GB15980-2009一次性使用醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)-醫(yī)療器械注冊

GB15980-2009GB15980-2009附錄E（規(guī)范性附錄）

電離輻射消毒或滅菌效果檢測E1常規(guī)檢測可使用劑量計(jì)進(jìn)行測定。E2生物檢測E2.1生物指示物要求以短小桿菌芽胞E601（ATCC27142）為指示菌，以布片或厚濾紙片（0.5X1.0cm2）為載體，回收菌量為5X105cfu/片?106cfu/片（滅菌時）或104cfu/片（消毒時）。殺滅90%微生物所需吸收劑量D10值為1.7kGy。E2.2布點(diǎn)要求用生物指示物應(yīng)放于產(chǎn)品箱（或輻照箱）中吸收劑量最小區(qū)域并均勻分布于被滅菌醫(yī)療用品中，每次至少放置10個生物指示物。E2.3培養(yǎng)基采用營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，配制方法如下：TOC\o"1-5"\h\z蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化鈉 5g蒸餾水 1000mL將各成分溶于蒸餾水中，調(diào)pH至7.2?7.4,分裝，于121c壓力蒸汽滅菌20min備用。E2.4培養(yǎng)方法和評價標(biāo)準(zhǔn)消毒或滅菌后回收菌片,連續(xù)培養(yǎng)（37℃）7天,每個指示菌片培養(yǎng)均為陰性,判為消毒或滅菌合格。同時設(shè)陽性對照。附錄F（資料性附錄）

接觸性創(chuàng)面敷料阻菌性試驗(yàn)方法F1低水分條件下的阻菌性F1.1意義和應(yīng)用本試驗(yàn)用于評價創(chuàng)面敷料在低水分條件下阻止細(xì)菌透過的性能。F1.2儀器F1.2.1疊式生物測定計(jì)數(shù)板（RODAC）。F1.2.2100g砝碼。F1.2.3營養(yǎng)肉湯。F1.2.4營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。F1.2.5粘質(zhì)沙雷菌8100培養(yǎng)物。F1.3步驟F1.3.1用20℃~25℃的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)粘質(zhì)沙雷菌24h,獲得菌含量109個/mL。F1.3.2用營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基注滿RODAC板。F1.3.3用無菌金屬絲環(huán)浸沾試驗(yàn)菌液，在RODAC板的表面上接種一個“X”形，每一交叉線的長度不應(yīng)超過2cm。F1.3.4將培養(yǎng)板置20℃?25℃下培養(yǎng)24h,使菌落生長。F1.3.5以無菌操作將一個無菌敷料樣品（表面積至少5cmX5cm）放到RODAC板上，使其覆蓋“X”狀的細(xì)菌培養(yǎng)物。F1.3.6在敷料上面放置注滿新鮮血瓊脂培養(yǎng)基、未接種菌的RODAC板，再在該RODAC板上加放一個100g砝碼，以對材料形成持續(xù)壓力。F1.3.7將整個培養(yǎng)板置20℃?25℃培養(yǎng)24h。F1.3.8取下上層的血瓊脂RODAC板，加蓋并置20℃?25℃下繼續(xù)培養(yǎng)24h。F1.3.9檢查該培養(yǎng)板被樣品覆蓋表面上是否有粘質(zhì)沙雷菌生長。注：粘質(zhì)沙雷菌在瓊脂上呈現(xiàn)出紅色菌落。F1.3.10再對兩個樣品重復(fù)該步驟。F1.4結(jié)果計(jì)算如果三個上層RODAC板中有一個有粘質(zhì)沙雷菌生長，則樣品未通過試驗(yàn)。F1.5試驗(yàn)報告報告至少應(yīng)包括以下信息：a）敷料種類，包括批號；b）試驗(yàn)方法的任何偏離；c）試驗(yàn)結(jié)果；d）試驗(yàn)日期；e）試驗(yàn)人員的識別。F2半潮濕條件下的阻菌性F2.1意義和應(yīng)用本試驗(yàn)用于評價創(chuàng)面敷料在半潮濕條件下阻止細(xì)菌透過的性能。F2.2儀器F2.2.1無菌培養(yǎng)皿。F2.2.2吸移管：每次能給出劑量精度為（0.2±0.01）mL。F2.2.3營養(yǎng)肉湯。F2.2.4營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。F2.2.5粘質(zhì)沙雷菌8100培養(yǎng)物。F2.3步驟F2.3.1用20℃?25℃的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)粘質(zhì)沙雷菌24h,獲得菌含量約109個/mL。F2.3.2以無菌操作將一個無菌敷料樣品（表面積至少5cmX5cm）移至裝有無菌營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿上。F2.3.3用無菌吸移管向敷料上滴5滴（各角部和中央各一滴）培養(yǎng)菌液。F2.3.4置20℃~25℃下培養(yǎng)24h。F2.3.5培養(yǎng)結(jié)束后，用無菌吸移管從敷料上將培養(yǎng)菌液吸除，用無菌鑷子將敷料從瓊脂表面取下。F2.3.6將培養(yǎng)皿置20℃?25℃下培養(yǎng)24h。F2.3.7檢查培養(yǎng)皿，觀察樣品覆蓋的表面積內(nèi)是否有粘質(zhì)沙雷菌生長。注：粘質(zhì)沙雷菌在瓊脂上呈現(xiàn)出紅色菌落。F2.3.8再對兩個樣品重復(fù)該步驟。F2.4結(jié)果計(jì)算如果三個RODAC頂板中有一個有粘質(zhì)沙雷菌生長，則樣品未通過試驗(yàn)。F2.5試驗(yàn)報告報告至少應(yīng)包括以下信息：a）敷料種類，包括批號；b）試驗(yàn)方法的任何偏離；c）試驗(yàn)結(jié)果；d）試驗(yàn)日期；e）試驗(yàn)人員的識別。F3潮濕條件下的阻菌性F3.1意義和應(yīng)用本試驗(yàn)用于評價創(chuàng)面敷料在潮濕條件下阻止細(xì)菌透過的性能。該試驗(yàn)專為膜敷料而設(shè)計(jì)。F3.2儀器F3.2.1500mL試劑瓶：頸口適合于法蘭圈下的橡膠圈。F3.2.2300mL法蘭圈：底部裝有磨砂玻璃濾斗，法蘭圈底部下配有橡膠圈。F3.2.3無菌胃型袋。F3.2.4營養(yǎng)肉湯。F3.2.5營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。F3.2.6粘質(zhì)沙雷菌8100培養(yǎng)物。F3.3步驟F3.3.1用20℃?25℃的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)粘質(zhì)沙雷菌24h,獲得菌含量約109個/mL。F3.3.2以無菌操作將試劑瓶注滿500mL營養(yǎng)肉湯，使彎月面在瓶口邊緣以上。F3.3.3以無菌操作法在瓶口放置一無菌樣品，使其完全接觸培養(yǎng)基。F3.3.4將橡膠圈裝于濾斗。F3.3.5將濾斗的磨砂玻璃底直接放置在試劑瓶口上的敷料上，用夾具夾緊。F3.3.6向?yàn)V斗中放100mL粘質(zhì)沙雷菌液。F3.3.7用兩個大的無菌胃型袋蓋住整個裝置，室溫下放置24h。F3.3.824h后倒出粘質(zhì)沙雷菌液。F3.3.9去除敷料，以無菌操作將100mL營養(yǎng)肉湯倒入一只無菌瓶中，置20℃?25℃下培養(yǎng)24h。F3.3.10檢查營養(yǎng)肉湯中是否有粘質(zhì)沙雷菌生長。注1：營養(yǎng)肉湯中如有粘質(zhì)沙雷菌生長，肉湯將變濁。注2：由于試驗(yàn)容易受交叉污染的影響，可采用傳統(tǒng)微生物學(xué)技術(shù)對污染菌進(jìn)行鑒別。F3.3.11再對兩個樣品重復(fù)該步驟。F3.4結(jié)果計(jì)算如果三個肉湯瓶中有一個有粘質(zhì)沙雷菌生長，則樣品未通過試驗(yàn)。F3.5試驗(yàn)報告報告至少應(yīng)包括以下信息：a）敷料種類，包括批號；b）試驗(yàn)方法的任何偏離；c）試驗(yàn)結(jié)果；d）試驗(yàn)日期；e）試驗(yàn)人員的識別。附錄G（資料性附錄）

包裝材料性能檢驗(yàn)方法G1與滅菌過程的相適應(yīng)性試驗(yàn)G1.1滅菌條件G1.1.1壓力蒸汽滅菌：121℃,20min?30min；134℃,2min?6min。G1.1.2環(huán)氧乙烷滅菌：溫度54℃,環(huán)氧乙烷濃度600mg/L?1000mg/L,作用至預(yù)定時間。G1.1.3輻照滅菌：輻照劑量10kGy?30kGy。G1.2操作要求G1.2.1壓力蒸汽滅菌：按GB18278進(jìn)行。G1.2.2環(huán)氧乙烷滅菌：按GB18279進(jìn)行。G1.2.3輻照滅菌：按GB18280進(jìn)行。G1.3結(jié)果報告：包裝袋上化學(xué)指示色塊變色情況及包裝內(nèi)生物指示劑滅菌情況。G1.4評價：在滅菌條件下，所有化學(xué)指示色塊均達(dá)規(guī)定顏色。包裝內(nèi)生物指示劑應(yīng)無菌生長。G2透氣性材料微生物屏障試驗(yàn)G2.1濕性條件下微生物屏障性能G2.1.1器材a）試驗(yàn)微生物:金黃色葡萄球（ATCC6538）；b）培養(yǎng)基：血瓊脂、營養(yǎng)瓊脂、葡萄糖營養(yǎng)肉湯；c）真空干燥箱：100mbar；d）樣片：面積50mmX50mm。G2.1.2操作步驟a）將樣片于134℃壓力蒸汽滅菌6min,100mbar真空干燥10min。b）將金黃色葡萄球接種于6ml葡萄糖營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，取37℃培養(yǎng)16h后的菌懸液作活菌計(jì)數(shù)。c）將預(yù)處理的樣片外表面朝上平鋪于無菌平皿內(nèi)。d）用含107cGu/ml的金黃色葡萄球菌懸液滴到樣片上，互不接觸滴5滴，每滴0.1ml。e）將染菌樣片在溫度20℃~25℃,相對濕度40%?50%條件下放置使其干燥，時間不超過6h。f）將染菌樣片平鋪于血瓊脂培養(yǎng)基表面，完全接觸，染菌面朝上，5s?6s后將樣片移開。g）將血瓊脂培養(yǎng)基于37℃培養(yǎng)16h?24h進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。G2.1.3結(jié)果報告每個血瓊脂培養(yǎng)基平板上生長的菌落數(shù)以及5個平板上生長的菌落總數(shù)。G2.1.4評價a）5個培養(yǎng)基平板上均無菌生長，試驗(yàn)菌不能透過樣片。b）如5個培養(yǎng)基平板上生長的菌落總數(shù)W5,則用20個樣片復(fù)測，在20個平板上生長的菌落數(shù)W5為合格。G2.2干性條件下微生物屏障性能G2.2.1器材a）試驗(yàn)瓶：250ml有蓋玻璃瓶，螺旋蓋帶有34mm的孔：密封墊圈內(nèi)徑34mm,由聚四氟乙烯（PTFE）或帶PTFE覆蓋層材料制成；b）試驗(yàn)微生物：枯草桿菌黑色變種（ATCC9372）芽孢；c）培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；d）鋁泊、濾紙。G2.2.2操作步驟a）取100ml含106cfu/ml芽孢的乙醇（96%）懸液與100g無菌石英粉（0.04mm?0.15mm）混合，50℃干燥16h。b）在試驗(yàn)瓶內(nèi)加入20ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基并使凝固。c）將10個直徑為42mm的圓形樣片分別置于試驗(yàn)瓶兩個密封墊圈之間，并用螺旋蓋適當(dāng)壓緊,使樣片被密封墊圈緊壓在瓶沿上。d）將試驗(yàn)瓶用鋁泊包裹，于121℃滅菌20min。e）滅菌并冷卻后，移去鋁泊包裹，稱取0.25g染菌石英粉均勻撒于樣片上。f）將試驗(yàn)瓶放入培養(yǎng)箱加熱到50℃,取出放入冷藏箱降至10℃。如此為1次，重復(fù)5次。g）將試驗(yàn)瓶置37℃培養(yǎng)24h,數(shù)菌。G2.2.3結(jié)果報告:每個樣片透過的菌落數(shù)及10個樣片透過的菌落總數(shù)。G2.2.4評價：每個樣片透過的菌落數(shù)應(yīng)W5cfu,10個樣片透過的菌落總數(shù)應(yīng)W15cfu。G3無菌有效期鑒定G3.1樣品放置條件G3.1.1自然留樣法將樣片放置室溫下,模擬室內(nèi)貨架貯存,