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文檔簡介

4/4抗核抗體的檢測及醫(yī)學(xué)意義抗核抗體(antinuclearantibody,ANA)是一組將自身真核細(xì)胞的各種細(xì)胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。ANA的性質(zhì)主要是IgG,也有IgM、IgA和IgD,其無器官和種屬特異性,故該類抗體可與所有動(dòng)物的細(xì)胞核發(fā)生反應(yīng)。迄今已有二十余種抗核內(nèi)不同成分的抗核抗體被相繼發(fā)現(xiàn)。ANA主要存在于血清中,也可存在于胸水、關(guān)節(jié)滑膜液和尿液中。ANA在未治療的SLE患者中的滴度較高,在大多數(shù)自身免疫性疾病中均可呈陽性,如SLE、RA、混合性結(jié)締組織?。∕CTD)、干燥綜合征(SS)、硬皮病、慢性活動(dòng)性肝炎,正常老年人也可有低滴度的ANA。ANA陽性并不一定患有自身免疫性疾病。由于細(xì)胞核成分的復(fù)雜性,不同成分的抗原性不同,因此可產(chǎn)生多種類型的ANA,在其眾多類型中,作為針對某一特定核成分的個(gè)別抗體,只在某一疾病中出現(xiàn),成為診斷該疾病的血清標(biāo)志性抗體。各種ANA在不同的自身免疫性疾病中出現(xiàn)不同組合,可形成各種疾病或疾病亞群的特征性抗體譜。因此,總的ANA檢測在臨床診斷與鑒別診斷中是一個(gè)極為重要的篩選試驗(yàn),ANA陽性者進(jìn)一步檢測各亞類ANA抗體對明確診斷、臨床分型、病情觀察、預(yù)后及治療評價(jià)都具有重要意義。目前按細(xì)胞內(nèi)分子理化特性與抗原分布部位將ANA分為四大類,即抗DNA抗體;抗組蛋白抗體;抗非組蛋白抗體和抗核仁抗體,每一大類又因不同的抗原特性再分為許多亞類。在臨床檢測中ANA的命名通常按以下三種方式進(jìn)行:1.根據(jù)抗原的化學(xué)名稱命名如抗dsDNA、抗RNP、抗DNP抗體。2.以第一位檢出該抗體的患者命名如抗Sm、抗Ro、抗La抗體。3.以相關(guān)疾病命名如抗SSA、抗SSB抗體。常見的ANA熒光圖形及臨床意義1.均質(zhì)性(homogeneous,H)細(xì)胞核均勻著染熒光,有些核仁部位不著色,分裂期細(xì)胞染色體可被染色出現(xiàn)熒光。與均質(zhì)型相關(guān)的自身抗體主要有抗不溶性DNP,抗組蛋白抗體,抗dsDNA抗體也可產(chǎn)生均質(zhì)性。高滴度均質(zhì)型主要見于SLE患者,低滴度均質(zhì)型可見于RA、慢性肝臟疾病、傳染性單核細(xì)胞增多癥或藥物誘發(fā)的狼瘡患者。2.斑點(diǎn)型(speckled,S)細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀熒光,分裂期細(xì)胞染色體無熒光顯色。與斑點(diǎn)型相關(guān)的自身抗體涉及抗核糖體核蛋白顆??贵w,如抗Sm、抗Ru1RNP、抗SSB/La等抗體。高滴度的斑點(diǎn)型常見于MCTD,同時(shí)也見于SLE、硬皮病、SS等自身免疫性疾病。3.核膜型(membranous,M)又稱周邊型(rim),熒光著色主要顯示在細(xì)胞核的周邊形成熒光環(huán),或在均一的熒光背景上核周邊熒光增強(qiáng);分裂期細(xì)胞染色體區(qū)出現(xiàn)熒光著色。相關(guān)抗體主要是抗dsDNA抗體。高滴度的周邊型幾乎僅見于SLE,特別是活動(dòng)期SLE,其他自身免疫疾病很少見周邊型,因此周邊型對SLE的診斷價(jià)值極大,且提示病情活動(dòng)。4.核仁型(nucheolar,N)熒光著色主要在核仁區(qū),分裂期細(xì)胞染色體無熒光著色。相關(guān)抗體是抗核仁特異的低分子量RNA,抗RNA聚合酶-1、抗U3RNP、抗PM-Scl。核仁型在硬皮病中出現(xiàn)率最高,尤其是高滴度核仁型對診斷硬皮病具有一定特異性,但核仁型也見于雷諾現(xiàn)象者,偶爾也出現(xiàn)于SLE。未經(jīng)治療的SLE或MCTD患者幾乎95%以上都有抗核抗體,且滴度較高,一般1∶100以上具有臨床診斷價(jià)值??购丝贵w陰性對排除SLE的陰性預(yù)告值較高,所以抗核抗體檢測是SLE的最佳篩查試驗(yàn)。抗核抗體滴度與自身免疫性疾病的臨床活動(dòng)性無相關(guān)關(guān)系。抗核抗體在其他自身免疫病中也可出現(xiàn)陽性,但滴度較低,其各自的陽性檢出率見下表。常見自身免疫性疾病的ANA陽性檢出率

熒光抗體檢查判定結(jié)果時(shí),各實(shí)驗(yàn)室須在自己的實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行一定數(shù)量的正常人調(diào)查,定出正常人血清ANA水平的上限。如為測定ANA效價(jià),則可將陽性血清再自正常上限開始作雙倍連續(xù)稀釋。判定陽性或陰性時(shí),首先用低倍鏡觀察,并與相應(yīng)對照比較。判定染色圖像時(shí),物鏡選用40X或60X,也有人用100X,但應(yīng)固定使用一個(gè)放大倍數(shù)。待測血清只在陽性上限以下稀釋。染色圖像只有相對的參考意義,必要時(shí)應(yīng)進(jìn)一步作特異性

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