微生物基礎知識及衛(wèi)生管理培訓

微生物基礎知識及衛(wèi)生管理培訓《藥品生產質量管理規(guī)范》附錄中第二十條凡在潔凈區(qū)工作的人員（包括清潔工和設備維修工）應當定期培訓，使無菌藥品的操作符合要求。培訓的內容應當包括衛(wèi)生和微生物方面的基礎知識。未受培訓的外部人員（如外部施工人員或維修人員）在生產期間需進入潔凈區(qū)時，應當對他們進行特別詳細的指導和監(jiān)督。第二十九條所有人員都應當接受衛(wèi)生要求的培訓，企業(yè)應當建立人員衛(wèi)生操作規(guī)程，最大限度地降低人員對藥品生產造成污染的風險第三十一條企業(yè)應當對人員健康進行管理，并建立健康檔案。直接接觸藥品的生產人員上崗前應當接受健康檢查，以后每年至少進行一次健康檢查。第三十二條企業(yè)應當采取適當措施，避免體表有傷口、患有傳染病或其他可能污染藥品疾病的人員從事直接接觸藥品的生產。第三十五條進入潔凈生產區(qū)的人員不得化妝和佩帶飾物。第三十六條生產區(qū)、倉儲區(qū)應當禁止吸煙和飲食，禁止存放食品、飲料、香煙和個人用藥品等非生產用物品。12一月20232微生物的定義

微生物:存在于自然界中的一群體型細小、結構簡單、肉眼看不見，必須借助于特殊儀器放大后才能觀察到的微小生物。按其結構、化學組成及生活習性可分為:★原核類:僅有原始核質，無核仁或核膜，細胞器很不完善。如細菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體、螺旋體

★真核類:細胞核的分化程度較高，有核膜、核仁和染色體，細胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌）、原生動物、藻類★非細胞類:體積微小，能通過除菌過濾器。如病毒和朊病毒等按其致病性可分為:★病原性微生物★非病原性微生物12一月20233微生物分布廣泛江河、湖海、土壤、空氣中都存在種類不一、數(shù)量不等的微生物，人體體表、體內亦有多種微生物的存在土壤中微生物最豐富，1克土壤中可有幾億到幾十億個大多數(shù)微生物對人類是有益的，而且是必需的自然界中N、C、S等多種元素要靠微生物的代謝活動來循環(huán)

固氮菌。農業(yè)制造菌肥。工業(yè)用于食品發(fā)酵、皮革、石油化工、醫(yī)藥。正常情況下，寄生在人體的微生物是無害的，有些尚具有拮抗病原微生物的作用，腸道正常菌群，大腸桿菌等提供人體必需的硫胺素、核黃素、氨基酸等。沒有微生物，植物就不能新陳代謝，人類和動物也難以生存12一月20234微生物學（microbiology)：研究微生物在一定條件下的形態(tài)、結構、生命活動和規(guī)律、進化、分類以及與人類、動物、植物、自然界相互關系等問題的一門科學微生物學的發(fā)展歷史（一）經(jīng)驗時期制酒（公元前兩千年前，制酒）制醋（二）實驗微生物學時期列文·虎克顯微鏡巴斯德有機物發(fā)酵與腐敗與微生物防酒發(fā)酵成醋-巴氏消毒12一月20235★微生物學的開山祖—列文虎克

1674年荷蘭人列文虎克用自己制造的能放大200-300倍的顯微鏡觀察了污水、牙垢、腐敗有機物等，發(fā)現(xiàn)了許許多多肉眼看不見的微小的生物，為微生物的存在提供了有力的證據(jù)。12一月20236微生物學的發(fā)展歷史★微生物學的奠基人—巴斯德：從1862年起法國科學家巴斯德解決了葡萄酒變酸問題、發(fā)明了巴斯德滅菌法、醫(yī)治了蠶病、炭疽病和瘋狗病而成為偉大的微生物奠基人。微生物方法學和醫(yī)學微生物學的奠基人—科赫：德國科學家科赫發(fā)現(xiàn)了炭疽桿菌、結核桿菌、霍亂弧菌、鼠疫桿菌，并第一次用科學的方法證明某種特定的微生物是某種特定疾病的病原。于1905年，獲得了諾貝爾醫(yī)學和生理學獎，主要是為了表彰他在肺結核研究方面的貢獻。12一月20237微生物學的發(fā)展歷史（三）現(xiàn)代微生物學時期隨化學、物理學、生化、遺傳學、細胞生物學、分子生物學等學科的發(fā)展，以及電子顯微鏡、組織化學、細胞培養(yǎng)、免疫熒光、免疫酶、同位素標記、分子雜交等新技術的應用，微生物學得到極為迅速的發(fā)展細菌細胞和病毒結構的研究提高到亞超微結構水平分子遺傳學使基因的DNA片段移植到細菌中去，通過質粒載體轉移到大腸桿菌，在大腸桿菌中表達，制備藥物克隆技術的應用12一月20238自然界中的主要微生物真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌（濕疹）細菌：肺炎球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌支原體：肺炎支原體衣原體：沙眼立克次體：斑疹傷寒螺旋體：梅毒病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。12一月20239常見污染微生物1.葡萄球菌：可引起局部感染2.大腸桿菌：膽道及尿道感染3.綠膿桿菌：化膿性感染、中耳炎、肺炎4.枯草桿菌：結膜炎5.酵母菌：使糖分解，藥液產生有機酸6.霉菌：使制劑霉壞、酸敗變質12一月202310

1、體積小，面積大微生物的個體極其微小，必須借助顯微鏡放大幾倍、幾百倍、上千倍，乃至數(shù)萬倍才能看清。桿菌的寬度是微米，因此80個桿菌“肩并肩”地排列成橫隊，也只有一根頭發(fā)絲的寬度。桿菌的長度約2微米，故1500個桿菌頭尾銜接起來僅有一顆芝麻長。物體的表面積和體積之比稱為比表面積。大腸桿菌的比表面積是人的30萬倍。微生物的數(shù)量和種類是十分驚人的。一滴水，一顆土粒往往都是一個微生物“社會”。其中以土壤內的生存密度最大，1克較肥活的土壤常含有幾億到幾十億個微生物；貧瘠土壤每克也含有幾百萬到幾千萬個，一只骯臟的蒼蠅，全身能攜帶5億多個細菌，三對足能粘附700萬至1000萬個細菌，可見微生物的密集度之大。12一月2023112、吸收多，轉化快微生物的食譜非常廣泛，凡是動植物能利用的營養(yǎng)，微生物都能利用，大量的動植物不能利用的物質，甚至劇毒的物質，微生物照樣可以視為美味佳肴。如大腸桿菌在合適條件下，每小時可以消耗相當于自身重量2000倍的糖，而人體則需要40年之久。12一月2023123、生長旺，繁殖快

微生物以驚人的速度“生兒育女”。例如大腸桿菌在合適的生長條件下，12.5~20分鐘便可繁殖一代，每小時可分裂3次，由1個變成8個。每晝夜可繁殖72代，由1個細菌變成重約4722噸，細菌數(shù)量的翻番只能維持幾個小時，不可能無限制地繁殖。因而在培養(yǎng)液中繁殖細菌，它們的數(shù)量一般僅能達到每毫升1-10億個，最多達到100億。中等大小的細菌，1000個疊加在一起只有句號那么大。想像一下一滴牛奶，每毫升腐敗的牛奶中約有5千萬個細菌。12一月2023134、適應強，易變異多數(shù)細菌能耐0～－196℃的低溫；在海洋深處的某些硫細菌可在250～300℃的高溫條件下正常生長；一些嗜鹽細菌甚至能在飽和鹽水中正常生活；產芽孢細菌和真菌孢子在干燥條件下能保藏幾十年、幾百年。由于微生物繁殖快，也可在短時間內產生大量變異的后代。正是由于這個特性，人們才能夠按照自己的要求不斷改良在生產上應用的微生物，如青霉素生產菌的發(fā)酵水平由每毫升20單位上升到近10萬單位，利用變異和育種得到如此大幅度的產量提高。12一月2023145、分布廣，種類多微生物在地球上幾乎無處不有，無孔不入，人的皮膚上，口腔，腸道里都有許多微生物。微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各種微生物生長繁殖的大本營，約占微生物總量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一個微生物世界，不論數(shù)量或種類均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20億個微生物，即使是貧瘠的土壤，每克土中也含有3－5億個微生物?？諝饫飸腋≈鵁o數(shù)細小的塵埃和水滴，它們是微生物在空氣中的藏身之地。哪里的塵埃多，哪里的微生物就多。迄今為止，我們知道的微生物約有10萬種，目前已知的種類只占地球上實際存在的微生物總數(shù)的20%，人類生產和生活中僅開發(fā)利用了已發(fā)現(xiàn)微生物種數(shù)的1%。12一月202315微生物的特點個體小,面積大：小于0.1mm。肉眼不可見。吸收多，轉化快：發(fā)酵乳糖的細菌在1小時內可分解其自重1000～10000倍的乳糖；產朊假絲酵母合成蛋白質的能力比食用公牛強10萬倍生長旺，繁殖快：微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內就可以繁殖一代適應性強，易變異（耐藥性產生的原因）分布廣,種類多（10萬多種）

：自然界中到處都有，如水、空氣、土壤等,土壤中的數(shù)量最多。12一月202316葡萄球菌

酵母菌（芽痕）棒狀桿菌大腸桿菌弧狀菌鏈球菌12一月202317菌落單位菌落單位----CFU

由單個菌細胞或幾個同種菌細胞在培養(yǎng)基上長成肉眼可見的菌落，每個菌落就是1CFU光滑型菌落粗糙型菌落12一月202318微生物的菌落形態(tài)12一月202319微生物的分布土壤：是微生物生活的最適環(huán)境水：僅次于土壤的微生物分布、定居的第二場所空氣：空氣中的微生物主要來源于帶有微生物菌體及孢子的灰塵，這類微生物大多數(shù)是腐生性的，還來源于人和動物，它們大多數(shù)是通過呼吸道排出的，其中也包含有病原微生物，懸浮在大氣中。

12一月202320人體中的微生物人自出生后，外界的微生物就逐漸進入人體。在正常人體皮膚、粘膜及外界相通的各種腔道（如口腔、鼻咽腔、腸道和泌尿道）等部位，存在著對人體無害的微生物群，包括細菌、真菌、螺旋體、支原體等，稱為正常菌群。能使宿主致病的為致病菌或病原菌，不能造成宿主感染的為非致病菌或非病原菌。有些細菌在正常情況下并不致病，但當在某些條件改變的特殊情況下可以致病，這類菌稱為條件致病菌或機會致病菌12一月202321人體內外微生物人的頭皮上有140萬個/cm2，兩手上約有4~40萬個，1g指甲污垢有38億個，1g糞便可達10~1000億個?？梢哉f微生物是無處不在，無處不有。12一月202322人是最大的污染源？人是潔凈室最大的污染源，占90%左右。一般男性每人每分鐘向周圍排放1000個以上的含菌粒子，女性為750個以上。穿無菌服時，靜止時的發(fā)菌量為10~300個/min，一般活動時發(fā)菌量為150~1000個/min，行走時發(fā)菌量為900~2500個/min?？人砸淮伟l(fā)菌量為70~700個/min，噴嚏一次為4000~60000個/min。所以在潔凈室中，人的數(shù)量和活動應有特別嚴格的限制。12一月202323如何阻斷人體污染源進入潔凈室（區(qū)）的人員不得化妝和佩帶飾物，不得裸手直接接觸產品?！魺o菌工作服必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。12一月202324人體中的微生物

部位

常見菌種皮膚表皮葡萄球菌、類白喉桿菌、綠膿桿菌、恥垢桿菌等口腔鏈球菌（甲型或乙型）、乳酸桿菌、螺旋體、梭形桿菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、類白喉桿菌胃正常一般無菌腸道類桿菌、雙歧桿菌、大腸桿菌、厭氧性鏈球菌、糞鏈球菌、葡萄球菌、白色念球菌、乳酸桿菌、變形桿菌、破傷風桿菌、產氣莢膜桿菌等鼻咽腔甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等眼結膜皮表葡萄球菌、結膜干燥桿菌、類白喉桿菌等12一月202325★防范措施：1.建立個人健康檔案新員工入廠全面體檢，直接接觸藥品的生產人員每年至少體檢一次，如發(fā)現(xiàn)有傳染疾病應立即隔離。2.清潔的個人衛(wèi)生①勤洗澡、理發(fā)、剪指甲②正確的洗手、更衣流程及防護方式3.潔凈區(qū)內的自我約束①不佩帶首飾，不化妝②進出次數(shù)應可能地少，在操作過程中應減小動作幅度③規(guī)范各類操作及避免違規(guī)行為12一月202326★防范措施：一次更鞋：阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對而言，腳底是最臟的部分。脫去外套：阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。一更洗手：規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和大部分的微生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。二更帶口罩：阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內不能脫下口罩。帶發(fā)套：阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整的包裹頭發(fā)。穿連體服：阻斷體表皮膚的微生物發(fā)散。潔凈區(qū)內不能解開連體服。手消毒：再次消除手部的細菌和微生物。75%的酒精能殺滅手部95%以上的微生物。12一月202327

設備的衛(wèi)生應從設備的設計開始，要求產塵少、脫落粒子少、易清洗、消毒和滅菌。設備與物料的接觸面不得與物料反應，不得吸附物料，設備的內表面材質要平整、光滑，凹凸不平的區(qū)域不僅不易清洗，而且易存留殘液等，它將成為微生物繁殖滋生的場所。管道的安裝要避免批與批之間的交叉污染，管道要能定期清洗消毒?！锓婪洞胧孩俳⑾鄳脑O備清潔保養(yǎng)制度及規(guī)程②保持一貫的清潔狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)污漬、污水、殘余物等應立即清除③機修人員在線維修設備時，應注意操作盡量減少對藥品產生污染④對直接接觸藥品的設備進行清潔驗證設備與微生物12一月202328物料與微生物對于物料衛(wèi)生的問題，從供應商的審計、物料進廠后的檢驗、使用全過程，均要嚴格按照GMP規(guī)定的衛(wèi)生要求進行。物料主要包括：原輔料、玻瓶、工藝用水。★防范措施：①正確的原輔料的脫包、消毒、運送(容器)及投加操作。②正確的膠塞清洗流程。③對精洗殘余水、清洗水及工藝用水的定期監(jiān)測。④原輔料使用前的抽檢。12一月202329操作方法與微生物

潔凈區(qū)人員的操作是否規(guī)范，影響藥品滅菌前的微生物負荷，最終將影響產品的無菌保證值(SAL)。F0≥6×D121℃+D121℃×lgN0

F0:標準滅菌時間;

N0：產品滅菌前的帶菌量；D121℃：在121℃下殺滅90%微生物所需時間。

★防范措施：①制定日常操作的規(guī)范并嚴格執(zhí)行。②直接與藥品有接觸的操作應帶無菌手套并頻繁沖洗，操作過程中動作不宜過大。③加強對微生物知識的了解，增強無菌操作意識。12一月202330環(huán)境與微生物環(huán)境中的微生物種類繁多，主要有附著于塵埃上的從地面飛起的球菌屬（包括八疊球菌屬在內的好氧菌）；形成孢子的好氧性桿菌（如枯草芽孢桿菌）；青霉等霉菌的孢子等。微生物的存在嚴重影響著藥品生產的安全，依次必須加以嚴格控制。

新版GMP對潔凈區(qū)微生物的動態(tài)要求12一月202331★防范措施：3.每天進行空氣消毒(臭氧、甲醛、過氧化氫熏蒸)12一月202332微生物的作用及危害

1.微生物的作用絕大多數(shù)微生物對人和動物是有益的，已廣泛應用于農業(yè)、食品、醫(yī)藥、釀造、化工、制革、石油等行業(yè)，發(fā)揮了越來越重要的作用。例如與我們日常生活密切相關的如酸奶、酒類、抗生素、疫苗等。2.微生物的危害微生物中也有一部分能引起人及動、植物發(fā)生病害，這些具有致病性的微生物，稱為病原微生物。如人類的許多傳染?。ǜ忻?、傷寒、痢疾、結核、脊髄灰質炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。從藥品生產的衛(wèi)生學而言，微生物對藥品的原料、生產環(huán)境和成品的污染是造成生產失敗、成品不合格的重要因素。

12一月202333微生物的類群和形態(tài)結構

一、細菌

細菌是一類細胞細而短、結構簡單、細胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。細菌的形態(tài)與結構

（1）球菌多數(shù)球菌直徑在1微米左右，外觀呈球形或近似球形。由于繁殖時分裂平面不同可形成不同的排列方式，分為雙球菌、鏈球菌、葡萄球菌等。（2）桿菌形態(tài)多數(shù)呈直桿狀，也有的菌體稍彎，多數(shù)呈分散存在，也有的呈鏈狀排列，分為棒狀桿菌、鏈狀桿菌、球桿菌等。（3）螺形菌菌體彎曲，呈弧形或螺旋形。如幽門螺桿菌。

細菌雖小，仍具有一定的細胞結構和功能。細胞壁、細胞膜、細胞質和核質等各種細菌都有，是細菌的基本結構。

12一月202334球菌(coccus)腦膜炎奈瑟菌雙球菌(diplococcus)肺炎鏈球菌12一月202335鏈球菌(streptococcus)球菌(coccus)12一月202336球菌(coccus)葡萄球菌(streptococcus)12一月202337球菌(coccus)四聯(lián)球菌(tetrad)12一月202338球菌(coccus)八疊球菌(sarcina)12一月202339桿菌(bacillus)不同桿菌的大小、長短、粗細很不一致。炭疽芽胞桿菌3-10μm大中大腸埃希菌2-3μm小布魯菌0.6-1.5μm12一月202340桿菌的形態(tài)多樣桿菌(bacillus)兩端齊平炭疽芽胞桿菌兩端尖細白喉棒狀桿菌12一月202341桿菌(bacillus)桿菌的形態(tài)多樣分枝桿菌雙歧桿菌12一月202342螺形菌(spiralbacterium)弧菌螺菌螺桿菌12一月2023432、細菌的繁殖

細菌生長速度很快，一般約20min分裂一次。若按此速度計算，細菌群體將龐大到難以想象的程度。但事實上由于細菌繁殖中營養(yǎng)物質的逐漸消耗，有害代謝產物的逐漸積累，細菌不可能始終保持高速度的無限繁殖。經(jīng)過一段時間后，細菌繁殖速度逐漸減慢，死亡菌數(shù)增多，活菌增長率隨之下降并趨于停滯。12一月202344微生物的生長規(guī)律微生物整個生長過程可以分為4個階段：★延滯期：細胞變大，細胞內RNA含量增高，培養(yǎng)基不豐富時延滯期較長?！飳?shù)期：細胞分裂最快，代謝旺盛，生長速率由營養(yǎng)成分決定?！锓€(wěn)定期：總體數(shù)量保持不變，開始產生代謝產物或開始形成芽孢?！锼ネ銎冢河捎诖x毒素的積累，死亡數(shù)超過新生數(shù)。最易處理期12一月202345★細菌：是一類細胞細而短、直徑一般為，結構簡單、細胞壁堅韌，以二分裂方式無性繁殖的原核微生物，分布廣泛。生長最適溫度為30~35℃，主要去除方法有紫外殺菌法、濾膜過濾法及高溫殺滅法等。個別細菌如：嗜熱脂肪芽孢桿菌，能在121℃條件，可耐受4~5min。滅菌柜驗證中作為生物指示劑最適合生長條件為55~60℃12一月202346二、真菌真菌是一類有細胞壁，無葉綠素，以寄生或腐生方式生存，少數(shù)為單細胞，多數(shù)為多細胞，能進行無性或有性繁殖的一類真核細胞型微生物。真菌包括單細胞與多細胞兩類。單細胞真菌呈圓形或卵圓形，稱為酵母菌；多細胞真菌由菌絲和孢子組成，并交織成團，稱絲狀菌或霉菌。真菌生長的最適的溫度為22～28℃，最適的pH值為4～6。其繁殖能力強，但生長速度比細菌慢，常需1-4周才形成菌落。真菌對熱的抵抗力不強，一般加熱60~70℃1小時即被殺死，但對干燥、日光、紫外線和一些化學消毒劑有抵抗力，但對％碘酒、10％甲醛則較敏感。12一月202347三、病毒病毒屬非細胞型微生物，在自然界分布非常廣泛，可在人、動物、植物、真菌和細菌中寄居并引起感染。病毒是體積最小、結構最簡單的微生物，它僅有一種核酸（DNA或RNA）作其遺傳物質。病毒必須在宿主活細胞內寄生，依靠細胞提供的能量、營養(yǎng)物質及生物大分子合成機制，完成病毒的復制過程。病毒與人類的關系極為密切，人類的傳染病約75％是由病毒引起的。有些病毒傳染性強，可引起世界大流行（如流感、艾滋病等）。12一月202348病毒——豬流感病毒豬流感(Swineinfluenza，SI)是由A型流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病。H1N1亞型流感病毒流感病毒屬于正黏病毒科。A型流感病毒可以感染多種動物，包括許多禽類和哺乳動物。禽流感病毒亞型主要為H5N1、H9N2、H7N7豬流感癥狀人感染豬流感后的癥狀與感冒類似，患者會出現(xiàn)發(fā)燒、咳嗽、疲勞、食欲不振等。

豬流感病毒病毒是最常見的致病微生物，人類傳染病中大約75%是由病毒引起的。乙肝、丙肝、艾滋病、梅毒12一月202349肝炎病毒病毒性肝炎是危害人類健康的最嚴重的疾病之一。主要分為甲型、乙型、丙型、丁型。其中甲型肝炎病毒由消化道傳播，引起急性肝炎，不轉為慢性肝炎或慢性攜帶者。乙型與丙型肝炎病毒均由輸血、血制品或注射器污染而傳播，除急性肝炎外，可致慢性肝炎，并與肝硬化以及肝癌有關，故危害性極為嚴重。丁型肝炎病毒必須在乙型肝炎病毒等輔助下方能復制，故其傳播途徑與乙型肝炎病毒相同。12一月2023501.甲型肝炎病毒（HAV）在體外抵抗力較強，在-20℃條件下保存數(shù)年，其傳染性不變，能耐受56℃30分鐘的溫度及PH3的酸度。甲型肝炎病毒引起甲型肝炎，這種肝炎的傳染源主要是病人。其病毒通常由病人糞便排出體外，通過被污染的手、水、食物、食具等傳染，嚴重時會引起甲型肝炎流行。如1988年1月，上海市出現(xiàn)了較大規(guī)模的流行性甲型肝炎，主要原因是人們食用了被甲肝病毒污染的毛蚶。甲型肝炎病毒圖12一月202351乙型肝炎病毒2.乙型肝炎病毒（HBV）HBV在體外抵抗力很強，紫外線照射，加熱60℃4小時及一般濃度的化學消毒劑(如苯酚，硫柳汞等)均不能使之滅活，在干燥或冰凍環(huán)境下能生存數(shù)月到數(shù)年，加熱60℃持續(xù)10小時，煮沸(100℃)20分鐘，高壓蒸汽122℃10分鐘或過氧乙酸(0．分鐘以上則可以滅活。傳播途徑主要為：血液、血制品傳播，母嬰傳播。12一月202352.肝炎病毒常用的家庭消毒方法肝炎病毒常用的家庭消毒方法有物理消毒法與藥物消毒法兩種。物理消毒法：

1）高壓蒸汽消毒法：通常采用千帕壓力與121-126°C溫度10-15分鐘，可殺滅各型肝炎病毒；采用蒸籠蒸煮或家用高壓鍋，待冒氣蓋閥后20分鐘，即可達到消毒效果

2）煮沸消毒法：在100°C的溫度下煮1分鐘，就能使乙、丙、丁、戊型及甲型肝炎病毒失去活力和傳染性；煮沸15-20分鐘以上，可將各型肝炎病毒殺滅。本法適合于食具、護理用具及棉織品的消毒。至于塑料制品、合成纖維及皮毛制品則不適合。新潔爾滅、氯已定（洗必泰）不能肯定，度米芬、來蘇、石炭酸、米醋、熏醋對乙型肝炎病毒無作用。此外，肝炎患者的剩飯剩莫須有最好也要煮沸消毒后再棄去。

3）陽光曝灑法：凡不能蒸煮的物品，則宜采用本法，一般曝曬6小時以上。

4）焚燒法：患者污染并丟棄的雜物、一次性醫(yī)護用品、垃圾（包括月經(jīng)紙、手紙）等均應焚燒掉，以達徹底消毒之目的。12一月202353HIV1.傳染源和傳播途徑

HIV感染者是傳染源，曾從血液、精液、陰道分泌液、眼淚、乳汁等分離得HIV。傳播途徑有：性傳播：通過男性同性戀之間及異性間的性接觸感染。血液傳播：通過輸血、血液制品或沒有消毒好的注射器傳播，靜脈嗜毒者共用不經(jīng)消毒的注射器和針頭造成嚴重感染，據(jù)我國云南邊境靜脈嗜毒者感染率達60%。母嬰傳播：包括經(jīng)胎盤、產道和哺乳方式傳播。12一月202354

病毒

呼吸道病毒、腸道病毒、肝炎病毒

蟲媒病毒、皰疹病毒、逆轉錄病毒HIV病毒腺病毒12一月202355熱原與內毒素許多細菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能產生熱原。熱原是微量即可引起恒溫動物體溫異常升高的物質的總稱。主要物質為細菌內毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗體復合物、半抗體原物質和某些藥物（類固醇）等。1、細菌內毒素一般指革蘭陰性細菌細胞壁的結構成分，主要是脂多糖。2、細菌內毒素生物學活性可分為兩類：一是致病作用，一是保護性反應。3、其他理化特性①耐熱性：120℃加熱4h，可破壞98%。180℃加熱2h或250℃加熱30min，才可徹底破壞。②濾過性：其體積小，約在1~5nm之間，故能通過濾器進入濾液中。③具有水溶性及不揮發(fā)性。④能被強酸、強堿和氧化劑破壞12一月202356熱原與內毒素4、熱原引入的途徑從溶劑中帶進從原料中帶進從容器、用具、管道和裝置等帶進制備過程中的污染從輸液器帶入12一月202357內毒素大量進入血液就會引起發(fā)熱反應—“熱原反應”。內毒素大量進入、集聚于血液中，超過機體各自衛(wèi)系統(tǒng)的清除能力，則可導致不同程度的內毒素血癥。對于易于引入內毒素的藥品醫(yī)療器械等必須通過內毒素檢測。內毒素的檢測常用家兔熱原法和鱟試驗法。中國藥典收錄的細菌內毒素檢查法包括2種方法：凝膠法和光度法，使用鱟試劑來定性或定量檢測內毒素。

12一月202358熱原與內毒素5、消除細菌內毒素的方法高溫破壞法：可用180℃干烤3~4h或250℃干烤30min。吸附法：一般選用活性炭。蒸餾法：此法僅限于制備蒸餾水?；瘜W酸堿和氧化法。離子交換法。反滲透法。凝膠過濾法。超濾法

12一月202359藥品的微生物污染藥品微生物污染：微生物的產生、附著而給藥品及生產環(huán)境帶來不良影響。藥品的微生物污染也稱染菌。污染藥品的細菌：常見污染藥物制劑的細菌是一些生命力較強的細菌，如：葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、枯草桿菌及一些霉菌，抵抗力弱的細菌一般不易造成污染。藥品的微生物污染源：空氣、水、廠房與設備、藥品生產用原輔料、包裝材料、昆蟲和其它嚙齒動物、生產操作人員12一月202360消毒與滅菌下列術語常用于表示物理或化學方法對微生物的殺滅程度消毒：殺死物體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽孢在內的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制體內或體外細菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細菌的繁殖。防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。同一種化學藥品在高濃度時為消毒劑，低濃度時常為防腐劑。無菌：不存在活的細菌。防止細菌進入人體或其他物品的操作技術，為無菌操作。12一月202361化學指示物

chemicalindicator:利用某些化學物質對某一殺菌因子的敏感性，使其發(fā)生顏色或形態(tài)改變,以指示殺菌因子的強度(或濃度)和作用時間是否符合消毒或滅菌處理的要求生物指示物

biologicalindicator:將適當載體染以一定量的特定微生物,用于指示消毒或滅菌效果的制品。12一月202362消毒與滅菌的一般原理作用于微生物的蛋白，破壞微生物的膜蛋白結構作用于微生物的核酸，不能進行轉錄、復制及蛋白合成干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝同時作用于微生物蛋白和核酸

12一月202363★芽胞芽胞是細菌的休眠體，在適宜的條件下可以重新轉變成為營養(yǎng)態(tài)細胞；一般的芽胞在普通的條件下可保存幾年至幾十年的生活力；世界上最古老的芽孢：2.5億年；其對熱力、干燥、輻射、化學消毒等理化因素有強大的抵抗力；殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。12一月202364消毒與滅菌一、物理滅菌方法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過除菌法超聲波殺菌法干燥與低溫抑菌法12一月202365消毒與滅菌熱力滅菌法：使蛋白質、酶及核酸永久性破環(huán)，細胞膜溶解，導致細胞發(fā)生不可逆轉的死亡。1、干熱滅菌法—采用灼燒或干熱空氣滅菌，使用方便，適用于玻璃器皿和瓷器等耐高溫的固體物的滅菌。2、濕熱滅菌法—利用熱蒸汽殺死微生物。

高壓蒸汽滅菌：利用高溫高壓蒸汽進行滅菌的方法，蒸汽的穿透力較熱空氣強可以殺死一切微生物，包括細菌的芽孢，真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個體。最可靠最適用最廣泛的滅菌方法。12一月202366消毒與滅菌輻射滅菌法

1、紫外線：波長200-300nm的紫外線具有殺菌作用。穿透物質的能力很差，一般要求紫外燈距離照射物不超過米為宜

2、電離輻射高速電子、X射線、γ射線

3、微波波長1mm~1m12一月202367消毒與滅菌濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去,以達到除菌目的。濾菌器含有微細小孔≤微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過。適用范圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。12一月202368消毒與滅菌二、化學滅菌方法許多化學藥物能影響微生物的化學組成、物理結構和生理活性，從而發(fā)揮防腐、消毒及滅菌的作用。潔凈室(區(qū))應定期消毒，使用的消毒劑不得對設備、物料和成品產生污染。消毒劑品種應定期更換，防止產生耐藥菌株。12一月202369甲醛、環(huán)氧乙烷及戊二醛——化消毒劑發(fā)展的三個里程碑

一、醇類去除細菌胞膜中的脂類，并使菌體蛋白質變性乙醇、異丙醇70％～75％乙醇殺菌力最強，高濃度乙醇殺菌能力反而降低

95-100%的乙醇具有很強的脫水作用,能使菌體表面蛋白質迅速凝固，當遇到微生物細胞時,細胞表面很快脫水形成一層保護膜,乙醇分子再不易滲透保護膜起到殺菌作用。對細菌芽胞無殺滅能力，對微生物消滅作用較差。其消毒滅菌作用受蛋白質影響較大。異丙醇的殺菌作用比乙醇強，且揮發(fā)性低，但毒性較高。二、酚類低濃度時破壞菌細胞膜，使胞質內容物漏出；高濃度時使菌體蛋白質凝固。也有抑制細菌脫氫酶、氧化酶等作用。

石炭酸、來蘇爾、洗必泰等化學消毒滅菌法12一月202370三、烷化劑對細菌蛋白質和核酸的烷化作用（一）醛類甲醛通過對微生物蛋白質分子上的氨基、羥基、巰基以及對核酸等的烷化作用,破壞其生命的基本結構,使之滅活。甲醛氣體的殺菌能力是與其濃度成正相關關系。由于甲醛氣體穿透力極差,不能穿透管壁進入管腔,只能通過擴散作用進入腔內。在狹窄的管腔內的甲醛氣體,難以達到有效濃度。由于甲醛氣體穿透力差,為保證器械和物品的消毒效果,熏蒸消毒時物品應攤開,分層擺放或懸掛,避免重疊擺放以及打包裝盒等,確保物品表面充分接觸甲醛氣體,以達到預期的消毒效果戊二醛殺菌機理主要是其活性基團能與細菌蛋白質的氨基結合，使蛋白質變性。戊二醛消毒液有廣譜、高效、快速和持久的殺菌效果,隨溫度升高,溶液的活性增強,對芽胞殺滅作用強,7小時可殺滅芽胞。殺菌譜廣，效果好，性質穩(wěn)定，殺菌速度快，使用濃度低，無毒性，比甲醛強2-10倍，在時殺菌力最強，對人的刺激比甲醛小。

（二）環(huán)氧乙烷廣譜高效殺菌劑沸點較低，可用水浴使其揮發(fā)，不宜超過60度。但易燃易爆，有中等毒性，對人體有毒滅菌機理是由于它的烷基的取代性質。對細菌、芽胞、真菌、微生物等各種微生物都有殺滅作用，消毒后殘留量較大，需置通風處1時后才能使用。用于工業(yè)中一次性醫(yī)療器械用品的滅菌和皮毛工業(yè)的消毒。12一月202371四、氧化劑與酶蛋白中的-SH基結合，導致酶活性喪失

（一）含氯消毒劑能溶解于水產生次氯酸，并分解放出具有強氯化作用的新生態(tài)氯起殺菌作用。作用機理是由于氧化作用和抑制細菌的某些含巰基酶使細菌的生長繁殖發(fā)生障礙。有脫色能力，無毒性。不足之處是穿透力較差，同時有腐蝕和漂白作用。

殺菌力強，能殺滅細菌繁殖體、芽胞

漂白粉、金星消毒液、“84”消毒液、氯代異氰尿酸、二氧化氯（二）含碘化合物碘酊、碘伏氧化細菌原漿蛋白的活性基團，并與蛋白質的氨基結合而使其變性主要缺點是有機物干擾大12一月202372（三）過氧化物類消毒劑過氧乙酸、過氧化氫在水中可形成氧化能力很強的自由羥基，破壞蛋白質的分子結構殺菌作用強，應用廣泛，但穩(wěn)定性差

（四）高錳酸鉀強氧化劑1:1000與1:1250的濃度都具有殺菌作用。0.5-1%的高錳酸鉀水溶液于５分鐘內可殺死大多數(shù)細菌；５％水溶液于１小時內可殺死細菌芽孢。在酸性溶液中殺菌作用增高。對霉菌殺傷效果很差。

（五）臭氧強氧化劑，不穩(wěn)定；殺菌迅速，無殘留用于空氣、飲用水、生活用水等的消毒12一月202373五、表面活性劑減低液體的表面張力，使物品表面油脂乳化易于除去，有清潔作用能吸附于細菌表面，改變胞壁通透性，使菌體內的酶、輔酶、代謝中間產物逸出，呈現(xiàn)殺菌作用表面活性劑有陽離子型、陰離子型和非離子型三類。因細菌帶陰電，故陽離子型殺菌作用較強。非離子型對細菌無毒性，有些反而有利于細菌的生長。

新潔爾滅可殺死細菌繁殖體，但對結核桿菌與真菌的效果不好S/D法（有機溶劑/表面活性劑法）六、重金屬鹽類與帶陰電荷的菌體蛋白質結合，使之發(fā)生變性或沉淀硫柳汞、二氯化汞（升汞）

12一月202374消毒與滅菌

★常用消毒劑種類和用途12一月202375常用化學殺菌劑應用范圍和常用濃度表12一月202376消毒滅菌的效果受環(huán)境、微生物種類及消毒劑本身等多種因素的影響消毒劑的性質、濃度與作用時間微生物的種類與數(shù)量溫度酸堿度有機物

影響消毒滅菌效果的因素12一月202377衛(wèi)生管理1.了解污染源對藥品生產全過程可能造成污染的來源，進行深入的了解研究，從而設計一個完好的生產工藝，制定規(guī)章制度和標準操作規(guī)程，從各個環(huán)節(jié)采取消毒和衛(wèi)生措施來防止微生物污染，使產品達到所要求的衛(wèi)生學質量，包括穩(wěn)定性及各種微生物參數(shù)。2.進行微生物監(jiān)測在藥品生產過程中，應按GMP要求不斷進行各項微生物衛(wèi)生學監(jiān)測。例如：對潔凈室空氣中的浮游菌、沉降菌的監(jiān)測；對無菌設備清潔滅菌的驗證；對非無菌藥品進行細菌和活菌數(shù)測定和病原菌的限制性檢查等。12一月202378衛(wèi)生管理

嚴格按照“管理規(guī)程、衛(wèi)生管理規(guī)定”對生產科各個區(qū)域進行清潔衛(wèi)生，確保生產區(qū)域符合GMP衛(wèi)生管理要求。新進人員的健康檢查：藥品生產企業(yè)在招收新職工時，一定要對新職工進行全面的健康檢查，要確保新員工不患有急性或慢性傳染病。建立生產人員健康檔案：藥品生產企業(yè)應對職工建立個人健康檔案，直接接觸藥品的生產人員至少每年體檢一次；患有傳染病或體表有傷口者不得進入潔凈室。

培養(yǎng)藥品生產人員良好的個人衛(wèi)生習慣

潔凈區(qū)生產人員要求：進入潔凈室必須更換潔凈服；并按照規(guī)定程序進出潔凈室；在潔凈區(qū)生產操作動作要準、穩(wěn)、輕、少，減少不必要的談話和活動；生產人員應定期進行微生物基礎知識培訓和衛(wèi)生教育。

12一月202379關于污染的基本知識1．藥品常見的污染形式⑴塵粒污染藥廠中可能存在的一些微粒。⑵微生物污染2．藥廠傳播污染的主要媒介⑴空氣；⑵清洗用水；⑶物料及其包裝容器表面；⑷人：人是最常見的污染源①人的頭發(fā)和皮膚②咳嗽或噴嚏排出物③衣服④化妝品和手飾⑤生產過程中人群混雜所帶來的微生物。12一月202380．環(huán)境衛(wèi)生（1）外環(huán)境（潔凈廠房外部環(huán)境）①總體布局合理，生產、生活、行政、輔助系統(tǒng)分區(qū)，不得相互妨礙；②規(guī)劃考慮風向，嚴重空氣污染源應處于主導風向的下風側，減少交叉污染；③廠區(qū)內人流、物流道路分開；④生產區(qū)內及周圍無露土地面，廠區(qū)內道路硬化；⑤潔凈廠房離主干道距離大于50米；（2）內環(huán)境（潔凈廠房）①按生產工藝流程及所要求的空氣潔凈級別合理布局

②潔凈室（區(qū)）的內表面平整光滑、無裂縫、接口嚴密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形，弧度應≧50mm，以減少灰塵積聚和便于清潔③潔凈室(區(qū))的窗戶、天棚及進入室內的管道、風口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均應密封④門窗造型簡單、不易積塵、清潔方便、與內墻面平，無窗臺，無外走廊潔凈室的外窗采用雙層玻璃窗。

12一月2023812．設備衛(wèi)生①設備、容器、工具按定置管理要求放置，不得隨意亂放，保持清潔。管道、管線排列整齊，并包扎光潔，無跑、冒、滴、漏。潔凈區(qū)設備容器采用相應的消毒措施后才可使用。②各部門應根據(jù)本部門的實際情況，制定該部門所使用的設備、容器、生產工具、照明器具、搬運工具的清潔、保養(yǎng)方法。操作人員必須按相關SOP要求，對這些器具清洗至符合標準，作好記錄后，才能使用。③更換產品或換批時，應嚴格清場，設備、工用具、容器應徹底清洗干凈。12一月2023823．人員衛(wèi)生⑴手的衛(wèi)生①指甲修剪，手上無傷口；②不戴手表、戒指和其他飾物，不用指甲油；③生產操作前、后，接觸污物后，要洗手消毒。④不得裸手直接接觸藥品⑵頭部、面部、體表衛(wèi)生①經(jīng)常洗澡、理發(fā)、勤換衣服，保持個人清潔，戴帽不露頭發(fā)，戴口罩不露鼻、口。②不蓄胡須，不化妝，不佩戴項鏈、耳環(huán)等飾品，眼鏡應消毒。

12一月202383（3）健康要求①患有傳染病、隱性傳染病、精神病患者、皮膚?。ㄈ缙ぐ_、灰指甲等）、體表有傷口者及藥物過敏者，不得從事藥品生產工作。②生產人員至少每年體檢一次并建立健康檔案。（4）人員行為要求①進入生產區(qū)域需穿戴規(guī)定的工作服（包括工作衣、帽、鞋），按規(guī)定的程序進入。工作服不得穿出本區(qū)域以外的地方。②進入一般生產區(qū)的人員在生產場所不得吸煙，不得吃食物，不得存放非生產物料與私人雜物。工作服按規(guī)程要求洗滌，必要時增加洗滌次數(shù)。③潔凈區(qū)工作服應按要求換洗，經(jīng)常保持清潔干凈。④生產車間操作人員的動作要穩(wěn)、輕、準，減少不必要的談話和走動⑤生產人員應定期接受生產車間進行的藥品生產的衛(wèi)生教育，自覺強化生產藥品必備的衛(wèi)生知識。12一月202384潔凈室（區(qū)）物料衛(wèi)生要求：進入生產的原輔料必須符合標準，不洗即用的內包裝材料、容器，其生產環(huán)境的空氣潔凈級別必須與藥品生產相一致。對可以重復使用的盛裝容器，應按SOP要求清洗干凈。直接與藥品（中間產品）接觸的設備、工具、容器、內包裝容器最后一次沖洗用水應與生產用水一致。物料凈化用室包括物料清潔室、消毒室、氣閘室或傳遞柜（窗）、備料室、（棄廢）物料出口的專用傳遞設施等。物料應經(jīng)凈化或消毒滅菌后通過物流通道進入。物流通道不能作為通路生產過程中產生的廢棄物出口不能與物料進口合用同一氣閘或傳遞柜（窗），宜單獨設置專用傳遞設施。12一月202385清潔規(guī)程㈠清潔規(guī)程內容1．清潔范圍、對象；2．清潔方法和程序；3．清潔工具；4．清潔頻次；5．使用的清潔劑、消毒劑配制方法及使用注意事項；6．清潔劑更換周期；7．清潔工具的清潔方法和存放地點；8．清潔衛(wèi)生檢查及評價。㈡制定范圍1．設備；2．器具、容器（包括運輸工具）；3．生產區(qū)內的運輸工具；4．墻面、天花板、地面、臺面、門窗；5．管道；風道、過濾器；6．下水道、地漏；7．衛(wèi)生間；8．水系統(tǒng)；9．工作服。

12一月202386㈢清潔劑與消毒劑

1．要求：

①對設備、容器、物料及產品不發(fā)生化學反應，不污染；

②安全、無毒；無腐蝕性；

③不帶有顆粒性物質（洗衣粉就有顆粒性物質，不宜選用）；

2．常用的消毒劑及用途：12一月202387清潔工具生產用清潔用具管理規(guī)定1．要求：①不易脫落纖維和顆粒；②不同區(qū)域的清潔工具有明顯區(qū)別，不混用；③不選用易滋生微生物的材料，如：木、棉；④使用后及時清洗。2．潔凈區(qū)內清潔用抹布有紅、藍、黃、白四種顏色，紅色用于抹設備及工器具表面，藍色用于抹墻壁，黃色用于抹地面，白色用于抹設備內壁及容器（如物料周轉桶）內表面。3．存放①存放間按不同區(qū)域設置，規(guī)定位置存放；②存放間應通風；