植物器官的培養(yǎng)

關(guān)于植物器官的培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/102一、器官培養(yǎng)的種類包括離體的根、莖、葉、花器和果實(shí)的培養(yǎng)。以器官作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，是植物組織培養(yǎng)中最主要的一個(gè)方面，進(jìn)行的植物種類最多，應(yīng)用的范圍也最廣。第一節(jié)概述現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/103

二、器官培養(yǎng)的意義：

1.器官培養(yǎng)是研究器官生長(zhǎng)、營(yíng)養(yǎng)代謝、生理生化、組織分化和形態(tài)建成的最好材料和方法；2.器官培養(yǎng)在生產(chǎn)實(shí)踐上具有重要的應(yīng)用價(jià)值.

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/104

如利用莖、葉和花器培養(yǎng)建立的試管苗，可在短期內(nèi)提高繁殖速率，進(jìn)行名貴品種的快速繁殖；利用莖尖培養(yǎng)可得到脫毒試管苗，解決品種的退化問(wèn)題，提高產(chǎn)量和質(zhì)量；將植物器官作誘變處理，用器官培養(yǎng)可得到突變株，進(jìn)行細(xì)胞突變育種?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/105植物器官培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)器官培養(yǎng)生殖器官培養(yǎng)根培養(yǎng)莖培養(yǎng)（包括莖尖、莖段）葉培養(yǎng)（包括葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉）花培養(yǎng)（包括花托、花瓣、花絲、花柄、子房、花藥）種子培養(yǎng)（包括成熟與未成熟）胚胎培養(yǎng)（包括幼胚、成熟胚、胚珠、子房、胚乳培養(yǎng)）現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/106第二節(jié)營(yíng)養(yǎng)器官的培養(yǎng)一、離體根的培養(yǎng)二、莖尖的培養(yǎng)三、莖段的培養(yǎng)四、離體葉的培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/107一、離體根的培養(yǎng)

（一）意義：①生理代謝研究的優(yōu)良實(shí)驗(yàn)體系②研究器官分化形態(tài)建成的良好體系③建立快速生長(zhǎng)的根無(wú)性系④進(jìn)行誘變育種現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1081.培養(yǎng)基選擇

White培養(yǎng)基；2/3或1/2MS和B5培養(yǎng)基注：離體根生長(zhǎng)要求提供全部必需元素，蔗糖、硝態(tài)氮效果好，加入B1、B6最重要，生長(zhǎng)素對(duì)離體根影響不一致。培養(yǎng)溫度25－27℃，暗光培養(yǎng)。（二）培養(yǎng)方法現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1092.無(wú)性繁殖系的建立

種子消毒→→接種→→待根伸長(zhǎng)后從根尖一端切取長(zhǎng)1.2cm的根尖→→接種于培養(yǎng)基→→發(fā)育出側(cè)根→→待側(cè)根生長(zhǎng)約1周后切取側(cè)根的根尖進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)→→又迅速生長(zhǎng)并長(zhǎng)出側(cè)根→→切下進(jìn)行培養(yǎng)，如此反復(fù)→→得到從單個(gè)根尖衍生而來(lái)的離體根的無(wú)性系。

3.培養(yǎng)條件

暗光和溫度25-27℃?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1010根無(wú)性繁殖系的建立根無(wú)性繁殖系無(wú)菌種子

1.2cm接后1周側(cè)根反復(fù)轉(zhuǎn)接現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1011

4.植株再生培養(yǎng)

根段的離體培養(yǎng)也可以用來(lái)再生植株。第一步誘導(dǎo)形成愈傷組織。第二步在再分化培養(yǎng)基上誘導(dǎo)芽的分化、在愈傷組織上分化成小植株。

離體根愈傷組織分化芽再生植株再分化培養(yǎng)基脫分化培養(yǎng)基現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1012二、莖尖的培養(yǎng)（一）莖尖培養(yǎng)概念及類型（二）莖尖培養(yǎng)方法及步驟現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1013

(一)莖尖培養(yǎng)概念及類型

1.莖尖培養(yǎng)：切取莖的先端部分或莖尖分生組織部分，進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)。莖尖培養(yǎng)根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小可分為：

2.微莖尖培養(yǎng):帶有1-2個(gè)葉原基的生長(zhǎng)錐,其長(zhǎng)度不超過(guò)0.5mm。

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10143.普通莖尖培養(yǎng)：較大的莖尖(如幾mm到幾十mm)、芽尖及側(cè)芽。這里主要講普通莖尖培養(yǎng)。這種培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)單，操作方便，莖尖容易成活，成苗所需時(shí)間短。4.莖尖培養(yǎng)的意義：普通莖尖培養(yǎng)技術(shù)簡(jiǎn)單，操作方便，易成活，成苗時(shí)間短，加快繁殖。微莖尖培養(yǎng)可獲得脫毒苗；現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1015（二）莖尖培養(yǎng)方法及步驟取材材料處理及消毒培養(yǎng)接種馴化移栽現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1016①直接取材：在生長(zhǎng)旺盛、枝條健壯、無(wú)病的母株上選生長(zhǎng)不久、雜菌污染少的頂梢（1－2cm）（取前可噴殺菌藥，可頂芽或側(cè)芽）。②從試管苗獲取。1、取材取1-2㎝頂梢現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10172、材料處理及消毒

將采集到的莖尖切成0.5-1.0cm長(zhǎng)→→去葉（休眠芽預(yù)先剝除鱗片）→→流水沖洗2-4h→→75％的酒精中處理30s→→稀釋20倍的次氯酸鈉中浸5-8min(取自老枝條上的可適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間）

→→用無(wú)菌水沖洗數(shù)次，準(zhǔn)備接種。

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1018

3、接種

接種前再剝掉一些葉片，使莖尖0.5cm→→接種要求：隨切隨接，動(dòng)作迅速。亦可將切下莖尖材料在1－5%VC液中浸一下?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10194、培養(yǎng)的方法和程序（1）培養(yǎng)基①基本培養(yǎng)基MS、White、B5、

Heller培養(yǎng)基。

②蔗糖作碳源效果好，濃度2－3%。③激素（2，4-D，IAA，NAA）和有機(jī)添加物有明顯影響。但激素濃度以0.1mg/L為宜，不要太高?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第十九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1020生長(zhǎng)太慢：莖尖不增大→→變綠→→細(xì)胞逐漸老化→→休眠原因:生長(zhǎng)素濃度太低；溫度過(guò)低或過(guò)高；生長(zhǎng)太快：莖尖迅速增大→→愈傷組織→→喪失成苗能力原因:生長(zhǎng)素濃度過(guò)高；光照太弱或溫度太高；生長(zhǎng)正常：莖尖基部稍增大并形成少量愈傷組織，莖尖顏色逐漸變綠，并伸長(zhǎng)，葉原基發(fā)育成可見(jiàn)的小葉，進(jìn)而形成小苗。莖尖生長(zhǎng)狀態(tài)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1021（2）初代培養(yǎng)條件

每天光照16h，光強(qiáng)度1500-30001x，

溫度25±2℃

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1022（3）繼代培養(yǎng)

莖尖長(zhǎng)成的新梢→→切成小段→→增殖培養(yǎng)基中→→1個(gè)月左右→→新梢又可切成小段→→再轉(zhuǎn)入新培養(yǎng)基→→建立和維持了莖尖無(wú)性系。（即微型扦插）

繼代培養(yǎng)可用MS培養(yǎng)基。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1023

（4）誘導(dǎo)生根

采用1／2MS培養(yǎng)基加入一定的生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)物質(zhì)，如NAA、IBA等。新梢基部浸入50或100mg/l的IBA溶液處理4-8h，然后轉(zhuǎn)移到無(wú)激素的生根培養(yǎng)基中?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1024(5)馴化移栽入土

在生根培養(yǎng)1個(gè)月左右→→生長(zhǎng)健壯而發(fā)達(dá)的根系→→煉苗→→移栽→→管理（溫、光、濕、氣）現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1025

（一）定義：指不帶芽和帶一個(gè)以上定芽或不定芽（包括塊莖、球莖在內(nèi)）的幼莖切段的無(wú)菌培養(yǎng)。

三、莖段培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1026（二）意義：

快速繁殖；探討莖細(xì)胞的生理特點(diǎn)進(jìn)行育種上的篩選突變體的過(guò)程現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1027（三）培養(yǎng)步驟1.材料的選擇和處理

（1）取材：當(dāng)年生嫩枝→→去葉→→剪成5cm的小段→→自來(lái)水沖洗1-3h

注：生長(zhǎng)期取芽，外植體取枝條頂部或中部莖段?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1028（2）消毒與接種：

將材料切割成2-3cm長(zhǎng)短→→無(wú)菌條件下用75％酒精滅菌30-60s

→無(wú)菌水沖洗→→0.1％升汞浸泡3-8min（飽和漂白粉浸泡10-20min）→→無(wú)菌水沖洗數(shù)次→切割成0.5cm→以備接種?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10292.培養(yǎng)

(1)培養(yǎng)基的選擇：MS+3％蔗糖+0.7％瓊脂+激素（促進(jìn)腋芽增殖6-BA﹥Kt和Ze）(2)培養(yǎng)條件：保持25℃左右，給予充分的光照和光期現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第二十九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1030(3)繼代培養(yǎng)：

途徑一：促進(jìn)腋芽的快速生長(zhǎng)優(yōu)點(diǎn)：不會(huì)產(chǎn)生變異，方法簡(jiǎn)便，每年從一個(gè)芽可增殖10萬(wàn)株以上途徑二：誘導(dǎo)形成大量不定芽。優(yōu)點(diǎn)：產(chǎn)生變異。繼代增殖過(guò)程注意選用培養(yǎng)基和生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1031（4）生根培養(yǎng)

目的：使再生的大量試管苗形成根系，獲得完整的植株。培養(yǎng)基選擇：1/2，1/3或1/4的MS，B5培養(yǎng)基或White培養(yǎng)基附加生長(zhǎng)素（濃度NAA0.1-1.0mg/L，IBA和IAA可稍高）而降低或除去細(xì)胞分裂素。最好添加0.3％活性炭，以促進(jìn)生根

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1032

3.移植

移植是一個(gè)由異養(yǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)樽责B(yǎng)的過(guò)程。試管苗→→煉苗→→取苗→→洗凈瓊脂→→小心移栽→→苗期管理（初期濕度要大，基質(zhì)通氣濕潤(rùn)，保濕保溫）現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1033

（一）定義：

離體葉培養(yǎng)指包括葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉在內(nèi)的葉組織的無(wú)菌培養(yǎng)。它大多經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再由愈傷組織分化出莖和根。其中葉片培養(yǎng)是一個(gè)典型的代表。

四、離體葉的培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1034（二）意義：

1.是繁殖稀有名貴品種的有效手段；

2.可用于研究形態(tài)建成、光合作用、葉綠素形成等理論問(wèn)題。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1035（三）葉片的離體培養(yǎng)方法

發(fā)育方式：葉片培養(yǎng)再生成完整植株有兩種方式：①是直接誘導(dǎo)形成芽和根→→完整植株；

②是先誘導(dǎo)形成愈傷組織，再經(jīng)愈傷組織分化形成芽和根→→完整植株。其中，以第二種方式最為常見(jiàn)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1036葉片離體培養(yǎng)發(fā)育方式（成苗途徑）葉原基葉鞘葉片子葉葉柄愈傷組織莖和根試管苗

不定芽現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1037

1.材料選擇及滅菌

取植物的幼嫩葉片，切割成適當(dāng)大?。?—3cm），在流水中沖洗干凈。再用70％酒精浸泡約10s→→飽和漂白粉液中浸3-15min，或在0.1％升汞中浸3-5min→→無(wú)菌水沖洗數(shù)次→→無(wú)菌的干濾紙上吸干水分→→接種。注：細(xì)嫩與成熟葉片消毒時(shí)間不同現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10382.接種

外植體大?。?.5cm2薄片（葉柄、子葉）上表皮朝上接種培養(yǎng)基。最好帶葉脈，注意極性現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10393.培養(yǎng)

（1）培養(yǎng)基：

MS、B5、White、N6；蔗糖3%；2.4－D利于愈傷組織形成，NAA抑制芽形成，利于根發(fā)生，KT、6-BA利于芽形成。愈傷組織誘導(dǎo)：BA1-3mg/L,NAA0.25-1mg/L；

分化培養(yǎng)：CTK2mg/L；

生根培養(yǎng)：NAA0.5－1.0mg/L現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第三十九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1040(2)培養(yǎng)過(guò)程：

培養(yǎng)約2周至4周→→形成愈傷組織→→再分化培養(yǎng)基上（附加6-BA2mg／L）進(jìn)行分化培養(yǎng)→→約10d左右，愈傷組織開(kāi)始轉(zhuǎn)綠出現(xiàn)綠色芽點(diǎn)→→發(fā)育成無(wú)根苗→→生根培養(yǎng)基（附加NAA0.5-lmg/L）→→發(fā)育形成完整植株。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1041(3)培養(yǎng)條件：

溫度：25±2℃

光照時(shí)間：10-12h，光照強(qiáng)度：1500-3000Lx?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1042

葉的培養(yǎng)比胚，莖尖和莖段培養(yǎng)難度大。首先要選用易培養(yǎng)成功的葉組織，如幼葉比成熟葉易培養(yǎng)，子葉比葉片易培養(yǎng)。其次要添加適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，保證利于葉組織的脫分化和再分化。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1043第二節(jié)生殖器官的培養(yǎng)一、花器官的培養(yǎng)二、種子的培養(yǎng)三、胚胎的培養(yǎng)四、胚珠培養(yǎng)五、子房培養(yǎng)六、胚乳培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1044一、花器官的培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10451.定義：花器官培養(yǎng)指整個(gè)花器及其組成部分如花托、花瓣、花絲、花柄、子房、花藥等的無(wú)菌培養(yǎng)。

一、花器官的培養(yǎng)（花蕾）現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10462、意義：

通過(guò)離體花芽培養(yǎng)可了解整體植物和內(nèi)源激素在花芽性別決定中所起的作用可以了解花器各部分對(duì)果實(shí)和種子發(fā)育的作用內(nèi)、外源激素在果實(shí)種子發(fā)育過(guò)程中的調(diào)控作用生產(chǎn)上也可用于珍貴品種的擴(kuò)大繁殖。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1047

3.培養(yǎng)方法

(1)取材、消毒

從健壯植株上取未開(kāi)放的花蕾→75％酒精浸潤(rùn)約30s→飽和漂白粉浸泡10-15min（或0.1％升汞中浸3-5min）→無(wú)菌水沖洗數(shù)次→接種。

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1048(2)接種花蕾培養(yǎng)：花梗插入培養(yǎng)基中。部分花器培養(yǎng)：切片接入培養(yǎng)基中(3)培養(yǎng)培養(yǎng)基：MS、B5。附加生長(zhǎng)素（NAA0.1mg/L）和細(xì)胞分裂素（6-BA2mg/L），誘導(dǎo)形成愈傷組織或胚狀體，再分化培養(yǎng)成植株現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1049培養(yǎng)條件：溫度：25±2℃

光照時(shí)間：10-12h，光照強(qiáng)度：1500-3000Lx培養(yǎng)約1周，形成少量愈傷組織。再經(jīng)1個(gè)月就分化出綠色芽點(diǎn)，再切割轉(zhuǎn)接，可形成大量無(wú)根苗，經(jīng)長(zhǎng)根成植株，用于繁殖。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第四十九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1050二、種子培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1051定義：

種子培養(yǎng)是指受精后發(fā)育完全的成熟種子和發(fā)育不完全的未成熟種子的無(wú)菌培養(yǎng)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10522.意義：可以打破種子休眠，促進(jìn)萌發(fā)；解決遠(yuǎn)緣雜種敗育性，產(chǎn)生后代；快速繁殖苗木優(yōu)點(diǎn)：植株分化容易，無(wú)菌操作方便現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1053

3.培養(yǎng)技術(shù)

(1)種子滅菌

種皮厚或不飽滿的種子，宜用0.1％升汞消毒10-20min。幼嫩的或發(fā)育不全的種子，宜用飽和漂白粉消毒15-30min。若種子上有絨毛或蠟質(zhì)，應(yīng)先用95％酒精或吐溫40處理，提高消毒效果。對(duì)殼厚難萌發(fā)的種子，可去殼培養(yǎng)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1054(2)培養(yǎng)基：A.促種子萌發(fā)用MS培養(yǎng)基，加或不加激素，誘導(dǎo)愈傷組織則可加入6-BA或2,4-D。B.無(wú)胚乳種子應(yīng)適當(dāng)加生長(zhǎng)素。C.一般糖濃度為1-3%。D.打破休眠可加GA，或在接種前浸種處理?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1055(3)接種培養(yǎng)

把種子按每瓶3-5粒放人培養(yǎng)瓶中，均勻排列

培養(yǎng)條件：溫度20-28℃光強(qiáng)1000-20001x，每天光照10-12h現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1056植物胚胎培養(yǎng)是胚及胚器官(如子房、胚珠)在離體無(wú)菌條件下，使胚發(fā)育成幼苗的技術(shù)。包括幼胚培養(yǎng)、成熟胚培養(yǎng)、胚珠培養(yǎng)、子房培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)等。三、胚胎的培養(yǎng)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1057胚胎培養(yǎng)已有近百年的歷史：1904年的Haning最早成功地培養(yǎng)了蘿卜和辣椒的胚，并萌發(fā)形成小苗。30年代成功地把蘭科植物的胚培養(yǎng)成小植株。40年代在蘋(píng)果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、馬鈴薯、甘藍(lán)與大白菜的種間雜種的胚胎培養(yǎng)、胚乳培養(yǎng)及子房與胚珠培養(yǎng)均取得了不同程度的進(jìn)展現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1058（一）胚胎培養(yǎng)的意義克服遠(yuǎn)緣雜種的不育性；使胚發(fā)育不全的植物獲得后代縮短育種年限；研究與胚發(fā)育有關(guān)的內(nèi)外因素現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1059（二）離體胚培養(yǎng)

離體胚培養(yǎng)包括胚胎發(fā)生過(guò)程中不同發(fā)育期的胚，一般可分為成熟胚和幼胚培養(yǎng)。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第五十九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/10601.成熟胚培養(yǎng)

指子葉期后至發(fā)育完全的胚。培養(yǎng)較易成功，在含有大量無(wú)機(jī)元素和糖的基本培養(yǎng)基上，就能正常生長(zhǎng)成幼苗。將成熟或未成熟種子用70％酒精進(jìn)行幾秒鐘的表面消毒→無(wú)菌水沖洗3-4次→無(wú)菌條件下進(jìn)行解剖，取出胚并接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1061

培養(yǎng)基：WhiteTukeyMS無(wú)機(jī)鹽+糖(1-2%)+生長(zhǎng)輔助物質(zhì)(激素、AA、活性炭、維生素等)現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1062幼胚是指子葉期以前的幼小胚。由于幼胚培養(yǎng)在遠(yuǎn)緣雜交育種上有極大的利用價(jià)值，其研究應(yīng)用越來(lái)越深入廣泛。幼胚培養(yǎng)技術(shù)：心形期胚或更早期的胚（長(zhǎng)度僅0.1～0.2mm）胚越小就越難培養(yǎng),幼胚培養(yǎng)成功的有大麥、薺菜、甘蔗、甜菜、胡蘿卜等

2.幼胚（未成熟胚）培養(yǎng)：現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1063（1）未成熟胚胎的培養(yǎng)有三種不同的發(fā)育方式：a.繼續(xù)進(jìn)行正常的胚胎發(fā)育，維持“胚性生長(zhǎng)”；b.早熟萌發(fā)，即培養(yǎng)后迅速萌發(fā)成幼苗；c.胚在培養(yǎng)基中發(fā)生細(xì)胞增殖形成愈傷組織，并由此再分化形成多個(gè)胚狀體或芽原基。

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1064（2）幼胚培養(yǎng)技術(shù)幼胚培養(yǎng)的操作方法與成熟胚培養(yǎng)方法基本相同。值得注意的是切取幼胚必須在高倍解剖鏡下進(jìn)行，操作時(shí)要細(xì)心，盡量取出完整的胚。幼胚培養(yǎng)成功的關(guān)鍵，是提供幼胚所必需的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十四頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1065

①培養(yǎng)基幼胚對(duì)培養(yǎng)基要求較高，常用的培養(yǎng)基有Tukey，Nitch、MS，B5培養(yǎng)基；通常存在的影響條件如下：現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十五頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1066②生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)

不同植物的胚培養(yǎng)需要的生長(zhǎng)物質(zhì)不同。如IAA可明顯促進(jìn)向日葵胚的生長(zhǎng)；IAA，Kt的共同作用可促進(jìn)薺菜幼胚的生長(zhǎng)；一般認(rèn)為IAA可使胚的長(zhǎng)度增加；加入BA可提高胚的生存機(jī)會(huì)；現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十六頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1067③天然提取物的作用

椰乳對(duì)胚培養(yǎng)有一定的促進(jìn)作用（番茄胚在含有50%椰乳的培養(yǎng)基中可維持生長(zhǎng)）一些瓜類的胚乳提取物能促進(jìn)胚生長(zhǎng)的能力。現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十七頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1068④溫光條件

對(duì)于大多數(shù)植物的胚來(lái)說(shuō)，在25-30℃為宜早熟果樹(shù)如桃的種胚，必須經(jīng)過(guò)一定的低溫春化階段才能正常萌發(fā)生長(zhǎng)，而馬鈴薯胚以20℃為好。光照可以促進(jìn)某些植物胚的轉(zhuǎn)綠，利于胚芽生長(zhǎng)，而黑暗則利于胚根生長(zhǎng)。因此以光暗交替培養(yǎng)較為有利?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十八頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1069⑤其它條件

胚培養(yǎng)中除要求較高的蔗糖（4.5%）濃度、高滲透壓以外，還要求較高濃度的氨基酸及無(wú)機(jī)鹽?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第六十九頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1070四、胚珠培養(yǎng)（一）定義：胚珠培養(yǎng)是將授粉的子房在無(wú)菌條件下解剖后，取胚珠置于培養(yǎng)基培養(yǎng)的過(guò)程。有時(shí)也把胚珠連同胎座一起取下來(lái)培養(yǎng)?，F(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七十頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1071柱頭花柱子房花?；ㄍ谢ńM成現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七十一頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1072胚囊卵細(xì)胞株心珠孔反足細(xì)胞珠被胚珠極核

株柄現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七十二頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1073（二）意義：

胚珠培養(yǎng)可以解決象蘭科植物成熟胚較小不易培養(yǎng)的問(wèn)題。另一方面在未受精的胚珠培養(yǎng)中，可誘發(fā)大孢子發(fā)育成單倍體，用于單倍體育種。

現(xiàn)在學(xué)習(xí)的是第七十三頁(yè)，共81頁(yè)2023/1/1074（三）培養(yǎng)技術(shù)：

從花中取出子房→→70%酒精消毒30