藥物雜質(zhì)研究基本思路課件

藥物雜質(zhì)研究基本思路

及控制方法2011.1.161.國(guó)內(nèi)外對(duì)藥物雜質(zhì)研究的相關(guān)技術(shù)要求2.雜質(zhì)來源和控制有機(jī)雜質(zhì)無機(jī)雜質(zhì)殘留溶劑主要內(nèi)容ICH（InternationalConferenceon

HarmonizationofTechnicalRequirementsforRegistrationofPharmaceuticalsforHumanUse）美國(guó)藥典（USP）英國(guó)藥典(BP)歐洲藥典(EP)中國(guó)藥典(ChP)《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究的技術(shù)指導(dǎo)原則》相關(guān)內(nèi)容的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國(guó)藥物研發(fā)的特點(diǎn)，通過分析、研究與藥物的安全性、有效性及質(zhì)量可控性之間的內(nèi)在關(guān)系而制定的（二）雜質(zhì)的分類

按理化性質(zhì)

按照其來源

按照其毒性按化學(xué)結(jié)構(gòu)

有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)、殘留溶劑

工藝雜質(zhì)（包括合成中未反應(yīng)完全的反應(yīng)物、試劑、中間體、副產(chǎn)物等）

降解產(chǎn)物

從反應(yīng)物及試劑中混入的雜質(zhì)等。

毒性雜質(zhì)、普通雜質(zhì)

如甾體、生物堿、幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體聚合物等。有機(jī)雜質(zhì)：包括工藝中引入的雜質(zhì)和降解產(chǎn)物等，由于這類雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)一般與活性成分類似或具淵源關(guān)系，故通常又可稱之為有關(guān)物質(zhì)。無機(jī)雜質(zhì)：是指在原料藥及制劑生產(chǎn)或傳遞過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)通常是已知的，主要包括：反應(yīng)試劑、配位體、催化劑、重金屬、其它殘留的金屬、無機(jī)鹽、助濾劑、活性炭等。殘留溶劑：在合成、純化、制劑過程中殘留所使用的溶劑，這些溶劑通常是已知的。二、國(guó)內(nèi)外對(duì)藥物雜質(zhì)研究的

相關(guān)技術(shù)要求最大日劑量報(bào)告限度鑒定限度質(zhì)控限度≤2g0.05%0.10%或1.0mg（取最小值）0.15%或1.0mg（取最小值）>2g 0.03% 0.05% 0.05%附件1：原料藥的雜質(zhì)限度

(一)雜質(zhì)限度要求報(bào)告限度最大日劑量≤1g>1g限度0.1%0.05%鑒定限度最大日劑量<1mg1mg-10mg>10mg-2g>2g限度1.0％或5μg（取最小值）0.5％或20μg（取最小值）0.2％或2mg（取最小值）0.10%質(zhì)控限度最大日劑量<10mg10mg-100mg>100mg-2g>2g限度1.0％或50μg（取最小值）0.5％或200μg（取最小值）0.2％或3mg（取最小值）0.15%附件2：制劑的雜質(zhì)限度

1、有機(jī)雜質(zhì)的限度確定

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)有機(jī)雜質(zhì)的限度規(guī)定應(yīng)包括：每一個(gè)已知雜質(zhì)、未知雜質(zhì)及總雜質(zhì)。共存的異構(gòu)體和抗生素的多組分一般不作為雜質(zhì)進(jìn)行控制，必要時(shí)作為共存物質(zhì)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定其比例。單一的對(duì)映體藥物，其對(duì)映異構(gòu)體應(yīng)作為雜質(zhì)控制.由于創(chuàng)新藥物與仿制藥情況不同，在確定雜質(zhì)限度時(shí)，可有所區(qū)別。故新產(chǎn)品應(yīng)在上市后繼續(xù)監(jiān)測(cè)不良反應(yīng):如與雜質(zhì)有關(guān)，則應(yīng)分析原因，設(shè)法降低雜質(zhì)含量，這樣制訂出來的雜質(zhì)限度才能保證產(chǎn)品的安全性。如某雜質(zhì)同時(shí)也是該藥物在動(dòng)物或人體中的主要代謝產(chǎn)物，則對(duì)該雜質(zhì)可不考慮其安全性，但需制訂合理的限度。與藥物性質(zhì)和臨床應(yīng)用相關(guān)聯(lián)。

福莫司?。?）仿制已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品

可以根據(jù)已有的標(biāo)準(zhǔn)制訂相應(yīng)的雜質(zhì)限度。1、該標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定雜質(zhì)的限度：應(yīng)與已上市同品種藥品進(jìn)行全面的質(zhì)量對(duì)比研究雜質(zhì)的種類與含量穩(wěn)定性考察

2、難以獲得已上市同品種的標(biāo)準(zhǔn)，但有相同原料藥的其它劑型上市，則在制訂雜質(zhì)限度時(shí)，可參考此上市產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行控制。3、工藝或處方的不同雜質(zhì)的限度：新雜質(zhì)的含量高于附件1或2規(guī)定的合理限度在研產(chǎn)品的雜質(zhì)含量明顯高于已上市的同品種產(chǎn)品的雜質(zhì)實(shí)測(cè)值。優(yōu)化產(chǎn)品的處方與制備工藝安全性研究。（3）其它新藥

改變給藥途徑的制劑，其雜質(zhì)限度的確定參照創(chuàng)新藥物的要求進(jìn)行。對(duì)于其它類別的新藥，如果能夠獲得已上市的對(duì)照樣品，則可按照仿制已有標(biāo)準(zhǔn)的藥品的研究思路，在詳細(xì)的質(zhì)量對(duì)比研究的基礎(chǔ)上，確定雜質(zhì)的限度。如果不能獲得對(duì)照樣品，則應(yīng)參照創(chuàng)新藥物的要求確定雜質(zhì)限度，或通過詳細(xì)的安全性試驗(yàn)來證明已有的雜質(zhì)限度是安全的。2、無機(jī)雜質(zhì)的限度確定

原則：無機(jī)雜質(zhì)的限度主要根據(jù)該雜質(zhì)的毒性、對(duì)藥品本身質(zhì)量（如穩(wěn)定性）的影響及各批次產(chǎn)品的實(shí)測(cè)結(jié)果而定。各國(guó)藥典收載的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及我國(guó)已批準(zhǔn)上市產(chǎn)品的注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)于我們確定在研產(chǎn)品的無機(jī)雜質(zhì)限度具有重要的參考價(jià)值。

給藥途徑、適應(yīng)癥、劑量等選擇合適的參考標(biāo)準(zhǔn)，確定合理的限度。

3、殘留溶劑限度確定

藥物中常見殘留溶劑及其限度溶劑名稱PDE值(mg/天）限度（％）第一類溶劑（應(yīng)避免使用）苯0.020.0002四氯化碳0.040.00041,2-二氯乙烷0.050.00051,1-二氯乙烯0.080.00081,1,1-三氯乙烷15.00.15溶劑名稱PDE值(mg/天）限度（％）第二類溶劑（應(yīng)該限制使用）

乙腈 4.10.041氯苯 3.60.036氯仿 0.60.006環(huán)己烷 38.80.388N,N-二甲氧基甲酰胺8.80.0881,4-二氧六環(huán)

3.80.038正己烷 2.90.029甲醇 30.00.3四氫呋喃 7.20.072甲苯

8.90.089二氯甲烷 6.00.064、臨床研究申請(qǐng)與上市生產(chǎn)申請(qǐng)

階段的雜質(zhì)研究申報(bào)臨床研究：

1、申報(bào)臨床研究前，應(yīng)對(duì)已有批次產(chǎn)品的雜質(zhì)進(jìn)行比較，根據(jù)安全性研究用樣品的雜質(zhì)含量情況來證明臨床研究用藥品是安全的。2、可在臨床研究期間對(duì)雜質(zhì)分析方法進(jìn)行完善。3、對(duì)于創(chuàng)新藥物，可對(duì)雜質(zhì)的限度做初步的規(guī)定。

申報(bào)生產(chǎn)研究：1、產(chǎn)生了新的雜質(zhì)2、已有雜質(zhì)的含量超出限度根據(jù)附件1或2來判斷該雜質(zhì)的含量是否合理，如不合理，則應(yīng)參照決策樹來考慮下一步的研究工作。（1）有機(jī)雜質(zhì)的分析方法化學(xué)法、光譜法、色譜法等，隨著分離、檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展與更新，高效、快速的分離技術(shù)與靈敏、穩(wěn)定、準(zhǔn)確、適用的檢測(cè)手段相結(jié)合。目前普遍采用的雜質(zhì)檢測(cè)方法：

高效液相色譜法薄層色譜法、氣相色譜法毛細(xì)管電泳法應(yīng)根據(jù)藥物及雜質(zhì)的理化性質(zhì)、化學(xué)結(jié)構(gòu)、雜質(zhì)的控制要求等確定適宜的檢測(cè)方法。由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進(jìn)行雜質(zhì)分析時(shí)，應(yīng)注意不同原理的分析方法間的相互補(bǔ)充與驗(yàn)證，如HPLC與TLC及HPLC與CE的互相補(bǔ)充，反相HPLC系統(tǒng)與正相HPLC系統(tǒng)的相互補(bǔ)充，HPLC不同檢測(cè)器檢測(cè)結(jié)果的相互補(bǔ)充等。對(duì)于無機(jī)雜質(zhì)，各國(guó)藥典都收載了經(jīng)典、簡(jiǎn)便而又行之有效的檢測(cè)方法。對(duì)于成熟生產(chǎn)工藝的仿制，可根據(jù)實(shí)際情況，采用藥典收載的方法進(jìn)行質(zhì)量考察及控制。對(duì)于采用新生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的新藥，鼓勵(lì)采用離子色譜法及電感耦合等離子發(fā)射光譜－質(zhì)譜（ICP-MS）等分析技術(shù)，對(duì)產(chǎn)品中可能存在的各類無機(jī)雜質(zhì)進(jìn)行定性、定量分析，以便對(duì)其生產(chǎn)工藝進(jìn)行合理評(píng)價(jià)，并為制定合理的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。不揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)采用熾灼殘?jiān)ㄟM(jìn)行檢測(cè)。某些金屬陽(yáng)離子雜質(zhì)（銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、砷、鋅、鈷與鎳等）籠統(tǒng)地用重金屬限度檢查法進(jìn)行控制。因在藥品生產(chǎn)中遇到鉛的機(jī)會(huì)較多，且鉛易積蓄中毒，故作為重金屬的代表，以鉛的限量表示重金屬限度。對(duì)某種（些）特定金屬離子或上述方法不能檢測(cè)到的金屬離子作限度要求，可采用專屬性較強(qiáng)的原子吸收分光光度法或具有一定專屬性的經(jīng)典比色法（如采用藥典已收載的鐵鹽、銨鹽、硒等的檢查法檢測(cè)藥品中微量鐵鹽、銨鹽和硒等雜質(zhì)）。雖然重金屬檢查法可同時(shí)檢測(cè)砷，但因其毒性大，且易帶入產(chǎn)品中，故需采用靈敏度高、專屬性強(qiáng)的砷鹽檢查法進(jìn)行專項(xiàng)考察和控制，各國(guó)藥典收載的方法已歷經(jīng)多年驗(yàn)證，行之有效，應(yīng)加以引用。（3）殘留溶劑的檢測(cè)方法在確定了需要進(jìn)行殘留量研究的溶劑后，需要通過方法學(xué)研究建立合理可行的檢測(cè)方法。目前，常用的檢測(cè)方法為氣相色譜法（GasChromatography，GC），也有其他一些檢測(cè)方法。三、雜質(zhì)來源和控制（一）有機(jī)雜質(zhì)來源和控制工藝雜質(zhì)反應(yīng)物試劑中間體副產(chǎn)物降解產(chǎn)物混入的雜質(zhì)反應(yīng)物試劑工藝雜質(zhì)反應(yīng)物、試劑、中間體鹽酸氨溴索合成副產(chǎn)物異構(gòu)體不同工藝路線桂哌齊特工藝研究副產(chǎn)物異構(gòu)體降解產(chǎn)物不同工藝路線環(huán)丙沙星中間體副產(chǎn)物副產(chǎn)物副產(chǎn)物降解產(chǎn)物降解產(chǎn)物有機(jī)雜質(zhì)的定量方法

有機(jī)雜質(zhì)的檢測(cè)一般多采用HPLC法，有時(shí)也采用TLC、GC等其它方法。如采用HPLC法，須采用峰面積法，①外標(biāo)法（雜質(zhì)對(duì)照品法）②加校正因子的主成分自身對(duì)照法③不加校正因子的主成分自身對(duì)照法④峰面積歸一化法。①法定量比較準(zhǔn)確②法應(yīng)對(duì)校正因子進(jìn)行嚴(yán)格測(cè)定，僅適用于已知雜質(zhì)的控制③法的前提是假定雜質(zhì)與主成分的響應(yīng)因子基本相同。④法簡(jiǎn)便快捷，但因各雜質(zhì)與主成分響應(yīng)因子不一定相同、雜質(zhì)量與主成分量不一定在同一線性范圍內(nèi)、儀器對(duì)微量雜質(zhì)和常量主成分的積分精度及準(zhǔn)確度不相同等因素，所以在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中采用有一定的局限性。

有關(guān)物質(zhì)中包括已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)。已知雜質(zhì)對(duì)主成分的相對(duì)響應(yīng)因子在0.9-1.1范圍內(nèi)時(shí)，可以用主成分的自身對(duì)照法計(jì)算含量，超出0.9-1.1范圍時(shí)，宜用雜質(zhì)對(duì)照品法計(jì)算含量，也可用加校正因子的主成分自身對(duì)照法。理想的定量方法為已知雜質(zhì)對(duì)照品法與未知雜質(zhì)不加校正因子的主成分自身對(duì)照法兩者的結(jié)合。研究人員可根據(jù)實(shí)際情況選用合適的定量方法。有機(jī)雜質(zhì)的定量要求1、專屬性為了考察在其他成分存在的條件下，采用的方法是否具有準(zhǔn)確測(cè)定出待檢測(cè)的有機(jī)雜質(zhì)的能力。2、檢測(cè)限通常有機(jī)雜質(zhì)量較低，而每種有機(jī)雜質(zhì)的檢測(cè)靈敏度又各不相同，為了考察所采用的方法能否將殘留的少量或微量的有機(jī)雜質(zhì)檢出。3、定量限為保證測(cè)定方法的準(zhǔn)確度和精密度，需要進(jìn)行定量限的研究。4、線性在配制對(duì)照品溶液時(shí)，對(duì)照品溶液濃度很難和規(guī)定的限度達(dá)到完全一致，當(dāng)不一致時(shí)，需要通過標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行換算，這種換算的前提是有關(guān)物質(zhì)的濃度與色譜峰面積直接成正比關(guān)系。5準(zhǔn)確度為了保證檢測(cè)結(jié)果能夠代表產(chǎn)品的實(shí)際情況，建議進(jìn)行方法的準(zhǔn)確度考察。6耐用性為考察測(cè)定條件發(fā)生細(xì)小變動(dòng)時(shí)，測(cè)定方法和結(jié)果是否仍準(zhǔn)確可靠，建議進(jìn)行耐用性考察。（二）無機(jī)雜質(zhì)來源和控制工藝雜質(zhì)反應(yīng)物：鹽試劑：含鉛催化劑：鎳、鈀炭干燥劑：硫酸鹽、氯化物、磷酸鹽pH調(diào)節(jié)劑（兩性藥物）混入的雜質(zhì)反應(yīng)物試劑助濾劑、活性炭A硝化反應(yīng)：68%硝酸+丙酸于125℃反應(yīng)30min。B胺化反應(yīng)：B1氯化，SOCl2+DMF于CH2Cl2中加熱回流3.5hB2胺化，于-15℃滴加異丁胺與CH2Cl2溶液后，加熱回流30min.C氫化反應(yīng)：室溫，RenyNi催化，50psi氫壓力下氫化3h.D環(huán)合反應(yīng)：甲酸中加熱回流4h.E氧化反應(yīng)：16%過氧乙酸+乙醇，于50℃反應(yīng)24h.F胺化反應(yīng)：二氯甲烷+28-30%氨水于0℃20min內(nèi)滴加對(duì)甲苯磺酰氯的二氯甲烷溶液。詳細(xì)的精制方法取咪喹莫特成品10g，加5N鹽酸200ml，攪拌加熱至80℃使溶解，過濾除去不溶物，濾液冷卻，用二氯甲烷洗（50mlx2），加入活性炭少許，于80℃加熱15min，濾去活