載。復(fù)胚種子單位作為單粒種子計數(shù),試驗結(jié)果用至少產(chǎn)生一個正常幼苗的種子單位的百分率表示。當送驗者提出要求時,也可測定100個種子單位所產(chǎn)生的正常幼苗數(shù),或產(chǎn)生一株、兩株及兩株以上正常幼苗的種子單位數(shù)。
第二十八頁,共九十一頁,2022年,8月28日重新試驗
當試驗出現(xiàn)下列情況時,應(yīng)重新試驗。(1)懷疑種子有休眠(即有較多的新鮮不發(fā)芽種子)時,可采用上述休眠種子處理方法重新試驗,將得到的最佳結(jié)果填報,同時注明所用的方法。(2)由于真菌或細菌的蔓延而使試驗結(jié)果不一定可靠時,可采用砂床或土壤發(fā)芽床重新試驗。如有必要,應(yīng)增加種子之間的距離。(3)當正確鑒定幼苗困難時,可采用表3-12中規(guī)定的一種或幾種方法用砂床或土壤發(fā)芽床重新試驗。第二十九頁,共九十一頁,2022年,8月28日(4)當發(fā)現(xiàn)實驗條件、幼苗鑒定或計數(shù)有差錯時,應(yīng)采用同樣方法重新試驗。(5)當100粒種子重復(fù)間的差距超過表3-13最大容許差距時,應(yīng)采用同樣的方法重新試驗。第三十頁,共九十一頁,2022年,8月28日修約(P83)
正常幼苗修約至最接近的整數(shù)位,0.5則進位.計算其余成分百分率的整數(shù),并獲得其總和.如果總和為100,修約結(jié)束.如果總和不是100,繼續(xù)修約,在不正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子和死種子中,首先找出小數(shù)部分(.0、.25、.5、.75)最大值者,修約此數(shù)至最大整數(shù),并作為最終結(jié)果;其次計算其余成分百分率的整數(shù),獲得其總和,如果總和為100,修約到此結(jié)束,如果不是100,重復(fù)此程序。如果小數(shù)部分相同,優(yōu)先次序為不正常幼苗>硬實>新鮮不發(fā)芽種子>死種子。第三十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日例1:在發(fā)芽試驗中,正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子、不正常幼苗和死種子的百分率分別為94.5%、0%、0.75%、1.5%、3.25%,那么最后填報的結(jié)果應(yīng)為
95%、0%、1%、1%、3%例2:在發(fā)芽發(fā)芽試驗中,正常幼苗、硬實、新鮮不發(fā)芽種子、不正常幼苗和死種子的百分率分別為94%、1.25%、0.25%、1.25%和3.25%,那么最后填報的結(jié)果應(yīng)為:
94%、1%、0%、2%和3%第三十二頁,共九十一頁,2022年,8月28日[例1]
某一水稻雜交種發(fā)芽試驗4次重復(fù)的發(fā)芽率分別為97%、96%、98%、95%,其發(fā)芽試驗條件為紙上,30℃恒溫。4次重復(fù)的結(jié)果平均值為:(97+96+98+95)/4=96.5,根據(jù)修約至最近似整數(shù)的原則,發(fā)芽率修約(0.5進為1計算)為97%。查表3-13(或GB/T3543.4—1995中表3),查得重復(fù)間最大容許差距為7,而重復(fù)間的最大值98與最小值95之差為3,在容許差距范圍內(nèi),所以本試驗結(jié)果是可靠的,發(fā)芽率的填報結(jié)果為97%。第三十三頁,共九十一頁,2022年,8月28日[例2]
現(xiàn)測得一發(fā)芽試驗4次重復(fù)的發(fā)芽率分別為:76%、65%、68%和57%,4次重復(fù)的結(jié)果平均值為:(76十65十68十57)/4=66.5,根據(jù)進入最大值保留整數(shù)的修約原則,用67查表3-13(或GB/T3543.4—1995中表3),查得容許誤差為18,而重復(fù)間的最大差異為:76—57=19,超過了容許誤差18,所以必須進行重新試驗。第二次的發(fā)芽試驗4次重復(fù)的發(fā)芽率分別為:70%、70%、68%和72%。4次重復(fù)的結(jié)果平均值為:(70十70十68十72)/4=70,用70查表3-13(GB/T3543.4—1995中表3),容許誤差為18,而重復(fù)間的最大差異為:72—68=4,未超過容許誤差18。第三十四頁,共九十一頁,2022年,8月28日現(xiàn)在再比較兩次試驗的一致性:(66.5十70)/2=68.25,用68查表3-14(或GB/T3543.4一1995中表4),其容許誤差為7,而兩次試驗間的差距為70—66.5=3.5,未超過容許誤差。因此,發(fā)芽率的最后填報結(jié)果為68%。第三十五頁,共九十一頁,2022年,8月28日結(jié)果報告填報發(fā)芽結(jié)果時,須填報正常幼苗、不正常幼苗、新鮮不發(fā)芽種子、硬實和死種子的百分率。假如其中任何一項結(jié)果為零,則將符號“-0-”填入該格中。填報正常幼苗等百分率時,同時還須填報采用的發(fā)芽床種類和溫度、發(fā)芽試驗持續(xù)時間以及為促進發(fā)芽所采用的處理方法。第三十六頁,共九十一頁,2022年,8月28日如果發(fā)芽試驗時間超過規(guī)定的時間,在規(guī)定欄中填報末次計數(shù)的發(fā)芽率。超過規(guī)定時間以后的正常幼苗數(shù)應(yīng)填報在附加說明中,并采用下列格式:“到規(guī)定時間X天后,有Y%為正常幼苗”。第三十七頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗鑒定技術(shù)正確區(qū)分正常幼苗與不正常幼苗主要植物幼苗的形態(tài)結(jié)構(gòu)熟悉幼苗鑒定標準第三十八頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗構(gòu)造(總述)幼苗根系幼苗中軸子葉芽鞘(禾本科)初生根次生根上胚軸下胚軸頂芽種子根(小麥屬)中胚軸:盾片著生點至胚芽之間的苗軸(禾本科某些屬)如:玉米單子葉雙子葉多子葉(松科)第三十九頁,共九十一頁,2022年,8月28日胚芽鞘胚芽胚軸胚根胚根鞘胚乳盾片第一片真葉胚芽鞘不定根胚芽盾片胚根鞘初生根中胚軸玉米種子形成幼苗第四十頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗構(gòu)造(分述)單子葉植物子葉出土型幼苗(洋蔥)初生根不定根管狀子葉子葉不定根初生根蔥屬幼苗(子葉出土型)第四十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗構(gòu)造(分述)單子葉植物子葉留土型幼苗初生根不定根種子根(禾本科某些屬)次生根中胚軸初生葉胚芽鞘初生葉胚芽鞘種子根小麥幼苗(子葉留土型)初生葉胚芽鞘中胚軸不定根次生根不定根初生根玉米幼苗(子葉留土型)第四十二頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗構(gòu)造(分述)雙子葉植物子葉出土型幼苗初生根下胚軸或上胚軸次生根子葉頂芽初生葉初生葉葉柄頂芽上胚軸子葉下胚軸次生根初生根菜豆幼苗(子葉出土型)子葉葉柄頂芽下胚軸初生根次生根蕓苔屬幼苗(子葉出土型)第四十三頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗構(gòu)造(分述)雙子葉植物子葉留土型幼苗(蠶豆、豌豆)初生根上胚軸次生根子葉頂芽初生葉鱗片初生葉上胚軸鱗片子葉次生根初生根豌豆幼苗(子葉留土型)第四十四頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗鑒定總則一、正常幼苗第一類完整幼苗幼苗主要構(gòu)造(根系、幼苗中軸、特定數(shù)目子葉、初生葉、頂芽或苗端、芽鞘)生長良好、完全、勻稱和健康。第四十五頁,共九十一頁,2022年,8月28日第二類帶有輕微缺陷的幼苗幼苗主要構(gòu)造(初生根、下胚軸上胚軸或中胚軸、子葉、初生葉、芽鞘)出現(xiàn)某種輕微缺陷,但在其他方面能均衡生長,并與同一試驗中的完整幼苗相當。第四十六頁,共九十一頁,2022年,8月28日第三類次生感染的幼苗由真菌或細菌感染引起,使幼苗主要構(gòu)造發(fā)病和腐爛,但有證據(jù)表明病源不來自種子本身。第四十七頁,共九十一頁,2022年,8月28日幼苗鑒定總則二、不正常幼苗第一類受損傷的幼苗
由機械處理、加熱、干燥、凍害、化學(xué)處理、昆蟲損害等外部因素引起,使幼苗構(gòu)造(子葉或幼苗中軸、上下胚軸、胚芽鞘、初生根)殘缺不全或受到嚴重損傷,以致不能均衡生長者。第四十八頁,共九十一頁,2022年,8月28日第二類畸形或不勻稱的幼苗
由于內(nèi)部因素引起生理紊亂,幼苗生長細弱,或存在生理障礙,或主要構(gòu)造畸形或不勻稱者。第四十九頁,共九十一頁,2022年,8月28日第三類腐爛幼苗
由初生感染(病源來自種子本身)引起,使幼苗主要構(gòu)造發(fā)病和腐爛,并妨礙其正常生長者。第五十頁,共九十一頁,2022年,8月28日殘缺停滯短粗缺失破裂從頂端開裂負向地生長縮縊卷縮在種皮內(nèi)纖細僅有一條生長弱或沒有種子根水腫狀初生感染引起的腐爛初生根和種子根不正常幼苗類型第五十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日縮短而變粗深度橫裂或破裂縱向裂縫(開裂)缺失形成環(huán)狀或螺旋狀纖細水腫狀由初生根感染所引起的腐爛縮溢嚴重扭曲過度彎曲下胚軸、上胚軸或中胚軸不正常幼苗類型第五十二頁,共九十一頁,2022年,8月28日50%規(guī)則
如果整個子葉組織或初生葉有一半或一半以上的面積具有功能,則這種幼苗可列為正常幼苗;如果一半以上的組織不具備功能,如缺失、壞死、變色或腐爛,則為不正常幼苗。當從子葉著生點到下胚軸有損傷和腐爛的跡象時;當初生葉形狀正常,只是葉片面積較小時,則不能應(yīng)用50%規(guī)則。第五十三頁,共九十一頁,2022年,8月28日腫脹卷曲畸形分離或缺失斷裂或其他損傷變色壞死水腫狀由初生根感染所引起的腐爛除蔥屬外的所有屬的子葉缺陷不正常幼苗類型(采用50%規(guī)則)第五十四頁,共九十一頁,2022年,8月28日蔥屬子葉的特有缺陷不正常幼苗類型(采用50%規(guī)則)縮短而變粗縮溢過度彎曲形成環(huán)狀或螺旋狀無明顯“膝”纖細第五十五頁,共九十一頁,2022年,8月28日初生葉不正常幼苗類型(采用50%規(guī)則)畸形損傷缺失變色、壞死由初生感染所引起的腐爛雖形狀正常,但小于正常葉片大小的四分之一第五十六頁,共九十一頁,2022年,8月28日畸形損傷缺失由初生感染所引起的腐爛頂芽及周圍組織不正常幼苗類型(采用50%規(guī)則)第五十七頁,共九十一頁,2022年,8月28日畸形損傷缺失頂端損傷或缺失嚴重過度彎曲胚芽鞘、頂芽及周圍組織不正常幼苗類型(采用50%規(guī)則)形成環(huán)狀或螺旋形嚴重扭曲裂縫長度超過從頂端量起的三分之一基部開裂纖細延伸長度不及胚芽鞘的一半由初生感染所引起的腐爛缺失撕裂或其他畸形第五十八頁,共九十一頁,2022年,8月28日畸形斷裂黃化或白化纖細子葉比根先長出兩株幼苗連在一起水腫狀整株幼苗畸形類型由初生感染所引起的腐爛第五十九頁,共九十一頁,2022年,8月28日第四節(jié)品種純度鑒定第六十頁,共九十一頁,2022年,8月28日一、相關(guān)概念第六十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日異型株一個或多個性狀(特征、特性)與原品種的性狀明顯不同的植株。標準種子用于品種鑒定試驗的對照樣品種子,應(yīng)由品種權(quán)人提供能代表品種原有特征特性的原種或原原種。第六十二頁,共九十一頁,2022年,8月28日二、品種真實性和純度鑒定的基本條件檢驗對象可以是種子、幼苗或植株標準樣品作對照使用試驗條件保證測定結(jié)果的準確性、可靠性和重演性。專業(yè)人員第六十三頁,共九十一頁,2022年,8月28日三、檢驗方法分類第六十四頁,共九十一頁,2022年,8月28日第六十五頁,共九十一頁,2022年,8月28日形態(tài)學(xué)鑒定包括:子粒形態(tài)、幼苗形態(tài)、植株和果穗形態(tài)性狀。1.第六十六頁,共九十一頁,2022年,8月28日2.第六十七頁,共九十一頁,2022年,8月28日3.第六十八頁,共九十一頁,2022年,8月28日物理特性與化學(xué)特性第六十九頁,共九十一頁,2022年,8月28日生理生化特性第七十頁,共九十一頁,2022年,8月28日第七十一頁,共九十一頁,2022年,8月28日細胞遺傳學(xué)主要依據(jù)細胞染色體數(shù)目上的差異。解剖學(xué)根據(jù)不同品種果皮、種皮細胞形態(tài)和特征的差異,以及繁殖器官顏色和構(gòu)造的差異來鑒定。分子標記性狀以染色體DNA
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