臨床常用免疫學(xué)檢查講稿

臨床常用免疫學(xué)檢查中國(guó)醫(yī)科大學(xué)教育部免疫學(xué)診斷：用免疫學(xué)方法確定疾病相關(guān)因子、監(jiān)測(cè)疾病過程、判斷療效及預(yù)后，涉及對(duì)疾病相關(guān)因子的診斷和輔助診斷，以及檢測(cè)機(jī)體免疫功能狀態(tài)。

臨床常用免疫學(xué)檢查：血清免疫球蛋白檢測(cè)，血清補(bǔ)體檢測(cè)，細(xì)胞免疫檢測(cè)，肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)，感染免疫檢測(cè)，腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，自身抗體檢測(cè)及其它免疫檢測(cè)。一.體液免疫功能檢測(cè)

檢測(cè)血清免疫球蛋白及其類別（尤其是IgG、IgA和IgM）和水平，可為診斷免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病提供重要參數(shù)。

檢測(cè)針對(duì)疫苗或感染因子的特異性抗體及其水平，可較直接反映機(jī)體特異性體液免疫功能狀態(tài)。1．免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig)具有抗體活性和抗體樣結(jié)構(gòu)的球蛋白，由漿細(xì)胞產(chǎn)生，存在于血液、體液、外分泌液及部分細(xì)胞的表面。分五類：IGG、IGM、IGA、IGD、IGE?！?〕.IgG、IgM、IgA的檢測(cè)：IgG是血清中的主要抗體成分，占總Ig的75%是唯一能通過胎盤的Ig，通過自然被動(dòng)免疫獲得。IgM是Ig中分子量最大者，亦是最早出現(xiàn)的抗體為五聚體，在機(jī)體早期的免疫防御中起重要作用。IgA分血清型與分泌型，尤以分泌型IgA在局部抗感染、抗過敏起重要免疫屏障。檢測(cè)方法：免疫擴(kuò)散法及免疫比濁法參考值：各個(gè)年齡階段有差別臨床意義：(1).Ig均增高常見于慢性肝病、淋巴瘤、SLE、RA、MM等(2).單一Ig增高：見于免疫增殖性疾病如MM（IGG），巨球蛋白血癥（IGM）(3).Ig降低：反復(fù)呼吸道感染者常見IGA單一降低2.IgG亞類測(cè)定分四類：IgG1IgG2IgG3IgG4與免疫缺陷病和變態(tài)反應(yīng)性疾病有關(guān)3.IgE測(cè)定血清含量低但與I型變態(tài)反應(yīng)疾病有關(guān)IgEELISA法0.1~0.9mg/L?

IgE增高：見于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、RA和各種過敏性疾病。?

IgE降低：見于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長(zhǎng)期用免疫抑制劑者和共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等。測(cè)定方法：ELISA法參考值：0.1~0.9mg/L意義：?

IgE增高：見于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、肝臟病、結(jié)節(jié)病、RA和各種過敏性疾病。?

IgE降低：見于丙種球蛋白缺乏癥、惡性腫瘤、長(zhǎng)期用免疫抑制劑者和共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥等。二.血清M蛋白(monoclonalimmunoglobulins)測(cè)定測(cè)定方法：蛋白電泳法、免疫比濁法和免疫電泳法參考值：陰性意義：檢測(cè)到M蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖性疾病。見于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、重鏈病、輕鏈病和半分子病等三.血清補(bǔ)體檢測(cè)?

基本概念補(bǔ)體(complement)：是一組具有酶原活性的糖蛋白，由傳統(tǒng)途徑的9種成分C1-C9、旁路途徑的3種成分及其衍生物組成，參與滅活病原體的免疫反應(yīng)，也參與破壞自身組織和自身細(xì)胞而造成的免疫損傷。1.補(bǔ)體CH50方法：試管法參考值：50000-100000u/l

意義：反映補(bǔ)體傳統(tǒng)途徑活化的活性程度。1、CH50增高見于急性炎癥、組織損傷和某些惡性腫瘤；2、CH50降低見于腎小球腎炎、自身免疫病、感染性心內(nèi)膜炎、病毒性肝炎和慢性肝病。2.補(bǔ)體C3方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法(1.14±0.27g/L)免疫比濁法(0.85-1.70g/L)意義：1、增高見于急性炎癥、傳染病早期、腫瘤和排異反應(yīng)；2、減低見于70%以上的急性腎小球腎炎、、85%以上的鏈球菌感染后腎炎、78%狼瘡性腎炎患者。還見于活動(dòng)性SLE和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。2.補(bǔ)體C4方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法(0.553-0.109g/L)意義：1、升高見于急性風(fēng)濕熱、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈周圍炎、皮肌炎、關(guān)節(jié)炎、和組織損傷等；2、降低見于自身免疫性肝炎、狼瘡性腎炎、SLE、1型糖尿病、胰腺癌、多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、

IgA腎病和遺傳性IgA缺乏癥。3.補(bǔ)體C1q方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法(0.197-0.04g/L)意義：1、增加見于骨髓炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、過敏性紫癜等；2、降低見于SLE和混合性結(jié)締組織病等。4.BF方法：：?jiǎn)蜗蛳蛎庖咭邤U(kuò)散散法(0.1-0.4g/L)意義：：增高高見于于某些些自身身免疫疫病、、腎病病綜合合征、、慢性性腎炎炎、惡惡性腫腫瘤；；2、減減低見見于肝肝病、、急性性腎小小球腎腎炎、、自身身免疫疫性溶溶血性性貧血血。第二節(jié)節(jié)細(xì)細(xì)胞免免疫檢檢測(cè)主要包包括有有T細(xì)細(xì)胞、、B細(xì)細(xì)胞、、K細(xì)細(xì)胞、、NK細(xì)胞胞及其其亞群群；臨臨床常常對(duì)淋淋巴細(xì)細(xì)胞的的數(shù)量量，表表面標(biāo)標(biāo)志物物及功功能進(jìn)進(jìn)行檢檢測(cè)，，以了了解機(jī)機(jī)體的的細(xì)胞胞免疫疫功能能.?T細(xì)細(xì)胞免免疫檢檢測(cè)1.T細(xì)胞胞表面面標(biāo)志志物檢檢測(cè)(1).E-玫瑰瑰花形形成試試驗(yàn)：：用于于檢測(cè)測(cè)T細(xì)細(xì)胞的的數(shù)量量。其其臨床床意義義：①①降降低低；見見于免免疫缺缺陷性性疾病病，如如惡性性腫瘤瘤、免免疫性性疾病病、大大面積積燒傷傷、多多發(fā)性性神經(jīng)經(jīng)炎等等。②②升升高高：見見于甲甲亢、、甲狀狀腺炎炎、重重癥肌肌無力力、慢慢性活活動(dòng)性性肝炎炎、SLE活動(dòng)動(dòng)期和和器官官移植植排斥斥反應(yīng)應(yīng)等。。（2））T細(xì)細(xì)胞胞分分化化抗抗原原測(cè)測(cè)定定①CD3:參參考考值值（（IFA法法））61%-85%意義義：：降降低低見見于于自自身身免免疫疫性性疾疾病病，，如如SLE、、RA等等②CD4:參參考考值值（（IFA法法））28%-58%意義義：：降降低低見見于于惡惡性性腫腫瘤瘤、、遺遺傳傳性性免免疫疫缺缺陷陷病病、、愛愛滋滋病病、、應(yīng)應(yīng)用用免免疫疫抑抑制制劑劑者者③CD8+:參參考考值值（（IFA法法））19%-48%意義義：：減減低低見見于于自自身身免免疫疫性性疾疾病病或或變變態(tài)態(tài)反反應(yīng)應(yīng)性性疾疾病病④CD4+/CD8+：：參考考值值（（IFA法法））1.66±±0.33意義義：①比比值值增增高高見見于于惡惡性性腫腫瘤瘤、、自自身身免免疫疫性性疾疾病病、、病病毒毒感感染染、、變變態(tài)態(tài)反反應(yīng)應(yīng)等等；；②②比比值值降降低低見見于于愛愛滋滋病?。?；③③監(jiān)監(jiān)測(cè)測(cè)器器官官移移植植排排斥斥反反應(yīng)應(yīng)時(shí)時(shí)比比值值增增高高提提示示可可能能發(fā)發(fā)生生排排斥斥反反應(yīng)應(yīng)。。?注注：：當(dāng)當(dāng)CD1-8都都增增高高可可能能為為T細(xì)細(xì)胞胞型型急急性性淋淋巴巴細(xì)細(xì)胞胞白白血血病病?B細(xì)細(xì)胞胞免免疫疫檢檢測(cè)測(cè)1.B細(xì)細(xì)胞胞表表面面標(biāo)標(biāo)志志物物檢檢測(cè)測(cè)：：B細(xì)細(xì)胞胞表表面面有有表表面面抗抗原原(CD19、、CD20、、CD21、、CD22、、CD40等等)與與表表面面受受體體(BCR、、CKR、、CR、、FC等等)BCR又稱稱B細(xì)細(xì)胞胞表表面面免免疫疫球球蛋蛋白白（（SmIg）），，是是B細(xì)細(xì)胞胞的的特特征征性性表表面面標(biāo)標(biāo)志志，，其其類類別別隨隨B細(xì)細(xì)胞胞發(fā)發(fā)育育階階段段不不同同而而變變化化。。(1).B細(xì)細(xì)胞胞表表面面免免疫疫球球蛋蛋白白（（SmIg））測(cè)測(cè)定定：：主主要要用用于于檢檢測(cè)測(cè)外外周周血血B細(xì)細(xì)胞胞的的百百分分率率。。臨床床意意義義：①①SmIg減減低低見見于于免免疫疫缺缺陷陷性性疾疾病?。?；②②SmIg升升高高見見于于慢慢性性淋淋巴巴細(xì)細(xì)胞胞性性白白血血病病、、多多毛毛細(xì)細(xì)胞胞白白血血病病和和原原發(fā)發(fā)性性巨巨球球蛋蛋白白血血癥癥。。原原發(fā)發(fā)性性巨巨球球蛋蛋白白血血癥癥患患者者SmIgM陽陽性性細(xì)細(xì)胞胞可可占占78%。。(2).B細(xì)細(xì)胞胞分分化化抗抗原原測(cè)測(cè)定定：：臨臨床床意意義義：：①①升升高高見見于于急急性性淋淋巴巴細(xì)細(xì)胞胞性性白白血血病病、、慢慢性性淋淋巴巴細(xì)細(xì)胞胞性性白白血血病病和和Burkitt淋淋巴巴瘤瘤等等；；②②降降低低見見于于無無丙丙種種球球蛋蛋白白血血癥癥、、使使用用化化療療或或免免疫疫抑抑制制劑劑后后。。?

淋巴細(xì)胞胞功能檢測(cè)(1).T細(xì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)驗(yàn)：反映T細(xì)細(xì)胞的免疫功功能。臨床意意義同T細(xì)胞胞花結(jié)形成試試驗(yàn)。但Down綜合征征時(shí)明顯增高高。(2).混合合淋巴細(xì)胞反反應(yīng)：反映機(jī)機(jī)體整體的細(xì)細(xì)胞免疫功能能，還可用于于HLA的細(xì)細(xì)胞學(xué)分型?

自然殺殺傷細(xì)胞免疫疫檢測(cè)自然殺殺傷細(xì)細(xì)胞活活性測(cè)測(cè)定：：可作作為判判斷機(jī)機(jī)體抗抗腫瘤瘤和抗抗病毒毒感染染的指指標(biāo)之之一。。在血血液系系統(tǒng)腫腫瘤、、實(shí)體體瘤、、免疫疫缺陷陷病，，愛滋滋病和和某些些病毒毒感染染者活活性降降低；；宿主主抗移移植物物反應(yīng)應(yīng)者活活性升升高。。?中性粒粒細(xì)胞胞吞噬噬、殺殺菌功功能檢檢測(cè)反映機(jī)機(jī)體抗抗感染染免疫疫的能能力第四節(jié)節(jié)感感染染免疫疫檢測(cè)測(cè)病原體體及其其代謝謝產(chǎn)物物進(jìn)入入人體體后刺刺激機(jī)機(jī)體免免疫系系統(tǒng)，，產(chǎn)生生相應(yīng)應(yīng)的免免疫產(chǎn)產(chǎn)物，，免疫疫產(chǎn)物物進(jìn)入入血液液。臨臨床多多利用用凝集集試驗(yàn)驗(yàn)、補(bǔ)補(bǔ)體結(jié)結(jié)合試試驗(yàn)、、沉淀淀試驗(yàn)驗(yàn)、免免疫熒熒光發(fā)發(fā)（IFA））、酶酶聯(lián)免免疫吸吸附試試驗(yàn)（（ELISA））、放放射免免疫法法（RIA）等等手段段檢測(cè)測(cè)血清清中的的免疫疫產(chǎn)物物或病病原體體的抗抗原成成分，，幫助助某些些感染染性疾疾病的的診斷斷或早早期診診斷。。近年年來隨隨著分分子生生物學(xué)學(xué)的發(fā)發(fā)展，，可以以利用用聚合合酶鏈鏈反應(yīng)應(yīng)（PCR）或或DNA探探針分分子雜雜交技技術(shù)對(duì)對(duì)病原原體的的核酸酸進(jìn)行行檢測(cè)測(cè)，幫幫助確確定病病原學(xué)學(xué)診斷斷。一.細(xì)細(xì)菌菌感感染染免免疫疫檢檢測(cè)測(cè)1.抗抗鏈鏈球球菌菌溶溶血血素素““O””測(cè)測(cè)定定?病病人人感感染染A群群溶溶血血性性鏈鏈球球菌菌一一周周后后ASO開開始始升升高高，，4-6周周達(dá)達(dá)高高峰峰，，可可持持續(xù)續(xù)幾幾個(gè)個(gè)月月或或幾幾年年，，見見于于活活動(dòng)動(dòng)性性風(fēng)風(fēng)濕濕熱熱、、風(fēng)風(fēng)濕濕性性關(guān)關(guān)節(jié)節(jié)炎炎、、急急性性腎腎小小球球腎腎炎炎、、急急性性上上呼呼吸吸道道感感染染、、皮皮膚膚軟軟組組織織感感染染。。?抗抗體體滴滴度度逐逐步步下下降降提提示示疾疾病病緩緩解解。。2.肥達(dá)達(dá)氏氏(Widal)反反應(yīng)應(yīng)：協(xié)協(xié)助助傷傷寒寒與與副副傷傷寒寒的的診診斷斷。。參考值：：O凝集價(jià)價(jià)<1：：80傷寒H凝凝集價(jià)<1：160副傷寒A、B、、C凝集集價(jià)<1：80意義：⑴O升升高，H正常⑵O正正常，H升高⑶O升升高，H升高⑷O升升高，A、B、、C均升升高3.結(jié)核核桿菌抗抗體：輔助結(jié)核核病的診診斷。4.結(jié)核核桿菌DNA檢測(cè)：：可以確定定結(jié)核病病的診斷斷，但應(yīng)應(yīng)防止假假陽性。。5.C反應(yīng)蛋蛋白測(cè)定定急性時(shí)相相反應(yīng)蛋蛋白，具具有激活活補(bǔ)體，，促進(jìn)吞吞噬和免免疫調(diào)理理作用臨床意義義：1).組組織損傷傷2).各各種細(xì)菌菌性感染染3).風(fēng)風(fēng)濕熱4).惡惡性腫瘤瘤，器官官移植后后排斥反反應(yīng)，妊妊娠等二.病毒毒感染免免疫檢測(cè)測(cè)1.漢坦坦病毒抗抗體IgM：：協(xié)助助腎綜合合征出血血熱早期期診斷。。2.乙腦腦病毒抗抗體IgM：：協(xié)助助乙腦的的早期診診斷。3.輪狀狀病毒抗抗體IgM、、IgG；輪狀狀病毒RNA:陽陽性提示示現(xiàn)癥感感染。4.柯薩薩奇病毒毒抗體IgM、IgGIgM陽陽性示現(xiàn)現(xiàn)癥感染染。當(dāng)IgM抗抗體陰性性IgG陽性提提示既往往感染5.EB病毒毒抗原、、抗體測(cè)測(cè)定：抗-VCAIgM陽性常常見于傳傳染性單單核細(xì)胞胞增多癥癥；抗-VCAIgA陽性性主要見見于鼻咽咽癌三.TORCH感染免免疫檢測(cè)測(cè)1.弓形形蟲抗體體IgM和IgGIgM陽陽性提提示現(xiàn)癥癥感染，，IgG陽性提提示既往往感染。。2.巨細(xì)細(xì)胞病毒毒抗體IgM、IgG：：IgM陽陽性示現(xiàn)現(xiàn)癥感染染或病毒毒活動(dòng)期期。IgG既往往或潛伏伏感染。。巨細(xì)胞胞病毒DNA:陽陽性提示示現(xiàn)癥感感染。3.風(fēng)疹疹病毒抗抗體測(cè)定定4.HSV抗體體測(cè)定四.寄生生蟲感染染免疫檢檢測(cè)1.血吸吸蟲感染染：1).環(huán)卵卵沉淀實(shí)實(shí)驗(yàn)2).血血吸蟲抗抗體IgM和和IgE：陽性性提示現(xiàn)現(xiàn)癥感染染，早期期診斷指指標(biāo)。IgG陽性提提示既往往感染。。2.囊蟲蟲抗體測(cè)測(cè)定：囊囊蟲特異異性IgG陽陽性提示示囊蟲病?在在血清學(xué)學(xué)試驗(yàn)中中，若能能以某種種病原體體的特異異性抗原原檢測(cè)到到針對(duì)某某種病原原體的特特異性IgM抗體，，或以特特異性抗抗體特別別是單克克隆抗體體檢測(cè)到到病原體體的抗原原成分，，或以多多聚酶鏈鏈反應(yīng)（（PCR）或DNA探探針分子子雜交技技術(shù)檢測(cè)測(cè)到病原原體的核核酸，則則具有早早期診斷斷意義，，甚至確確診意義義。但要要注意假假陽性或或假陰性性的問題題，特別別是在分分析PCR結(jié)果果時(shí)更應(yīng)應(yīng)注意，，因?yàn)镻CR具具有高度度特異性性和高度度敏感性性，稍有有不慎即即被污染染造成假假陽性。。第五節(jié).腫瘤標(biāo)標(biāo)志物檢檢查腫瘤標(biāo)志志物(TM)：指在在腫瘤發(fā)發(fā)生和增增殖過程程中，由由腫瘤細(xì)細(xì)胞本身身合成、、釋放或或者由機(jī)機(jī)體對(duì)腫腫瘤細(xì)胞胞反應(yīng)而而產(chǎn)生的的一類物物質(zhì)，主主要用于于腫瘤普普查、輔輔助診斷斷、觀察察療效和和判斷預(yù)預(yù)后。常用腫瘤瘤標(biāo)志物物檢測(cè)及及臨床意意義：分分三類1．蛋白白質(zhì)類腫腫瘤標(biāo)志志物：包包括甲胎蛋白白（AFP）、癌胚抗原原（CEA）、癌抗原原125（CA125）、癌癌抗原15-3（CA15-3）、、組織多多肽抗原原（TPA）、、前列腺特特異抗原原（PSA）鱗狀上皮皮細(xì)胞癌癌抗原（（SCC）等。。甲胎蛋蛋白主要要用于原原發(fā)性肝肝癌的輔輔助診斷斷，此外外生殖腺腺胚胎癌癌、胃癌癌和胰腺腺癌血中中AFP也可增增高。CEA明明顯增高高見于胰胰腺癌、、結(jié)腸癌癌、肺癌癌和乳腺腺癌。婦婦科腫瘤瘤特別是是卵巢癌癌CA125水水平明顯顯升高。。CA15-3主要用用于乳腺腺癌的輔輔助診斷斷和療效效觀察。。PSA可用于于前列腺腺癌的輔輔助診斷斷、療效效觀察以以及轉(zhuǎn)移移和復(fù)發(fā)發(fā)判斷。。SCC在上皮皮細(xì)胞源源性惡性性腫瘤中中升高。。2．糖脂脂類腫瘤瘤標(biāo)志物物：包括括癌抗原原-50（CA-50）、癌癌抗原72-4（CA72-4）、、癌抗原原242（CA242）、糖鏈抗原原19-9（CA19-9））等。CA-50增高見見于大部部分惡性性腫瘤，，動(dòng)態(tài)觀觀察其水水平變化化對(duì)癌腫腫療效、、預(yù)后判判斷、復(fù)復(fù)發(fā)檢測(cè)測(cè)頗有價(jià)價(jià)值。CA72-4是是卵巢腫腫瘤和胃胃腸道腫腫瘤的標(biāo)標(biāo)志物。。CA242是是胰腺癌癌和結(jié)腸腸癌的標(biāo)標(biāo)志物。。CA19-9在胰腺腺癌、膽膽道腫瘤瘤和胃腸腸道癌中中水平明明顯升高高。3．酶類類腫瘤標(biāo)標(biāo)志物：：包括前前列腺酸酸性磷酸酸酶（PAP））、神經(jīng)經(jīng)元特異異性烯醇醇化酶（（NSE）、異異常凝血血酶原（（APT）、αα-L-巖藻糖糖苷酶（（AFU）等。。PAP對(duì)前列列腺癌的的療效觀觀察、有有無復(fù)發(fā)發(fā)、轉(zhuǎn)移移及預(yù)后后判斷有有重要意意義。NSE是是神經(jīng)母母細(xì)胞瘤瘤和小細(xì)細(xì)胞肺癌癌的標(biāo)志志物。APT和和AFU在肝細(xì)細(xì)胞肝癌癌中水平平明顯升升高。第六節(jié)自身身免疫檢測(cè)抗核抗體：?ANA陽性：血清滴度>1：40為為陽性。最多多見于未治療療的SLE，，活動(dòng)期SLE幾乎100%陽性。。也可見于其其他自身免疫疫性疾病?？箍购丝贵w共有有4種熒光核核型：均質(zhì)型型，見于SLE、SS、、PSS、MCTD；邊邊緣型，見于于SLE、SS；顆粒型型，見于SLE、RA；；核仁型，見見于PSS、、Crest征。?

抗脫氧氧核糖核酸測(cè)測(cè)定：分為抗抗雙鏈DNA抗體（ds-DNA）、抗單鏈鏈DNA抗體體（ss-DNA）、抗抗Z-DNA抗體?？闺p雙鏈DNA抗抗體的檢測(cè)有有重要的臨床床意義，它見見于活動(dòng)期的的SLE，陽陽性率70%-90%。。組織和細(xì)胞抗抗體的檢測(cè)：：?抗線粒體抗抗體（AMA）：正常人人群陽性率低低于10%。。許多肝臟疾疾病可檢出AMA，原發(fā)發(fā)性膽汁性肝肝硬化無癥狀狀患者為90.5%，有有癥狀患者為為92.5%；慢性活動(dòng)動(dòng)性肝炎可達(dá)達(dá)90%以上上；但膽總管管和肝外膽管管阻塞為陰性性。?抗甲狀腺球蛋蛋白抗體（抗-TG））：陽性見于于90%-95%的橋本本甲狀腺炎，，52%-58%的甲亢亢和35%的的甲癌。此外外，40歲以以上的健康婦婦女檢出率為為18%。抗甲狀腺微粒粒體抗體（抗-TM））：抗-TM陽性檢出率率：橋本甲狀狀腺炎為50%-100%，甲減