英文文獻(xiàn),P糖蛋白(Pgp),聯(lián)合給藥

EstimationoftheUnboundBrainConcentrationofP-GlycoproteinSubstratesorNonsubstratesbyaSerialCerebrospinalFluidSamplingTechniqueinRats

---鄭大大大芬鄭大大大芬雜志作者M(jìn)olecularPharmaceutics(ACSPublication)至今共出版6065篇，2012年總出版量353，2012年影響因子：4.570作者：T.ThangaMariappan鄭大大大芬摘要血液中只有游離型藥物才能轉(zhuǎn)運(yùn)至腦，CNS中游離型藥物才能與作用靶點(diǎn)結(jié)合發(fā)揮藥理作用過程中血-腦屏障（BBB）以及血液-腦脊液屏障(BCSFB)限制藥物進(jìn)入CNS傳統(tǒng)取樣方法：個(gè)體差異性較大，試驗(yàn)動(dòng)物較多建立連續(xù)腦脊液取樣方法，減少試驗(yàn)用鼠，減少鼠間差異。腦脊液藥物濃度代替全腦內(nèi)游離型藥物濃度?利用七種藥物進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證，合用p-gp化學(xué)抑制劑，考察p-gp抑制的影響鄭大大大芬簡(jiǎn)介在CNS發(fā)揮作用的藥物，其Cu，brain處于動(dòng)態(tài)平衡中，其對(duì)于確定給藥量重要直接或間接Cu，brain測(cè)定方法：微透析適用于腦細(xì)胞間液中游離型藥物濃度測(cè)定。但是此方法不適用于高脂溶性藥物。藥物在腦內(nèi)的分步取決于血液、腦細(xì)胞間液(ISF)、腦細(xì)胞、腦脊液(CSF)間交換。鄭大大大芬簡(jiǎn)介：有文獻(xiàn)使用CCSF代替CISF，設(shè)想利用CCSF代替Cu，brainBBB與BCSFB存在中存在P-gp質(zhì)疑：對(duì)于P-gp底物及腫瘤耐藥蛋白底物是否適用。建立串行腦脊液取樣技術(shù)。利用其中不同理化性質(zhì)藥物進(jìn)行驗(yàn)證。評(píng)價(jià)P-gp化學(xué)抑制劑對(duì)P-gp底物在血液、全腦、腦脊液中藥物濃度影響。鄭大大大芬試驗(yàn)部分：藥物藥品：卡馬西平>95%，茶堿>98%，普萘洛爾>98%，奎寧丁>97%，維拉帕米>99%，地高辛>98%，加巴噴丁>95%，阿普唑侖>95%,依克立達(dá)>98%鄭大大大芬試驗(yàn)部分：動(dòng)物SD大鼠300-350g，喂養(yǎng)溫度：22±3℃，對(duì)于不連續(xù)取樣：12只/藥，3只/時(shí)間點(diǎn)連續(xù)取樣：3只/藥，3只/時(shí)間點(diǎn)方法學(xué)安全性試驗(yàn)：16只，Bederson分級(jí)，運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性測(cè)試，直立和跨格運(yùn)動(dòng)測(cè)試。驗(yàn)證此方法是否對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物產(chǎn)生神經(jīng)損傷。鄭大大大芬試驗(yàn)部分：體內(nèi)試驗(yàn)卡馬西平：2.5mg/mL茶堿：2.5mg/mL普萘洛爾：2.5mg/mL依克立達(dá)：5mg/mL2mL/kg尾靜脈注射奎寧?。?2.5mg/mL維拉帕米：5mg/mL地高辛：2.5mg/mL加巴噴?。?5mg/mL鄭大大大芬平衡透析法測(cè)定蛋白結(jié)合假設(shè)蛋白腦脊液濃度：0.3%奎寧丁，維拉帕米，地高辛99.39%，97.63%，98.80%當(dāng)大于等于97%時(shí)認(rèn)為蛋白結(jié)合可以忽略。根據(jù)上述結(jié)果：Cu,CSF接近CCSF試驗(yàn)部分：鄭大大大芬試驗(yàn)部分：藥代動(dòng)力學(xué)分析AUCCSF利用腦脊液藥物濃度進(jìn)行計(jì)算。AUCu,brain利用腦內(nèi)游離型藥物濃度進(jìn)行計(jì)算分配系數(shù)：鄭大大大芬結(jié)果：方法建立評(píng)價(jià)多次穿刺對(duì)于大鼠的影響指標(biāo)：所有試驗(yàn)動(dòng)物多次穿刺后穿刺部位均無水腫。神經(jīng)學(xué)分級(jí)：13/16無任何缺陷，3/16只為1級(jí)(提尾時(shí)損傷對(duì)側(cè)前肢不能伸直)感覺運(yùn)動(dòng)缺陷測(cè)定：對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組無明顯差異鄭大大大芬結(jié)果：方法建立每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的腦脊液組成（糖、蛋白、氯化物）糖、氯化物含量：均無顯著性差異蛋白含量：在后面時(shí)間點(diǎn)有顯著增加鄭大大大芬結(jié)果：不同取樣方式下藥物濃度差別圖2A：七種藥物的連續(xù)取樣與不連續(xù)取樣的AUC0-7比較連續(xù)腦脊液取樣與不連續(xù)腦脊液取樣的得到的藥時(shí)曲線下面積均無顯著性差異鄭大大大芬結(jié)果：不同取樣方式下藥物濃度差別圖2B：兩種取樣方法得到的維拉帕米的腦脊液藥時(shí)曲線。連續(xù)取樣技術(shù)與不連續(xù)取樣得到的腦脊液中藥物濃度時(shí)間曲線相似，兩種方法無顯著性差異鄭大大大芬結(jié)果：P-gp底物的蛋白結(jié)合率表3：在有無依克立達(dá)存在的條件下血液及腦中游離型藥物比例。為了說明此劑量的依克立達(dá)可以起作用。鄭大大大芬結(jié)果：依克立達(dá)對(duì)P-gp底物分布的影響鄭大大大芬結(jié)果：

CCSF與Cu,brain圖4A：C：卡馬西平G：加巴噴丁，P：普萘洛爾，T:茶堿鄭大大大芬結(jié)果：CCSF與Cu,brain圖4B：有無依克立達(dá)情況下的腦脊液濃度與腦內(nèi)游離型藥物濃度。鄭大大大芬討論連續(xù)取樣方法的優(yōu)點(diǎn)：試驗(yàn)動(dòng)物較少、對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物無神經(jīng)學(xué)損傷、減少個(gè)體差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響地高辛：當(dāng)合用依克立達(dá)的時(shí)候血漿藥物濃度升高，這可能與地高辛腎小管分泌減少有關(guān)，因?yàn)橐揽肆⑦_(dá)可以抑制腎小管管腔側(cè)p-gp的腎小管分泌減少。雖然腦和腦脊液在合用依克立達(dá)以后藥物濃度均有增加，但是腦脊液中藥物濃度增加比全腦中增加幅度小。這種現(xiàn)象在基因敲除鼠中也可以觀察的到。原因可能是由于p-gp被抑制后引起的作用不同，BBB中p-gp被抑制以后會(huì)使得全腦中的藥物濃度增加，而BCSFB中p-gp被抑制以后會(huì)導(dǎo)致腦脊液中藥物濃度降低。所以會(huì)導(dǎo)致CSF與全腦