POCT檢測(cè)技術(shù)與相關(guān)儀器

精選文檔POCT概述POCT的概念、基本原理及主要技術(shù)POCT是指在病人旁邊分析病人標(biāo)本的分析技術(shù)，或者說只要測(cè)試不在主實(shí)驗(yàn)室做，并且它是一個(gè)可移動(dòng)的系統(tǒng)，就可以稱為POCT。“POCT”的組成包括：地點(diǎn)、時(shí)間（point）、保健、照料（care）、檢驗(yàn)、試驗(yàn)（testing），point-of-caretesting英文字面的意思是在受治療者現(xiàn)場(chǎng)的保健檢驗(yàn)。POCT的基本原理是：把傳統(tǒng)方法中的相關(guān)液體試劑浸潤(rùn)于濾紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合的干燥試劑塊，然后將其固定于硬質(zhì)型基質(zhì)上，成為各種形式的診斷試劑條；或把傳統(tǒng)分析儀器微型化，操作方法簡(jiǎn)單化，使之成為便攜式和手掌式的設(shè)備；或?qū)⑸鲜鰞烧哒蠟榻y(tǒng)一的系統(tǒng)。POCT主要技術(shù)包括：（1）簡(jiǎn)單顯色（干化學(xué)法測(cè)定）技術(shù)將多種反應(yīng)試劑干燥、固定在紙片上，加上檢驗(yàn)標(biāo)本（全血、血清、血漿、尿液等）后產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用肉眼觀察定性或儀器檢測(cè)（半定量）。（2）多層涂膜（干化學(xué)法測(cè)定）技術(shù)多層涂膜技術(shù)是從感光膠片制作技術(shù)移植而來的。將多種反應(yīng)試劑依次涂布在片基上，制成干片，用儀器檢測(cè)，可以準(zhǔn)確定量。（3）免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚集時(shí)，肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn)，這一反應(yīng)可以通過銀顆粒的沉積被放大。該類技術(shù)主要有斑點(diǎn)免疫滲濾法（DIGFA）和免疫層析法（ICA）。（4）免疫熒光技術(shù)通過檢測(cè)板條上激光激發(fā)的熒光，定量檢測(cè)以pg/ml為單位的檢測(cè)板條上單個(gè)或多個(gè)標(biāo)志物。檢測(cè)系統(tǒng)通常由熒光讀數(shù)儀和檢測(cè)板組成。檢測(cè)板多用層析法，分析物在移動(dòng)的過程中形成免疫復(fù)合物，通過檢測(cè)區(qū)域、質(zhì)控區(qū)域的熒光信號(hào)值的不同與分析物的不同濃度成一定的比例，獲得定標(biāo)曲線，可檢測(cè)未知樣本中分析物的濃度。（5）生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物檢測(cè)器進(jìn)行分析檢測(cè)。該類技術(shù)是酶化學(xué)、免疫化學(xué)、電化學(xué)與計(jì)算機(jī)技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物。（6）生物芯片技術(shù)生物芯片是最新發(fā)展起來的新技術(shù)。其特點(diǎn)是在小面積的芯片上同時(shí)測(cè)定多個(gè)項(xiàng)目。生物芯片可分基因芯片、蛋白質(zhì)芯片和細(xì)胞芯片。它們具有高靈敏度、分析時(shí)間短、能同時(shí)檢測(cè)的項(xiàng)目多等特點(diǎn)。（7）紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于經(jīng)皮檢測(cè)儀器，用于檢測(cè)血液中血紅蛋白、膽紅素、葡萄糖等成分。這類床邊檢驗(yàn)儀器可連續(xù)監(jiān)測(cè)病人血液中的目的成分，無需抽血，可避免抽血可能引起的交叉感染和血液標(biāo)本的污染，降低每次檢驗(yàn)的成本和縮短報(bào)告時(shí)間。（8）其他技術(shù)POCT的特點(diǎn)及與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢查的不同POCT的主要特點(diǎn)就是，可以迅速地獲得可靠的檢驗(yàn)結(jié)果，從而提高病人的臨床醫(yī)療效果。簡(jiǎn)單的說，實(shí)驗(yàn)儀器小型化，操作方法簡(jiǎn)單化，結(jié)果報(bào)告即時(shí)化。表19-1臨床實(shí)驗(yàn)室與POCT的主要不同點(diǎn)比較項(xiàng)目 臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)試 POCT1/10精選文檔周轉(zhuǎn)時(shí)間慢快標(biāo)本鑒定復(fù)雜簡(jiǎn)單標(biāo)本處理通常需要不需要血標(biāo)本血清、血漿多為全血校正頻繁不頻繁試劑需要配制隨時(shí)可用消耗品相對(duì)少相對(duì)多檢測(cè)儀復(fù)雜簡(jiǎn)單對(duì)操作者的要求專業(yè)人員普通人亦可以靈敏度相對(duì)高相對(duì)低每個(gè)試驗(yàn)花費(fèi)低高試驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量高一般POCT儀的分類按照用途來分，可以分為血液分析儀、快速血糖檢測(cè)儀、電解質(zhì)分析儀、血?dú)夥治鰞x、藥物應(yīng)用監(jiān)測(cè)儀、抗凝測(cè)定儀、心肌損傷標(biāo)志物檢測(cè)儀、甲狀腺激素檢測(cè)儀、酶聯(lián)免疫檢驗(yàn)儀、放射免疫分析儀等種類繁多的儀器。根據(jù)其大小和重量，可以將監(jiān)測(cè)離體血液標(biāo)本的分析儀，分為桌面(benchtop)型、便攜型、手提式及手提式一次性使用型。最近，一種被稱為CD的POCT已經(jīng)問世，其在類似CD的圓盤中含有多種生物傳感器，具有診斷檢驗(yàn)功能，通過標(biāo)準(zhǔn)或定制的閱讀器獲取監(jiān)測(cè)結(jié)果，有人又稱之為CD實(shí)驗(yàn)室。根據(jù)所用的一次性裝置來分，可有單一或多墊試劑條、卡片式裝置、生物傳感器裝置、微制造裝置以及其他多孔材料等多種裝置。POCT的臨床應(yīng)用隨著各種POCT技術(shù)及檢測(cè)儀器的使用，使得POCT既可在醫(yī)院內(nèi)，也可在醫(yī)院外進(jìn)行。一些特殊項(xiàng)目甚至在家里或在某些特殊的場(chǎng)合(如室外、現(xiàn)場(chǎng))均可檢測(cè)，極大地方便了病人和一些特殊人群的需要。(1)糖尿病診治方面的應(yīng)用各種快速血糖儀、多種無創(chuàng)傷性血糖檢測(cè)儀的使用使報(bào)告時(shí)間(TAT)大大縮短，是臨床、患者家庭最常用的檢測(cè)儀器；全定量免疫熒光檢測(cè)儀檢測(cè)糖尿病患者的糖化血紅蛋白與尿微量白蛋白等指標(biāo)，有助于早期發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病，有利于患者病情的估計(jì)與長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)；傳感器相關(guān)檢測(cè)儀可檢測(cè)患者血?dú)饧半娊赓|(zhì)等指標(biāo)；干化學(xué)分析儀可檢測(cè)患者血液中各種生化指標(biāo)。(2)心血管疾病方面的應(yīng)用急性心肌梗死(AcuteMyocardialInfarction，AMI)發(fā)病急，嚴(yán)重影響到患者的生命安全。POCT的運(yùn)用可使AMI患者得到及時(shí)的診斷和治療。金標(biāo)定量檢測(cè)儀、全定量免疫熒光檢測(cè)儀、快速CRP檢測(cè)儀等可檢測(cè)特異性血清早期標(biāo)2/10精選文檔志物如肌鈣蛋白I(cTnl)、肌紅蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、D-二聚體、腦鈉肽(BNP)、CRP；利用干片式血凝分析儀進(jìn)行凝血酶原時(shí)間(PT)測(cè)定、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)測(cè)定；干化學(xué)分析儀可檢測(cè)血液中門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等生化指標(biāo)的檢測(cè)；傳感器相關(guān)分析儀可檢測(cè)患者血?dú)饧半娊赓|(zhì)等指標(biāo)。(3)感染性疾病中的應(yīng)用診斷用蛋白芯片技術(shù)、免疫金標(biāo)記技術(shù)相關(guān)POCT的使用，可使不具備細(xì)菌培養(yǎng)條件的基層醫(yī)院、民營診所、社區(qū)保健所進(jìn)行微生物的快速檢測(cè)，也可用于醫(yī)院中手術(shù)前傳染病四項(xiàng)檢測(cè)(HBsAg、HCV、HIV、TP)、內(nèi)鏡檢查前的病毒性肝炎篩選等。(4)發(fā)熱性疾病方面的應(yīng)用快速CRP檢測(cè)儀的使用，將CRP與血常規(guī)的結(jié)果聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)鑒別發(fā)熱患者感染病原體的性質(zhì)(細(xì)菌或病毒)比單一檢測(cè)更具特異性。(5)ICU病房?jī)?nèi)的應(yīng)用在ICU病房，目前臨床上已使用的有：用于體外監(jiān)測(cè)的電化學(xué)感應(yīng)器，可周期性地控制患者的血?dú)?、電解質(zhì)、紅細(xì)胞壓積和血糖等；用于體內(nèi)監(jiān)測(cè)的生物傳感器，將其安裝在探針或?qū)Ч鼙谏?，置于?dòng)脈或靜脈管腔內(nèi)，通過監(jiān)視器可定期獲取待測(cè)指標(biāo)的數(shù)據(jù)。(6)兒科診療中的應(yīng)用適合兒童的診斷行為需要輕便、易用、無創(chuàng)傷或創(chuàng)傷性小、樣品需求量少、無需預(yù)處理、快速得出結(jié)論等要素，以縮短就診周期，還需要關(guān)注父母的滿意度。POCT能較好地達(dá)到上述要求。POCT另一特點(diǎn)是診斷病情時(shí)父母可一直陪伴在孩子身邊，隨時(shí)了解檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的含義，更好地與醫(yī)護(hù)人員交流，有利于患兒疾病的診治。(7)循證醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用從循證醫(yī)學(xué)的角度來評(píng)價(jià)，POCT彌補(bǔ)了傳統(tǒng)臨床實(shí)驗(yàn)室流程煩瑣的不足。循證醫(yī)學(xué)(Evidencebasedmedicine，EBM)是遵循現(xiàn)代最佳醫(yī)學(xué)研究的證據(jù)，并將證據(jù)應(yīng)用于臨床對(duì)患者進(jìn)行科學(xué)診治決策的一門學(xué)問。POCT所用實(shí)驗(yàn)儀器體積小、攜帶方便、容易使用，操作人員可以在實(shí)驗(yàn)室外的任何場(chǎng)所進(jìn)行，快速、方便地獲取患者某些與疾病相關(guān)的數(shù)據(jù)，這正是循證醫(yī)學(xué)所要達(dá)到的主要目的——有據(jù)可循。(8)醫(yī)院外的應(yīng)用各種免疫金標(biāo)技術(shù)相關(guān)的POCT儀、傳感器技術(shù)相關(guān)的POCT儀、干化學(xué)技術(shù)相關(guān)POCT儀，由于方便、快速等特點(diǎn)，可在家庭自我保健、社區(qū)醫(yī)療、醫(yī)師診所、醫(yī)務(wù)室、體檢中心、救護(hù)車上、事故現(xiàn)場(chǎng)(甚至戰(zhàn)場(chǎng))、出入境檢疫、禁毒、戒毒中心、公安部門和運(yùn)動(dòng)員尿液檢測(cè)等醫(yī)院外的許多部門和場(chǎng)所廣泛應(yīng)用。4.1.5POCT存在的問題與發(fā)展前景.POCT存在的問題(1)質(zhì)量保證問題。各種POCT分析儀的準(zhǔn)確度和精密度各不相同，而且沒有統(tǒng)一的室內(nèi)和室間嚴(yán)格的質(zhì)量控制，無法確保分析系統(tǒng)的質(zhì)量。目前尚未有嚴(yán)格的質(zhì)量保證體系和管理規(guī)范，導(dǎo)致出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量不易保證的現(xiàn)象。非檢驗(yàn)操作人員如醫(yī)師和護(hù)士等工作人員沒有經(jīng)過適當(dāng)?shù)呐嘤?xùn)，不熟悉設(shè)備的性能和局限性，都是導(dǎo)致POCT產(chǎn)生質(zhì)量不穩(wěn)定的重要原因。3/10精選文檔由于POCT在使用和管理中的不規(guī)范導(dǎo)致對(duì)病人仍然存在潛在的危險(xiǎn)，因此許多國家和地區(qū)均頒布了權(quán)威的POCT使用原則。在英國，發(fā)布了諾丁漢女王醫(yī)學(xué)中心2005年修訂后的POCT使用原則。在美國，NCCLS于1995年發(fā)表了AST2-P文件，介紹關(guān)于評(píng)價(jià)和實(shí)施床邊體外診斷檢驗(yàn)的信息。隨后，美國的POCT部門又忙于修訂符合臨床實(shí)驗(yàn)室的管理法規(guī)，尤其是2003年1月頒布的新“質(zhì)量體系”要求。結(jié)合美國NCCLS近幾年發(fā)表的其他多篇與POCT質(zhì)量管理有關(guān)的文件，可以發(fā)現(xiàn)，POCT的質(zhì)量在美國正日趨得到保障。文件對(duì)有關(guān)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可、POCT儀的使用、操作人員的培訓(xùn)、質(zhì)量評(píng)估、方法學(xué)評(píng)價(jià)、結(jié)果記錄及報(bào)告等均有明確規(guī)定。在我國，POCT的使用發(fā)展較快，但管理相對(duì)滯后。不過，最近我國也已經(jīng)出臺(tái)了《關(guān)于POCT的管理辦法(試行草案)》。其中對(duì)POCT的組織管理、POCT人員的培訓(xùn)、對(duì)POCT專用儀器的認(rèn)可、POCT質(zhì)量保證計(jì)劃、POCT操作規(guī)范方面、人員安全性及廢物處理、床邊檢驗(yàn)的操作程序、結(jié)果的報(bào)告、以及費(fèi)用方面的問題等都有詳細(xì)的規(guī)定與說明。(2)循證醫(yī)學(xué)評(píng)估問題。POCT儀器及檢驗(yàn)結(jié)果本身來說，尚缺乏循證醫(yī)學(xué)的評(píng)估.(3)費(fèi)用問題。POCT單個(gè)檢驗(yàn)費(fèi)用，高于常規(guī)性檢驗(yàn)。(4)報(bào)告書寫不規(guī)范，也是目前POCT存在的一個(gè)問題。.POCT的發(fā)展前景為了適應(yīng)實(shí)際需要，理想的POCT儀器應(yīng)該是結(jié)構(gòu)靈巧、體積小、容易使用、不需要額外人工處理標(biāo)本、不需要非常精確的加樣，結(jié)果準(zhǔn)確、并能自動(dòng)保存所有記錄的微型移動(dòng)系統(tǒng)。應(yīng)用無創(chuàng)性/少創(chuàng)性技術(shù)的POCT儀器將是POCT的另一個(gè)發(fā)展方向。生物芯片技術(shù)相關(guān)的POCT因其具有高靈敏度、分析時(shí)間短、同時(shí)能檢測(cè)的項(xiàng)目多等特點(diǎn)，也是POCT發(fā)展的一個(gè)重要趨勢(shì)。4.2POCT常用技術(shù)及相關(guān)儀器POCT儀的基本結(jié)構(gòu)與功能POCT儀器，一般外形小巧，結(jié)構(gòu)不像中心實(shí)驗(yàn)室的大型儀器那么復(fù)雜(最主要是沒有復(fù)雜的液路系統(tǒng))，儀器的基本結(jié)構(gòu)包括：(1)電源開關(guān)。(2)狀態(tài)燈。(3)電池。由于POCT儀器使用地點(diǎn)非常廣泛，所以都自帶電源——配備電池。(4)(熱敏)打印機(jī)、顯示器。顯示器和打印機(jī)用于輸出結(jié)果。(5)鍵盤。鍵盤屬于輸入設(shè)備。(6)樣本測(cè)量室(閱讀儀及光源等)。樣本測(cè)量室的光源，可以是一般的檢測(cè)光源，也可能是激發(fā)光的光源。閱讀儀可以幫助控制、簡(jiǎn)化部分分析反應(yīng)，還可以整合數(shù)據(jù)的處理、存儲(chǔ)功能。比如，校正曲線計(jì)算法所使用的校正曲線，質(zhì)量控制限度和結(jié)果數(shù)據(jù)存儲(chǔ)等。帶有微處理器的閱讀儀甚至可以對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行校正，然后解釋結(jié)果。(7)條形碼/密碼牌閱讀器。由于一次性分析裝置通常是獨(dú)立包裝，每個(gè)外包裝上都帶有獨(dú)特的條碼，其中包含有試劑的各種信息；有的儀器還帶有密碼牌，用于校準(zhǔn)及質(zhì)量控制。所以，POCT儀一般都配備條形碼/密碼牌閱讀器。(8)內(nèi)置的數(shù)據(jù)處理及儲(chǔ)存中心。作為閱讀器的補(bǔ)充而出現(xiàn)的內(nèi)置的數(shù)據(jù)處理及儲(chǔ)存中心，增加了儲(chǔ)存質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)或患者數(shù)據(jù)及其他數(shù)據(jù)處理功能。4/10精選文檔（9）一次性分析裝置（帶有樣本感應(yīng)器或限流閥以及樣本注入口等）。一次性裝置又可以分成單一或多墊試劑條（包括單層、多層試紙墊）、酶層析裝置、免疫橫流（層析）分析裝置、卡片式裝置、微制造裝置、生物傳感器裝置等。多層涂膜技術(shù)相關(guān)POCT分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)與功能（1）多層涂膜技術(shù)制成的干片結(jié)構(gòu)，如圖19-1干片中的涂層按其功能分4層：分布層（有時(shí)又分成擴(kuò)散層和遮蔽或凈化劑層）、試劑層、指示劑層、支持層。分布層是一層高密度孔聚合物。分布層的作用不僅可以阻留細(xì)胞、結(jié)晶和其他小顆粒，還可以讓大分子（如蛋白質(zhì)）滯留。分布層中朝下的一面加入反光物質(zhì)如Ti02和BaS04來掩蓋病人標(biāo)本中的有色物質(zhì)，使反射光度計(jì)不受其影響。同時(shí)這些反光化合物也給干片底層的指示劑層提供反射背景。試劑層試劑層的主要功能是提供能實(shí)現(xiàn)化學(xué)反應(yīng)所需的環(huán)境，提供化學(xué)反應(yīng)所需干試劑，把標(biāo)本中的待測(cè)成分轉(zhuǎn)變成可定量物質(zhì)，同時(shí)去除干擾。指示劑層其目的是生成一種可以定量且與待測(cè)物含量直接成比例的產(chǎn)物。指示劑層中的色原含量用反射光度計(jì)讀取。支持層起物理固定作用，同時(shí)允許測(cè)量光通過，并對(duì)通過光不產(chǎn)生任何干擾作用