VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成課件

VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成作用的研究開題報告VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成作用的研究開1VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成課件2VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成課件3提綱4國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義17研究內(nèi)容及實驗方案243擬解決的問題可行性分析創(chuàng)新性56計劃進度、預(yù)期結(jié)果經(jīng)費落實情況及使用計劃2023/1/1提綱4國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義17研究內(nèi)容及實驗方案243擬解4國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義51.肺癌是臨床常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率及死亡率居各種癌癥之首，發(fā)病機制尚不完全清楚。2.肺癌豐富且形態(tài)多樣的新生血管在其快速生長和侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。3.針對抗血管生成，尋找新的靶點成為研究的熱點。2023/1/1國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義51.肺癌是臨床常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率5血管生成6正常正常微血管結(jié)構(gòu)高度有序，由內(nèi)皮細胞構(gòu)成管腔，周細胞趨附并覆蓋內(nèi)皮細胞管道外面，血管結(jié)構(gòu)完整穩(wěn)定。腫瘤在腫瘤血管中，周細胞形態(tài)異常，功能不足，連接松散甚至缺如，周細胞對內(nèi)皮細胞作用減弱，導(dǎo)致血管擴張和滲。2023/1/1血管生成6正常正常微血管結(jié)構(gòu)高度有序，由內(nèi)皮細胞構(gòu)成管腔，周6血管生成72023/1/1血管生成72022/12/277腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)因子82023/1/1腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)因子82022/12/278VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)2004年WatanabeDNA微陣分析實驗發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子誘導(dǎo)人的臍靜脈內(nèi)皮細胞基因表達譜VASH-1與VASH-2，兩者52.5%的同源氨基酸序列方法誘導(dǎo)劑分類2023/1/1VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)20049VASH-1，位于人染色體14q24.3，由365個氨基酸組成，在C末端有一簇堿性氨基酸，但此序列中缺乏經(jīng)典的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分泌信號序列，也不與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標記蛋白共定位，為非傳統(tǒng)的蛋白主要由血管內(nèi)皮細胞分泌。VASH-2，位于染色體1q32.3上，由355個氨基酸組成。在內(nèi)皮細胞上表達很低，目前研究顯示主要由壞死邊緣區(qū)的單核細胞分泌。

VASH2023/1/1VASH-1，位于人染VASH-2，位于VASH2022/110VASH作用VASH-1的作用：通過血管內(nèi)皮生長因子和纖維細胞生長因子的負反饋作用，抑制血管生成。VASH-2的作用，實驗表明：具有促血管生成的作用，是否與血管內(nèi)皮生長因子有關(guān)，說法不一，具體機制不詳。2023/1/1VASH作用VASH-1的作用：通過血管內(nèi)皮生長因子和纖維細11VASH在腫瘤血管生成中最新的報道王啟志（2012.4）

肝癌中研究表明：VASH-1與血管內(nèi)皮因子A（VascularendothelialgrowthfactorA,VEGF-A）、CD34具有相關(guān)性，與肝癌侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。王志娜等（2013.7）對肝癌組織采用免疫組化的方法，結(jié)果表明：VASH-1與缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）在病變組織中兩者的表達成正相關(guān)，HIF-α能夠誘導(dǎo)VEGF的分泌。122023/1/1VASH在腫瘤血管生成中最新的報道王啟志（2012.4）12VASH在腫瘤血管生成中最新的報道YazdaniS等（2013.8）

研究表明：肺癌中vasohibin-1/CD31-陽性率代表新生血管在肺癌中的地位，但沒有組織病理性的差異性，但血管成熟程度鱗癌低于腺癌，考慮可能是在抗血管生成治療中，鱗癌副作用較多的原因。KoyanagiT等（2013.12）

研究表明：肝癌中的VASH-2過表達時，核因子（Nuclearfactorkb，NF-kB）上調(diào)。KoyanagiT等在對卵巢癌研究中限制VASH-2表達，有助于血管的正常化。132023/1/1VASH在腫瘤血管生成中最新的報道132022/12/2713川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP）是從中藥川芎中分離出來的一種生物堿，即四甲基吡嗪。隨著研究的不斷深入，在抗腫瘤方面有新的突破。研究顯示：1.在不同的腫瘤部位，抗腫瘤血管生成的機制不同，比如：肺癌-環(huán)氧化酶2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、大腸癌-缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）；2.具有直接殺傷癌細胞的作用。川芎嗪與VASH家族關(guān)系有待進一步研究。142023/1/1川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP14順鉑

順鉑屬細胞周期非特異性藥物，具有細胞毒性，可抑制癌細胞的DNA復(fù)制過程，并損傷其細胞膜上結(jié)構(gòu)，有較強的廣譜抗癌作用。臨床用于卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等多種實體腫瘤均能顯示療效。兩者聯(lián)合是否通過作用于VASH具有協(xié)同抗腫瘤作用。152023/1/1順鉑順鉑屬細胞周期非特異性藥物，具有細胞毒性，可抑制癌細15研究意義通過對肺癌組織中VASH在血管生成中的作用，有助于深入了解此腫瘤的發(fā)生發(fā)展機制?？勺鳛樵缙陬A(yù)測血管轉(zhuǎn)移的參考指標，同時也為預(yù)防腫瘤提供理論依據(jù)。川芎嗪與順鉑的聯(lián)合作用于VASH-VEGF-CD31通路，有助于指導(dǎo)臨床用藥。NO1NO2NO32023/1/1研究意義通過對肺癌組織中VASH在血管生成中的作用，有16研究內(nèi)容及方案研究內(nèi)容：本實驗通過使用LLC(LewisLungCell)注射C57BL/6小鼠，建立肺腺移植瘤癌模型，空白對照組與腹腔注射用藥組，脫頸處死，取出瘤組織，采用透射電鏡、免疫組化、蛋白印跡技術(shù)，觀察藥物作用前后腫瘤細胞形態(tài)學(xué)的改變，檢測VASH-1、HIF-α、VEGF、CD31及其VASH-2、NF-kB、VEGF、CD31在肺癌模型中的表達情況。172023/1/1研究內(nèi)容及方案研究內(nèi)容：本實驗通過使用LLC(LewisL17細胞培養(yǎng)，建立肺腺癌移植瘤模型待腫瘤直徑8mm左右，分成空白對照組與腹腔用藥組，2周空白對照組腹腔注射用藥4組生理鹽水組川芎嗪組順鉑組川芎嗪+順鉑組脫頸處死，取出瘤組織，標本制備整理數(shù)據(jù)，統(tǒng)計分析，撰寫論文免疫組化蛋白印跡透射電鏡2023/1/1細胞培養(yǎng)，建立肺腺癌移植瘤模型待腫瘤直徑8mm左右，分成空白18技術(shù)路線檢測VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成中的作用川芎嗪對以上通路的作用川芎嗪聯(lián)合順鉑協(xié)同對以上通路的作用2023/1/1技術(shù)路線檢測VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成19擬解決的問題3免疫組化染色過程中怎樣選用最佳的抗原修復(fù)方法和抗原修復(fù)液最大程度地暴露抗原決定簇、恢復(fù)抗原性。2

蛋白印跡技術(shù)濃縮標本使目的蛋白信號最大化，轉(zhuǎn)膜、洗膜、封閉的時間。1各種樣品標本的制備2023/1/1擬解決的問題3免疫組化染色過程中怎樣選用最佳的抗原修復(fù)方法和20

VASH在肺癌及其它腫瘤中有報道實驗中心有條件、有技術(shù)支持查閱文獻，了解國內(nèi)外現(xiàn)狀可行性分析前期發(fā)表腫瘤血管生成論文數(shù)篇成功建立肺腺癌移植瘤模型2023/1/1VASH在肺癌及其它腫瘤中有報道實驗中心有條件、有技21創(chuàng)新性VASH家族在肺腺癌各自調(diào)節(jié)血管生成的初步研究川芎嗪對VASH家族影響川芎嗪聯(lián)合順鉑對VASH家族的影響國內(nèi)關(guān)于VASH家族在腫瘤血管中作用報道相對較少2023/1/1創(chuàng)新性VASH家族在肺腺癌各川芎嗪對川芎嗪聯(lián)合順鉑對國內(nèi)關(guān)于22計劃進度與預(yù)期進展計劃進度2013年3月-2013年10月查找文獻。2013年11月-2014年2月完成預(yù)實驗。2014年3月-2014年7月完成實驗。2014年8月-2014年10月整理數(shù)據(jù)，撰寫論文。預(yù)期進展2013年3月-2013年10月查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻，了解國內(nèi)外最新研究現(xiàn)狀。2013年11月-2014年2月完成預(yù)實驗，掌握相關(guān)技術(shù)方法。2014年3月-2014年7月完成實驗。2014年8月-2014年10月整理數(shù)據(jù)，撰寫論文。232023/1/1計劃進度與預(yù)期進展計劃進度232022/12/2723實驗圖片2023/1/1實驗圖片2022/12/27242023/1/12022/12/2725實驗圖像262023/1/1實驗圖像262022/12/2726實驗圖像2023/1/1實驗圖像2022/12/2727四組小鼠腹腔注射用藥后體重變化情況2023/1/1四組小鼠腹腔注射用藥后體重變化情況2022/12/2728四組小鼠腹腔注射用藥后腫瘤體積變化情況2023/1/1四組小鼠腹腔注射用藥后腫瘤體積變化情況2022/12/2729預(yù)期結(jié)果預(yù)期發(fā)表論文1-2篇預(yù)期理論結(jié)果：1.闡述VASH-1與VASH-2在肺腺癌中血管生成的可能機制。2.川芎嗪對VASH血管生成通路的影響，間接對VASH起作用，證明通路的正確性。3.川芎嗪聯(lián)合順鉑協(xié)同對VASH作用。302023/1/1預(yù)期結(jié)果預(yù)期發(fā)表論文1-2篇302022/12/2730實驗經(jīng)費經(jīng)費來源：導(dǎo)師經(jīng)費落實情況：已落實使用計劃：Lewis細胞株600元

C57BL/6小鼠2400元四季青胎牛血清2200元抗體10000元其它2000元312023/1/1實驗經(jīng)費經(jīng)費來源：導(dǎo)師經(jīng)費312022/12/2731歡迎各位專家和老師提出寶貴意見！322023/1/1歡迎各位專家和老師提出寶貴意見！322022/12/2732VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成作用的研究開題報告VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成作用的研究開33VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成課件34VASH-VEGF-CD31通路對肺腺癌血管生成課件35提綱36國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義17研究內(nèi)容及實驗方案243擬解決的問題可行性分析創(chuàng)新性56計劃進度、預(yù)期結(jié)果經(jīng)費落實情況及使用計劃2023/1/1提綱4國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義17研究內(nèi)容及實驗方案243擬解36國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義371.肺癌是臨床常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率及死亡率居各種癌癥之首，發(fā)病機制尚不完全清楚。2.肺癌豐富且形態(tài)多樣的新生血管在其快速生長和侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。3.針對抗血管生成，尋找新的靶點成為研究的熱點。2023/1/1國內(nèi)外研究現(xiàn)狀及意義51.肺癌是臨床常見的惡性腫瘤，其發(fā)病率37血管生成38正常正常微血管結(jié)構(gòu)高度有序，由內(nèi)皮細胞構(gòu)成管腔，周細胞趨附并覆蓋內(nèi)皮細胞管道外面，血管結(jié)構(gòu)完整穩(wěn)定。腫瘤在腫瘤血管中，周細胞形態(tài)異常，功能不足，連接松散甚至缺如，周細胞對內(nèi)皮細胞作用減弱，導(dǎo)致血管擴張和滲。2023/1/1血管生成6正常正常微血管結(jié)構(gòu)高度有序，由內(nèi)皮細胞構(gòu)成管腔，周38血管生成392023/1/1血管生成72022/12/2739腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)因子402023/1/1腫瘤血管生成的調(diào)節(jié)因子82022/12/2740VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)2004年WatanabeDNA微陣分析實驗發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子誘導(dǎo)人的臍靜脈內(nèi)皮細胞基因表達譜VASH-1與VASH-2，兩者52.5%的同源氨基酸序列方法誘導(dǎo)劑分類2023/1/1VASH(Vasohibin,血管新生抑制蛋白)200441VASH-1，位于人染色體14q24.3，由365個氨基酸組成，在C末端有一簇堿性氨基酸，但此序列中缺乏經(jīng)典的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分泌信號序列，也不與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)標記蛋白共定位，為非傳統(tǒng)的蛋白主要由血管內(nèi)皮細胞分泌。VASH-2，位于染色體1q32.3上，由355個氨基酸組成。在內(nèi)皮細胞上表達很低，目前研究顯示主要由壞死邊緣區(qū)的單核細胞分泌。

VASH2023/1/1VASH-1，位于人染VASH-2，位于VASH2022/142VASH作用VASH-1的作用：通過血管內(nèi)皮生長因子和纖維細胞生長因子的負反饋作用，抑制血管生成。VASH-2的作用，實驗表明：具有促血管生成的作用，是否與血管內(nèi)皮生長因子有關(guān)，說法不一，具體機制不詳。2023/1/1VASH作用VASH-1的作用：通過血管內(nèi)皮生長因子和纖維細43VASH在腫瘤血管生成中最新的報道王啟志（2012.4）

肝癌中研究表明：VASH-1與血管內(nèi)皮因子A（VascularendothelialgrowthfactorA,VEGF-A）、CD34具有相關(guān)性，與肝癌侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。王志娜等（2013.7）對肝癌組織采用免疫組化的方法，結(jié)果表明：VASH-1與缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）在病變組織中兩者的表達成正相關(guān)，HIF-α能夠誘導(dǎo)VEGF的分泌。442023/1/1VASH在腫瘤血管生成中最新的報道王啟志（2012.4）44VASH在腫瘤血管生成中最新的報道YazdaniS等（2013.8）

研究表明：肺癌中vasohibin-1/CD31-陽性率代表新生血管在肺癌中的地位，但沒有組織病理性的差異性，但血管成熟程度鱗癌低于腺癌，考慮可能是在抗血管生成治療中，鱗癌副作用較多的原因。KoyanagiT等（2013.12）

研究表明：肝癌中的VASH-2過表達時，核因子（Nuclearfactorkb，NF-kB）上調(diào)。KoyanagiT等在對卵巢癌研究中限制VASH-2表達，有助于血管的正常化。452023/1/1VASH在腫瘤血管生成中最新的報道132022/12/2745川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP）是從中藥川芎中分離出來的一種生物堿，即四甲基吡嗪。隨著研究的不斷深入，在抗腫瘤方面有新的突破。研究顯示：1.在不同的腫瘤部位，抗腫瘤血管生成的機制不同，比如：肺癌-環(huán)氧化酶2（Cyclooxygenase-2，COX-2）、大腸癌-缺氧因子1α（hypoxiainduciblefactor1alpha，HIF-1α）；2.具有直接殺傷癌細胞的作用。川芎嗪與VASH家族關(guān)系有待進一步研究。462023/1/1川芎嗪川芎嗪（tetramehtylpyrazine，TMP46順鉑

順鉑屬細胞周期非特異性藥物，具有細胞毒性，可抑制癌細胞的DNA復(fù)制過程，并損傷其細胞膜上結(jié)構(gòu)，有較強的廣譜抗癌作用。臨床用于卵巢癌、前列腺癌、睪丸癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等多種實體腫瘤均能顯示療效。兩者聯(lián)合是否通過作用于VASH具有協(xié)同抗腫瘤作用。472023/1/1順鉑順鉑屬細胞周期非特異性藥物，具有細胞毒性，可抑制癌細47研究意義通過對肺癌組織中VASH在血管生成中的作用，有助于深入了解此腫瘤的發(fā)生發(fā)展機制?？勺鳛樵缙陬A(yù)測血管轉(zhuǎn)移的參考指標，同時也為預(yù)防腫瘤提供理論依據(jù)。川芎嗪與順鉑的聯(lián)合作用于VASH-VEGF-CD31通路，有助于指導(dǎo)臨床用藥。NO1NO2NO32023/1/1研究意義通過對肺癌組織中VASH在血管生成中的作用，有48研究內(nèi)容及方案研究內(nèi)容：本實驗通過使用LLC(LewisLungCell)注射C57BL/6小鼠，建立肺腺移植瘤癌模型，空白對照組與腹腔注射用藥組，脫頸處死，取出瘤組織，采用透射電鏡、免疫組化、蛋白印跡技術(shù)，觀察藥物作用前后腫瘤細胞形態(tài)學(xué)的改變，檢測VASH-1、HIF-α、VEGF、CD31及其VASH-2、NF-kB、VEGF、CD31在肺癌模型中的表達情況。492023/1/1研究內(nèi)容及方案研究內(nèi)容：本實驗通過使用LLC(LewisL49細胞培養(yǎng)，建立肺腺癌移植瘤模型待腫瘤直徑8mm左右，分成空白對照組與腹腔用藥組，2周空白對照組腹腔注射用藥4組生理鹽水組川芎嗪組順鉑組川芎嗪+順鉑組脫頸處死，取出瘤組織，標本制備整理數(shù)據(jù)，統(tǒng)計分析，撰寫論文免疫組化蛋白印跡透射電鏡2023/1/1細胞培養(yǎng)，建立肺腺癌移植瘤模型待腫瘤直徑8mm左右，分成空白50技術(shù)路線檢測VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成中的作用川芎嗪對以上通路的作用川芎嗪聯(lián)合順鉑協(xié)同對以上通路的作用2023/1/1技術(shù)路線檢測VASH-VEGF-CD31通路在肺腺癌血管生成51擬解決的問題3免疫組化染色過程中怎樣選用最佳的抗原修復(fù)方法和抗原修復(fù)液最大程度地暴露抗原決定簇、恢復(fù)抗原性。2

蛋白印跡技術(shù)濃縮標本使目的蛋白信號最大化，轉(zhuǎn)膜、洗膜、封閉的時間。1各種樣品標本的制備2023/1/1擬解決的問題3免疫組化染色過程中怎樣選用最佳的抗原修復(fù)方法和52

VASH在肺癌及其它腫瘤中有報道實驗中心有條件、有技術(shù)支持查閱文獻，了解國內(nèi)外現(xiàn)狀可行性分析前期發(fā)表腫瘤血管生成論文數(shù)篇成功建立肺腺癌移植瘤模型2023/1/1VASH在肺癌及其它腫瘤中有報道實驗中心有條件、有技53創(chuàng)新性VASH家族在肺腺癌各自調(diào)節(jié)血管生成的初步研究川芎嗪對VASH家族影響川芎嗪聯(lián)合順鉑對VASH家族的影響國內(nèi)關(guān)于VASH家族在腫瘤血管中作用報道相對較少2023/1/1創(chuàng)新性VASH家族在肺腺癌各川芎嗪對川芎嗪聯(lián)合順鉑對國內(nèi)關(guān)于54計劃進度與預(yù)期進展計劃進度2013年3月-2013年10月查找文獻。2013年11月-2014年2月完成預(yù)實驗。2014年3月-2014年7月完成實驗。2014年8月-2014年10月整理數(shù)