GB 15193.4-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB151934—2014

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食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

2014-12-24發(fā)布2015-05-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)發(fā)布

國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)

GB151934—2014

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前言

本標(biāo)準(zhǔn)代替鼠傷寒沙門(mén)氏菌哺乳動(dòng)物微粒體酶試驗(yàn)

GB15193.4—2003《/》。

本標(biāo)準(zhǔn)與相比主要變化如下

GB15193.4—2003,:

標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)修改為食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

———“”;

修改了范圍

———;

增加了術(shù)語(yǔ)和定義

———;

修改了試驗(yàn)?zāi)康暮驮?/p>

———;

修改了儀器

———;

修改了磷酸鹽貯備液的配制方法

———;

修改了組氨酸生物素溶液的配制方法

———-;

修改了對(duì)的要求

———DMSO;

修改了輔酶和葡萄糖磷酸鈉鹽溶液的配制要求

———-Ⅱ-6-;

修改了進(jìn)行菌株基因型鑒定的條件

———;

修改了對(duì)增菌培養(yǎng)的要求

———;

修改了受試物的特殊處理

———;

修改了選擇溶媒的要求

———;

修改了劑量設(shè)計(jì)的內(nèi)容

———;

修改了試驗(yàn)菌株

———;

修改了試驗(yàn)方法中對(duì)觀察結(jié)果所需時(shí)間的規(guī)定

———;

修改了對(duì)照組的設(shè)置

———;

增加了制備的方法生物素缺陷型菌株的鑒定結(jié)果判定的內(nèi)容試驗(yàn)報(bào)告的要求試驗(yàn)的

———S9、、、、

解釋

;

修改了附錄

———。

Ⅰ

GB151934—2014

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食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

1范圍

細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)包括鼠傷寒沙門(mén)氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)和大腸桿菌細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定

。

了鼠傷寒沙門(mén)氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)的基本技術(shù)要求選擇大腸桿菌進(jìn)行細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)時(shí)應(yīng)參閱有關(guān)

,

文獻(xiàn)

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于評(píng)價(jià)受試物的致突變作用

。

2術(shù)語(yǔ)和定義

21細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)

.

以營(yíng)養(yǎng)缺陷型的突變體菌株為指示生物檢測(cè)基因突變的體外試驗(yàn)常用的菌株有組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷

。

型鼠傷寒沙門(mén)氏菌和色氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌

。

22堿基取代型基因突變

.

多核苷酸鏈上某個(gè)堿基為另一個(gè)堿基取代引起堿基序列異常

DNA,DNA。

23移碼型基因突變

.

在堿基序列中插入或缺失了一個(gè)或幾個(gè)除了和的倍數(shù)堿基按三聯(lián)密碼連續(xù)閱讀的

DNA(33),

規(guī)則該部位以后的密碼子組成全部改變指導(dǎo)合成的多肽鏈也全部發(fā)生改變

,,。

3試驗(yàn)?zāi)康暮驮?/p>

檢測(cè)受試物對(duì)微生物細(xì)菌的基因突變作用預(yù)測(cè)其遺傳毒性和潛在的致癌作用

(),。

細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)利用鼠傷寒沙門(mén)氏菌和大腸桿菌來(lái)檢測(cè)點(diǎn)突變涉及的一個(gè)或幾個(gè)堿基

,DNA

對(duì)的置換插入或缺失見(jiàn)附錄鼠傷寒沙門(mén)氏菌和大腸桿菌的試驗(yàn)菌株分別為組氨酸缺陷突變型和

、A。

色氨酸缺陷突變型在無(wú)組氨酸或色氨酸的培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)在有組氨酸或色氨酸的培養(yǎng)基上才能正

,,

常生長(zhǎng)致突變物存在時(shí)可以回復(fù)突變?yōu)樵B(yǎng)型在無(wú)組氨酸或色氨酸的培養(yǎng)基上也可以生長(zhǎng)故可

。,。

根據(jù)菌落形成數(shù)量來(lái)衡量受試物是否為致突變物

。

某些致突變物需要代謝活化后才能使上述細(xì)菌產(chǎn)生回復(fù)突變受試物要同時(shí)在有和沒(méi)有代謝活化

,

系統(tǒng)的條件下進(jìn)行試驗(yàn)

。

4儀器和試劑

41儀器

.

實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備低溫高速離心機(jī)低溫冰箱或液氮罐生物安全柜恒溫培