血常規(guī)尿常規(guī)白帶常規(guī)血型檢測的操作規(guī)范及質(zhì)量控制_第1頁
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文檔簡介

孕前優(yōu)生

血、尿、血型及陰道分泌物檢測

---操作規(guī)范&質(zhì)量控制內(nèi)容提要血液學(xué)檢驗的操作規(guī)范及質(zhì)量控制尿常規(guī)檢測的操作規(guī)范及質(zhì)量控制陰道分泌物檢測的操作規(guī)范及質(zhì)量控制ABO血型檢測的操作規(guī)范及質(zhì)量控制血液學(xué)檢驗的操作規(guī)范及質(zhì)量控制概述血液學(xué)檢測的操作規(guī)范血液學(xué)檢測的質(zhì)量控制危機(jī)值報告一、概述發(fā)展歷程由手工操作進(jìn)入半自動儀計數(shù),再進(jìn)入全自動血細(xì)胞分析儀測定,直到目前的全自動血細(xì)胞分析流水線這個里程碑式的歷程,見證了血常規(guī)檢驗技術(shù)的進(jìn)步。概念血液的一般檢查(血常規(guī)檢查):是對血液中的有形成分(紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板)的數(shù)量和質(zhì)量進(jìn)行檢測。包括全血細(xì)胞計數(shù)和白細(xì)胞的分類計數(shù)。三分類與五分類:儀器檢測原理三分類大都采用電阻抗檢測技術(shù);五分類的產(chǎn)品大都采用光散射檢測技術(shù)。白細(xì)胞分類方法三分群是將白細(xì)胞分為淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞,粒細(xì)胞;五分群則是將白細(xì)胞分為淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞(中性細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、嗜堿性細(xì)胞)。二、血液學(xué)檢測的操作規(guī)范2.三分類原理——電阻抗法

在待測液體中置一微孔,在微孔的兩端各加一定電壓的電極,當(dāng)液體中的顆粒經(jīng)過微孔時,電極間的電阻就會產(chǎn)生訓(xùn)瞬間的變化,因而產(chǎn)生電脈沖,對這種電脈沖進(jìn)行計數(shù)就可得到顆粒的數(shù)量,脈沖幅度的大小表示顆粒的體積的大小,經(jīng)過對各種細(xì)胞所產(chǎn)生脈沖的大小的電子的選者擇,可以區(qū)分出不同種類的細(xì)胞;在液體中加上一定的負(fù)壓就能使經(jīng)過微孔的液體流動3.五分類檢測原理容量、傳導(dǎo)、光散射分類法(VCS)阻抗、射頻和特殊稀釋液處理的聯(lián)合分類多角度偏振光三色分類法(MAPSS)光散射與細(xì)胞化學(xué)技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用分類法利用激光流式細(xì)胞分析系統(tǒng)加核酸熒光染色技術(shù)分類法4.操作規(guī)程開機(jī)后先做質(zhì)控,質(zhì)控通過后進(jìn)行樣本檢測將合格樣本編號,待檢標(biāo)本檢測1.上下顛倒試管將內(nèi)容物充分混勻,檢查有無凝血。2.將試管正確放入試管架上。3.按start鍵,樣品開始吸取。4.當(dāng)readyled暗(并發(fā)出兩聲短音)移開試管。5.當(dāng)readyled再次亮起時,準(zhǔn)備下一個樣品,重復(fù)上述步驟。5.鏡檢篩選為了保證血血液分析結(jié)結(jié)果準(zhǔn)確,,鏡檢是細(xì)細(xì)胞形態(tài)分分析的最終終手段。2005年國際血液液學(xué)復(fù)檢專專家組經(jīng)詳詳細(xì)分析后后,制定了了41條指導(dǎo)性自自動血細(xì)胞胞分析和分分類的復(fù)檢檢標(biāo)準(zhǔn)。三分群血液液分析儀::100%顯微鏡WBC分類及血細(xì)細(xì)胞形態(tài)檢檢查。三、血液學(xué)學(xué)檢測的質(zhì)質(zhì)量控制分析前質(zhì)量量控制分析中質(zhì)量量控制分析后質(zhì)量量控制四、危機(jī)值值報告RBC≤≤2.5××1012/LHGB<50g/L或>250g/LPLT<30×109/L或>600×109/LWBC<2.0×109/L或>28.0××109/L尿常規(guī)檢測測的操作規(guī)規(guī)范及質(zhì)量量控制尿液檢驗的的流程尿液干化學(xué)學(xué)檢查尿沉渣顯微微鏡檢查一、尿液檢檢驗流程二、尿液干化學(xué)學(xué)檢查(一)尿液干化學(xué)學(xué)分析的發(fā)發(fā)展1956年:美國人人Ames和Lilly發(fā)明了尿糖糖干化學(xué)試試帶1957年:利用““蛋白質(zhì)誤誤差”的原原理推出尿尿蛋白檢測測試帶,1958年:推出尿尿糖、尿蛋蛋白二聯(lián)試試帶1959年:推出尿尿糖、尿蛋蛋白、尿pH三聯(lián)試帶20世紀(jì)70年代:第一一臺干化學(xué)學(xué)分析儀問問世——現(xiàn)代尿液分分析自動化化的標(biāo)志試帶逐步發(fā)發(fā)展到多項項,八聯(lián)、、十聯(lián)、十十一聯(lián)、十十二聯(lián)從目測發(fā)展展到自動化化儀器檢測測,由半自自動化到全全自動化國產(chǎn)試劑代代替進(jìn)口試試劑。(二)尿干化化學(xué)分析儀儀分類按自動化程程度1.半自動尿液液分析儀::2.全自動尿液液分析儀::按檢測項目目8項:pH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、BLD、NIT10項:8項+LEU、SG11項:10項+VitC12項:10項+顏色、透明明度(三)尿液液分析儀的的原理尿液分析儀儀的測試原原理主要有有以下三個個方面尿液分析儀儀的試劑帶帶原理尿液分析儀儀測量原理理尿液分析儀儀計算原理理(四)尿干干化學(xué)試劑劑帶的使用用規(guī)范操作人員必須仔細(xì)閱閱讀試帶性性能和儀器器的操作方方法;操作中應(yīng)充充分混勻新新鮮尿液標(biāo)標(biāo)本;將試帶全部部迅速浸入入尿液標(biāo)本本;試帶從標(biāo)本本中取出時時,除去多多余的尿液液可疑結(jié)果必必須進(jìn)行確確診實驗;;干化學(xué)實驗驗結(jié)果應(yīng)與與理學(xué)、顯顯微鏡結(jié)果果相關(guān)聯(lián)。。不能丟掉鏡檢(五)尿干干化學(xué)檢測測的質(zhì)量控控制分析前質(zhì)量量控制人員培訓(xùn)建立標(biāo)準(zhǔn)操操作規(guī)程尿液標(biāo)本的的采集及保保存儀器設(shè)備定定期校準(zhǔn)和和保養(yǎng)尿試紙的正正確使用質(zhì)控品的選選擇三、尿沉渣渣顯微鏡檢檢查尿沉渣檢測測是對尿液液離心沉淀淀物中有形形成分的鑒鑒定。傳統(tǒng)統(tǒng)的尿沉渣渣檢測包括括用顯微鏡鏡對尿沉渣渣進(jìn)行定性性、定量檢檢查以及各各種有形成成分的計數(shù)數(shù)檢測;現(xiàn)現(xiàn)在可用尿尿液分析儀儀(試紙條法)及尿沉渣自自動分析儀儀,對尿中中某些有形形成分進(jìn)行行自動檢測測。尿液顯微鏡鏡檢測方法取混勻新鮮鮮晨尿10ml,1500rpm離心5min,留沉淀物物0.25-0.35ml混勻取50l涂片以弱光低倍倍鏡觀察,,用高倍鏡鏡辨認(rèn)記錄各類細(xì)細(xì)胞或各類類管型在10個視野內(nèi)所所見到的最最低和最高高數(shù)目紅細(xì)胞尿沉渣中不不染色紅細(xì)細(xì)胞典型形形狀為淺黃黃色雙凹盤盤狀。但受受PH、滲透壓及及紅細(xì)胞來來源的影響響,可發(fā)生生變化。堿性尿中紅紅細(xì)胞邊緣緣不規(guī)則,,高滲尿中中紅細(xì)胞因因脫水皺,,呈表面帶帶刺、顏色色較深的桑桑葚狀;低低滲尿中紅紅細(xì)胞因吸吸水脹大,,并可有血血紅蛋白逸逸出,呈大大小不等的的空環(huán)形,,稱紅細(xì)胞胞淡影。參考值:正正常平均每每高倍視野野0-3個,>3個/HP稱鏡下血尿尿。定量檢檢查0-5個/μL。尿液中主要要的有形成成分白細(xì)胞和膿膿細(xì)胞白細(xì)胞外形形完整,分分散存在,,以中性粒粒細(xì)胞多見見。膿細(xì)胞胞是指在炎炎癥過程中中破壞或死死亡的中性性粒細(xì)胞,,外形不規(guī)規(guī)則,常成成堆聚集存存在。參考值:正正常平均0-5個/高倍視野,,定量檢查查0-10個/μL上皮細(xì)胞::尿液中上皮皮細(xì)胞來自自腎至尿道道的整個泌泌尿系統(tǒng),,包括腎小小管上皮細(xì)細(xì)胞、移行行上皮細(xì)胞胞和復(fù)層扁扁平上皮細(xì)細(xì)胞。管型尿液中的蛋蛋白在腎小小管內(nèi)凝集集而成,尿尿內(nèi)出現(xiàn)管管型是腎實實質(zhì)病變的的證據(jù)。如如急性腎小小球腎炎多多見透明管管型和顆粒粒管型,慢慢性腎小球球腎炎多見見細(xì)、粗顆顆粒管型;;在慢性腎炎炎,腎病綜綜合癥,高高血壓腎損損傷時可見見透明管型型增多。結(jié)晶尿中出現(xiàn)結(jié)結(jié)晶稱晶體體尿。尿液中是否否析出結(jié)晶晶。取決于于某些物質(zhì)質(zhì)在尿液中中的溶解度度、濃度、、pH、溫度及膠膠體狀況等等因素。當(dāng)當(dāng)種種促進(jìn)進(jìn)與抑制結(jié)結(jié)晶折出的的因子和使使尿液過飽飽和狀態(tài)維維持穩(wěn)定動動態(tài)平衡的的因素失衡衡時,則可可見結(jié)晶折折出。報告方式分?jǐn)?shù)報告法法細(xì)胞成分::最低低~最高/HPF管型成分::最低低~最高/LPF加號報告法法以有形成分分占視野面面積來判定定,1/4視野為+,滿視野為++++。多用于細(xì)細(xì)胞數(shù)極多多和結(jié)晶、、粘液絲、脂脂肪滴、細(xì)細(xì)菌等的報報告。定量報告法法(/ml/ul)質(zhì)量控制標(biāo)本量應(yīng)達(dá)達(dá)到10ml,離心速度度在1500r/min,5min。細(xì)胞等有形形成分較多多時,應(yīng)在在載玻片上上選擇較薄薄處進(jìn)行檢檢查,防止止因遮蓋漏漏報或少報報。觀察管型時時光線不能能太強(qiáng),避避免透明管管型的漏檢檢。陰道分泌物物檢測的操操作規(guī)范及及質(zhì)量控制制概述標(biāo)本采集及及處理陰道分泌物物檢查的規(guī)規(guī)范化程序序質(zhì)量控制一、概述女性生殖系統(tǒng)統(tǒng)分泌的液體體,俗稱“白白帶”,主要要是由宮頸腺腺體和前庭大大腺的分泌物物組成,也含含有來自子宮宮內(nèi)膜和陰道道黏膜的分泌泌物。常用于女性生生殖系統(tǒng)炎癥癥、腫瘤的診診斷及雌激素素水平的判斷斷。二、標(biāo)本的采采集及處理常由婦產(chǎn)科醫(yī)師給給檢驗對象采采集,取材后后,棉拭子放于生理鹽水試管內(nèi)。制成生理鹽水水涂片固定、染色患者準(zhǔn)備:在在采集標(biāo)本前前24小時內(nèi)應(yīng)無性性交、無盆浴浴、無陰道灌灌洗、近期內(nèi)內(nèi)未服用激素素類藥物。標(biāo)本要求:用用無菌棉拭子子從陰道后穹穹隆處取分泌泌物;所用窺窺陰器不可用用潤滑劑,只只能用少量無無菌等滲鹽水水潤濕。標(biāo)本儲存:取取材后應(yīng)立刻刻檢查,避免免因放置時間間太久影響滴滴蟲的活動性性或蟲體受到到破壞使檢查查結(jié)果受到影影響。標(biāo)本運輸:一一般室溫運輸輸,如冬季氣氣溫較低應(yīng)注注意保溫運輸輸。三、陰道分泌泌物檢查的規(guī)規(guī)范化程序1.一般性狀檢查查:外觀檢查:正正常陰道分泌泌物為白色稀稀糊狀,無氣氣味,其量多多少與雌激素素水平高低和和生殖器官充充血程度有關(guān)關(guān)。PH值:在生理情情況下,由于于陰道桿菌的的作用使正常常健康婦女陰陰道pH<5.0?!緟⒖贾怠縫H4.0~4.5一般性狀檢查查陰道清潔度檢查【檢測方法】①涂片②高倍鏡③觀察判斷陰陰道清潔度2.顯微鏡檢查濕片檢查a.NS1滴b.標(biāo)本涂抹混勻勻分級微生物及寄生生蟲檢查滴蟲主要是陰道毛毛滴蟲,致滴滴蟲性陰道炎炎。檢測采用用生理鹽水懸懸滴法或濕片片法,滴蟲呈梨形,,后端尖,約約為白細(xì)胞的的2~3倍大小。低倍顯微鏡下下可見波動狀狀或螺旋狀運運動。真菌采用懸滴法于于低倍鏡下可可見到白色絲絲假酵母菌的的卵圓形孢子子和假菌絲。。如取陰道分分泌物涂片并并時行革蘭氏氏染色后油觀觀察,可見芽芽孢、孢子或或與出芽細(xì)胞胞相連接的菌菌絲,成鏈狀狀及分支狀。。陰道加德納菌菌陰道加德納菌菌為革蘭氏染染色陰性或染染色不定小桿桿菌。大小為為1.5-2.5μm,具有多形性性,呈桿狀或或球桿狀,致致陰道分泌物物PH>4.5,胺試驗陽性性。淋球菌革蘭氏染色陰陰道性雙球菌菌,形似腎或或咖啡豆?fàn)?,,凹面相對,,除散在于白白?xì)胞之間外外,還可見其其被吞噬于中中性粒細(xì)胞胞胞質(zhì)之內(nèi),因因淋病奈瑟菌菌對各種理化化因子抵抗力力弱,涂片法法可被漏診,,必要時可進(jìn)進(jìn)行淋病奈瑟瑟菌培養(yǎng),且且有利于菌株株分型和藥過過敏試驗。四、質(zhì)量控制制結(jié)果報告應(yīng)全全面,符合規(guī)規(guī)范;首先報報告陰道分泌泌物清潔度,,其次報告所所發(fā)現(xiàn)的病原原微生物。分析檢測結(jié)果果之間的關(guān)聯(lián)聯(lián)性。檢驗報告的審審核、簽發(fā)、、登記。ABO血型檢測的操操作規(guī)范及質(zhì)質(zhì)量控制概述ABO血型鑒定的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)規(guī)程ABO血型檢測的質(zhì)質(zhì)量控制常見的問題一、概述血型的概念血型(bloodgroup)是人體血液的的一種遺傳性性狀。20世紀(jì)初發(fā)現(xiàn)紅紅細(xì)胞ABO血型系統(tǒng)以來來,血型的概概念僅指紅細(xì)細(xì)胞表面抗原原的差異。隨著對血型研研究的進(jìn)展,,白細(xì)胞、血血小板和血清清中血型抗原原的發(fā)現(xiàn),血血型已被認(rèn)為為是指各種血血液成分的遺遺傳多態(tài)性標(biāo)標(biāo)記。KarlLandsteiner奧地利科學(xué)家家1901年發(fā)現(xiàn)人類ABO血型系統(tǒng)二、標(biāo)準(zhǔn)化操操作規(guī)程方法一:玻片片法試驗原理:根根據(jù)紅細(xì)胞上上有或無A抗原或/和B抗原,將血型型分為A型、B型、AB型及O型四種。A型紅細(xì)胞膜上上含有A抗原,B型紅細(xì)胞膜上上含有B抗原,AB型紅細(xì)胞膜上上含有A、B抗原,抗A、抗B試劑是分別針針對A抗原和B抗原的特異性性抗體??衫眉t細(xì)胞凝凝集試驗,通通過正、反定定型準(zhǔn)確鑒定定ABO血型。適用范圍:初初篩血型或普普通體檢操作步驟:取清潔玻片1張(或白瓷板板1塊),用肥皂皂水刷洗后晾晾干,用蠟筆筆劃出小格,,并注明A、B字樣。將抗A試劑、抗B試劑各一滴分分別滴于玻片片(或瓷盤))上A、B處。分別取等等體積待檢血血樣(5%-10%紅細(xì)胞懸液液或全血)于于抗A試劑和抗B試劑。另取潔凈玻片片1張(或白瓷板板1塊),用記號號筆劃成方格格,標(biāo)明A細(xì)胞、B細(xì)胞和O細(xì)胞,用滴管管各加受檢者者血清1滴,再分別用用滴管滴加A、B和O型試劑紅細(xì)胞胞懸液1滴。用不同的竹簽簽將分型試劑劑與待檢血樣樣調(diào)勻,同時時不停的搖動動玻片(或瓷瓷盤)并觀察察血型凝集((或溶血)反反應(yīng)。如以玻玻片做試驗時時,也可用低低倍鏡觀察結(jié)結(jié)果。方法二:試管管法試驗原理:根根據(jù)紅細(xì)胞上上有或無A抗原或/和B抗原,將血型型分為A型、B型、AB型及O型四種??衫眉t細(xì)胞凝凝集試驗,通通過正、反定定型準(zhǔn)確鑒定定ABO血型。正定型型,是用已知知的抗A、抗B分型血清來測測定紅細(xì)胞膜膜上有無相應(yīng)應(yīng)的A抗原或/和B抗原所謂;反反定型是用已已知A細(xì)胞和B細(xì)胞來測定血血清中有無相相應(yīng)的抗A或/和抗B。試劑:抗A、抗B分型標(biāo)準(zhǔn)血清清(單克隆抗抗體)2﹪~4﹪A1型、B型和O型試劑紅細(xì)胞胞懸液受檢者新鮮血血清受檢者2﹪~4﹪紅細(xì)胞鹽水懸懸液操作步驟:1.取潔凈試管2支,分別標(biāo)記記:編號、抗抗A抗B2.分別加抗A、抗B分型血清各2滴于試管底部部,再以吸管管分別加入受檢檢者2﹪~4﹪紅細(xì)胞鹽水懸懸液1滴,混合3.取潔凈試管3支,分別標(biāo)記記:編號、AC、BC、OC4.用吸管分別加加入受檢者血血清2滴于試管底部部,再分別加加入2﹪~4﹪A1型、B型和O型試劑紅細(xì)胞胞懸液1滴,混合。5.取潔凈試試管1支,標(biāo)標(biāo)記:編號、、自身6.用試管分分別加入受檢檢者血清2滴滴和受檢者紅紅細(xì)胞懸液1滴混合。7.離心:根根據(jù)試劑說明明書選擇離心心轉(zhuǎn)速和。8.待離心機(jī)機(jī)停止后,取取出試驗管,,肉眼觀察有有無溶血現(xiàn)象象,然后將試試管輕輕搖動動,使沉于管管底的紅細(xì)胞胞再懸浮,觀觀察凝聚強(qiáng)度度,必要時以以低倍鏡觀察察結(jié)果時間方法三:微柱柱凝膠法原理:在微柱柱凝膠介質(zhì)中中,紅細(xì)胞抗抗原與相應(yīng)抗抗體結(jié)合,利利用凝膠

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