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文檔簡介
PAGE12《微生物學(xué)》提綱及思考題:1.什么是微生物?它包括哪些類群?
答:微生物是一切肉眼看不見或看不清的微小生物的總稱.
包括①原核類的細菌`放線菌`藍細菌’支原體`立克次氏體和衣原體;②真核類的真菌`原生動物`和顯微
藻類,以及屬于非細胞類的病毒和亞病毒.2.微生物有哪五大共性?其中最基本的是哪一個?為什么?
答:①.體積小,面積大;②.吸收多,轉(zhuǎn)化快;③.生長旺,繁殖快;④.適應(yīng)強,易變異;⑤.分布廣,種類多。其中,體積小面積大最基本,因為一個小體積大面積系統(tǒng),必然有一個巨大的營養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面,并由此而產(chǎn)生其余4
個共性。3.試述微生物的多樣性答:①.物種的多樣性;②.生理代謝類型的多樣性;③.代謝產(chǎn)物的多樣性;④遺傳基因的多樣性;⑤生態(tài)類型的多樣性。4.細菌的基本構(gòu)造、特殊構(gòu)造各有哪些?答:細菌的基本構(gòu)造包括細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、核區(qū)和內(nèi)含物,是各種細菌都具有的。細菌的特殊構(gòu)造是某些細菌具有的,如鞭毛、糖被(莢膜等)、芽孢、菌毛和性毛等。5.細菌細胞壁的結(jié)構(gòu)和主要成分?答:細胞壁時位于細胞最外的一層厚實、堅韌的外被,主要成分為肽聚糖,具有固定細胞外形和保護細胞不受損傷等多種生理功能。細胞壁的幾種特殊成分:①.肽聚糖:真細胞細胞壁中的特有成分;②.磷壁酸:革蘭氏陽性G+細菌(革蘭氏染色法染成紫色)細胞壁中的特有成分;③.脂多糖:革蘭氏陰性G-細菌(革蘭氏染色法染成紅色)壁中的特有成分6.革蘭氏染色原理答:通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細菌的細胞壁以內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。G+菌:細胞壁厚,肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障,當(dāng)乙醇脫色時,肽聚糖脫水而孔障縮小,再加上它不含類脂,故乙醇的處理不會溶出縫隙,因此保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細胞膜上。呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細胞壁,沙黃復(fù)染后呈紅色。7.溶菌酶、青霉素的作用答:溶菌酶使細胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導(dǎo)致細胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細菌溶解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結(jié)合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽,使病毒失活。青霉素作用機制是干擾細菌細胞壁的合成。青霉素通過抑制細菌細胞壁四肽側(cè)鏈和五肽交連橋的結(jié)合而阻礙細胞壁合成而發(fā)揮殺菌作用。8.常見的顆粒狀內(nèi)含物有哪些?答:1)磁小體;2)貯藏物,如PHB和異染粒;3)羧酶體;4)氣泡9.糖被、鞭毛的結(jié)構(gòu)和組成答:糖被是包被于某些細菌細胞壁外死亡一層厚度不定的透明膠狀物質(zhì)。糖被按其有無固定層次、層次厚薄又可細分為莢膜、微莢膜、黏液層和菌膠團。糖被的成分一般是多糖,少數(shù)是蛋白質(zhì)或者多肽,也有多糖和多肽復(fù)合型的。鞭毛是生長在某些細菌表面的長絲狀、波曲的蛋白質(zhì)附屬物。由基體、鉤形鞘和鞭毛絲三部分組成。10.芽孢、芽孢的組成和抗熱機制答:芽孢是某些細菌在其生長發(fā)育后期,在細胞內(nèi)形成的一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量低、抗逆性強的休眠構(gòu)造。芽孢由孢外壁、芽孢衣、皮層、核心(包括芽孢壁、芽孢質(zhì)膜、芽孢質(zhì)和核區(qū))組成。芽孢的抗熱機制(滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說)在于芽孢衣對多價陽離子和水分的透性很差以及皮層的離子強度很高,使皮層產(chǎn)生了極高的滲透壓去奪取芽孢核心中的水分,造成皮層的充分膨脹和核心的高度失水。11.放線菌、藍細菌、枝原體、立克次氏體和衣原體答:放線菌是一類呈絲狀生長、以孢子繁殖(少數(shù)以基內(nèi)菌絲分裂形成孢子狀細胞繁殖)、陸生性較強的高級原核生物,多生活在含水量較低、有機物豐富和呈微堿性的土壤中,它們中有許多是抗生素的生產(chǎn)菌。典型的有鏈霉菌。藍細菌是一類G-、含葉綠素a、能進行產(chǎn)氧性光合作用的大型水生性強的原核生物,有多種功能各異的特化細胞。因為廣泛分布于自然界,包括各種水體、土壤中和部分生物體內(nèi)外,甚至在巖石表面和其他惡劣環(huán)境(高溫、低溫、鹽湖、荒漠和凍原)中,有“先鋒生物”之美稱。枝原體、立克次氏體和衣原體是3類(大多是病原菌)同屬G-代謝能力弱、多數(shù)為細胞內(nèi)寄生物的小型原核生物。枝原體無細胞壁,有的能獨立生活;立克次氏體是專性寄生物;而衣原體寄生性更強,屬專性能量寄生物。12.細菌的形態(tài)、大小或表示方式、繁殖方式答:細菌的形態(tài)極其簡單,基本上只有球狀、桿狀和螺旋狀三大類,僅少數(shù)為其他形狀,如絲狀、三角形、方形和圓盤形等。量度細菌大小的單位是微米(即10-6m),而量度亞細胞結(jié)構(gòu)則要用納米nm(即10-9m)。細菌的一般以裂殖(二分裂、三分裂、復(fù)分裂)和芽殖)方式進行繁殖。13.菌落、菌苔?描寫菌落特征的主要指標有哪些?答:菌落就是在固體培養(yǎng)基上(內(nèi))以母細胞為中心的一對肉眼可見的,有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細胞集團。菌苔:如果把大量分散的純種細胞密集地接種在固體培養(yǎng)基的較大表面上,結(jié)果長出的大量“菌落”已互相連成一片,這就是菌苔。描寫菌落特征的主要指標有濕潤(干燥)、光滑(粗糙)、透明與否、粘稠、易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位的顏色等。14.假肽聚糖?古生菌的細胞膜上磷脂組成的特點?答:一些古生菌細胞壁中不含真正的肽聚糖,有些含假肽聚糖,有些含多糖,也有含糖蛋白或蛋白質(zhì)的。假肽聚糖結(jié)構(gòu)與肽聚糖相似。古生菌的細胞膜中其磷脂的親水頭仍由甘油組成,但疏水尾卻由長鏈烴組成,一般都是異戊二烯的重復(fù)單位;親水頭和疏水尾間通過特殊的醚鍵(-C-O-C-)連接成甘油二醚或二甘油四醚;古生菌的細胞膜中存在著獨特的單分子層或單、雙分子層混合膜。15.缺壁細菌有哪些?答:實驗室中:形成的自發(fā)缺壁突變(L型菌);人工方法去壁(徹底除盡:原生質(zhì)體;部分去除:球狀體);自然界長期進化中形成(枝原體)16.真菌細胞壁結(jié)構(gòu)、主要成分(酵母菌、低等霉菌、高等霉菌)答:真核生物中的真菌包括酵母菌、霉菌、蕈菌三類。真菌的主要特點:(1)無葉綠素,不能進行光合作用;(2)一般具有發(fā)達的菌絲體;(3)細胞壁多數(shù)含幾丁質(zhì);(4)營養(yǎng)方式為異氧吸收型;(5)以產(chǎn)生大量無性(或)有性孢子的方式繁殖;陸生性較強真菌細胞壁的主要成分是多糖,另有少量蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。低等真菌的細胞壁成分以纖維素為主;酵母菌的細胞壁成分以葡聚糖為主(由甘露聚糖、葡聚糖、蛋白質(zhì)和幾丁質(zhì)組成);高等陸生真菌的細胞壁以幾丁質(zhì)為主。細胞壁具有固定細胞外形和保護細胞免受外界不良因子的損傷等功能。17.假菌絲?酵母菌的細胞形態(tài)、繁殖方式、生活史答:假菌絲是指長大的字細胞與母細胞不立即分離,其間僅以狹小的面積相連,這種藕節(jié)狀的細胞串。如果細胞相連,且其間的橫隔面積與細胞直徑一致,這種竹節(jié)狀的細胞串則為真菌絲。酵母菌的細胞形態(tài)通常有球狀、卵圓狀、橢圓狀、柱狀和香腸狀等。酵母菌的繁殖方式分為無性和有性(產(chǎn)子囊孢子),無性繁殖又分為芽殖(各屬酵母菌都存在)、裂殖(在裂殖酵母菌中存在)、產(chǎn)無性孢子(節(jié)孢子、擲孢子、后垣孢子)。只進行無性繁殖的酵母菌稱為假酵母或擬酵母,具有有性生殖的酵母稱為真酵母。存在有性生殖的不同酵母菌的生活時可以分為:(1)營養(yǎng)體既能以單倍體也能以二倍體形式存在;(2)營養(yǎng)體只能以單倍體形式存在;(3)營養(yǎng)體只能以二倍體形式存在。18.霉菌菌絲的特化形態(tài)有哪些?繁殖方式?哪些是霉菌有性孢子,哪些是無性孢子?孢子與芽孢的主要區(qū)別?答:霉菌營養(yǎng)體的基本單位是菌絲。菌絲體分為營養(yǎng)菌絲和氣生菌絲。營養(yǎng)菌絲體的特化形態(tài)有吸收養(yǎng)料的假根、吸器;附著用的附著胞和附著枝;休眠的菌核和菌索;延伸用的匍匐枝;捕食線蟲用的菌環(huán)和菌網(wǎng)。氣生菌絲體主要特化成各種形態(tài)的子實體。霉菌的繁殖方式有霉菌的有性孢子主要有接合孢子、卵孢子、子囊孢子;霉菌的無性孢子主要有孢囊孢子、分生孢子、厚垣孢子、白地霉的節(jié)孢子。芽孢是某些細菌生長的一定階段,在細胞內(nèi)形成一個圓形、橢圓形或柱形的休眠體,具有很強的抗逆性,是用來保護細菌的;而孢子是真菌和放線菌用來繁殖的。19.病毒的組成、結(jié)構(gòu)、對稱性答:病毒是一類由核酸和蛋白質(zhì)等少數(shù)幾種成分組成的超顯微“非細胞生物”,其本質(zhì)是DNA或RNA的特殊遺傳因子。亞病毒因子是一類只含核酸或蛋白質(zhì)單一成分的分子病原體,包括類病毒(只含RNA、專性寄生于活細胞)、擬病毒(包裹在病毒粒中有缺陷的類病毒)和朊病毒(傳染性蛋白質(zhì)分子)有感染力的單個病毒粒子專稱病毒?;虿《倔w,其基本成分是核酸(DNA和RNA)和蛋白質(zhì)。病毒粒由核衣殼(包括衣殼和核酸)和包膜組成。病毒粒的對稱體制有螺旋對稱(桿狀)、二十面體對稱(球狀)和復(fù)合對稱(蝌蚪狀或磚狀)。20.烈性噬菌體、溫和噬菌體、噬菌斑?烈性噬菌體的生活史(繁殖方式),烈性噬菌體對工業(yè)發(fā)展的危害、對應(yīng)措施。答:T4噬菌體的裂解性生活史可分為5個階段,即吸附、侵入、增殖、成熟和裂解。烈性噬菌體:能在短時間連續(xù)完成5個階段而實現(xiàn)其繁殖的噬菌體。(反之,則為溫和噬菌體)溶源菌:在染色體組上整合有溫和噬菌體但能進行正常生長繁殖的宿主。這一現(xiàn)象即為溶源現(xiàn)象或溶源性。噬菌斑:由噬菌體在菌苔上形成的“負菌落”。噬菌體對發(fā)酵工業(yè)影響很大,大罐液體發(fā)酵若受噬菌體嚴重污染時,輕則引起發(fā)酵周期延長、發(fā)酵液變清和發(fā)酵產(chǎn)物難以形成等事故,重則造成倒灌、停產(chǎn)甚至危及工廠命運,此情況在谷氨酸發(fā)酵、細菌淀粉酶或蛋白酶發(fā)酵、丙酮丁醇發(fā)酵以及若干抗生素發(fā)酵中司空見慣。為防止噬菌體的污染,比勛確立防重于治的理念,例如絕不可使用可疑菌種、嚴格保持環(huán)境衛(wèi)生,絕不任意丟棄和排放有生產(chǎn)菌種的菌液,注意通氣質(zhì)量,加強發(fā)酵罐和管道滅菌,不斷篩選抗噬菌體菌種,經(jīng)常輪換生產(chǎn)菌種,以及嚴格會客制度等。21.發(fā)酵液段時間內(nèi)突然變澄清可能是什么原因?qū)е碌??答:發(fā)酵中常常遇到噬菌體污染,引起溶菌,并隨之出現(xiàn)發(fā)酵遲緩或停止發(fā)酵,使其變澄清。22.噬菌體一步生長曲線的實驗方法,分幾個時期?分別對應(yīng)于噬菌體繁殖過程的哪些階段?答:噬菌體一步生長曲線分為潛伏期(又可分為隱晦期和胞內(nèi)累積期)、裂解期、平穩(wěn)期。23.常用碳源、氮源?雙(三)功能營養(yǎng)物?生長因子?答:微生物在營養(yǎng)要求上有著高度的統(tǒng)一性,即在元素水平上都需20種左右同樣種類和需要量的元素,而在營養(yǎng)水平上則都有相似的6個大類,包括碳源、氮源、能源、生長因子、無機鹽和水。所有的微生物可分為4種營養(yǎng)類型,即光能無機營養(yǎng)型、光能有機營養(yǎng)型、化能無機營養(yǎng)型和化能有機營養(yǎng)型。微生物常用碳源主要為糖類,其次是有機酸類、醇類和脂質(zhì)等;常用的有機氮源是牛肉膏、酵母膏、植物的餅粕粉和蟬蛹粉等,應(yīng)用較廣泛的事蛋白胨。單功能營養(yǎng)物:只能當(dāng)作碳源(氮源)或能源,如光輻射能雙功能營養(yǎng)物:對于一切異養(yǎng)微生物,其碳源(氮源)又兼作能源,如糖類和還原態(tài)無機物NH+三功能營養(yǎng)物:既是碳源又是氮源,還可以當(dāng)作能源,如氨基酸類生長因子:是一類對于調(diào)節(jié)微生物正常代謝所必需,但不能用簡單的碳、氮源自行合成的微量有機物。按微生物對生長因子的需要與否,可分為3類:生長因子自養(yǎng)型微生物、生長因子異養(yǎng)型微生物、生長因子過量合成型微生物。24.營養(yǎng)物質(zhì)進入細胞的方式不通過膜上載體蛋白:單純擴散(被動運輸,主要是氧氣、二氧化碳、乙醇、甘油和某些氨基酸分子)通過膜上載體蛋白:不耗能-促進擴散(不消耗能量且可逆,例如釀酒酵母對糖類、氨基酸和維生素的吸收)耗能-運送前后溶質(zhì)分子不變:主動運送(需提供能量,低濃度運到高濃度,主要有無機離子、有機離子和一些糖類)-運送前后溶質(zhì)分子改變:基團移位(需耗能,廣泛應(yīng)用于原核生物中)25.培養(yǎng)基的配置原則?凝固劑種類、用量,選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基及其應(yīng)用答:培養(yǎng)基是指由人工配置的、含有六大營養(yǎng)要素、適合微生物生長繁殖或產(chǎn)生代謝產(chǎn)物用的混合營養(yǎng)料。選用和設(shè)計培養(yǎng)基的原則和方法4個原則:目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、理化適宜、經(jīng)濟節(jié)約4種方法:生態(tài)模擬、借鑒文獻、精心設(shè)計、試驗比較碳氮比:微生物培養(yǎng)基中所含的碳源中的碳原子摩爾數(shù)與氮源中的氮原子摩爾數(shù)之比。凝固劑:1%~2%瓊脂、5%~12%明膠、海藻酸膠、脫乙酰吉蘭糖膠、多聚醇F127按對培養(yǎng)基成分的了解分類:天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基按培養(yǎng)基外觀的物理狀態(tài)分類:液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、脫水培養(yǎng)基按培養(yǎng)基對微生物的功能分類:選擇性培養(yǎng)基、鑒別性培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基:一類根據(jù)某微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素抗性的原理而設(shè)計的培養(yǎng)基,具有使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌的功能,廣泛應(yīng)用于菌種篩選等領(lǐng)域。鑒別性培養(yǎng)基:一類在成分中加有能與目的菌無色代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應(yīng)的指示劑,從而達到只需用肉眼辨別顏色就能方便地從近似菌落中找出目的菌菌落的培養(yǎng)基,如伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基。它在飲用水、牛奶的大腸菌群數(shù)等細菌學(xué)檢查和在大腸桿菌的遺傳學(xué)研究工作中有著重要的用途。26.底物脫氫的4條途徑?微生物特有途徑是哪條?此途徑特點答:底物脫氫的4條途徑:EMP途徑(即糖酵解途徑):HMP途徑:ED途徑:TCA循環(huán):微生物特有途徑是EMP途徑,此途徑產(chǎn)能效率雖低,但生理功能極其重要:供應(yīng)ATP形式的能量和NADH2形式的還原力;是連接其他幾個重要代謝途徑的橋梁;微生物合成提供多種中間代謝產(chǎn)物;通過逆向反應(yīng)可進行多糖合成。27.發(fā)酵、無氧呼吸、有氧呼吸?由丙酮酸出發(fā)的發(fā)酵有哪些?答:微生物氧化可分為呼吸、無氧呼吸和發(fā)酵3種。其中呼吸產(chǎn)能效率最高,發(fā)酵產(chǎn)能效率最低。發(fā)酵:指在無氧等外源氫受體的條件下,底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力[H]未經(jīng)呼吸鏈傳遞而直接交某一內(nèi)源性中間代謝產(chǎn)物接受,以實現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類生物氧化反應(yīng)。(僅用于生物體能量代謝中的狹義發(fā)酵概念)無氧呼吸:指一類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機氧化物(少數(shù)為有機氧化物)的生物氧化。是一類在無氧條件下進行的、產(chǎn)能效率較低的特殊呼吸。有氧呼吸:是一種最普遍又最重要的生物氧化或產(chǎn)能方式,其特點是底物按常規(guī)方式脫氫后,脫下的氫(常以還原力[H]形式存在)經(jīng)完整的呼吸鏈又稱電子傳遞鏈傳遞,最終被外源分子氧接受,產(chǎn)生了水并釋放出ATP形式的能量。這是一種遞氫和受氫都必須在有氧條件下完成的生物氧化作用,是一種高效產(chǎn)能方式。由丙酮酸出發(fā)的6條發(fā)酵途徑:同型酒精發(fā)酵、同型乳酸發(fā)酵、丙酸發(fā)酵、混合酸發(fā)酵、2,3-丁二醇發(fā)酵、丁酸型發(fā)酵28.混合酸發(fā)酵,甲基紅試驗、V-P試驗、產(chǎn)酸產(chǎn)氣情況答:混合酸發(fā)酵:由大腸桿菌等多種腸桿菌通過EMP途徑將葡萄糖轉(zhuǎn)變成琥珀酸、乳酸、甲酸、乙醇、乙酸、H2和CO2等多種代謝產(chǎn)物,由于代謝產(chǎn)物中含有多種有機酸,故將其稱為混合酸發(fā)酵。甲基紅試驗:根據(jù)腸桿菌科各菌屬都能發(fā)酵葡萄糖,在分解葡萄糖過程中產(chǎn)生丙酮酸,進一步分解中,由于糖代謝的途徑不同,可產(chǎn)生乳酸,琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性產(chǎn)物,可使培養(yǎng)基PH值下降至pH4.5以下,使甲基紅指示劑變紅這個原理進行的測驗。V-P試驗:利用產(chǎn)氣腸桿菌能產(chǎn)生3-羥基丁酮(乙酰甲基甲醇)的原理,因為它在堿性條件下可被氧化成二乙酰,若用有胍基的精氨酸與二乙酰反應(yīng),就可產(chǎn)生特征性的紅色反應(yīng)(V.P.陽性),而與產(chǎn)氣腸桿菌近緣的大腸桿菌呈V.P.陰性,故極易區(qū)別兩菌。29.微生物的光能利用方式有哪些?答:光能有機自養(yǎng)型和光能無機自養(yǎng)型化能自養(yǎng)型微生物可通過呼吸鏈提供ATP,通過逆呼吸鏈傳遞產(chǎn)生還原力。光能自養(yǎng)型微生物則可通過循環(huán)光合磷酸化、非循環(huán)光合磷酸化或紫膜光介導(dǎo)方式提供ATP和還原力。30.固氮菌的生態(tài)類型?固氮酶的特點?固氮反應(yīng)6要素?固氮菌的生態(tài)類型:自生固氮菌、共生固氮菌、聯(lián)合固氮菌固氮酶的特點:生物固氮:指大氣中的分子氮通過微生物固氮酶的催化而還原成氨的過程,生物界中只有原核生物才具有固氮能力。生物固氮的6要素:ATP的供應(yīng)、還原力[H]及其傳遞載體、固氮酶、還原底物-N2、鎂離子、嚴格的厭氧微環(huán)境固氮酶:是一種復(fù)合蛋白,由固二氮酶和固二氮酶還原酶兩種相互分離的蛋白構(gòu)成,它們對氧都高度敏感。31.新陳代謝、能量代謝新陳代謝:是發(fā)生在生物體內(nèi)一切有序化學(xué)反應(yīng)的總稱,它為全部生命活動提供了一切必需的能量和物質(zhì)基礎(chǔ)。新陳代謝包括合成代謝和分解代謝兩種。能量代謝:是新陳代謝中的主要內(nèi)容,其功能是把存在于環(huán)境中的各種形式。32.測定生長繁殖的方法?常用活菌計數(shù)法是?答:測生長量:直接法、間接法(如比濁法、生理指標法)計繁殖數(shù):直接法、間接法(是一種活菌計數(shù)法,常用的是菌落計數(shù)法,如平板菌數(shù)計數(shù)法、厭氧菌的菌落計數(shù)法)33.細菌的生長曲線分哪幾個時期?各時期特點、應(yīng)用?答:生長曲線:定量描述液體培養(yǎng)基中微生物群體生長規(guī)律的實驗曲線。由延滯期、指數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期4個階段延滯期:該期特點為生長速率常數(shù)為零;細胞形態(tài)變大或增長;細胞內(nèi)的RNA尤其是rRNA含量增高;合成代謝十分活躍;對外界不良條件反應(yīng)敏感指數(shù)期:該期特點為生長速率常數(shù)R最大,而代時或原生質(zhì)體增加一倍所需的倍增時間最短;細胞進行平衡生長;酶系活躍,代謝旺盛穩(wěn)定期:該期特點是生長速率常數(shù)R等于零,即處于新繁殖的細胞數(shù)與衰亡的細胞數(shù)相等,或正生長與負生長相等的動態(tài)平衡中。衰亡期:微生物個體死亡速度超過新生速度,整個群體呈現(xiàn)負生長狀態(tài)(R為負值)34.連續(xù)培養(yǎng)?按控制方式可分哪兩類?各自特點?答:連續(xù)培養(yǎng)是指向培養(yǎng)容器中連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)液,使微生物的液體培養(yǎng)物長期維持穩(wěn)定、高速生長狀態(tài)的一種溢流培養(yǎng)技術(shù)。續(xù)培養(yǎng)器按控制方式分:內(nèi)控制(控制菌體密度,恒濁器)、外控制(控制培養(yǎng)液流速及R,恒化器)恒濁器:這是一種根據(jù)培養(yǎng)器內(nèi)微生物的生長密度,并借光電控制系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液流速,以取得菌體密度高、生長速率恒定的微生物細胞的連續(xù)培養(yǎng)器。恒化器:是一種設(shè)法使培養(yǎng)液的流速保持不變,并使微生物始終在低于其最高生長速率的條件下進行生長繁殖的連續(xù)培養(yǎng)裝置。按培養(yǎng)器串聯(lián)級數(shù)分:單級連續(xù)培養(yǎng)器、多級連續(xù)培養(yǎng)器按細胞狀態(tài)分:一般連續(xù)培養(yǎng)器、固定化細胞連續(xù)培養(yǎng)器按用途分:實驗室科研用、發(fā)酵生產(chǎn)用35.為什么必須調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值?常用來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值的物質(zhì)有哪些?答:影響微生物生長的外界因素只要有溫度、pH和氧氣。最適生長溫度:某菌分裂代時最短或生長速率最高時的培養(yǎng)溫度。按照微生物與氧的關(guān)系,可分為:專性好氧菌、兼性厭氧菌、微好氧菌、耐氧菌、嚴格厭氧菌自由基:凡由均裂產(chǎn)生、可單獨存在、具有一個或幾個不配對電子的分子或原子。pH會對細胞發(fā)生直接影響,如破環(huán)DNA、ATP、菌綠素和葉綠素等重要成分被酸破壞,或RNA、磷脂類等被堿破環(huán),還對細胞產(chǎn)生間接影響,如影響環(huán)境中有害物質(zhì)對微生物的毒性,以及影響代謝反應(yīng)中各種酶的活性等。常用來調(diào)節(jié)pH的方法有:治標法:過酸時加氫氧化鈉、碳酸鈉等堿液中和;過堿時加硫酸、鹽酸等酸液中和治本法:過酸時加適當(dāng)?shù)矗缒蛩?、硝酸鈉、氨水或蛋白質(zhì)等;過堿時加適當(dāng)碳源,如加糖、乳糖、醋酸、檸檬酸貨油脂等,或者降低通氣量36.氧對厭氧菌的毒害機制?答:在厭氧菌培養(yǎng)技術(shù)方面,實驗室中最常用的有厭氧罐技術(shù)、亨蓋特滾管技術(shù)和厭氧手套箱技術(shù)3類。Friodovich提出關(guān)于專性厭氧生活的超氧化物歧化酶(SOD)學(xué)說:凡嚴格厭氧菌就無SOD活力,一般也無過氧化氫酶活力;所有具細胞色素系統(tǒng)的好氧菌都有SOD和過氧化氫酶;耐氧性厭氧菌不含細胞色素系統(tǒng),但具有SOD活力而無過氧化氫酶活力。SOD的功能是保護好氧菌免受超氧化物陰離子自由基的毒害,而缺乏SOD的微生物必然只能進行專性厭氧生活。37.磺胺類藥物、抗生素的抑菌機制答:<殺滅法>滅菌:采用強烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施。消毒:一種采用較溫和理化因素,僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體或動、植物有害的病原菌,而對被消毒的對象基本無害的措施。<抑制法>防腐:利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖,即通過抑菌作用防止食品、生物制品等對象發(fā)生霉腐的措施?;煟褐咐镁哂懈叨冗x擇毒力即對病原菌具高度毒力而對其宿主基本無毒的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖,借以達到治療該宿主傳染病的一種措施?;前返淖饔脵C制:磺胺的結(jié)構(gòu)與細菌的一種生長因子對氨基苯磺酸高度相似,故是它的代謝類似物,因此兩者會發(fā)生競爭性拮抗作用。抗生素:是一類由微生物或其他生物生命活動過程中合成的次生代謝產(chǎn)物或其人工衍生物,它們在很低濃度時就能抑制或干擾他種生物(包括病原菌、病毒、癌細胞等)的生命活動,因而可用作優(yōu)良的化學(xué)治療劑。38.高溫滅菌的常用方法、機理、影響因素?答:高溫滅菌分為干熱滅菌法和濕熱滅菌法干熱滅菌法可使細胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性和原生質(zhì)干燥,并可使各種細胞成分發(fā)生氧化變質(zhì)。常見的有:火焰灼燒法、烘箱內(nèi)熱空氣滅菌法濕熱滅菌法是一類利用高溫的水或水蒸氣進行滅菌的方法。濕熱蒸氣不但透射力強,而且還能破壞維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)和穩(wěn)定性的氫鍵,從而加速這一重要生命大分子物質(zhì)的變性。常見的有:常壓下:巴氏消毒法(LTH法、HTST法)、煮沸消毒法、間歇滅菌法加壓下:常規(guī)加壓滅菌法、連續(xù)加壓滅菌法影響加壓蒸氣滅菌效果的因素有:被滅菌物體含菌量、滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度、滅菌對象的pH、滅菌對象的體積、加熱與散熱速度39.表型、飾變?微生物的基因突變類型?哪些是選擇性突變株?答:表型:指某一生物所具有的一切外表特征和內(nèi)在特性的總和,是遺傳型仔合適環(huán)境條件下通過代謝和發(fā)育而得到的具體體現(xiàn)。變異:指生物體在某種外因或內(nèi)因的作用下所引起的遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)或數(shù)量的改變,亦即遺傳型的改變。其特點是在群體中只以極低的概率出現(xiàn),形狀變化幅度大,且變化后的新形狀是穩(wěn)定的、可遺傳的。飾變:指外表的修飾性變化,即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平上的表型變化。其特點是整個群體中的幾乎每一個體都發(fā)生相同變化;形狀變化的幅度小;因遺傳物質(zhì)未變,故飾變事不遺傳的?;蛲蛔冾愋停哼x擇性突變:營養(yǎng)缺陷型、抗性突變型、條件致死突變型非選擇性突變:形態(tài)突變型、抗原突變型、產(chǎn)量突變型基因突變的6個特點:自發(fā)性、不對應(yīng)性、稀有性、獨立性、可誘變性、穩(wěn)定性40.什么是質(zhì)粒?其組成、應(yīng)用答:質(zhì)粒:凡游離于原核生物核基因組以外,具有獨立復(fù)制能力的小型共價閉合環(huán)狀的dsDNA分子,即cccDNA,就是典型的質(zhì)粒。是一種獨立存在于細胞內(nèi)的復(fù)制子。質(zhì)粒上攜帶某些核基因組上缺少的基因,使細菌等原核生物獲得了某些對其生存并非必不可少的特殊功能,例如接合、產(chǎn)毒、抗藥、固氮、產(chǎn)特殊酶或降解環(huán)境毒物等功能。質(zhì)粒許多有利于基因工程,可以改建作為克隆載體。41.營養(yǎng)缺陷型?篩選中常用的幾種培養(yǎng)基答:營養(yǎng)突變型:某一野生型菌種因發(fā)生基因突變而喪失合成一種或幾種生長因子、堿基或氨基酸等能力,因而不能在基本培養(yǎng)基上正常生長繁殖的變異類型。營養(yǎng)缺陷型突變株在遺傳學(xué)、分子生物學(xué)、遺傳工程和育種等工作中十分有用。與篩選營養(yǎng)缺陷型突變株有關(guān)的3類培養(yǎng)基:基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基、補充培養(yǎng)基與營養(yǎng)缺陷型突變有關(guān)的3類遺傳型個體:野生型、營養(yǎng)缺陷型、原養(yǎng)型42.抗生素法和菌絲過濾法為何能“濃縮”營養(yǎng)突變型突變株答:抗生素法:有青霉素法和制霉菌素法等數(shù)種。青霉素法適用于細菌,其原理是青霉素能抑制細菌細胞壁的合成,因而可殺死能正常生長繁殖的野生型細菌,但無法殺死正處于休止?fàn)顟B(tài)的營養(yǎng)缺陷型細菌,從而達到“濃縮”后者的目的。制霉菌素屬于大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,可與真菌細胞膜上的甾醇作用,從而引起膜的損傷。因為它只能殺死生長繁殖著的酵母菌或霉菌等真菌,故也可用于淘汰相應(yīng)的野生型菌種和“濃縮”營養(yǎng)缺陷型菌株。菌絲過濾法:適用于進行絲狀生長的真菌和放線菌。其原理是:在基本培養(yǎng)基中,野生型菌株的孢子能發(fā)芽成菌絲,而營養(yǎng)缺陷型的孢子則不能。因此,將誘變劑處理后的大量孢子放在基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間后,再用濾孔較大的擦鏡紙過濾。如此重復(fù)數(shù)遍后,就可除去大部分野生型菌株,從而達到“濃縮”營養(yǎng)缺陷型的目的。43.細菌基因重組的4種主要方式?各自特點答:基因重組:兩個獨立基因內(nèi)的遺傳基因,通過一定的途徑轉(zhuǎn)移到一起,形成新的穩(wěn)定基因組的過程。原核細菌的基因重組特點:片斷性、單向性、多樣性;原核生物4種主要遺傳重組形式:轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合、原生質(zhì)體融合真核微生物的基因重組方式:有性雜交、準性雜交、原生質(zhì)體融合和遺傳轉(zhuǎn)化等。44.菌種衰退的原因,菌種保藏的基本原理答:衰退:指某純種微生物群體中的個別個體由于發(fā)生自發(fā)突變的結(jié)果,而使該物種原有一系列生物學(xué)性狀發(fā)生衰退性的量變或質(zhì)變現(xiàn)象。衰退原因:在一個大群體中個別細胞發(fā)生自發(fā)突變(一般均為負變),這是不及時發(fā)現(xiàn)并采取有效措施,而一味地移種、傳代,使得這個群體中這種負變個體的比例逐漸增大,最后發(fā)展成為優(yōu)勢群體,從而使整個群體表現(xiàn)出嚴重的衰退。這是一個量變到質(zhì)變的逐步演化過程。菌種保藏:指通過適當(dāng)方法使微生物能長期存活,并保持原種的生物學(xué)性狀穩(wěn)定不變的一類措施。菌種保藏的原理:首先應(yīng)挑選典型菌種或典型培養(yǎng)物的優(yōu)良純種,最好保藏他們的分生孢子、芽孢等休眠體;其次,創(chuàng)造一個有利于它們長期休眠的良好環(huán)境條件,諸如干燥、低溫、缺氧、避光、缺乏營養(yǎng)以及添加保護劑或酸度中和劑等。干燥和低溫是菌種保藏中最重要因素。菌種保藏最普遍的方法:冷凍干燥保藏法、液氮超低溫保藏法45.微生物與生物環(huán)境之間的關(guān)系答:微生物與生物環(huán)境間的5種相互關(guān)系:互生、共生、寄生、拮抗、捕食互生:兩種可單獨生活的生物,當(dāng)它們生活在一起時,通過各自的代謝活動而有利于對方,或偏利于一方的相互關(guān)系。如人體腸道中的正常菌群與人體的關(guān)系。共生:是指兩種生物共居在一起,相互分工合作、相依為命,甚至形成獨特結(jié)構(gòu)、達到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。如由菌藻共生或菌菌共生的地衣、微生物與高等植物共生的菌根、微生物與高等動物間的共生瘤胃微生物與反芻動物。寄生:一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)(包括細胞內(nèi))或體表,從中奪取營養(yǎng)并進行生長繁殖,同時使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。前者稱為寄生物,后者稱作宿主或寄主。如噬菌體與其宿主菌。如衛(wèi)生間的噬菌體與其細菌或真菌宿主間、蛭弧菌與其宿主細菌間。拮抗:指由某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長發(fā)育甚至殺死他們的一種相互關(guān)系。如抗生菌所產(chǎn)生抗生素與人類關(guān)系。捕食:一般指一種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營養(yǎng)需要的相互關(guān)系。如原生動物捕食細菌。46.人體正常菌群、菌群失調(diào)癥?答:正常菌群:生活在健康動物各部位、數(shù)量大、種群較穩(wěn)定、一般能發(fā)揮有益作用的微生物群。正常菌群失調(diào):宿主的防御功能減弱、正常菌群生長部位改變或者長期服用抗生素等制菌藥物后,原先某些不致病的正常菌群成員趁機大量轉(zhuǎn)移或大量繁殖,成了致病菌。47.自然界氮素循環(huán)中微生物的作用答:在重要生命元素氮素循環(huán)的8個環(huán)節(jié)中,有6個只能通過微生物的活動才能進行。進入生態(tài)系統(tǒng)的氮以氨或氨鹽的形式被固定,經(jīng)過硝化作用(能夠完成這一轉(zhuǎn)變的是一些特殊的微生物類群如固氮菌、藍綠藻和根瘤菌等,即生物固氮)形成亞硝酸鹽或硝酸鹽,被綠色植物吸收并轉(zhuǎn)化成為氨基酸,合成蛋白質(zhì);然后,食草動物利用植物蛋白質(zhì)合成動物蛋白質(zhì);動物的排泄物和動植物殘體經(jīng)細菌的分解作用形成氨、CO2和水,排放到土壤中的氨又經(jīng)細菌的硝化作用形成硝酸鹽,被植物再次吸收、利用合成蛋白質(zhì)。這是氮在生物群落和土壤之間的循環(huán)。由硝化作用形成的硝酸鹽還可以被反硝化細菌還原,經(jīng)HYPERLINK"/s?wd=%E5%8F%8D%E7%A1%9D%E5%8C%96%E4%BD%9C%E7%94%A8&tn=44039180_cpr&fenlei=mv6quAkxTZn0IZRqIHckPjm4nH00T1Y3Pjc3nvcYn19hPWubnW
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