21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件

專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題2課題1㈠.微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類：細(xì)菌、支原體、衣原體、放線菌、藍(lán)藻個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡單酵母菌、霉菌、食用菌真菌：原生生物：顯微藻類、原生生物（如：草履蟲、變形蟲等）病毒、類病毒、朊病毒◆微生物的共同特點(diǎn)：一.微生物基礎(chǔ)知識(shí)㈠.微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類：細(xì)菌、支原體、1.細(xì)菌的形態(tài)1.細(xì)菌的形態(tài)擬核，大型環(huán)狀DNA質(zhì)粒(小型環(huán)狀DNA，含抗生素，抗藥性，固氮基因)其成分為肽聚糖2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)特殊結(jié)構(gòu)（有時(shí)包括芽孢）擬核，大型環(huán)狀DNA質(zhì)粒(小型環(huán)狀DNA，含抗生素，抗藥性芽孢

有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。（抗逆性極強(qiáng)）注：不是繁殖體芽孢有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌.例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可細(xì)菌主要是以二分裂的方式進(jìn)行增殖（如右圖）3.細(xì)菌的繁殖4.細(xì)菌的菌落⑴.定義：單個(gè)或者少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。⑵.特征：大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等。⑶.功能：每種細(xì)菌在一定條件下所形成的菌落，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。細(xì)菌主要是以二分裂的方式進(jìn)行增殖（如右圖）3.細(xì)菌的繁殖4.幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)5.病毒的結(jié)構(gòu):由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成。5.病毒的結(jié)構(gòu):由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成。病毒的結(jié)構(gòu)病毒的結(jié)構(gòu)吸附注入合成釋放組裝6.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五個(gè)階段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白質(zhì)→組裝→釋放6.病毒的營養(yǎng)方式：寄生吸附注入合成釋放組裝6.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五個(gè)階段微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)是：㈡.微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能1.水2.碳源3.氮源4.無機(jī)鹽5.生長因子微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)是：㈡.微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及1.碳源：為微生物提供碳元素。無機(jī)碳化合物——CO2、NaHCO3等有機(jī)碳化合物糖類（最常用的碳源，尤其是葡萄糖）烴類、醇類、脂肪酸蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等（有機(jī)大分子）牛肉膏、蛋白胨、花生粉餅、石油（天然）1.碳源：為微生物提供碳元素。無機(jī)碳化合物——CO2、NaH2.氮源:N2NH3等有機(jī)物中的氮（還有尿素）無機(jī)氮牛肉膏、蛋白胨為微生物提供氮元素。圓褐固氮菌、硝化細(xì)菌和大腸桿菌氨鹽、硝酸鹽等是常用的氮源氮源主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物2.氮源:N2NH3等有機(jī)物中的氮（還有尿素）無機(jī)氮牛肉膏、自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()A．碳源B．氮源C．無機(jī)鹽D．特殊營養(yǎng)物質(zhì)A自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()3.生長因子⑶.常見的生長因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物。酶和核酸的組成成分。維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。一些天然物質(zhì)如酵母膏、蛋白胨、動(dòng)植物組織提取液等可為微生物提供生長因子（4）來源：3.生長因子⑶.常見的生長因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生注意：最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖最常用的氮源是銨鹽、硝酸鹽對(duì)異養(yǎng)生物而言，含C、H、O、N的化合物既是碳源，也是氮源，如蛋白質(zhì)之所以補(bǔ)充生長因子，是由于缺少合成這些物質(zhì)的酶或合成能力有限注意：最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖思考：C思考：C（三）培養(yǎng)基

培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。1.培養(yǎng)基的類型及用途（三）培養(yǎng)基培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法種類是否含凝固劑用途固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分是否分離、計(jì)數(shù)等工業(yè)生產(chǎn)種類是否含凝用途固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分是否分離、計(jì)固體培養(yǎng)基：菌落固體培養(yǎng)基：菌落半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種等半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)觀察微生物液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長按化學(xué)成分分種類化學(xué)成分是否明確用途天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基否是主要用于工業(yè)生產(chǎn)分類、鑒定按化學(xué)成分分種類化學(xué)成分是否明確用途天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基否是按培養(yǎng)基的功能（用途）分種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基加入某種化學(xué)物質(zhì)加入某種試劑或化學(xué)藥品依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的抗性依據(jù)微生物的代謝產(chǎn)物與特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化從眾多微生物中分離所需的微生物鑒別不同種類的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可鑒別大腸桿菌按培養(yǎng)基的功能（用途）分種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基鑒選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色葡萄球菌分離固氮菌分離自養(yǎng)型微生物jkzyw選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色（三）培養(yǎng)基

（1）按物理狀態(tài)分：（2）按功能分：（3）按成分分：總結(jié)：1.培養(yǎng)基的類型固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基（三）培養(yǎng)基（1）按物理狀態(tài)分：總結(jié)：1.培養(yǎng)基的類型固體2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．3.培養(yǎng)基的成分2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方不管哪種培養(yǎng)基，血清中含有：①多種蛋白質(zhì)（白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等）②多種金屬離子；③激素；④促貼附物質(zhì)，如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長因子⑥轉(zhuǎn)移蛋白⑦不明成分人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清）。血清中含有：人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和（四）無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念

無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。成功地培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵。

（四）無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別

3.常用的消毒與滅菌的方法比較項(xiàng)目理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的程度芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別3.常用的消毒與滅菌的方法①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化學(xué)藥劑消毒法：用75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒；氯氣消毒水源。④紫外線消毒。消毒的方法：3.常用的消毒與滅菌的方法①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。消毒的方法：3.常用（1）日常生活經(jīng)常用到的是

煮沸

消毒法

；（2）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用

巴氏

消毒法（例如牛奶）；（3）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以增強(qiáng)消毒效果，然后使用

紫外線

進(jìn)行物理消毒。（4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)行消毒；（5）飲水水源用氯氣進(jìn)行消毒。消毒的方法（1）日常生活經(jīng)常用到的是煮沸消毒法；消毒的方法21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件1、灼燒滅菌滅菌的方法：接種環(huán)、接種針、試管口等的滅菌1、灼燒滅菌滅菌的方法：接種環(huán)、接種針、試管口等的滅菌2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸氣滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.如玻璃器皿、金屬用具等的滅菌如培養(yǎng)基、無菌水等的滅菌2、干熱滅菌：如玻璃器皿、金屬用具等的滅菌如培養(yǎng)基、無菌水高壓蒸氣滅菌的原理是（）A．高壓使細(xì)菌DNA變性B．高壓使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固變性C．高溫燙死細(xì)菌D．高溫使細(xì)菌DNA變性B高壓蒸氣滅菌的原理是（）B滅菌的方法：

1、灼燒滅菌2、干熱滅菌3、高壓蒸氣滅菌4、紫外線滅菌如表面滅菌和空氣滅菌等，所用器械是紫外燈

。滅菌的方法：關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是A．消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的B．滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子C．接種環(huán)用燒灼的方法滅菌D．常用滅菌方法有加熱法、過濾法、紅外線法、化學(xué)藥品法A關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是A1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。旁欄思考1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外二、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1、器具的滅菌2、培養(yǎng)基的配制3、培養(yǎng)基的滅菌4、倒平板5、微生物接種6、恒溫箱中培養(yǎng)7、菌種的保存二、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1、器具的滅菌21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件涂布器接種環(huán)接種針涂布器接種環(huán)接種針21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件a.制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細(xì)菌）配方：a.制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細(xì)菌）配方：1．計(jì)算、稱量2．溶化3．調(diào)pH：pH7．6

4．過濾：這一步可以省去。5．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6．加塞7．包扎操作步驟1．計(jì)算、稱量操作步驟8．滅菌:

將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。將培養(yǎng)基用舊報(bào)紙包裹，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下滅菌2h。

9．倒平板:

待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）2d后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種.

10．無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。8．滅菌:倒平板操作倒平板操作1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。⑴培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿⑵玻棒、試管、燒瓶和吸管⑶實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。問題討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如b.純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法微生物的接種技術(shù)：b.純化大腸桿菌接種方法有：微生物的接種技術(shù)：接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法

平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.

在數(shù)次畫線后,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落.接種方法有：平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培平板劃線的操作平板劃線的操作21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件1.接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次.2.劃線首尾不能相接3.劃線后,培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)劃線分離法注意事項(xiàng):其他畫線分離圖：1.接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次.劃21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。問題討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免稀釋涂布平板的操作方法稀釋涂布平板的操作方法21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。問題討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)

伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，可以用來檢測自來水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，因?yàn)榈拇x產(chǎn)物與伊紅—美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈黑色并帶有金屬光澤，使大腸桿菌的菌落顯示出來，并沒有促進(jìn)大腸桿菌的生長和抑制其他微生物的生長。例如：鑒別大腸桿菌培養(yǎng)基大腸桿菌呈黑色中心,有或無金屬光澤伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，可以用來檢測自來水中的大腸菌種的保存1、臨時(shí)保藏：接種到固體斜面培養(yǎng)基，菌落長成后置于4℃冰箱保存。2、長期保存：甘油冷凍管藏法菌種的保存1、臨時(shí)保藏：接種到固體斜面培養(yǎng)基，菌落長結(jié)果分析與評(píng)價(jià)㈠.培養(yǎng)基的制作是否合格如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。㈡.接種操作是否符合無菌要求如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，則說明接種操作是符合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達(dá)到要求，需要分析原因，再次練習(xí)。㈢.是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同，及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn)，并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。結(jié)果分析與評(píng)價(jià)㈠.培養(yǎng)基的制作是否合格本課題知識(shí)小結(jié):本課題知識(shí)小結(jié):【典例解析】例:關(guān)于微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是()A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽D.無機(jī)氮源也能提供能量解析：不同的微生物，所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng)，它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時(shí)是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同時(shí)是能源，如葡萄糖；有的碳源同時(shí)是氮源，也是能源，如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng)，除水以外的無機(jī)物種類繁多，功能也多樣。如二氧化碳，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHCO3，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽；而NaCl則只能提供無機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng)，無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的，如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。D【典例解析】例:關(guān)于微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是(編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml例2．右表是某微生物培養(yǎng)基成分，請(qǐng)據(jù)此回答：（1）右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是

。（2）若不慎將過量NaCl加入培養(yǎng)基中。如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基，可再加入

.（提示：金黃色葡萄球菌具耐鹽性）自養(yǎng)型微生物

含碳有機(jī)物

編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2（3）若除去成分②，加入（CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)

。（4）表中營養(yǎng)成分共有

類。（5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行的是

。固氮微生物

3

調(diào)整pH

編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml（3）若除去成分②，加入（CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)（6）右表中各成分重量確定的原則是

。（7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分

。依微生物的生長需要確定

瓊脂（或凝固劑）

編號(hào)成分含量①粉狀硫10g②（NH4）2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100ml依微生物的生長需要確定瓊脂（或凝固劑）編號(hào)成分含量①粉狀謝謝！供婁浪頹藍(lán)辣襖駒靴鋸瀾互慌仲寫繹衰斡染圾明將呆則孰盆瘸砒腥悉漠塹脊髓灰質(zhì)炎(講課2019)脊髓灰質(zhì)炎(講課2019)謝謝！供婁浪頹藍(lán)辣襖駒靴鋸瀾互慌仲寫繹衰斡染圾明將呆則孰盆瘸78專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)專題2課題1㈠.微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類：細(xì)菌、支原體、衣原體、放線菌、藍(lán)藻個(gè)體微小、結(jié)構(gòu)簡單酵母菌、霉菌、食用菌真菌：原生生物：顯微藻類、原生生物（如：草履蟲、變形蟲等）病毒、類病毒、朊病毒◆微生物的共同特點(diǎn)：一.微生物基礎(chǔ)知識(shí)㈠.微生物的類群微生物原核類:真核類非細(xì)胞類：細(xì)菌、支原體、1.細(xì)菌的形態(tài)1.細(xì)菌的形態(tài)擬核，大型環(huán)狀DNA質(zhì)粒(小型環(huán)狀DNA，含抗生素，抗藥性，固氮基因)其成分為肽聚糖2.細(xì)菌的結(jié)構(gòu)特殊結(jié)構(gòu)（有時(shí)包括芽孢）擬核，大型環(huán)狀DNA質(zhì)粒(小型環(huán)狀DNA，含抗生素，抗藥性芽孢

有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，對(duì)干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強(qiáng)的抵抗力。（抗逆性極強(qiáng)）注：不是繁殖體芽孢有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當(dāng)環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時(shí)候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個(gè)細(xì)菌.例如，有的細(xì)菌的芽孢，煮沸3小時(shí)以后才死亡。芽孢又小又輕，可細(xì)菌主要是以二分裂的方式進(jìn)行增殖（如右圖）3.細(xì)菌的繁殖4.細(xì)菌的菌落⑴.定義：單個(gè)或者少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，會(huì)形成一個(gè)肉眼可見的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。⑵.特征：大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等。⑶.功能：每種細(xì)菌在一定條件下所形成的菌落，可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。細(xì)菌主要是以二分裂的方式進(jìn)行增殖（如右圖）3.細(xì)菌的繁殖4.幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)幾種菌落及其形態(tài)5.病毒的結(jié)構(gòu):由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成。5.病毒的結(jié)構(gòu):由核酸和蛋白質(zhì)構(gòu)成。病毒的結(jié)構(gòu)病毒的結(jié)構(gòu)吸附注入合成釋放組裝6.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五個(gè)階段，即：吸附→注入核酸→合成核酸和蛋白質(zhì)→組裝→釋放6.病毒的營養(yǎng)方式：寄生吸附注入合成釋放組裝6.病毒的繁殖病毒的增殖一般可分五個(gè)階段微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)是：㈡.微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能1.水2.碳源3.氮源4.無機(jī)鹽5.生長因子微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)是：㈡.微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及1.碳源：為微生物提供碳元素。無機(jī)碳化合物——CO2、NaHCO3等有機(jī)碳化合物糖類（最常用的碳源，尤其是葡萄糖）烴類、醇類、脂肪酸蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸等（有機(jī)大分子）牛肉膏、蛋白胨、花生粉餅、石油（天然）1.碳源：為微生物提供碳元素。無機(jī)碳化合物——CO2、NaH2.氮源:N2NH3等有機(jī)物中的氮（還有尿素）無機(jī)氮牛肉膏、蛋白胨為微生物提供氮元素。圓褐固氮菌、硝化細(xì)菌和大腸桿菌氨鹽、硝酸鹽等是常用的氮源氮源主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物2.氮源:N2NH3等有機(jī)物中的氮（還有尿素）無機(jī)氮牛肉膏、自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()A．碳源B．氮源C．無機(jī)鹽D．特殊營養(yǎng)物質(zhì)A自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()3.生長因子⑶.常見的生長因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生長不可缺少的微量有機(jī)物。酶和核酸的組成成分。維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。一些天然物質(zhì)如酵母膏、蛋白胨、動(dòng)植物組織提取液等可為微生物提供生長因子（4）來源：3.生長因子⑶.常見的生長因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生注意：最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖最常用的氮源是銨鹽、硝酸鹽對(duì)異養(yǎng)生物而言，含C、H、O、N的化合物既是碳源，也是氮源，如蛋白質(zhì)之所以補(bǔ)充生長因子，是由于缺少合成這些物質(zhì)的酶或合成能力有限注意：最常用的碳源是糖類，尤其是葡萄糖思考：C思考：C（三）培養(yǎng)基

培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法配制而成的，專供微生物生長繁殖使用的混合營養(yǎng)液。1.培養(yǎng)基的類型及用途（三）培養(yǎng)基培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）是由人工方法種類是否含凝固劑用途固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分是否分離、計(jì)數(shù)等工業(yè)生產(chǎn)種類是否含凝用途固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分是否分離、計(jì)固體培養(yǎng)基：菌落固體培養(yǎng)基：菌落半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、鑒定菌種等半固體培養(yǎng)基：無動(dòng)力有動(dòng)力(彌散)觀察微生物液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長按化學(xué)成分分種類化學(xué)成分是否明確用途天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基否是主要用于工業(yè)生產(chǎn)分類、鑒定按化學(xué)成分分種類化學(xué)成分是否明確用途天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基否是按培養(yǎng)基的功能（用途）分種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基加入某種化學(xué)物質(zhì)加入某種試劑或化學(xué)藥品依據(jù)某些微生物對(duì)某些物質(zhì)的抗性依據(jù)微生物的代謝產(chǎn)物與特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化從眾多微生物中分離所需的微生物鑒別不同種類的微生物加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可鑒別大腸桿菌按培養(yǎng)基的功能（用途）分種類制備方法原理用途舉例選擇培養(yǎng)基鑒選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色葡萄球菌分離固氮菌分離自養(yǎng)型微生物jkzyw選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離金黃色（三）培養(yǎng)基

（1）按物理狀態(tài)分：（2）按功能分：（3）按成分分：總結(jié)：1.培養(yǎng)基的類型固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基（三）培養(yǎng)基（1）按物理狀態(tài)分：總結(jié)：1.培養(yǎng)基的類型固體2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．3.培養(yǎng)基的成分2.不同的微生物往往需要采用不同的培養(yǎng)基配方不管哪種培養(yǎng)基，血清中含有：①多種蛋白質(zhì)（白蛋白、球蛋白、鐵蛋白等）②多種金屬離子；③激素；④促貼附物質(zhì)，如纖粘蛋白、冷析球蛋白、膠原等。⑤各種生長因子⑥轉(zhuǎn)移蛋白⑦不明成分人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和繁殖，還需補(bǔ)充一定量的天然培養(yǎng)基（如血清）。血清中含有：人工合成培養(yǎng)基只能維持細(xì)胞生存，要想使細(xì)胞生長和（四）無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念

無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。成功地培養(yǎng)微生物的關(guān)鍵。

（四）無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)的概念無菌操作泛指在培養(yǎng)微生物2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別

3.常用的消毒與滅菌的方法比較項(xiàng)目理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的程度芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別3.常用的消毒與滅菌的方法①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化學(xué)藥劑消毒法：用75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒；氯氣消毒水源。④紫外線消毒。消毒的方法：3.常用的消毒與滅菌的方法①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。消毒的方法：3.常用（1）日常生活經(jīng)常用到的是

煮沸

消毒法

；（2）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用

巴氏

消毒法（例如牛奶）；（3）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑石炭酸或煤酚皂等溶液以增強(qiáng)消毒效果，然后使用

紫外線

進(jìn)行物理消毒。（4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用酒精進(jìn)行消毒；（5）飲水水源用氯氣進(jìn)行消毒。消毒的方法（1）日常生活經(jīng)常用到的是煮沸消毒法；消毒的方法21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件1、灼燒滅菌滅菌的方法：接種環(huán)、接種針、試管口等的滅菌1、灼燒滅菌滅菌的方法：接種環(huán)、接種針、試管口等的滅菌2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸氣滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.如玻璃器皿、金屬用具等的滅菌如培養(yǎng)基、無菌水等的滅菌2、干熱滅菌：如玻璃器皿、金屬用具等的滅菌如培養(yǎng)基、無菌水高壓蒸氣滅菌的原理是（）A．高壓使細(xì)菌DNA變性B．高壓使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固變性C．高溫燙死細(xì)菌D．高溫使細(xì)菌DNA變性B高壓蒸氣滅菌的原理是（）B滅菌的方法：

1、灼燒滅菌2、干熱滅菌3、高壓蒸氣滅菌4、紫外線滅菌如表面滅菌和空氣滅菌等，所用器械是紫外燈

。滅菌的方法：關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是A．消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的B．滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子C．接種環(huán)用燒灼的方法滅菌D．常用滅菌方法有加熱法、過濾法、紅外線法、化學(xué)藥品法A關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是A1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。（1）培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2）玻棒、試管、燒瓶和吸管（3）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。旁欄思考1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外二、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1、器具的滅菌2、培養(yǎng)基的配制3、培養(yǎng)基的滅菌4、倒平板5、微生物接種6、恒溫箱中培養(yǎng)7、菌種的保存二、微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的基本操作程序1、器具的滅菌21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件涂布器接種環(huán)接種針涂布器接種環(huán)接種針21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件a.制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細(xì)菌）配方：a.制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細(xì)菌）配方：1．計(jì)算、稱量2．溶化3．調(diào)pH：pH7．6

4．過濾：這一步可以省去。5．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6．加塞7．包扎操作步驟1．計(jì)算、稱量操作步驟8．滅菌:

將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。將培養(yǎng)基用舊報(bào)紙包裹，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下滅菌2h。

9．倒平板:

待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）2d后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種.

10．無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。8．滅菌:倒平板操作倒平板操作1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。⑴培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿⑵玻棒、試管、燒瓶和吸管⑶實(shí)驗(yàn)操作者的雙手答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。問題討論1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.在倒平板的過程中，如b.純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法微生物的接種技術(shù)：b.純化大腸桿菌接種方法有：微生物的接種技術(shù)：接種方法有：平板劃線法和稀釋涂布平板法

平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫線的操作,將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.

在數(shù)次畫線后,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落.接種方法有：平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培平板劃線的操作平板劃線的操作21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件1.接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次.2.劃線首尾不能相接3.劃線后,培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)劃線分離法注意事項(xiàng):其他畫線分離圖：1.接種環(huán)只蘸一次菌液,但要在培養(yǎng)基不同位置連續(xù)劃線多次.劃21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。問題討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？答：以免稀釋涂布平板的操作方法稀釋涂布平板的操作方法21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件21復(fù)習(xí)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)+課件答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍等等。問題討論涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求，想一想，第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作？答：應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)微生物的恒溫培養(yǎng)

伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，可以用來檢測自來水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，因?yàn)榈拇x產(chǎn)物與伊紅—美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈黑色并帶有金屬光澤，使大腸桿菌的菌落顯示出來，并沒有促進(jìn)大腸桿菌的生長和抑制其他微生物的生長。例如：鑒別大腸桿菌培養(yǎng)基大腸桿菌呈黑色中心,有或無金屬光澤伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，可以用來檢測自來水中的大腸菌種的保存