口腔鱗狀細(xì)胞癌采用沙利霉素的效果分析,口腔科學(xué)論文

口腔鱗狀細(xì)胞癌采用沙利霉素的效果分析,口腔科學(xué)論文摘要：目的：討論沙利霉素〔salinomycin〕對(duì)口腔鱗癌細(xì)胞增殖和凋亡的影響,并初步討論沙利霉素對(duì)信號(hào)通路的影響。方式方法：培養(yǎng)口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系CAL-27，將1、2、4、8、16和32mol/L沙利霉素和1.25、2.5、5、10、20、40和80mol/L順鉑與CAL-27細(xì)胞共同培養(yǎng)，24h和48h后用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(cellcountingkit-8，CCK-8)法檢測(cè)沙利霉素和順鉑對(duì)CAL-27細(xì)胞增殖的影響；0、2、4、8mol/L沙利霉素和0、5、10、20mol/L順鉑與CAL-27細(xì)胞共培養(yǎng)48h后，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)沙利霉素和順鉑對(duì)CAL-27細(xì)胞周期的影響，蛋白免疫印跡法〔Westernblot〕檢測(cè)CAL-27細(xì)胞中天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3〔cysteine-containingaspartate-specificproteases-3，Caspase-3〕,天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-9〔cysteine-containingaspartate-specificproteases-9，Caspase-9〕,脫氧核糖核酸〔deoxyribonucleicacid，DNA〕修復(fù)酶〔polyADP-ribosepolymerase，PARP〕,蛋白激酶B(proteinkinaseB,Akt)和磷酸化蛋白激酶B〔phosphorylatedProteinKinaseB，p-Akt〕的表示出。結(jié)果：通過CCK-8試驗(yàn)表示清楚沙利霉素和順鉑均能顯著抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞增殖且抑制作用呈時(shí)間依靠性和藥物濃度依靠性，但是相對(duì)于臨床一線化療藥物順鉑而言，沙利霉素對(duì)CAL-27細(xì)胞增殖的抑制效果愈加顯著〔P＜0.001〕。細(xì)胞周期檢測(cè)表示清楚與參加二甲基亞砜〔dimethylsulfoxide，DMSO〕的對(duì)照組相比，8mol/L沙利霉素與CAL-27細(xì)胞共同培養(yǎng)48h后，細(xì)胞休眠期/DNA合成前期的CAL-27細(xì)胞比例明顯升高〔40.40%1.99%vs.64.46%0.90%，P＜0.05〕，DNA合成期和DNA合成后期/有絲分裂期的CAL-27細(xì)胞比例出現(xiàn)降低〔24.32%2.30%vs.18.73%0.61%，P＜0.05，35.01%1.24%vs.16.54%1.31%，P＜0.05〕；順鉑對(duì)CAL-27細(xì)胞周期沒有特異性改變。蛋白免疫印跡法結(jié)果顯示沙利霉素在上調(diào)CAL-27細(xì)胞中Caspase-3和Caspase-9蛋白表示出〔P＜0.05〕的同時(shí)下調(diào)PARP、Akt和p-Akt蛋白的表示出〔P＜0.05〕。結(jié)論：相對(duì)于順鉑而言，沙利霉素對(duì)CAL-27細(xì)胞增殖有更強(qiáng)的抑制作用，并且能將口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞周期阻滯在細(xì)胞休眠期/DNA合成前期，同時(shí)能夠誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞發(fā)生凋亡，這一機(jī)制可能和Akt/p-Akt信號(hào)通路相關(guān)。本文關(guān)鍵詞語：沙利霉素;口腔鱗狀細(xì)胞癌;細(xì)胞周期;凋亡;Abstract：Objective:Thisstudywasaimedtoinvestigatetheeffectsofsalinomycinontheproliferationandapoptosisoforalsquamouscarcinomacellsandtofurtherunderstandthemechanismsoftheseeffects.Methods:ThehumanoralsquamouscarcinomacelllineCAL-27wasculturedindifferentconcentrationsofsalinomycinandcisplatin.Afterco-culturewith0,1,2,4,8,16and32mol/Lsalinomycinor0,1.25,2.5,5,10,20,40and80mol/Lcisplatinfor24hoursand48hours,theproliferationoforalsquamouscarcinomacellsweredetectedbycellcountingkit-8(CCK-8)assay.Afterexposedto0,2,4,8mol/Lsalinomycinand0,5,10,20mol/Lcisplatinfor48hours,thecellcycleoforalsquamouscarcinomacellswasdetectedbyflowcytometryassay,andWesternBlotanalysiswasperformedtoanalyzetheexpressionofcysteine-containingaspartate-specificproteases-3(Caspase-3),cysteine-containingaspartate-specificproteases-9(Caspase-9),polyADP-ribosepolymerase(PARP),proteinkinaseB(Akt)andphosphorylatedProteinKinaseB(p-Akt)proteininoralsquamouscarcinomacells.Results:BothsalinomycinandcisplatinsignificantlyinhibitedtheproliferationoforalsquamouscellcarcinomaCAL-27cellsinatime-anddose-dependentmanner.However,comparedwiththefirst-linechemotherapeuticdrugcisplatin,salinomycinshowedstrongeranti-proliferationactivityinoralsquamouscarcinomacellsthancisplatin(P0.001).Afterexposedto8mol/Lsalinomycin,CAL-27cellsexhibitedmarkedlyhigherproportioninquiescent/firstgapphases(40.40%1.99%vs.64.46%0.90%,P0.05),andhadasignificantlylowerproportioninsynthesisphasesandsecondgap/mitosisphases(24.32%2.30%vs.18.73%0.61%,P0.05;35.01%1.24%vs.16.54%1.31%,P0.05)comparedwiththedimethylsulfoxidecontrolgroup;moreovercisplatindidntshowcell-cyclespecificeffectonCAL-27.Westernblottingprovedthatsalinomycincouldup-regulatetheexpressionofCaspase-3andCaspase-9proteininoralsquamouscellcarcinomaCAL-27cells(P0.05).Atthesametime,thelevelofPARP,Aktandp-Aktproteinweredown-regulated(P0.05).Conclusion:Comparedwithcisplatin,salinomycinhasabetterinhibitoryeffectontheproliferationoforalsquamouscarcinomacellsandblocksthecellcycleprocessatthequiescent/firstgapphase.Atthesametime,salinomycincouldtriggerapoptosisoforalsquamouscarcinomacellsandthemechanismisassociatedwiththeAkt/p-Aktsignalingpathway.Keyword：Salinomycin;Oralsquamouscellcarcinoma;Cellcyclearrest;Apoptosis;口腔癌是人類常見惡性腫瘤之一，每年有超過30萬口腔癌新發(fā)病例，占全球新發(fā)腫瘤病例數(shù)的2.1%，口腔癌中超過90%是口腔鱗狀細(xì)胞癌，占全球惡性腫瘤的1%~2%[1]。當(dāng)前，中國的口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)病率占惡性腫瘤總發(fā)病率的1.5%～5.6%[2]。固然手術(shù)治療結(jié)合術(shù)后放射治療、化學(xué)治療作為當(dāng)前口腔鱗狀細(xì)胞癌治療的主要途徑獲得了較好的療效，但是由于術(shù)后局部復(fù)發(fā)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，5年生存率僅為55%[3]?？谇击[狀細(xì)胞癌已經(jīng)出現(xiàn)了耐藥的現(xiàn)象，順鉑等一線化療藥物并不能全面遏制口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)展[4]，因而尋找更高層次效的藥物對(duì)抗口腔鱗狀細(xì)胞癌的任務(wù)顯得特別迫切。沙利霉素是1974年從白色鏈霉菌發(fā)酵液中分離出的一種羧基聚醚類鉀離子載體抗生素，被廣泛應(yīng)用于防治家禽的球蟲病，并在2018年初次發(fā)現(xiàn)沙利霉素能夠選擇性的殺死乳腺癌腫瘤干細(xì)胞，其效果比臨床常用乳腺癌化療藥物紫杉醇高出100倍以上[5]。此后的研究表示清楚沙利霉素能夠有效抑制卵巢癌[6]、鼻咽癌[7]、乳腺癌[8]和肺癌[9]等多種腫瘤細(xì)胞的增殖并促進(jìn)其凋亡，但沙利霉素對(duì)于口腔鱗狀細(xì)胞癌的作用尚不清楚。本研究旨在觀察沙利霉素對(duì)口腔鱗狀細(xì)胞癌的細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和凋亡的影響，并在分子水平初步討論沙利霉素作用的機(jī)制。1、資料與方式方法1.1、材料與試劑沙利霉素[溶于二甲基亞砜〔dimethylsulfoxide，DMSO〕后，配置成所需濃度的溶液]、順鉑和DMSO購于美國Sigma公司；胎牛血清(fetalbovineserum，F(xiàn)BS)和磷酸緩沖鹽溶液〔phosphatebuffersaline，PBS〕購自美國Gibco公司;RPMI-1640培養(yǎng)基購于美國Hyclone公司；細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8(cellcountingkit-8，CCK-8)、放射免疫沉淀分析〔radioimmunoprecipitationassay，RIPA〕裂解液、蛋白濃度測(cè)定試劑盒(bicinchoninicacid，BCA)購自上海碧云天生物技術(shù)公司；細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒購于上海七海生物公司；兔抗人多克隆抗體天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-3〔cysteine-containingaspartate-specificproteases-3，Caspase-3〕、天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-9〔cysteine-containingaspartate-specificproteases-9，Caspase-9〕、脫氧核糖核酸〔deoxyribonucleicacid，DNA〕修復(fù)酶〔polyADP-ribosepolymerase，PARP〕、蛋白激酶B〔proteinkinaseB，Akt〕和磷酸化蛋白激酶B〔phosphorylatedproteinkinaseB，p-Akt〕購自英國Abcam公司；二抗抗體購自北京索萊寶科技公司;人口腔鱗癌細(xì)胞系CAL-27購自美國形式培養(yǎng)物集存庫。1.2、細(xì)胞培養(yǎng)人口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞復(fù)蘇后，使用含10%〔體積分?jǐn)?shù)〕胎牛血清的RMPI-1640培養(yǎng)基在37℃、5%CO2〔體積分?jǐn)?shù)〕的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每2天更換1次培養(yǎng)基。當(dāng)細(xì)胞到達(dá)80%融合度時(shí)，用0.25%胰蛋白酶消化細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1.3、CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖取對(duì)數(shù)生長期CAL-27細(xì)胞，PBS洗滌后用0.25%胰蛋白酶消化細(xì)胞，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度。以每孔5.0103個(gè)細(xì)胞接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔參加100L培養(yǎng)液。24h后PBS洗滌，沙利霉素實(shí)驗(yàn)組中分別參加1、2、4、8、16和32mol/L的沙利霉素；順鉑實(shí)驗(yàn)組中分別參加1.25、2.5、5、10、20、40和80mol/L的順鉑，另外設(shè)置無藥物處理組為陰性對(duì)照，孔內(nèi)不含藥物和細(xì)胞的培養(yǎng)基為空白調(diào)零組，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組、空白調(diào)零組均設(shè)置6個(gè)復(fù)孔。加藥培養(yǎng)24h和48h后，吸棄培養(yǎng)基后每孔加10L的CCK-8液繼續(xù)培養(yǎng)；4h后選擇450nm波長，用酶標(biāo)儀(Thermo公司，美國)測(cè)定各孔光密度值，根據(jù)光密度值評(píng)估沙利霉素和順鉑處理后的細(xì)胞存活率。1.4、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期取對(duì)數(shù)生長期的CAL-27細(xì)胞消化、計(jì)數(shù)，1106/孔接種于六孔板中培養(yǎng)24h后，沙利霉素實(shí)驗(yàn)組分別參加2、4和8mol/L的沙利霉素，順鉑實(shí)驗(yàn)組分別參加5、10和20mol/L的順鉑，對(duì)照組參加與實(shí)驗(yàn)組等量的培養(yǎng)基,培養(yǎng)48h后,胰酶消化后收集細(xì)胞，1000r/min離心5min，棄上清液，加PBS洗滌細(xì)胞2次,并用預(yù)冷的70%乙醇固定,4℃冰箱內(nèi)過夜。分析前用PBS洗滌樣本2次,終濃度為50mg/L的RNA酶及碘化丙啶，4℃避光孵育30min后上機(jī)檢測(cè)細(xì)胞周期的分布。1.5、蛋白免疫印跡將濃度為2、4和8mol/L的沙利霉素和DMSO與CAL-27細(xì)胞共同培養(yǎng)48h后，棄培養(yǎng)液，參加RIPA裂解液后在冰上收集細(xì)胞，在4℃下離心〔12000r/min，10min〕。利用BCA法測(cè)定蛋白濃度，將蛋白質(zhì)〔50g〕進(jìn)行十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis，SDS)，并用濕轉(zhuǎn)法將蛋白轉(zhuǎn)移到聚偏氟乙烯[poly(vinylidenefluoride)，PVDF]膜上。5%脫脂奶粉室溫封閉2h后，將一抗Akt、p-Akt、Caspase-3、Caspase-9和PARP〔1：1000稀釋〕4℃下孵育過夜。TBTS緩沖液〔trisbufferedsaline，withtween-20〕漂洗三次后參加二抗〔1：3000稀釋〕室溫下孵育1h，參加加強(qiáng)熒光發(fā)光試劑顯影，使用圖像成像系統(tǒng)分析各條帶。1.6、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間生長抑制率的差異性比擬采用單因素方差分析，細(xì)胞周期變化以及蛋白表示出差異則通過Levene方差齊性檢驗(yàn)組間的方差齊性，方差齊采用單因素方差分析(One-wayANOVA)，組間兩兩比擬采用LSD-t法檢驗(yàn)，P＜0.05被以為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、結(jié)果2.1、沙利霉素顯著抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞增殖通過CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沙利霉素及順鉑對(duì)CAL-27細(xì)胞增殖的影響，發(fā)現(xiàn)順鉑和沙利霉素均對(duì)CAL-27細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用〔圖1A、B〕，且抑制作用呈現(xiàn)藥物濃度和時(shí)間依靠的方式。沙利霉素處理24h和48h后，CAL-27的半抑制濃度〔halfmaximalinhibitoryconcentration，IC50〕值分別為〔7.980.42〕mol/L和〔2.980.29〕mol/L，明顯低于順鉑處理組24h和48h的IC50值[〔15.751.14〕mol/L,〔6.570.32〕mol/L]，這些結(jié)果表示清楚，沙利霉素對(duì)CAL-27細(xì)胞的增殖抑制作用較順鉑更強(qiáng)〔P＜0.001〕。圖1沙利霉素〔A〕和順鉑〔B〕對(duì)CAL-27細(xì)胞增殖的影響下載原圖Figure1Theanti-proliferationeffectsofsalinomycin(A)andcisplatin(B)onCAL-27celllines2.2、沙利霉素對(duì)CAL-27細(xì)胞周期的影響對(duì)沙利霉素處理48h的CAL-27細(xì)胞進(jìn)行碘化丙啶染色，隨后通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期變化。如此圖2A所示，與對(duì)照組相比，沙利霉素處理組CAL-27細(xì)胞在DNA合成期和DNA合成后期/有絲分裂期比例明顯減少，但在細(xì)胞休眠期/DNA合成前期比例顯著增加〔40.40%1.99%，52.72%1.61%,63.15%1.63%和64.46%0.90%，P＜0.05〕，這講明CAL-27細(xì)胞以劑量依靠性方式誘導(dǎo)細(xì)胞休眠期/DNA合成前期細(xì)胞周期阻滯，但是4mol/L和8mol/L沙利霉素處理后，CAL-27細(xì)胞周期沒有顯著改變〔P0.2〕。如此圖2B所示，與對(duì)照組DNA合成期〔38.85%0.99%〕相比，順鉑處理組在DNA合成期比例明顯增加〔58.64%2.59%，93.67%1.03%，46.34%3.22%〕，但是沒有藥物濃度依靠性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果整體表示清楚順鉑對(duì)CAL-27各個(gè)細(xì)胞周期均有影響，不存在細(xì)胞周期特異性，并且無藥物濃度依靠性。圖2沙利霉素和順鉑對(duì)CAL-27細(xì)胞周期的影響2.3、沙利霉素誘導(dǎo)口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞凋亡對(duì)沙利霉素處理48h后的CAL-27細(xì)胞進(jìn)行Westernblot檢測(cè)，圖3中結(jié)果顯示沙利霉素在上調(diào)口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞中Caspase-3和Caspase-9蛋白表示出〔P＜0.05〕的同時(shí)能夠下調(diào)PARP蛋白的表示出〔P＜0.05〕，這一結(jié)果表示清楚沙利霉素誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞凋亡，同時(shí)沙利霉素可以誘導(dǎo)DNA修復(fù)酶〔PARP〕裂解。為了解沙利霉素在CAL-27細(xì)胞凋亡中的分子基礎(chǔ)，通過Westernblot檢測(cè)了Akt和p-Akt蛋白，結(jié)果顯示4mol/L和8mol/L沙利霉素處理后Akt和p-Akt蛋白的表示出均降低，p-Akt蛋白更為顯著〔P＜0.05〕。圖3沙利霉素對(duì)CAL-27細(xì)胞凋亡以及凋亡信號(hào)通路的影響3、討論本研究顯示沙利霉素能夠有效抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞的增殖，且抑制作用呈現(xiàn)時(shí)間與藥物濃度依靠性。與口腔癌臨床一線化療藥物順鉑相比，沙利霉素對(duì)于口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞的增殖抑制作用愈加明顯〔P＜0.001〕。為了進(jìn)一步研究沙利霉素對(duì)于口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞的增殖抑制作用，本次研究對(duì)沙利霉素作用后的CAL-27細(xì)胞周期進(jìn)行了檢測(cè)，結(jié)果顯示與對(duì)照組相比，沙利霉素處理組CAL-27細(xì)胞在DNA合成期和DNA合成后期/有絲分裂期比例明顯減少，但在細(xì)胞休眠期/DNA合成前期比例顯著增加，這講明沙利霉素能將CAL-27細(xì)胞阻滯在細(xì)胞休眠期/DNA合成前期，這與Parajuli等[10]關(guān)于沙利霉素對(duì)卵巢癌的細(xì)胞周期阻滯結(jié)果相符。但我們的研究顯示4mol/L和8mol/L沙利霉素處理后CAL-27細(xì)胞周期變化差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表示清楚4mol/L沙利霉素能夠?qū)AL-27細(xì)胞阻滯在細(xì)胞休眠期/DNA合成前期，并且沙利霉素還有其他途徑能夠抑制CAL-27細(xì)胞增殖。同時(shí)本次研究對(duì)順鉑作用后的CAL-27細(xì)胞周期進(jìn)行了檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示順鉑對(duì)CAL-27各個(gè)細(xì)胞周期均有影響，不存在細(xì)胞周期特異性，并且無藥物濃度依靠性。通過回首文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)我們的結(jié)果與亓放等[11]在1999年提出順鉑為細(xì)胞周期非特異性化療藥物這一觀點(diǎn)相符，并且與徐志巧等[12]于2020年主編的(實(shí)用腫瘤臨床藥物手冊(cè)〕內(nèi)描繪敘述順鉑為細(xì)胞周期非特異性藥物的結(jié)論一致。凋亡是是抑制腫瘤生長的一個(gè)重要方式，鉀離子在細(xì)胞凋亡的經(jīng)過中扮演著特別重要的角色，而沙利霉素作為一種離子載體能夠有效降低細(xì)胞間的鉀離子水平[13]?；厥准韧墨I(xiàn)發(fā)現(xiàn)，Nuutinen等[14]在2006年提出多種腫瘤內(nèi)出現(xiàn)Akt通路的激活并在抑制凋亡中起到重要作用，另外Jeong等[15]于2008年在研究中提出活化的天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶-9和Caspase-9均在細(xì)胞凋亡中起作用，并且Caspase9在誘導(dǎo)凋亡中作用愈加明顯，所以本次實(shí)驗(yàn)通過Westernblot檢測(cè)凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的同時(shí)，檢測(cè)與其相關(guān)的重要蛋白如PARP,Akt和p-Akt進(jìn)一步佐證沙利霉素誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞凋亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)沙利霉素作用于CAL-27細(xì)胞后，Caspase-3和Caspase-9蛋白表示出發(fā)生了上調(diào)，同時(shí)引起了DNA修復(fù)酶〔PARP〕的裂解，這提示沙利霉素能夠誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞發(fā)生凋亡。另外本次實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)沙利霉素能夠降低Akt和p-Akt蛋白的表示出，且4mol/L和8mol/L沙利霉素對(duì)降低p-Akt蛋白表示出愈加顯著，因而揣測(cè)沙利霉素誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞發(fā)生凋亡的機(jī)制可能與降低Akt和p-Akt蛋白表示出水平相關(guān)。通常，我們希望化療藥物在能有效殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)能夠?qū)φ＜?xì)胞產(chǎn)生較小或者不產(chǎn)生副作用。有報(bào)道表示清楚沙利霉素優(yōu)先作用于腫瘤細(xì)胞而非正常細(xì)胞，F(xiàn)uchs等[13]研究顯示沙利霉素能誘導(dǎo)白血病CD4+T細(xì)胞凋亡，但對(duì)正常CD4+T淋巴細(xì)胞沒有影響。Ketola[16]研究顯示，較低劑量的沙利霉素如1mol/L和1.33mol/L對(duì)人前列腺癌細(xì)胞有著高效的抑制作用，但對(duì)正常前列腺細(xì)胞沒有毒性作用。Kaplan等[17]的研究表示清楚，1mol/L沙利霉素對(duì)卵巢上皮細(xì)胞沒有毒性作用，但是這個(gè)濃度卻能抑制卵巢癌細(xì)胞的增殖，這些研究表示清楚沙利霉素對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高效的殺傷作用，但對(duì)正常細(xì)胞的毒性卻很小。綜上所述，本實(shí)驗(yàn)證實(shí)沙利霉素能夠有效抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌CAL-27細(xì)胞的增殖，并且能將CAL-27細(xì)胞阻滯于細(xì)胞休眠期/DNA合成前期，同時(shí)沙利霉素能夠通過下調(diào)Akt和p-Akt蛋白表示出并激活Caspase-3和Caspase-9蛋白，促進(jìn)DNA修復(fù)酶〔PARP〕的裂解來誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞的凋亡，這為今后口腔鱗狀細(xì)胞癌的治療提供了新的思路。以下為參考文獻(xiàn)[1]FerlayJ,Soerjomataram1I,DikshitR，etal.Cancerincidenceandmortalityworldwide:Sources,methodsandmajorpatternsinGLOBOCAN2020［J］.IntJCancer,2021,136(5):E359E386.[2]孟憲瑞，劉進(jìn)忠.口腔癌的早期診斷［J］.國際口腔醫(yī)學(xué)雜志，2008，35(3):329－331．[3]Abrah?oR，AnantharamanD，GaborieauV，etal.Theinfluenceofsmoking,ageandstageatdiagnosisonthesurvivalafterlarynx,hypopharynxandoralcavitycancersinEurope:TheARCAGEstudy［J］.IntJCancer,2021,143(1):3244.[4]ChoH，NishiikeS,YamamotoY，etal.Docetaxel,cisplatin,andfluorouracilforpatientswithinoperablerecurrentormetastaticheadandnecksquamouscellcarcinoma［J］.AurisNasusLarynx,2021,42(5):396400.[5]GuptaPB,OnderTT,JiangG，etal.Identificationofselectiveinhibitorsofcancerstemcellsbyhigh-throughputscreening［J］.Cell,2018,138(4):645-659．[6]ZhangB,WangX,CaiF，etal.EffectsofsalinomycinonhumanovariancancercelllineOV2008areassociatedwithmodulatingp38MAPK［J］.TumorBiol,2020,33(6):1855-1862[7]WuD,ZhangY,HuangJ,etal.Salinomycininhibitsproliferationandinducesapoptosisofhumannasopharyngealcarcinomacellinvitroandsuppressestumorgrowthinvivo［J］.BiochemBiophResCo,2020,443(2):712-717.[8]DhaheriAI,AttoubS,ArafatK,etal.Salinomycininducesapoptosisandsenescenceinbreastcancer:Upregulationofp21,downregulationofsurvivinandhistoneH3andH4hyperacetylation［J］.BBA-GENSubjects,2020,1830(4):3121-3135.[9]ArafatK,IratniR,TakahashiT,etal.InhibitoryEffectsofSalinomycinonCellSurvival,ColonyGrowth,Migration,andInvasionofHumanNon-SmallCellLungCancerA549