實(shí)驗(yàn)一小液流法測定植物細(xì)胞水勢

關(guān)于實(shí)驗(yàn)一小液流法測定植物細(xì)胞水勢第一頁，共三十三頁，2022年，8月28日植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則1、認(rèn)真預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)。明確目的，掌握原理，列出步驟，提出問題。2、認(rèn)真操作，仔細(xì)觀察，從實(shí)記錄。3、正確操作儀器，不亂開儀器。4、注意安全和清潔衛(wèi)生（包括值日）。5、正確處理廢物。第二頁，共三十三頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求實(shí)驗(yàn)?zāi)康模汉喢鞫笠獙?shí)驗(yàn)原理：簡明扼要材料：用什么？方法：實(shí)際操作過程（文字或圖示，簡潔）數(shù)據(jù)計(jì)算：原始數(shù)據(jù)，計(jì)算公式，結(jié)果。討論和分析：針對自己的結(jié)果進(jìn)行，分析錯(cuò)誤原因。實(shí)驗(yàn)報(bào)告下周二上交。第三頁，共三十三頁，2022年，8月28日植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)評分標(biāo)準(zhǔn)課上：1、預(yù)習(xí)報(bào)告2、認(rèn)真實(shí)驗(yàn)，操作規(guī)范，實(shí)驗(yàn)結(jié)果符合要求3、不遲到，不早退，積極參與衛(wèi)生清掃第四頁，共三十三頁，2022年，8月28日課下：實(shí)驗(yàn)報(bào)告評分標(biāo)準(zhǔn)l、卷面清潔，字跡工整2、語句通暢，簡明扼要，邏輯性強(qiáng)，表達(dá)準(zhǔn)確，無概念錯(cuò)誤3、預(yù)習(xí)報(bào)告、實(shí)驗(yàn)原始記錄、實(shí)驗(yàn)報(bào)告齊全4、實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式規(guī)范，重點(diǎn)突出5、實(shí)驗(yàn)原始記錄要如實(shí)認(rèn)真記錄實(shí)際操作、觀察及測定結(jié)果6、對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的討論要充分有據(jù)，論點(diǎn)要正確，與該實(shí)驗(yàn)無關(guān)的內(nèi)容不要寫入報(bào)告中7、抄襲別人報(bào)告者0分第五頁，共三十三頁，2022年，8月28日本學(xué)期實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與安排1、植物組織水勢的測定2、植物體內(nèi)硝酸還原酶活力的測定3、溶液培養(yǎng)與礦質(zhì)元素缺乏癥***4、光合作用的Hill反應(yīng)5、凈光合速率的測定與葉綠素的提取和測定6、植物生長物質(zhì)的生理效應(yīng)7、激動素對離體小麥葉片中超氧化物歧化酶活性的影響***第六頁，共三十三頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)一植物組織水勢的測定

（小液流法）第七頁，共三十三頁，2022年，8月28日

【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/p>

掌握一種植物組織中水勢的測定方法。第八頁，共三十三頁，2022年，8月28日植物細(xì)胞的水勢1.水勢（waterpotential）的概念：指每偏摩爾體積水的化學(xué)勢，是水可以用來作功的能量大小的度量，用ψw表示。ψw＝＝

：水的偏摩爾體積μw：水溶液的化學(xué)勢μw0：純水的化學(xué)勢ΔμwVwμw-μw0VwVw第九頁，共三十三頁，2022年，8月28日偏摩爾體積溶液中水的偏摩爾體積：即在一定溫度、壓力和濃度下，1mol水在混合物（均勻體系）中所占的有效體積。1個(gè)大氣壓和25℃，1mol的水體積18ml，但在相同條件下，將1mol的水加入到大量的水和酒精等摩爾的混合物中時(shí)，這種混合物增加的體積不是18ml而是16.5ml，16.5ml就是水的偏摩爾體積。第十頁，共三十三頁，2022年，8月28日純水的水勢(ψw0)最大ψw0=0，植物細(xì)胞的水勢都為負(fù)值。水勢的單位：帕（Pa）、巴(bar)、大氣壓(atm)。1巴=0.987大氣壓=105Pa＝0.1MPa第十一頁，共三十三頁，2022年，8月28日植物細(xì)胞水勢的組分通常認(rèn)為植物細(xì)胞的水勢由3部分組成：水勢=滲透勢+襯質(zhì)勢+壓力勢

第十二頁，共三十三頁，2022年，8月28日小液流法

【實(shí)驗(yàn)原理】

植物材料浸入不同濃度溶液中植物材料水勢低于溶液水勢植物材料水勢等于溶液水勢植物材料水勢高于溶液水勢材料吸水外界溶液濃度變大比重變大外界溶液濃度不變比重不變材料失水外界溶液濃度變小比重變小第十三頁，共三十三頁，2022年，8月28日浸過材料的溶液滴回同一濃度而未浸過材料的溶液中比重小的液流上浮比重不變的液流靜止比重大的液流下沉此溶液的水勢即等于所測材料的水勢第十四頁，共三十三頁，2022年，8月28日

【器材與試劑】

實(shí)驗(yàn)儀器：試管、離心管、直角彎頭的毛細(xì)吸管、鑷子、打孔器（直徑0.7cm）、解剖針、移液管實(shí)驗(yàn)試劑：1mol/L蔗糖溶液、甲基藍(lán)實(shí)驗(yàn)材料：馬鈴薯第十五頁，共三十三頁，2022年，8月28日

【實(shí)驗(yàn)步驟】

取8只試管編號，配制0.1~0.8M梯度蔗糖溶液第十六頁，共三十三頁，2022年，8月28日另取8只試管編號為實(shí)驗(yàn)組，分別吸取上述溶液4ml。用打孔器打取馬鈴薯圓柱，切片，放入實(shí)驗(yàn)組試管中（每管5片），放置30min，其間搖動數(shù)次；每個(gè)離心管中挑入少許甲基藍(lán)，搖勻，使溶液呈藍(lán)色。第十七頁，共三十三頁，2022年，8月28日5.用毛細(xì)吸管從實(shí)驗(yàn)組離心管中吸取少量溶液，小心插入裝有相同濃度蔗糖的對照組試管的中部，緩慢從毛細(xì)吸管尖端放出一滴藍(lán)色溶液，輕輕取出滴管，觀察藍(lán)色液滴的移動方向并記錄。6.計(jì)算葉片細(xì)胞的水勢：

ψcell＝ψo(hù)ut＝－IcRT

第十八頁，共三十三頁，2022年，8月28日【注意事項(xiàng)】試管、移液管和毛細(xì)管等要洗凈烘干，移液管與毛細(xì)移液管要各個(gè)濃度專用。如只用一支則應(yīng)從低濃度到高濃度依次吸取溶液。

甲基藍(lán)不宜加得過多（溶液呈稍深的藍(lán)色即可），否則將使實(shí)驗(yàn)組各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要搖勻，時(shí)間放久了的蔗糖溶液會分層，影響結(jié)果。釋放藍(lán)色液滴時(shí)要緩慢，防止過急擠壓沖力影響液滴移動。

第十九頁，共三十三頁，2022年，8月28日

【思考題】

如果小液滴在各對照溶液中全部上升（或下降），說明什么問題？應(yīng)如何改進(jìn)實(shí)驗(yàn)設(shè)置？

第二十頁，共三十三頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)二

植物組織滲透勢的測定（質(zhì)壁分離法）

第二十一頁，共三十三頁，2022年，8月28日

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

觀察植物組織在不同濃度溶液中細(xì)胞質(zhì)壁分離的產(chǎn)生過程及測定植物組織滲透勢的方法。第二十二頁，共三十三頁，2022年，8月28日二、實(shí)驗(yàn)原理當(dāng)植物組織細(xì)胞內(nèi)的汁液與其周圍的某種溶液處于滲透平衡狀態(tài)，植物細(xì)胞內(nèi)的壓力勢為零時(shí)，細(xì)胞汁液的滲透勢就等于該溶液的滲透勢。這種滲透勢相等的溶液稱為等滲溶液。該溶液的濃度稱為等滲濃度。第二十三頁，共三十三頁，2022年，8月28日當(dāng)用一系列梯度濃度溶液觀察細(xì)胞質(zhì)壁分離現(xiàn)象時(shí)，細(xì)胞的等滲濃度將介于剛剛引起初始質(zhì)壁分離的濃度和尚不能引起質(zhì)壁分離的濃度之間的溶液濃度。代入公式即可計(jì)算出其滲透勢。第二十四頁，共三十三頁，2022年，8月28日三、實(shí)驗(yàn)材料洋蔥表皮第二十五頁，共三十三頁，2022年，8月28日四、實(shí)驗(yàn)用具顯微鏡濾紙載玻片蓋玻片鑷子刀片解剖針第二十六頁，共三十三頁，2022年，8月28日五、實(shí)驗(yàn)步驟切取洋蔥表皮，投入1~8號對照組試管中使之完全浸沒5~10分鐘。依次從試管中取出洋蔥表皮放載玻片上（事先滴上同樣濃度蔗糖溶液），蓋上蓋玻片于顯微鏡下觀察。確定一個(gè)引起半數(shù)以上細(xì)胞原生質(zhì)剛剛從細(xì)胞壁的角隅上分離的濃度，和不引起質(zhì)壁分離的最高濃度。第二十七頁，共三十三頁，2022年，8月28日六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果第二十八頁，共三十三頁，2022年，8月28日未發(fā)生質(zhì)壁分離第二十九頁，共三十三頁，2022年，8月28日箭頭所示角隅處發(fā)生初始質(zhì)壁分離第三十