組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)題

細(xì)胞全能型：植物器官培養(yǎng)：愈傷組織培養(yǎng)：19世紀(jì)30年代，德國(guó)植物學(xué)家施萊登和德國(guó)動(dòng)物學(xué)家施旺創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說(shuō)，根據(jù)這一學(xué)說(shuō)，如果給細(xì)胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個(gè)細(xì)胞都應(yīng)該能夠獨(dú)立生活。1902年，德國(guó)植物學(xué)家哈伯蘭特在細(xì)胞全能性的理論是植物組培的理論基礎(chǔ)。1958年，一個(gè)振奮人心的消息從美國(guó)傳向世界各地，美國(guó)植物學(xué)家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜韌皮部的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開(kāi)花結(jié)果，證實(shí)了哈伯蘭特在五十多年前關(guān)于細(xì)胞全能的預(yù)言。植物組培的簡(jiǎn)單過(guò)程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過(guò)脫分化（也叫去分化）形成愈傷組織——再經(jīng)過(guò)再分化形成組織或器官——經(jīng)過(guò)培養(yǎng)發(fā)育成一顆完整的植株。植物組培的大致過(guò)程是：在無(wú)菌條件下，將植物器官或組織（如芽、莖尖、根尖或花藥）的一部分切下來(lái)，用纖維素酶與果膠酶處理用以去掉細(xì)胞壁，使之露出原生質(zhì)體，然后放在適當(dāng)?shù)娜斯づ囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，這些器官或組織就會(huì)進(jìn)行細(xì)胞分裂，形成新的組織。不過(guò)這種組織沒(méi)有發(fā)生分化，只是一團(tuán)薄壁細(xì)胞，叫做愈傷組織。在適合的光照、溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與激素等條件下，愈傷組織便開(kāi)始分化，產(chǎn)生出植物的各種器官和組織，進(jìn)而發(fā)育成一棵完整的植株。植物組織培養(yǎng)即植物無(wú)菌培養(yǎng)技術(shù)，又稱離體培養(yǎng)，是根據(jù)植物細(xì)胞具有全能性的理論，利用植物體離體的器官如根、莖、葉、莖尖、花、果實(shí)等）組織（如形成層、表皮、皮層、髓部細(xì)胞、胚乳等）或細(xì)胞（如大孢子、小孢子、體細(xì)胞等）以及原生質(zhì)體,在無(wú)菌和適宜的人工培養(yǎng)基及光照、溫度等人工條件下，能誘導(dǎo)出愈傷組織、不定芽、不定根，最后形成完整的植株的學(xué)科編輯本段植物組織的培養(yǎng)培養(yǎng)方法1、非試管微組織快繁非試管微組織快繁技術(shù)是將外植體（一般要求帶一葉一芽）放置在室內(nèi)外普通沙子培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，利用植物腋芽自然倍增達(dá)到快速繁殖的目的。一般植物7～15天可以生長(zhǎng)出根系。此技術(shù)投資低，操作環(huán)節(jié)少。2、試管組織培養(yǎng)試管組織培養(yǎng)是將外植體（即離體組織、器官或細(xì)胞）放置在組培瓶等器皿中在無(wú)菌的條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)獲得組培瓶苗。培養(yǎng)步驟第一步，將采來(lái)的植物材料除去不用的部分，將需要的部分仔細(xì)洗干凈，如用適當(dāng)?shù)乃⒆拥人⑾?。把材料切割成適當(dāng)大小，即滅菌容器能放入為宜。置自來(lái)水龍頭下流水沖洗幾分鐘至數(shù)小時(shí)，沖洗時(shí)間視材料清潔程度而宜。易漂浮或細(xì)小的材料，可裝入紗布袋內(nèi)沖洗。流水沖洗在污染嚴(yán)重時(shí)特別有用。洗時(shí)可加入洗衣粉清洗，然后再用自來(lái)水沖凈洗衣粉水。洗衣粉可除去輕度附著在植物表面的污物，除去脂質(zhì)性的物質(zhì)，便于滅菌液的直接接觸。當(dāng)然，最理想的清洗物質(zhì)是表面活性物質(zhì)—吐溫。第二步是對(duì)材料的表面浸潤(rùn)滅菌。要在超凈臺(tái)或接種箱內(nèi)完成，準(zhǔn)備好消毒的燒杯、玻璃棒、70%酒精、消毒液、無(wú)菌水、手表等。用70%酒精浸10～30秒。由于酒精具有使植物材料表面被浸濕的作用，加之70%酒精穿透力強(qiáng)，也很易殺傷植物細(xì)胞，所以浸潤(rùn)時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)。有一些特殊的材料，如果實(shí)、花蕾、包有苞片、苞葉等的孕穗，多層鱗片的休眠芽等等，以及主要取用內(nèi)部的材料，則可只用70%酒精處理稍長(zhǎng)的時(shí)間。處理完的材料在無(wú)菌條件下，待酒精蒸發(fā)后再剝除外層，取用內(nèi)部材料。第三步是用滅菌劑處理。表面滅菌劑的種類較多，可根據(jù)情況選取1—2種使用見(jiàn)表。第四步是用無(wú)菌水涮洗，涮洗要每次3min左右，視采用的消毒液種類，涮洗3-l0次左右。無(wú)菌水涮洗作用是免除消毒劑殺傷植物細(xì)胞的副作用注意：①酒精滲透性強(qiáng)，幼嫩材料易在酒精中失綠，所以浸泡時(shí)間要短，防止酒精殺死植物細(xì)胞。②老熟材料，特別是種子等可以在酒精中浸泡時(shí)間長(zhǎng)一些，如種子可以浸泡5分鐘。③升汞的滲透力弱，一般浸泡10分鐘左右，對(duì)植物材料的殺傷力不大。④漂白粉容易導(dǎo)致植物材料失綠，所以對(duì)于幼嫩材料要慎用。⑤在消毒液中加入濃度為0.08—0.12%的吐溫20或80（一種濕潤(rùn)劑），可以降低植物材料表面的張力，達(dá)到更好的消毒效果。培養(yǎng)特點(diǎn)1、培養(yǎng)條件可以人為控制組培采用的植物材料完全是在人為提供的培養(yǎng)基和小氣候環(huán)境條件下進(jìn)行生長(zhǎng)，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災(zāi)害性氣候的不利影響，且條件均一，對(duì)植物生長(zhǎng)極為有利，便于穩(wěn)定地進(jìn)行周年培養(yǎng)生產(chǎn)。2、生長(zhǎng)周期短，繁殖率高組培是由于人為控制培養(yǎng)條件，根據(jù)不同植物不同部位的不同要求而提供不同的培養(yǎng)條件，因此生長(zhǎng)較快。另外，植株也比較小，往往20-30天為一個(gè)周期。所以，雖然組培需要一定設(shè)備及能源消耗，但由于植物材料能按幾何級(jí)數(shù)繁殖生產(chǎn)，故總體來(lái)說(shuō)成本低廉，且能及時(shí)提供規(guī)格一致的優(yōu)質(zhì)種苗或脫病毒種苗。3、管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動(dòng)化控制植物組織培養(yǎng)是在一定的場(chǎng)所和環(huán)境下，人為提供一定的溫度、光照、濕度、營(yíng)養(yǎng)、激素等條件，極利于高度集約化和高密度工廠化生產(chǎn)，也利于自動(dòng)化控制生產(chǎn)。它是未來(lái)農(nóng)業(yè)工廠化育苗的發(fā)展方向。它與盆栽、田間栽培等相比省去了中耕除草、澆水施肥、防治病蟲(chóng)等一系列繁雜勞動(dòng)，可以大大節(jié)省人力、物力及田間種植所需要的土地。培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)1、占用空間小，不受地區(qū)、季節(jié)限制。2、培養(yǎng)脫毒作物3、培養(yǎng)周期短4、可用組培中的愈傷組織制取特殊的生化制品5、可短時(shí)間大量繁殖，用于拯救瀕危植物6、可誘導(dǎo)之分化成需要的器官，如根和芽7、解決有些植物產(chǎn)種子少或無(wú)的難題，8、不存在變異，可保持原母本的一切遺傳特征9、投資少，經(jīng)濟(jì)效益高10、繁殖方式多，試用品種多培養(yǎng)材料采集要根據(jù)培養(yǎng)目的適當(dāng)選取材料，選擇原則：易于誘導(dǎo)、帶菌少。要選取植物組織內(nèi)部無(wú)菌的材料。這一方面要從健壯的植株上取材料，不要取有傷口的或有病蟲(chóng)的材料。另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，決不要在雨天、陰天或露水未干時(shí)取材料。因?yàn)榻训闹仓旰颓缣旃夂虾粑⒌慕M織，有自身消毒作用，這種組織一般是無(wú)菌的。培養(yǎng)材料的消毒從外界或室內(nèi)選取的植物材料，都不同程度地帶有各種微生物。這些污染源一旦帶人培養(yǎng)基，便會(huì)造成培養(yǎng)基污染。因此，植物材料必須經(jīng)嚴(yán)格的表面滅菌處理，再經(jīng)無(wú)菌操作手續(xù)接到培養(yǎng)基上。試劑·乙醇?！み胚嵋宜幔↖AA）或2，4–D（生長(zhǎng)素類似物）?！ぢ然ㄉ┗虼温人徕c?！?-芐基氨基腺嘌呤（6-BA）·MS培養(yǎng)基·0.1mol/LNaOH與0.1mol/LHCl配制培養(yǎng)基（1）愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基：MS培養(yǎng)基（蔗糖含量為10g/L，2,4–D含量為2mg/L，瓊脂10g/L）。（2）試驗(yàn)培養(yǎng)基：在MS培養(yǎng)基中加入IAA和6–BA。吲哚乙酸（IAA)先用少量0.1mol/LNaOH溶解，6-芐基氨基腺嘌呤先用少量0.1mol/LHCl溶解，然后用蒸餾水稀釋，再加入培養(yǎng)基中。儀器設(shè)備培養(yǎng)室，高壓滅菌鍋，水浴鍋，解剖刀，三角燒瓶（100mL），燒杯，量筒，組培瓶，組培蓋或封口膜，棉線，接種箱或超凈工作臺(tái)，分析天平，長(zhǎng)鑷子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮紙。培養(yǎng)基滅菌將配好的培養(yǎng)基加入瓊脂加熱溶解，調(diào)至pH5.8，趁熱分裝于100mL組培瓶中，每瓶約20mL。待培養(yǎng)基冷卻凝固后，蓋上組培蓋，或蓋上封口膜并用棉線扎牢，然后在高壓滅菌鍋中121℃（1kg/cm2）下滅菌20min。取出組培瓶放在臺(tái)子上，冷卻后備用。接種操作所需的一切用具（如長(zhǎng)鑷子、解剖刀、剪刀等）及滅菌水，需同時(shí)滅菌。編輯本段組織培養(yǎng)分類1、胚胎培養(yǎng)指以從胚珠中分離出來(lái)的成熟或未成熟胚為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。2、器官培養(yǎng)指以植物的根、莖、葉、花、果等器官為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)，如根的根尖和切段，莖的莖尖、莖節(jié)和切段，葉的葉原基、葉片、葉柄、葉鞘和子葉，花器的花瓣、雄蕊（花藥、花絲）、胚珠、子房、果實(shí)等的離體無(wú)菌培養(yǎng)。3、組織培養(yǎng)指以分離出植物各部位的組織（如分生組織、形成層、木質(zhì)部、韌皮部、表皮、皮層、胚乳組織、薄壁組織、髓部等），或已誘導(dǎo)的愈傷組織為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。這是狹義的植物組織培養(yǎng)。4、細(xì)胞培養(yǎng)指以單個(gè)游離細(xì)胞（如用果酸酶從組織中分離的體細(xì)胞，或花粉細(xì)胞，卵細(xì)胞）為接種體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。5、原生質(zhì)體培養(yǎng)。指以除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體為外植體的離體無(wú)菌培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)試題植物組織培養(yǎng)考試題5一、名詞解釋：（每小題3分，共15分）1．初代培養(yǎng)基；2．脫分化；3．液體培養(yǎng)；4．細(xì)胞全能性；5．再分化.二、填空（每空1分，共40分）1．植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，最常用的培養(yǎng)基是，培養(yǎng)基的pH因外植體的來(lái)源不同而異，常用和調(diào)節(jié)pH，大多數(shù)植物的pH要求調(diào)節(jié)在范圍內(nèi)。2．可以通過(guò)、、、、等措施預(yù)防褐變的發(fā)生。3．植物組織培養(yǎng)時(shí)，外植體可以是、、、。4．應(yīng)用微尖嫁接技術(shù)進(jìn)行脫毒培養(yǎng)無(wú)病毒苗，主要程序?yàn)椤?．組織培養(yǎng)植株的再生途徑有兩條：一是發(fā)生，另一是發(fā)生。6．在配制培養(yǎng)基時(shí)，可以在培養(yǎng)基中添加，利用其吸附能力，可以降低褐變的發(fā)生，但它對(duì)物質(zhì)的吸附。7．培養(yǎng)基的滅菌要求壓力為、溫度為、維持時(shí)間為。8．組織培養(yǎng)中常用的生長(zhǎng)素有吲哆乙酸（IAA），2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D），吲哆丁酸（IBA），萘乙酸（NAA），它們的作用強(qiáng)弱順序?yàn)?gt;>>。9.莖尖微繁殖過(guò)程一般包括五個(gè)階段，即、、、、。10．莖尖分生組織培養(yǎng)的目的主要是，其莖尖一般取毫米。為了使脫毒效果更好，可以將莖尖分生組織培養(yǎng)與結(jié)合起來(lái)。脫毒處理的試管苗，在用于生產(chǎn)之前，必須進(jìn)行。11．污染的原因從病源菌上分析主要有兩大類、。三、判斷正誤，并改錯(cuò)。（每小題2分，共20分）1．一般將微量元素母液均配制成10倍，在配制培養(yǎng)基時(shí)，使用量為10ml/L。細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值較高時(shí)，有利于愈傷組織的誘導(dǎo)。2．對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物，要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià)值，只能通過(guò)葉培養(yǎng)。3．植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí)，材料也容易褐變，生長(zhǎng)素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。4．利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí)，莖尖外植體大小與脫毒效果成正比。5．某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗。6．無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變，因而對(duì)其他病毒和病原體的侵染更為敏感，因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。7．微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑，一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生，二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。后一途徑相對(duì)較為優(yōu)越，因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織不會(huì)出現(xiàn)一些突變。8．細(xì)胞的全能性，可以通過(guò)分裂細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。9．培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物，以防在pH較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。四、簡(jiǎn)答題：（每小題5分，共15分）1．植物生長(zhǎng)物質(zhì)如何調(diào)控外植體形態(tài)發(fā)生？2．為什么要對(duì)脫毒苗進(jìn)行多次檢定？3．莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)的目的和取材大小可分為哪幾種類型？各有何特點(diǎn)？五、綜述題（每小題10分，共10分）試管苗移栽時(shí)應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？答案5一、名詞解釋：（每小題3分，共15分）1．初代培養(yǎng)基：是指用來(lái)第一次接種外植體的培養(yǎng)基。2．脫分化：一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。3．液體培養(yǎng)：指在進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中不加瓊脂等凝固劑，一般需要通過(guò)振蕩等方法解決培養(yǎng)基的通氣情況。4．細(xì)胞全能性：一個(gè)細(xì)胞能產(chǎn)生一個(gè)完整植株的固有能力，或植物細(xì)胞具有全部的遺傳信息，不論是性細(xì)胞還是體細(xì)胞，在特定環(huán)境下，能進(jìn)行表達(dá)而產(chǎn)生一個(gè)獨(dú)立完整的個(gè)體。5．再分化：愈傷組織形成不定芽或不定根或胚狀體。二、填空（每空1分，共40分）1．MS、HCL、NaOH、5.6~6.02．適宜外植體、最佳的培養(yǎng)基、連續(xù)轉(zhuǎn)接、加抗氧化劑、加活性炭。3．器官、組織、細(xì)胞、去掉細(xì)胞壁的原生質(zhì)體4．無(wú)菌砧木、莖尖準(zhǔn)備、嫁接、嫁接苗培養(yǎng)、移植5．器官、胚胎6．活性炭、無(wú)選擇性。7．1000~5000Lx、16h、25±2℃8．2，4-D、NAA、IBA、IAA9．無(wú)菌外植體的建立、芽的增殖、中間繁殖體的增殖、誘導(dǎo)生根、試管苗的移栽。10．脫毒、0.1熱處理、病毒檢定11．細(xì)菌、真菌三、判斷正誤，并改錯(cuò)。（每小題2分，共20分）1．×一般將微量元素母液均配制成100倍，在配制培養(yǎng)基時(shí)，使用量為10ml/L。2．×細(xì)胞分裂素/生長(zhǎng)素的比值較高時(shí)，有利于愈傷組織芽的誘導(dǎo)。3．×對(duì)于金邊虎尾蘭等遺傳學(xué)上的嵌合體植物，要是組織培養(yǎng)繁殖的植株保持原有的園藝價(jià)值，只能通過(guò)莖尖和側(cè)芽培養(yǎng)。4．×植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)使用不當(dāng)時(shí)，材料也容易褐變，細(xì)胞分裂有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。5.×利用莖尖分生組織進(jìn)行脫毒培養(yǎng)時(shí)，莖尖外植體大小與脫毒效果成反比。6.√某些植物通過(guò)愈傷組織培養(yǎng)可以獲得無(wú)病毒苗。7.√無(wú)病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病毒之后，體內(nèi)營(yíng)養(yǎng)和生理狀況發(fā)生改變，因而對(duì)其他病毒和病原體的侵染更為敏感，因此在種植脫毒苗的一定要隔離種植。8.×微繁不定芽的產(chǎn)生有兩個(gè)途徑，一是不定芽不通過(guò)愈傷組織由外植體直接產(chǎn)生，二是外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，由愈傷組織上產(chǎn)生不定芽。前一途徑相對(duì)較為優(yōu)越，因?yàn)橥ㄟ^(guò)愈傷組織會(huì)出現(xiàn)一些突變。9.√細(xì)胞的全能性，可以通過(guò)成熟細(xì)胞的脫分化和再分化過(guò)程得以體現(xiàn)。10．√培養(yǎng)基中的鐵鹽，常用不易分解的乙二胺四乙酸鐵螯合物，以防在pH較高時(shí)鐵被氧化為不溶的氫氧化鐵。四、簡(jiǎn)答題：（每小題5分，共15分）1．答案要點(diǎn)：在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，常用的植物激素有生長(zhǎng)素類和細(xì)胞分裂素類，在高生長(zhǎng)素（如使用高濃度2，4—D）時(shí)能促進(jìn)外植體的脫分化，在生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比值較高時(shí)，促進(jìn)不定根的發(fā)生，比值較低時(shí)促進(jìn)不定芽的發(fā)生。2．答案要點(diǎn)：由莖尖分生組織培養(yǎng)獲得的試管苗，經(jīng)第一次擴(kuò)繁后要對(duì)試管苗進(jìn)行病毒檢測(cè)，以確定材料的脫毒情況。因?yàn)閯內(nèi)∏o尖的大小直接關(guān)系到脫毒效果，一船剝?nèi)〉那o尖愈小成苗率愈低，但脫毒率高，而培養(yǎng)的莖尖愈大，成苗率愈高，但脫毒率低。脫毒苗中病毒有可能再次出現(xiàn)，病毒的再現(xiàn)可能有三方面的原因，一是脫毒不徹底，脫毒后試管苗血清檢測(cè)沒(méi)有病毒反映，是因?yàn)橹仓牦w內(nèi)病毒含量非常少，以致檢測(cè)不到，試管苗多次繼代后，病毒逐漸積累，從而再次出現(xiàn)病毒侵染；二是一些弱系病毒或一些暫時(shí)沒(méi)有條件檢測(cè)到的病毒，在強(qiáng)系病毒脫掉后快速繁殖造成危害，三是由于操作及其它一些原因造成的病毒再次侵染。3．答案要點(diǎn)：莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為莖尖分生組織培養(yǎng)和普通莖尖培養(yǎng)兩種類型。莖尖分生組織培養(yǎng)主要是指對(duì)莖尖長(zhǎng)度不超過(guò)0.lmm，最小只有幾十微米的莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)可獲得無(wú)病毒植株。但這樣小的莖點(diǎn)分離實(shí)際上是很困難的，而且成苗時(shí)間也很長(zhǎng)，需要一年乃至更長(zhǎng)的時(shí)間。因此在莖尖分生組織培養(yǎng)中往往采用帶有l(wèi)～2個(gè)葉原基的生長(zhǎng)錐進(jìn)行培養(yǎng)。普通莖尖培養(yǎng)是指對(duì)幾毫米乃至幾十毫米長(zhǎng)的莖尖、芽尖及側(cè)芽的培養(yǎng)，這類莖尖的培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)單，操作方便，莖尖容易成活，成苗所需要的時(shí)間短，能加快繁殖速度。五、總述題（每小題10分，共10分）答題要點(diǎn)：1．保持試管苗的水分平衡2．要選擇合適的基質(zhì)3．要防止雜菌滋生4．要注意光、溫的管理。植物組織培養(yǎng)試題一、名詞解釋1.初代培養(yǎng)：2.再分化：3.細(xì)胞融合：4.細(xì)胞的全能性：5.外植體：6.花藥培養(yǎng)

7.繼代培養(yǎng)8.體細(xì)胞雜交9.液體淺置培養(yǎng)10．植物組織培養(yǎng)二．專用名翻譯（縮寫(xiě)譯成中文名或相反）NAA：多效唑：BA：水解乳蛋白：ZT：水解酪蛋白：KT：鹽酸硫胺素：IBA：鹽酸吡哆醇：三．填空１．目前植物組織培養(yǎng)的農(nóng)業(yè)應(yīng)用主要是＿＿＿＿和＿＿＿＿。２．培養(yǎng)基的母液一般是配成＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿４類存放備用。３．ＭＳ培養(yǎng)基中組成大量元素的鹽類分別是＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿＿。４．組培過(guò)程要進(jìn)行徹底滅茵的是＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。５．植物組織培養(yǎng)，從接種到商品苗可分為五階段，它們是＿＿＿，＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿。６．一般情況下，細(xì)胞分裂/生長(zhǎng)素的比值高，有利于愈傷組織長(zhǎng)＿＿＿＿，比值低有利于長(zhǎng)＿＿＿＿。７．組培中不同的植物對(duì)生長(zhǎng)素的敏感性不同，雙子葉植物要求的濃度＿＿＿＿＿，單子葉植物要求的濃度＿＿＿＿。８．植物組培獲得單倍體植株的方法是進(jìn)行＿＿＿＿＿而獲得三倍體的方法是進(jìn)行＿＿＿＿。９．在植物的材料滅菌中，酒精的濃度用＿＿＿＿＿，處理時(shí)間一般在＿＿＿＿＿范圍，是靠_________殺菌的；升汞的濃度一般用＿＿＿＿＿，處理的時(shí)間在＿＿＿＿＿范圍，升汞是靠_________殺菌的；殺菌劑中的次氯酸鈉是靠_________殺菌的。10．培養(yǎng)植物適宜的溫度大多在＿＿＿＿＿＿，光照強(qiáng)度在＿＿＿＿＿＿，光照時(shí)間在＿＿＿。11、進(jìn)行熱處理植物脫毒的溫度在__________左右。12、配制螯合態(tài)鐵鹽需要的成分是_________和__________。13、培養(yǎng)基中有機(jī)態(tài)N素營(yíng)養(yǎng)主要是----___________和___________。14、目前認(rèn)為植物組培誘導(dǎo)分化成苗的方式有4種__________、__________、__________和___________。15、常用生長(zhǎng)素類中作用再?gòu)?qiáng)的是_______，細(xì)胞分裂素中作用再?gòu)?qiáng)的是____。16、植物病毒檢測(cè)方法有____________、___________、____________、等幾種。17、減少組培苗變異的主要措施有__________________、__________________、____________________。四．選擇題（單或多項(xiàng)選擇，錯(cuò)或漏選扣１分，每題３分）１．組培材料選擇應(yīng)選以下情況的＿＿＿＿＿＿A休眠期B旺盛生長(zhǎng)期C潮濕天氣D干燥天氣２．植物組培初代接種易污染的可能原因＿＿＿＿A材料過(guò)嫩B材料過(guò)老C接種材料過(guò)大D每瓶接種數(shù)量太少3.影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_________。

A瓊脂的質(zhì)量好壞；B高壓滅菌的時(shí)間；C高壓滅菌的溫度；D培養(yǎng)基的PH４．愈傷組織不分化、生長(zhǎng)過(guò)旺、疏松，其原因有＿＿＿＿＿A糖的濃度過(guò)高B培養(yǎng)基的滲透壓過(guò)低C生長(zhǎng)素和分裂素過(guò)高D生長(zhǎng)素和分裂素過(guò)低５．有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到４株無(wú)菌苗，以后按每３６天繼代增殖一次，每次增殖倍數(shù)為３倍，一年后繁殖苗有＿＿＿＿＿＿A3×410株B4×312株C４×310株D３×412株6.下列不屬于生長(zhǎng)素類的植物激素是_________。

ABA；BNAA；CZT；D2.4－D7.植物組織培養(yǎng)可用于：_____________。A快速繁殖；B脫除病毒；C提高品質(zhì)；D育種；E減少品種變異8、誘導(dǎo)試管苗分化叢芽，培養(yǎng)基的調(diào)整應(yīng)_____________。A加大生長(zhǎng)素的濃度B加大分裂素的濃度C加活性炭D降低鹽的濃度。9.下列不屬于MS中微量元素的鹽是_________。

ANH4NO3；BKNO3；CZnSO4.7H2O；DMgSO4.7H2O

10.對(duì)生根培養(yǎng)不起作用的激素是：___________。

AGA；BIAA；CNAA；DIBA五、判斷題（對(duì)的畫(huà)"√"；錯(cuò)題畫(huà)"×"，并改正。每題2分，共10分）

1.在MS的培養(yǎng)基成分中，CaCl2·2H2O屬于微量元素。

2.試管苗生長(zhǎng)細(xì)長(zhǎng)有愈生組織化是因?yàn)榧?xì)胞分裂素過(guò)高3.固體培養(yǎng)基可加進(jìn)活性炭，以利于防止產(chǎn)生褐化。

4.生根培養(yǎng)中加入多效唑可提高生根率。

5.初代接種的材料產(chǎn)生污染只與滅菌的方法有關(guān)與接種材料的大小無(wú)關(guān)。六．計(jì)算題(每題5分)1.培養(yǎng)基的配方是ＭＳ＋ＢＡ1.5＋ＮＡＡ0.2＋３％糖，需配400ml，母液的濃度分別是：大量元素10倍，微量元素500倍，鐵鹽50倍，有機(jī)物50倍，ＢＡ1mg/ml，NAA0.1mg/ml，問(wèn)各種母液、糖應(yīng)量稱取多少？２．要配制0.1N的NaOH500ml，要稱取98%的固體NaOH多少克？要配制0.2N的HCl500ml，要量取濃NaCl多少ml？（NaOH分子量40，HCl分子量36.45，濃HCl含量38%，比重1.18）七．問(wèn)答題(每題10分)1.試管苗移栽較易死亡，從苗的生理看主要原因有哪些？2.請(qǐng)講述無(wú)菌操作接種的全過(guò)程。3.組培苗產(chǎn)生變異的因素有哪些？應(yīng)采取什么措施減少變異的產(chǎn)生？4．細(xì)胞分裂素有哪些生理作用？在組培的初代、繼代生根培養(yǎng)中如何使用？5．闡述試管苗煉苗、移栽、管理的一般技術(shù)過(guò)程。6．產(chǎn)生褐變的原因有哪些？采取什么措施能防止和減少褐變？一、填空題（每空0.5分，共10分）

1.植物組織培養(yǎng)按培養(yǎng)對(duì)象分為_(kāi)______、_________、_________、__________、__________等幾種類型。

2.在分離原生質(zhì)體的酶溶液內(nèi)，需要加入一定量的_______其作用是保持原生質(zhì)體膜的穩(wěn)定，避免破裂。

3.1902年德國(guó)植物生理學(xué)家Haberlandt第一次提出植物_______的理論概念；1943年White提出植物細(xì)胞“_________”學(xué)說(shuō)，并出版了《植物組織培養(yǎng)手冊(cè)》，從而使植物組織培養(yǎng)成為一門(mén)新興的學(xué)科。

4.用烘箱迅速干燥洗凈后的玻璃器皿時(shí)溫度可以設(shè)在_________℃的溫度范圍內(nèi)，而若用它高溫干燥滅菌則需在_________℃的溫度下1-3小時(shí)；烘干植物材料的溫度是_________℃。

5.細(xì)胞全能性是指植物的每個(gè)細(xì)胞都具有該植物的__________和__________的

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植物組織培養(yǎng)綜合測(cè)試題（二）

一、填空題（每空0.5分，共10分）

1.植物組織培