實驗三、血清中總膽固醇的測定教學提綱_第1頁
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文檔簡介

血清(xuèqīng)中總膽固醇的測定實驗(shíyàn)三（膽固醇氧化酶法）第一頁，共9頁。一、實驗(shíyàn)目的學習膽固醇氧化酶法測定血清(xuèqīng)總膽固醇的原理。掌握血清(xuèqīng)總膽固醇的測定方法及操作技術。第二頁，共9頁。

（1）（3）H2O2+4-氨基(ānjī)安替吡啉（4-AAP）＋苯酚游離膽固醇＋FAA膽固醇酯酶H2O＋紅色(hóngsè)醌類物質過氧化物(ɡuòyǎnɡhuàwù)酶（POD）510nm光吸收法測定相對血清總膽固醇濃度二、實驗原理血清總膽固醇游離膽固醇膽固醇酯膽固醇氧化酶膽甾烯酮+H2O2（2）游離膽固醇第三頁，共9頁。三、實驗(shíyàn)器材材料：人血清試劑：總膽固醇測定試劑盒用具(yòngjù)：分光光度計，微量移液槍，試管，試管架，恒溫水浴鍋第四頁，共9頁。（1）取3支試管，按下表加入(jiārù)試劑:試劑試劑空白管標準管樣品管1樣品管2樣品管3工作試劑(mL)1.01.01.01.01.0標準液(uL)–10.0–––血清樣品(uL)––10.010.010.0四、實驗(shíyàn)步驟充分混勻，37℃水浴(shuǐyù)中保溫15min；冷卻至室溫后，510nm處比色比色方法：以空白管調零，讀取標準管及樣品管光密度值。第五頁，共9頁。（2）計算：依據(yījù)朗伯-比爾定律：A=KLC標準管膽固醇濃度：5.17mmol/L

樣品管膽固醇濃度(mmol/L)＝樣品管光密度值

標準管光密度值×5.17C樣=A樣A標×C標第六頁，共9頁。參考值膽固醇血清參考值：3.0~5.20mmol/L危險(wēixiǎn)閾值：5.20~6.20mmol/L高膽固醇血癥：>6.20mmol/L

第七頁，共9頁。正確使用比色器皿：手拿比色皿的毛面；比色液應占比色皿的2/3。測定膽固醇所用(suǒyònɡ)的試劑應防止被葡萄糖和甘油三酯污染。微量移液槍的正確使用注意事項第八頁，共9頁。思考題1、簡述膽固醇氧化酶法測

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