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文檔簡介
臨床微生物標本采集[]第一頁,共三十六頁,2022年,8月28日幾個概念1.標本=樣品=從整體里取出來的部分物質(zhì)標本不是整體,但要代表整體2.檢驗結(jié)果準確,嚴謹?shù)卣f,是標本內(nèi)信息表達準確。標本檢驗結(jié)果準確但對病人來說未必準確!3.標本溯源患者體內(nèi)信息的不確定性!第二頁,共三十六頁,2022年,8月28日王占科,雷萬生.中國全科醫(yī)學,2010,25(2):126-130第三頁,共三十六頁,2022年,8月28日護士,醫(yī)生,衛(wèi)勤人員等工作已經(jīng)參與了檢驗結(jié)果全程質(zhì)量控制行為!感謝您們!第四頁,共三十六頁,2022年,8月28日臨床微生物標本檢驗流程臨床標本留取環(huán)節(jié)一運送實驗室環(huán)節(jié)二分析前分析中判斷合格?環(huán)節(jié)三接種18-24h培養(yǎng)處理分析標本,菌落涂片G染色上機鑒定藥敏門診病房不合格合格環(huán)節(jié)四
環(huán)節(jié)五分析后發(fā)報告環(huán)節(jié)六SOP
培養(yǎng)基、冰箱溫箱、co2培養(yǎng)箱直接檢測儀器鑒定菌種+藥敏,KB法藥敏主要是痰標本涂片判斷是否合格對每個環(huán)節(jié)進行控制,構(gòu)成質(zhì)量保證體系第五頁,共三十六頁,2022年,8月28日1.為感染的診斷提供依據(jù)2.為抗感染治療提供參考3.臨床流行病學調(diào)查
微生物檢驗的一個重要功能就是進行細菌耐藥監(jiān)測,以指導臨床合理使用抗生素,并制定合理的用藥方案。微生物檢驗的作用第六頁,共三十六頁,2022年,8月28日標本的采集和處理原則標本質(zhì)量的好壞直接影響實驗結(jié)果的正誤。標本采集不當可導致假陰性,假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。標本的采集,送檢,保存等各個環(huán)節(jié)都要規(guī)范操作,嚴格進行質(zhì)量控制,是確保實驗結(jié)果準確可靠的前提。*盛標本容器須經(jīng)滅菌處理?;驗橐淮涡詿o菌塑料盒。*送檢標本應(yīng)注明來源和檢驗目的,以便選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境,必要時應(yīng)注明選用何種抗菌藥物。第七頁,共三十六頁,2022年,8月28日臨床常見微生物標本類型痰,咽拭子血液,骨髓,胸腹水,穿刺液,關(guān)節(jié)液,心包液引流液,膽汁中段尿糞便,直腸拭子,褥瘡潰瘍膿腫傷口分泌物,組織,靜脈導管腦脊液,前列腺液,陰道分泌物第八頁,共三十六頁,2022年,8月28日呼吸道標本
RespiratoryCultures第九頁,共三十六頁,2022年,8月28日痰標本
1:咳痰,清水反復漱口去除表面菌后用力咳痰,指導病人從呼吸道深部咳出新鮮痰液于痰盒內(nèi)送檢,只有口水或鼻腔分泌物的,請不要送檢。送檢到檢驗科的已接種的不合格痰標本,在看過涂片結(jié)合平板培養(yǎng)情況后會在發(fā)報告時報告單上會注明:標本來自上呼吸道。此時痰標本需重新指導留過,不合格的痰培養(yǎng),會耽誤治療的時機。2:對于少痰,干咳無痰者,可用霧化誘導咳出深部痰液,及時送檢。不要超過2h常溫送檢接種。注:對于普通細菌性肺炎,痰標本送檢每天1次,連續(xù)2~3天。不建議24h內(nèi)多次采集,除非痰液外觀性狀出現(xiàn)改變;如不能及時送檢,應(yīng)將標本暫存于4℃,但放置時間不可超過2h。運輸時勿置于冰塊中。
第十頁,共三十六頁,2022年,8月28日咽拭子1.清水漱口后,將棉拭子擦拭到咽后壁,注意避免觸及舌,口腔黏膜和唾液,留取后放入空的無菌管內(nèi),及時送檢。2.對化膿性扁桃體炎或口腔念珠菌病標本提取時,用棉拭子在病灶部位擦拭數(shù)次即可。不要超過2h送檢接種。不能及時送檢請放于4℃冰箱保存。目的:培養(yǎng)和鑒定引起咽炎的病原菌,不能反映下呼吸道感染的情況
發(fā)報告時間:陰性正常結(jié)果兩個工作日,陽性結(jié)果需要三~四個工作日第十一頁,共三十六頁,2022年,8月28日痰標本質(zhì)量帶血痰唾液or誘導痰(?)膿痰粘液樣痰第十二頁,共三十六頁,2022年,8月28日第十三頁,共三十六頁,2022年,8月28日顯微鏡下不合格痰標本第十四頁,共三十六頁,2022年,8月28日痰標本抗酸染色后鏡檢第十五頁,共三十六頁,2022年,8月28日血培養(yǎng)
BloodCulture第十六頁,共三十六頁,2022年,8月28日一、血培養(yǎng)送檢指征1.發(fā)熱(≥38℃)或低溫(≤36℃)2.懷疑有菌血癥或膿毒癥如休克、寒顫3.白細胞>10×109/L4.血小板減少5.皮膚粘膜出血6.昏迷7.多器官衰竭8.嚴重的局部感染9.呼吸頻率加快等
第十七頁,共三十六頁,2022年,8月28日血培養(yǎng)瓶培養(yǎng)包括血液,骨髓,胸腹水,穿刺液,關(guān)節(jié)液,心包液,等標本,在采集時的質(zhì)量直接關(guān)系到血液瓶培養(yǎng)的陽性率和準確性皮膚消毒:75%酒精擦拭靜脈,注意徹底消毒,因許多微生物,尤其葡萄球菌屬通常存在皮膚表面或近表層處,易造成污染培養(yǎng)瓶的消毒:75%酒精消毒培養(yǎng)瓶橡皮塞待60秒采血時機:在發(fā)熱或寒戰(zhàn)時,盡量在使用抗生素之前,若臨床懷疑為菌血癥的應(yīng)在24h內(nèi)再連續(xù)采集三次血培養(yǎng)標本采血量:成人5-10ML嬰幼兒:1-2ML(除血液之外的正常無微生物部位里體液標本請抽2--5ML,例如:骨髓至少不少于0.5ML注入血培養(yǎng)瓶)第十八頁,共三十六頁,2022年,8月28日血培養(yǎng)瓶培養(yǎng)(續(xù))采集時間:①抗生素使用前②停止用藥1-2天后③下次用藥前④血藥濃度較低時抽取。標本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢,也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶送檢
注:血培養(yǎng)申請單上請抽血護士手寫抽血時間,將培養(yǎng)瓶上的小條碼貼到申請單上,并在血培養(yǎng)瓶上寫上科室,姓名,床號。立即常溫送檢?。?!禁止冷藏發(fā)報告時間:陰性正常結(jié)果五個工作日,陽性:及時報告危急值第十九頁,共三十六頁,2022年,8月28日血培養(yǎng)陽性1.培養(yǎng)出腸球菌,金黃色葡萄球菌,革蘭陰性球菌,革蘭陰性桿菌等時,多數(shù)可以確認為病原菌2.培養(yǎng)出凝固酶陰性葡萄球菌、草綠色鏈球菌、芽胞桿菌等時,感染?污染?第二十頁,共三十六頁,2022年,8月28日引流液,膽汁采集:用70%酒精消毒導管,用注射器從引流管無菌采集2-3ml,注入無菌容器。常溫保存2h內(nèi)及時送檢。標本不能直接從引流袋中放出,因為引流液在袋中的儲留時間太長容易生長細菌。造成假陽性結(jié)果,誤導臨床。發(fā)報告時間:陰性正常結(jié)果三個工作日,陽性結(jié)果及時發(fā)出。第二十一頁,共三十六頁,2022年,8月28日尿培養(yǎng)標本
UrineCulture第二十二頁,共三十六頁,2022年,8月28日
尿標本的采集指征(1)有典型的尿路感染癥狀;(2)肉眼膿尿標本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢,也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶送檢或血尿;(3)尿常規(guī)檢查白細胞或亞硝酸鹽陽性;(4)不明原因的發(fā)熱,無其他局部癥狀;(5)留置導尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱;(6)膀胱排空功能受損;(7)泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前。
第二十三頁,共三十六頁,2022年,8月28日中段尿在未使用抗生素前采集標本,注意避免消毒劑污染標本,留取清潔中段尿,以晨起第一次中段尿為宜
1、避免尿道口污染!先用清水沖洗或消毒濕巾消毒外陰及尿道口周圍,再用潔凈紙巾等擦干,先排出一部分尿以沖洗尿道口,截留中段尿5ml左右于無菌瓶中。
2、標本留取后及時送檢,不能立即送檢者,可暫存4℃冰箱,但不能超過1小時后送檢。
3、尿液留置到容器的2/3即可,不要留取太滿,瓶蓋也不要隨便打開,以污染影響檢測準確度。
注:長期插有導尿管的病人,建議拔掉重置,或行恥骨上膀胱穿刺留取標本,切勿在導尿袋中直接留取標本。會造成結(jié)果假陽性,錯誤用藥。留置導尿管中采集或清洗不干凈的尿液標本(經(jīng)常被培養(yǎng)出三種以上細菌,疑污染,微生物室會做好登記退回申請單,需要臨床科重新留取標本檢查)發(fā)報告時間:陰性正常結(jié)果兩個工作日,陽性結(jié)果及時發(fā)出第二十四頁,共三十六頁,2022年,8月28日糞便標本采集的時間腹瀉病人在急性期用藥前采集;沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在2周內(nèi)采;胃腸炎在急性期6h內(nèi)采集新鮮膿血便。有腹瀉的病人,在送培養(yǎng)標本的同時可以送細菌涂片檢查??股叵嚓P(guān)性腹瀉,培養(yǎng)是陰性,但涂片檢查卻可以看到細菌比例失調(diào),涂片臨床意義大于培養(yǎng)。第二十五頁,共三十六頁,2022年,8月28日糞便,直腸拭子,褥瘡潰瘍1、排便后,挑取有膿血,黏液部分的糞便2-3克(液狀糞便取絮狀物1-3ml),盛于無菌盒內(nèi)蓋蓋送檢,用無菌棉棍取標本時務(wù)必注意不要接觸到便盆或馬桶,以免污染造成誤檢!對不易獲取糞便者或嬰幼兒可用肛拭子采集,常溫不超過2h及時送檢!如不能及時送檢請放置4℃冰箱保存,因為糞便極易滋生細菌,影響結(jié)果檢測。2、直腸拭子:將無菌拭子用生理鹽水濕潤后小心插入拭子超過肛門括約肌,輕輕旋轉(zhuǎn)拭子取到標本放入無菌容器。3、褥瘡潰瘍分泌物標本獲取時,先用無菌鹽水清洗表面,再用拭子用力采集損傷底部,放入無菌容器及時送檢。注意事項:①除排便困難外,不推薦使用拭子;②標本不能混入尿液,消毒劑或者化學藥物;③腹瀉患者建議多次送檢以確定致病菌。發(fā)報告時間:陰性正常報告兩個工作日,陽性結(jié)果及時發(fā)出第二十六頁,共三十六頁,2022年,8月28日膿腫傷口分泌物,組織,靜脈導管1、采集前用無菌鹽水或70%酒精徹底清創(chuàng),擦去表面滲出物和污染雜菌。用無菌注射器穿刺法抽吸深部膿液,或從傷口深處采集滲出分泌物放入無菌容器。如果采集到的標本量比較少時,可以用無菌拭子蘸zhan少許無菌生理鹽水,以保持標本濕度,2、在送檢小樣本組織時一般也需要滴加幾滴無菌生理鹽水保持濕潤,用無菌容器送檢。(組織或抽吸物標本送檢準確率高于拭子分泌物標本)3、需取深靜脈導管培養(yǎng)時,用70%酒精消毒導管周圍皮膚,將導管末端約5cm移入無菌管中及時送檢。分泌物,組織,靜脈導管在常溫放置都不要超過1h及時送檢.注意事項:①燒傷創(chuàng)面、膿腫標本不應(yīng)采集表面或表皮組織;②不提倡采集燒傷或動物咬傷12小時內(nèi)的傷口,除非存在感染指征;③當創(chuàng)傷出血時,敷用藥物2h以內(nèi)不應(yīng)采集標本,此時獲得陽性結(jié)果的機會很少。發(fā)報告時間:陰性正常報告三個工作日,陽性結(jié)果及時報告。第二十七頁,共三十六頁,2022年,8月28日膿腫傷口分泌物組織第二十八頁,共三十六頁,2022年,8月28日深靜脈導管深部膿液標本抽取第二十九頁,共三十六頁,2022年,8月28日腦脊液,前列腺液,陰道分泌物采集腦脊液一般用腰椎穿刺術(shù)獲得。第一管腦脊液送培養(yǎng)。采集量一般不低于1ML,置于無菌管內(nèi)立即送檢。腦脊液培養(yǎng)時醫(yī)生一般會考慮是否為腦膜炎雙球菌感染,腦膜炎雙球菌對環(huán)境溫度敏感,不能放置冰箱,需35℃下保溫送檢。但做病毒檢查的腦脊液標本時應(yīng)放置冰塊,可在4℃冰箱保存72小時內(nèi)送檢。以肥皂水和清水清洗尿道口及附近皮膚,直腸按壓前列腺獲取分泌物以無菌管采集或用無菌拭子送檢。陰道分泌物的采集可用無菌棉拭子自陰道深部或陰道穹后部,宮頸2-3cm處,轉(zhuǎn)動并停留10-30秒取分泌物,淋球菌培養(yǎng)同樣需要保溫及時送檢,衣原體,支原體等培養(yǎng)無法及時送檢時應(yīng)該放置冰箱4℃保存。注意事項:惡露標本不作為培養(yǎng)標本。
℃第三十頁,共三十六頁,2022年,8月28日腦膜炎雙球菌第三十一頁,共三十六頁,2022年,8月28日新型隱球菌第三十二頁,共三十六頁,2022年,8月28日第三十三頁,共三十六頁,2022年,8月28日手工K-B法藥敏試驗第三十四頁,共三十六頁,2022年,8月28日目前我科微生物室尚需開展的項目厭氧菌培養(yǎng)(省內(nèi)各大
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