氨基酸(教學(xué)講解課件)

(AminoAcid,AA,Aa,aa)第3章氨基酸(AminoAcid,AA,Aa,aa)第3章氨基酸1——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子ProteinArchitecture一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子ProteinArchitecture2（一）蛋白質(zhì)水解蛋白質(zhì)和多肽的肽鍵可被催化水解酸/堿能將蛋白完全水解

酶水解一般是部分水解得到各種AA的混合物得到多肽片段和AA的混合物氨基酸是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單元蛋白質(zhì)——月示——胨——多肽——肽——AA1*1045*1032*1031000200100-500（一）蛋白質(zhì)水解蛋白質(zhì)和多肽的肽鍵可被催化水解得到各種AA3（二）氨基酸的結(jié)構(gòu)地球上天然形成的AA300種以上。構(gòu)成蛋白質(zhì)的AA只有20余種，且都是α-氨基酸。（二）氨基酸的結(jié)構(gòu)地球上天然形成的AA300種以上。4什么是氨基酸？什么是氨基酸？5氨基酸(教學(xué)講解課件)6----C-C-C-C-COOHγβα----C-C-C-C(NH2)-COOHα-氨基酸----C-C-C(NH2)-C-COOHβ-氨基酸----C-C(NH2)-C-C-COOHγ-氨基酸什么是α-氨基酸？----C-C-C-C-COOH什么是α-氨基酸？7

大多數(shù)AA在中性pH時呈兼性離子狀態(tài):除甘氨酸外，19種AA都具有旋光性。除胱氨酸和酪氨酸外，其余AA都能溶于水。COO-NH3+大多數(shù)AA在中性pH時呈兼性離子狀態(tài):COO-NH3+8二、氨基酸的分類（一）常見的蛋白質(zhì)氨基酸二、氨基酸的分類（一）常見的蛋白質(zhì)氨基酸9按Ｒ基的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：１、脂肪族aa（１）中性aa按Ｒ基的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：１、脂肪族aa（１）中性aa10（2）含羥基或硫aa（2）含羥基或硫aa11氨基酸(教學(xué)講解課件)12（３）酸性aa及其酰胺（３）酸性aa及其酰胺13（４）堿性aa（４）堿性aa14２、芳香族aa２、芳香族aa15３、雜環(huán)aa３、雜環(huán)aa16按Ｒ基的極性性質(zhì)分類：１、非極性Ｒ基aa按Ｒ基的極性性質(zhì)分類：１、非極性Ｒ基aa17２、不帶電荷的極性Ｒ基aa２、不帶電荷的極性Ｒ基aa183、帶正電荷的Ｒ基aa3、帶正電荷的Ｒ基aa194、帶負(fù)電荷的Ｒ基aa4、帶負(fù)電荷的Ｒ基aa20（二）不常見的蛋白質(zhì)氨基酸由常見aa經(jīng)修飾而來。（二）不常見的蛋白質(zhì)氨基酸由常見aa經(jīng)修飾而來。21氨基酸(教學(xué)講解課件)22氨基酸(教學(xué)講解課件)23（三）非蛋白質(zhì)氨基酸150多種多是蛋白質(zhì)中L型α-AA衍生物有一些是β-，γ-，δ-AA有些是D-型AA

（三）非蛋白質(zhì)氨基酸150多種24鳥氨酸瓜氨酸氨基酸(教學(xué)講解課件)25三、氨基酸的酸堿性質(zhì)（一）兼性離子三、氨基酸的酸堿性質(zhì)（一）兼性離子26氨基酸(教學(xué)講解課件)27H3N—CH—COOHR+（pH＜pI）H3N—CH—COO-R+（pH=pI）H2N—CH—COO-R（pH＞pI）（二）氨基酸的解離H3N—CH—COOHR+（pH＜pI）H3N—CH—COO28（三）氨基酸的等電點(diǎn)當(dāng)溶液為某一pH值時，AA主要以兼性離子的形式存在，分子中所含的正負(fù)電荷數(shù)目相等，凈電荷為0。這一pH值即為AA的等電點(diǎn)（pI）。在pI時，AA在電場中既不向正極也不向負(fù)極移動，即處于兩性離子狀態(tài)。（三）氨基酸的等電點(diǎn)當(dāng)溶液為某一pH值時，AA主要以兼性離子29Ka1*Ka2=……側(cè)鏈不含離解基團(tuán)的中性AApI=(pK’1+pK’2)/2Ka1*Ka2=……側(cè)鏈不含離解基團(tuán)的中性AA30甘氨酸滴定曲線甘氨酸滴定曲線31對于側(cè)鏈含有可解離基團(tuán)的AApI取決于兩性離子兩邊pK’值的算術(shù)平均值酸性AA：pI=(pK’1+pK’R-COO-

)/2堿性AA：pI=(pK’2+pK’R-NH2)/2對于側(cè)鏈含有可解離基團(tuán)的AA32氨基酸(教學(xué)講解課件)33氨基酸(教學(xué)講解課件)34氨基酸(教學(xué)講解課件)35四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)36（一）α-氨基參加的反應(yīng)1.與亞硝酸反應(yīng)2.與酰化試劑反應(yīng)3.烴基化反應(yīng)4.形成Schiff’s堿反應(yīng)5.脫氨基反應(yīng)（一）α-氨基參加的反應(yīng)1.與亞硝酸反應(yīng)2.與?；噭┓磻?yīng)337

NH2OHRCHCOOH+HNO2RCHCOOH+H2O+N2VanSlyke法測氨基氮（體積）的基礎(chǔ)。N2中的1/2為氨基氮。

氨基酸定量和蛋白質(zhì)水解程度的測定。氨基酸定量和蛋白質(zhì)水解程度的測定。38NO2FO2N+H2N—CH—COOHRNO2O2NHN—CH—COOHR+HF弱堿性DNP-氨基酸（黃色）DNFBSanger法測定N末端氨基酸基礎(chǔ)NO2FO2N+H2N—CH—COOHRNO2O2NHN—39—N=C=S+N—CH—COOHHHRPITC—N—C—N—CH—COOHHHRSPTC-氨基酸—N—CHRSNCCOPTH-氨基酸pH8.3無水HF苯異硫氰酸酯PITC苯氨基硫甲酰衍生物苯乙內(nèi)硫脲衍生物Edman降解法基礎(chǔ)—N=C=S+N—CH—COOHHHRP40

R’COOHR’COOC=O+H2NCHC=NCHHRHR醛氨基酸Schiff’s堿-H20+H20

醛氨基酸Schiff’s堿-H20+H2041在生物體內(nèi)經(jīng)AA氧化酶催化即脫去α-氨基而轉(zhuǎn)變?yōu)橥?。氨基?教學(xué)講解課件)42（二）α-羧基參加的反應(yīng)1.成鹽或成酯反應(yīng)2.成酰氯反應(yīng)3.脫羧基反應(yīng)4.疊氮反應(yīng)（二）α-羧基參加的反應(yīng)1.成鹽或成酯反應(yīng)2.成酰氯反應(yīng)343（2）成酯

NH2

干燥，HCl

RCHCOOH+C2H5OH

回流

RCHCOOC2H5+H2ONH3·Cl

保護(hù)羧基（1）與NaOH等形成鹽

（2）成酯

NH244HN-保護(hù)基R—CH-COOH+PCl5

HN-保護(hù)基R—CH-COOCl+POCl3+HCl保護(hù)氨基活化羧基保護(hù)氨基活化羧基45

NH2脫羧酶R—CH-COOHR-CH2-NH2+CO2氨基酸(教學(xué)講解課件)46

YNHONH2NH2

R—CH—C—OCH3

YNHOHNO2

R—CH—C—NHNH2

YNHO

R—CH—C—N-—N+N+2H2O

?；被峒柞ル迈；被ｋ迈；被／B氮肽的人工合成

?；被峒柞ル迈；被ｋ迈；被／B氮肽的人工合成47（三）α-羧基和α-氨基都參加的反應(yīng)1、與茚三酮反應(yīng)

2、成肽反應(yīng)（三）α-羧基和α-氨基都參加的反應(yīng)1、與茚三酮反應(yīng)2、48弱酸加熱弱酸加熱49（四）側(cè)鏈R基參加的反應(yīng)1、Tyr2、堿性AA2、堿性AA3、帶硫AA（四）側(cè)鏈R基參加的反應(yīng)1、Tyr2、堿性AA2、堿性AA50Tyr酚基在3和5位上易發(fā)生親電取代反應(yīng)，如碘化和硝化黃色反應(yīng)Tyr酚基在3和5位上易發(fā)生親電取代反應(yīng)，黃色反應(yīng)51Pauly反應(yīng)Pauly反應(yīng)52His側(cè)鏈咪唑基與重氮苯磺酸生成棕紅色化合物Pauly反應(yīng)His側(cè)鏈咪唑基與重氮苯磺酸生成棕紅色化合物Pauly反應(yīng)53Arg側(cè)鏈胍基與環(huán)己二酮生成縮合物Arg側(cè)鏈胍基與環(huán)己二酮生成縮合物54Trp側(cè)鏈吲哚基能被N-溴代琥珀酰亞胺氧化——分光光度法測定Trp含量Trp側(cè)鏈吲哚基能被55Met側(cè)鏈上甲硫基：強(qiáng)親核基團(tuán)與烴化試劑成锍鹽保護(hù)巰基Met側(cè)鏈上甲硫基：強(qiáng)親核基團(tuán)與烴化試劑成锍鹽保護(hù)巰基56與二硫硝基苯甲酸發(fā)生硫醇-二硫化物交換pH8.0時412nm最大光吸收—分光光度法測定-SH與二硫硝基苯甲酸發(fā)生硫醇-二硫化物交換pH8.0時412nm57Cys的巰基不穩(wěn)定，易被氧化成二硫鍵巰基在有痕量的金屬離子如：Cu2+，F(xiàn)e2+，Co2+或Mn2+時，易被氧化Cys的巰基不穩(wěn)定，易被氧化成二硫鍵58Cys中的二硫鍵可被氧化劑（過甲酸）以及還原劑（巰基化合物）打開?；腔彼酑ys中的二硫鍵可被氧化劑（過甲酸）以及還原劑（巰基化合物）59氨基酸(教學(xué)講解課件)60五、AA的光學(xué)活性和光譜性質(zhì)（一）AA的光學(xué)活性和立體化學(xué)五、AA的光學(xué)活性和光譜性質(zhì)（一）AA的光學(xué)活性和立體化學(xué)61氨基酸(教學(xué)講解課件)62氨基酸(教學(xué)講解課件)63氨基酸(教學(xué)講解課件)64氨基酸(教學(xué)講解課件)65（二）氨基酸的光譜性質(zhì)可見光區(qū)：無吸收遠(yuǎn)紫外和紅外區(qū)：都吸收近紫外區(qū)（200—400nm）：Tyr/Trp/Phe原因：-C=C-C=C-C=C-C=C-1、紫外吸收光譜（二）氨基酸的光譜性質(zhì)可見光區(qū)：無吸收1、紫外吸收光譜66Trp280nmTyr275nmPhe257nm蛋白質(zhì)含量測定280nmTrp280nm蛋白質(zhì)含量測定280nm67氨基酸(教學(xué)講解課件)68２、核磁共振波譜２、核磁共振波譜69六、氨基酸混合物的分析分離——利用AA成分分配系數(shù)的差異（一）分配層析法的一般原理六、氨基酸混合物的分析分離——利用AA成分分配系數(shù)的差異（70{層析系統(tǒng)固定相{流動相附著在固相上的液體固體{層析系統(tǒng)固定相{流動相附著在固相上的液體固體71

按兩相所處狀態(tài)分：流動相液體氣體固定相液體液液層析氣液層析固體液固層析氣固層析按兩相所處狀態(tài)分：流動相液體氣體固定相液體液液層析氣液72柱固定相裝于柱內(nèi)紙固定相是液體，吸附在濾紙上，將樣品點(diǎn)在紙上，用流動相展開薄層將有適當(dāng)粘度的固定相涂在薄板上薄膜與紙層析相似，紙用其它高分子有機(jī)吸附劑代替

按操作形式分：柱固定相裝于柱內(nèi)紙固定相是液體，吸附在濾紙上，將樣品點(diǎn)在紙上73吸附固體吸附能力不同分配液體分配系數(shù)不同離子交換離子交換劑親和性不同凝膠多孔凝膠，通過速度不同親和固定相只能與一種組分結(jié)合，——分開其它無親和力的組分

按層析原理分：固定相各組分對固定相吸附固體吸附能力不同分配液體74（二）分配柱層析

填充物為親水性的不溶物質(zhì)如纖維素、淀粉、硅膠等，收集的組分用茚三酮顯色定量。（二）分配柱層析填充物為親水性的不溶物質(zhì)如纖維素、75氨基酸(教學(xué)講解課件)76（三）紙層析（四）薄層層析（三）紙層析（四）薄層層析77（五）離子交換層析（五）離子交換層析78（六）氣液層析（六）氣液層析79固定相支持劑顆粒細(xì)，表面積大；采取高壓，洗脫速度快。（七）高效液相層析固定相支持劑顆粒細(xì)，表面積大；（七）高效液相層析80

4、教學(xué)必須從學(xué)習(xí)者已有的經(jīng)驗(yàn)開始?！磐?/p>

5、構(gòu)成我們學(xué)習(xí)最大障礙的是已知的東西，而不是未知的東西。——貝爾納

6、學(xué)習(xí)要注意到細(xì)處，不是粗枝大葉的，這樣可以逐步學(xué)習(xí)摸索，找到客觀規(guī)律?！焯亓?/p>

7、學(xué)習(xí)文學(xué)而懶于記誦是不成的，特別是詩。一個高中文科的學(xué)生，與其囫圇吞棗或走馬觀花地讀十部詩集，不如仔仔細(xì)細(xì)地背誦三百首詩?！熳郧?/p>

8、一般青年的任務(wù)，尤其是共產(chǎn)主義青年團(tuán)及其他一切組織的任務(wù)，可以用一句話來表示，就是要學(xué)習(xí)?！袑?/p>

9、學(xué)習(xí)和研究好比爬梯子，要一步一步地往上爬，企圖一腳跨上四五步，平地登天，那就必須會摔跤了?！A羅庚

10、兒童的心靈是敏感的，它是為著接受一切好的東西而敞開的。如果教師誘導(dǎo)兒童學(xué)習(xí)好榜樣，鼓勵仿效一切好的行為，那末，兒童身上的所有缺點(diǎn)就會沒有痛苦和創(chuàng)傷地不覺得難受地逐漸消失?！K霍姆林斯基

11、學(xué)會學(xué)習(xí)的人，是非常幸福的人?！啄系?/p>

12、你們要學(xué)習(xí)思考，然后再來寫作?！纪吡_14、許多年輕人在學(xué)習(xí)音樂時學(xué)會了愛。——萊杰

15、學(xué)習(xí)是勞動，是充滿思想的勞動?！獮跎晁够?/p>

16、我們一定要給自己提出這樣的任務(wù)：第一，學(xué)習(xí)，第二是學(xué)習(xí)，第三還是學(xué)習(xí)?！袑?/p>

17、學(xué)習(xí)的敵人是自己的滿足，要認(rèn)真學(xué)習(xí)一點(diǎn)東西，必須從不自滿開始。對自己，“學(xué)而不厭”，對人家，“誨人不倦”，我們應(yīng)取這種態(tài)度?！珴蓶|

18、只要愿意學(xué)習(xí)，就一定能夠?qū)W會?！袑?/p>

19、如果學(xué)生在學(xué)校里學(xué)習(xí)的結(jié)果是使自己什么也不會創(chuàng)造，那他的一生永遠(yuǎn)是模仿和抄襲?！蟹颉ね袪査固?/p>

20、對所學(xué)知識內(nèi)容的興趣可能成為學(xué)習(xí)動機(jī)。——贊科夫

21、游手好閑地學(xué)習(xí)，并不比學(xué)習(xí)游手好閑好?！s翰·貝勒斯

22、讀史使人明智，讀詩使人靈秀，數(shù)學(xué)使人周密，自然哲學(xué)使人精邃，倫理學(xué)使人莊重，邏輯學(xué)使人善辯?！喔?/p>

23、我們在我們的勞動過程中學(xué)習(xí)思考，勞動的結(jié)果，我們認(rèn)識了世界的奧妙，于是我們就真正來改變生活了?！郀柣?/p>

24、我們要振作精神，下苦功學(xué)習(xí)。下苦功，三個字，一個叫下，一個叫苦，一個叫功，一定要振作精神，下苦功?！珴蓶|

25、我學(xué)習(xí)了一生，現(xiàn)在我還在學(xué)習(xí)，而將來，只要我還有精力，我還要學(xué)習(xí)下去?！獎e林斯基

13、在尋求真理的長河中，唯有學(xué)習(xí)，不斷地學(xué)習(xí)，勤奮地學(xué)習(xí)，有創(chuàng)造性地學(xué)習(xí)，才能越重山跨峻嶺。——華羅庚52、若不給自己設(shè)限，則人生中就沒有限制你發(fā)揮的藩籬。53、希望是厄運(yùn)的忠實(shí)的姐妹。54、辛勤的蜜蜂永沒有時間悲哀。55、領(lǐng)導(dǎo)的速度決定團(tuán)隊(duì)的效率。56、成功與不成功之間有時距離很短只要后者再向前幾步。57、任何的限制，都是從自己的內(nèi)心開始的。58、偉人所達(dá)到并保持著的高處，并不是一飛就到的，而是他們在同伴譽(yù)就很難挽回。59、不要說你不會做！你是個人你就會做！60、生活本沒有導(dǎo)演，但我們每個人都像演員一樣，為了合乎劇情而認(rèn)真地表演著。61、所謂英雄，其實(shí)是指那些無論在什么環(huán)境下都能夠生存下去的人。62、一切的一切，都是自己咎由自取。原來愛的太深，心有墜落的感覺。63、命運(yùn)不是一個機(jī)遇的問題，而是一個選擇問題；它不是我們要等待的東西，而是我們要實(shí)現(xiàn)的東西。64、每一個發(fā)奮努力的背后，必有加倍的賞賜。65、再冷的石頭，坐上三年也會暖。66、淡了，散了，累了，原來的那個你呢？67、我們的目的是什么？是勝利！不惜一切代價爭取勝利！68、一遇挫折就灰心喪氣的人，永遠(yuǎn)是個失敗者。而一向努力奮斗，堅韌不拔的人會走向成功。69、在真實(shí)的生命里，每樁偉業(yè)都由信心開始，并由信心跨出第一步。70、平凡的腳步也可以走完偉大的行程。71、勝利，是屬于最堅韌的人。72、因害怕失敗而不敢放手一搏，永遠(yuǎn)不會成功。73、只要路是對的，就不怕路遠(yuǎn)。74、駕馭命運(yùn)的舵是奮斗。不抱有一絲幻想，不放棄一點(diǎn)機(jī)會，不停止一日努力。3、上帝助自助者。24、凡事要三思，但比三思更重要的是三思而行。25、如果你希望成功，以恒心為良友，以經(jīng)驗(yàn)為參謀，以小心為兄弟，以希望為哨兵。26、沒有退路的時候，正是潛力發(fā)揮最大的時候。27、沒有糟糕的事情，只有糟糕的心情。28、不為外撼，不以物移，而后可以任天下之大事。29、打開你的手機(jī)，收到我的祝福，忘掉所有煩惱，你會幸福每秒，對著鏡子笑笑，從此開心到老，想想明天美好，相信自己最好。30、不屈不撓的奮斗是取得勝利的唯一道路。31、生活中若沒有朋友，就像生活中沒有陽光一樣。32、任何業(yè)績的質(zhì)變，都來自于量變的積累。33、空想會想出很多絕妙的主意，但卻辦不成任何事情。34、不大可能的事也許今天實(shí)現(xiàn)，根本不可能的事也許明天會實(shí)現(xiàn)。35、再長的路，一步步也能走完，再短的路，不邁開雙腳也無法到達(dá)。4、教學(xué)必須從學(xué)習(xí)者已有的經(jīng)驗(yàn)開始?！磐?1(AminoAcid,AA,Aa,aa)第3章氨基酸(AminoAcid,AA,Aa,aa)第3章氨基酸82——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子ProteinArchitecture一、氨基酸——蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子ProteinArchitecture83（一）蛋白質(zhì)水解蛋白質(zhì)和多肽的肽鍵可被催化水解酸/堿能將蛋白完全水解

酶水解一般是部分水解得到各種AA的混合物得到多肽片段和AA的混合物氨基酸是蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單元蛋白質(zhì)——月示——胨——多肽——肽——AA1*1045*1032*1031000200100-500（一）蛋白質(zhì)水解蛋白質(zhì)和多肽的肽鍵可被催化水解得到各種AA84（二）氨基酸的結(jié)構(gòu)地球上天然形成的AA300種以上。構(gòu)成蛋白質(zhì)的AA只有20余種，且都是α-氨基酸。（二）氨基酸的結(jié)構(gòu)地球上天然形成的AA300種以上。85什么是氨基酸？什么是氨基酸？86氨基酸(教學(xué)講解課件)87----C-C-C-C-COOHγβα----C-C-C-C(NH2)-COOHα-氨基酸----C-C-C(NH2)-C-COOHβ-氨基酸----C-C(NH2)-C-C-COOHγ-氨基酸什么是α-氨基酸？----C-C-C-C-COOH什么是α-氨基酸？88

大多數(shù)AA在中性pH時呈兼性離子狀態(tài):除甘氨酸外，19種AA都具有旋光性。除胱氨酸和酪氨酸外，其余AA都能溶于水。COO-NH3+大多數(shù)AA在中性pH時呈兼性離子狀態(tài):COO-NH3+89二、氨基酸的分類（一）常見的蛋白質(zhì)氨基酸二、氨基酸的分類（一）常見的蛋白質(zhì)氨基酸90按Ｒ基的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：１、脂肪族aa（１）中性aa按Ｒ基的化學(xué)結(jié)構(gòu)分類：１、脂肪族aa（１）中性aa91（2）含羥基或硫aa（2）含羥基或硫aa92氨基酸(教學(xué)講解課件)93（３）酸性aa及其酰胺（３）酸性aa及其酰胺94（４）堿性aa（４）堿性aa95２、芳香族aa２、芳香族aa96３、雜環(huán)aa３、雜環(huán)aa97按Ｒ基的極性性質(zhì)分類：１、非極性Ｒ基aa按Ｒ基的極性性質(zhì)分類：１、非極性Ｒ基aa98２、不帶電荷的極性Ｒ基aa２、不帶電荷的極性Ｒ基aa993、帶正電荷的Ｒ基aa3、帶正電荷的Ｒ基aa1004、帶負(fù)電荷的Ｒ基aa4、帶負(fù)電荷的Ｒ基aa101（二）不常見的蛋白質(zhì)氨基酸由常見aa經(jīng)修飾而來。（二）不常見的蛋白質(zhì)氨基酸由常見aa經(jīng)修飾而來。102氨基酸(教學(xué)講解課件)103氨基酸(教學(xué)講解課件)104（三）非蛋白質(zhì)氨基酸150多種多是蛋白質(zhì)中L型α-AA衍生物有一些是β-，γ-，δ-AA有些是D-型AA

（三）非蛋白質(zhì)氨基酸150多種105鳥氨酸瓜氨酸氨基酸(教學(xué)講解課件)106三、氨基酸的酸堿性質(zhì)（一）兼性離子三、氨基酸的酸堿性質(zhì)（一）兼性離子107氨基酸(教學(xué)講解課件)108H3N—CH—COOHR+（pH＜pI）H3N—CH—COO-R+（pH=pI）H2N—CH—COO-R（pH＞pI）（二）氨基酸的解離H3N—CH—COOHR+（pH＜pI）H3N—CH—COO109（三）氨基酸的等電點(diǎn)當(dāng)溶液為某一pH值時，AA主要以兼性離子的形式存在，分子中所含的正負(fù)電荷數(shù)目相等，凈電荷為0。這一pH值即為AA的等電點(diǎn)（pI）。在pI時，AA在電場中既不向正極也不向負(fù)極移動，即處于兩性離子狀態(tài)。（三）氨基酸的等電點(diǎn)當(dāng)溶液為某一pH值時，AA主要以兼性離子110Ka1*Ka2=……側(cè)鏈不含離解基團(tuán)的中性AApI=(pK’1+pK’2)/2Ka1*Ka2=……側(cè)鏈不含離解基團(tuán)的中性AA111甘氨酸滴定曲線甘氨酸滴定曲線112對于側(cè)鏈含有可解離基團(tuán)的AApI取決于兩性離子兩邊pK’值的算術(shù)平均值酸性AA：pI=(pK’1+pK’R-COO-

)/2堿性AA：pI=(pK’2+pK’R-NH2)/2對于側(cè)鏈含有可解離基團(tuán)的AA113氨基酸(教學(xué)講解課件)114氨基酸(教學(xué)講解課件)115氨基酸(教學(xué)講解課件)116四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)四、氨基酸的化學(xué)反應(yīng)117（一）α-氨基參加的反應(yīng)1.與亞硝酸反應(yīng)2.與?；噭┓磻?yīng)3.烴基化反應(yīng)4.形成Schiff’s堿反應(yīng)5.脫氨基反應(yīng)（一）α-氨基參加的反應(yīng)1.與亞硝酸反應(yīng)2.與酰化試劑反應(yīng)3118

NH2OHRCHCOOH+HNO2RCHCOOH+H2O+N2VanSlyke法測氨基氮（體積）的基礎(chǔ)。N2中的1/2為氨基氮。

氨基酸定量和蛋白質(zhì)水解程度的測定。氨基酸定量和蛋白質(zhì)水解程度的測定。119NO2FO2N+H2N—CH—COOHRNO2O2NHN—CH—COOHR+HF弱堿性DNP-氨基酸（黃色）DNFBSanger法測定N末端氨基酸基礎(chǔ)NO2FO2N+H2N—CH—COOHRNO2O2NHN—120—N=C=S+N—CH—COOHHHRPITC—N—C—N—CH—COOHHHRSPTC-氨基酸—N—CHRSNCCOPTH-氨基酸pH8.3無水HF苯異硫氰酸酯PITC苯氨基硫甲酰衍生物苯乙內(nèi)硫脲衍生物Edman降解法基礎(chǔ)—N=C=S+N—CH—COOHHHRP121

R’COOHR’COOC=O+H2NCHC=NCHHRHR醛氨基酸Schiff’s堿-H20+H20

醛氨基酸Schiff’s堿-H20+H20122在生物體內(nèi)經(jīng)AA氧化酶催化即脫去α-氨基而轉(zhuǎn)變?yōu)橥?。氨基?教學(xué)講解課件)123（二）α-羧基參加的反應(yīng)1.成鹽或成酯反應(yīng)2.成酰氯反應(yīng)3.脫羧基反應(yīng)4.疊氮反應(yīng)（二）α-羧基參加的反應(yīng)1.成鹽或成酯反應(yīng)2.成酰氯反應(yīng)3124（2）成酯

NH2

干燥，HCl

RCHCOOH+C2H5OH

回流

RCHCOOC2H5+H2ONH3·Cl

保護(hù)羧基（1）與NaOH等形成鹽

（2）成酯

NH2125HN-保護(hù)基R—CH-COOH+PCl5

HN-保護(hù)基R—CH-COOCl+POCl3+HCl保護(hù)氨基活化羧基保護(hù)氨基活化羧基126

NH2脫羧酶R—CH-COOHR-CH2-NH2+CO2氨基酸(教學(xué)講解課件)127

YNHONH2NH2

R—CH—C—OCH3

YNHOHNO2

R—CH—C—NHNH2

YNHO

R—CH—C—N-—N+N+2H2O

?；被峒柞ル迈；被ｋ迈；被／B氮肽的人工合成

酰化氨基酸甲酯肼?；被ｋ迈；被／B氮肽的人工合成128（三）α-羧基和α-氨基都參加的反應(yīng)1、與茚三酮反應(yīng)

2、成肽反應(yīng)（三）α-羧基和α-氨基都參加的反應(yīng)1、與茚三酮反應(yīng)2、129弱酸加熱弱酸加熱130（四）側(cè)鏈R基參加的反應(yīng)1、Tyr2、堿性AA2、堿性AA3、帶硫AA（四）側(cè)鏈R基參加的反應(yīng)1、Tyr2、堿性AA2、堿性AA131Tyr酚基在3和5位上易發(fā)生親電取代反應(yīng)，如碘化和硝化黃色反應(yīng)Tyr酚基在3和5位上易發(fā)生親電取代反應(yīng)，黃色反應(yīng)132Pauly反應(yīng)Pauly反應(yīng)133His側(cè)鏈咪唑基與重氮苯磺酸生成棕紅色化合物Pauly反應(yīng)His側(cè)鏈咪唑基與重氮苯磺酸生成棕紅色化合物Pauly反應(yīng)134Arg側(cè)鏈胍基與環(huán)己二酮生成縮合物Arg側(cè)鏈胍基與環(huán)己二酮生成縮合物135Trp側(cè)鏈吲哚基能被N-溴代琥珀酰亞胺氧化——分光光度法測定Trp含量Trp側(cè)鏈吲哚基能被136Met側(cè)鏈上甲硫基：強(qiáng)親核基團(tuán)與烴化試劑成锍鹽保護(hù)巰基Met側(cè)鏈上甲硫基：強(qiáng)親核基團(tuán)與烴化試劑成锍鹽保護(hù)巰基137與二硫硝基苯甲酸發(fā)生硫醇-二硫化物交換pH8.0時412nm最大光吸收—分光光度法測定-SH與二硫硝基苯甲酸發(fā)生硫醇-二硫化物交換pH8.0時412nm138Cys的巰基不穩(wěn)定，易被氧化成二硫鍵巰基在有痕量的金屬離子如：Cu2+，F(xiàn)e2+，Co2+或Mn2+時，易被氧化Cys的巰基不穩(wěn)定，易被氧化成二硫鍵139Cys中的二硫鍵可被氧化劑（過甲酸）以及還原劑（巰基化合物）打開。磺基丙氨酸Cys中的二硫鍵可被氧化劑（過甲酸）以及還原劑（巰基化合物）140氨基酸(教學(xué)講解課件)141五、AA的光學(xué)活性和光譜性質(zhì)（一）AA的光學(xué)活性和立體化學(xué)五、AA的光學(xué)活性和光譜性質(zhì)（一）AA的光學(xué)活性和立體化學(xué)142氨基酸(教學(xué)講解課件)143氨基酸(教學(xué)講解課件)144氨基酸(教學(xué)講解課件)145氨基酸(教學(xué)講解課件)146（二）氨基酸的光譜性質(zhì)可見光區(qū)：無吸收遠(yuǎn)紫外和紅外區(qū)：都吸收近紫外區(qū)（200—400nm）：Tyr/Trp/Phe原因：-C=C-C=C-C=C-C=C-1、紫外吸收光譜（二）氨基酸的光譜性質(zhì)可見光區(qū)：無吸收1、紫外吸收光譜147Trp280nmTyr275nmPhe257nm蛋白質(zhì)含量測定280nmTrp280nm蛋白質(zhì)含量測定280nm148氨基酸(教學(xué)講解課件)149２、核磁共振波譜２、核磁共振波譜150六、氨基酸混合物的分析分離——利用AA成分分配系數(shù)的差異（一）分配層析法的一般原理六、氨基酸混合物的分析分離——利用AA成分分配系數(shù)的差異（151{層析系統(tǒng)固定相{流動相附著在固相上的液體固體{層析系統(tǒng)固定相{流動相附著在固相上的液體固體152

按兩相所處狀態(tài)分：流動相液體氣體固定相液體液液層析氣液層析固體液固層析氣固層析按兩相所處狀態(tài)分：流動相液體氣體固定相液體液液層析氣液153柱固定相裝于柱內(nèi)紙固定相是液體，吸附在濾紙上，將樣品點(diǎn)在紙上，用流動相展開薄層將有適當(dāng)粘度的固定相涂在薄板上薄膜與紙層析相似，紙用其它高分子有機(jī)吸附劑代替

按操作形式分：柱固定相裝于柱內(nèi)紙固定相是液體，吸附在濾紙上，將樣品點(diǎn)在紙上154吸附固體吸附能力不同分配液體分配系數(shù)不同離子交換離子交換劑親和性不同凝膠多孔凝膠，通過速度不同親和固定相只能與一種組分結(jié)合，——分開其它無親和力的組分

按層析原理分：固定相各組分對固定相吸附固體吸附能力不同分配液體155（二）分配柱層析

填充物為親水性的不溶物質(zhì)如纖維素、淀粉、硅膠等，收集的組分用茚三酮顯色定量。（二）分配柱層析填充物為親水性的不溶物質(zhì)如纖維素、156氨基酸(教學(xué)講解課件)157（三）紙層析（四）薄層層析（三）紙層析（四）薄層層析158（五）離子交換層析（五）離子交換層析159（六）氣液層析（六）氣液層析160固定相支持劑顆粒細(xì)，表面積大；采取高壓，洗脫速度快。（七）高效液相層析固定相支持劑顆粒細(xì)，表面積大；（七）高效液相層析161

4、教學(xué)必須從學(xué)習(xí)者已有的經(jīng)驗(yàn)開始?！磐?/p>

5、構(gòu)成我們學(xué)習(xí)最大障礙的是已知的東西，而不是未知的東西?！悹柤{

6、學(xué)習(xí)要注意到細(xì)處，不是粗枝大葉的，這樣可以逐步學(xué)習(xí)摸索，找到客觀規(guī)律?！焯亓?/p>

7、學(xué)習(xí)文學(xué)而懶于記誦是不成的，特別是詩。一個高中文科的學(xué)生，與其囫圇吞棗或走馬觀花地讀十部詩集，不如仔仔細(xì)細(xì)地背誦三百首詩?！熳郧?/p>

8、一般青年的任務(wù)，尤其是共產(chǎn)主義青年團(tuán)及其他一切組織的任務(wù)，可以用一句話來表示，就是要學(xué)習(xí)。——列寧

9、學(xué)習(xí)和研究好比爬梯子，要一步一步地往上爬，企圖一腳跨上四五步，平地登天，那就必須會摔跤了?！A羅庚

10、兒童的心靈是敏感的，它是為著接受一切好的東西而敞開的。如果教師誘導(dǎo)兒童學(xué)習(xí)好榜樣，鼓勵仿效一切好的行為，那末，兒童身上的所有缺點(diǎn)就會沒有痛苦和創(chuàng)傷地不覺得難受地逐漸消失。——蘇霍姆林斯基

11、學(xué)會學(xué)習(xí)的人，是非常幸福的人?！啄系?/p>

12、你們要學(xué)習(xí)思考，然后再來寫作。——布瓦羅14、許多年輕人在學(xué)習(xí)音樂時學(xué)會了愛。——萊杰

15、學(xué)習(xí)是勞動，是充滿思想的勞動?！獮跎晁够?/p>

16、我們一定要給自己提出這樣的任務(wù)：第一，學(xué)習(xí)，第二是學(xué)習(xí)，第三還