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專(zhuān)題二十六《現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題》專(zhuān)題1基因工程第5課2017?2018學(xué)年《現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題》單元測(cè)試卷(一)一、選擇題1.下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的說(shuō)法,正確的是()限制酶主要是從真核生物中分離出來(lái)的限制酶的識(shí)別序列只能由6個(gè)核苷酸組成限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端都為黏性末端【答案】C【解析】限制酶主要存在于原核生物中。一種限制酶一般只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列,并且能在特定的位
點(diǎn)上切割DNA分子,切開(kāi)后形成兩種末端一一黏性末端或平末端。少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由4、5或8個(gè)核苷酸組成。2.在DNA連接酶的催化下形成的化學(xué)鍵和位置分別是()氫鍵堿基與脫氧核糖之間氫鍵堿基與堿基之間磷酸二酯鍵磷酸與脫氧核糖之間磷酸二酯鍵脫氧核糖與堿基之間答案】C【解析】顧A連接酶的作用只是催化DMA片段的“縫合陽(yáng),能恢復(fù)被限制酶切幵了的兩個(gè)核昔酸之間的磷酸二酣3.下3.下列有關(guān)基因工程技術(shù)的敘述,正確的是()重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、連接酶和載體所有的限制酶都只能識(shí)別同一種特定的核苷酸序列只要是細(xì)菌中的質(zhì)粒都可以直接作為基因工程中的載體載體必須具備的條件之一是有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),以便與外源基因進(jìn)行連接【答案】D【解析】載體不屬于酶;不同的限制酶識(shí)別不同的核苷酸序列;天然質(zhì)粒大多不符合要求,要進(jìn)行改造。水母發(fā)光蛋白由236個(gè)氨基酸構(gòu)成,其中Asp、Gly、Ser構(gòu)成發(fā)光環(huán),現(xiàn)已將這種蛋白質(zhì)的基因作為生物轉(zhuǎn)基因的標(biāo)記,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中,這種蛋白質(zhì)的作用是()
促使目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞中促使目的基因在宿主細(xì)胞中復(fù)制使目的基因容易被檢測(cè)出來(lái)使目的基因容易成功表達(dá)【答案】C【解析】標(biāo)記基因的作用是用于檢測(cè)目的基因的導(dǎo)入,水母發(fā)光蛋白也具有相應(yīng)的作用,即標(biāo)記基因和目的基因連在一起,如果水母發(fā)光蛋白表達(dá),則說(shuō)明目的基因也已經(jīng)進(jìn)入細(xì)胞.故選:C.毒程白壟因衣桿iSTi毒程白壟因衣桿iSTi庭?!负瑑?5哥白華空含宅組庾粒的③含雨劭白獲閔④亠出.龍的中組硬粒土壤的農(nóng)桿済的水稻俸堀腋…生“二?④過(guò)程依據(jù)細(xì)胞的全能性原理毒蛋白基因的獲得需要RNA聚合酶①過(guò)程所依據(jù)的理論基礎(chǔ)之一是DNA分子結(jié)構(gòu)的相似性該基因工程成功的標(biāo)志是毒蛋白基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性答案】B【解析】④過(guò)程是植物組織培養(yǎng),依據(jù)細(xì)胞的全能性原理,A正確;毒蛋白基因的獲得需要限制酶,朗A聚合酶是催化RNA合成的酶,不需要,B錯(cuò)誤,①過(guò)程所依據(jù)的理論基礎(chǔ)之一是DNA分子結(jié)構(gòu)的相似性,C正確;該基因工程的目的就是讓毒蛋白基因在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并高效的表達(dá)所需的遺傳特性,D正確。究人員想將生長(zhǎng)激素基因通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi),以表達(dá)產(chǎn)生生長(zhǎng)激素。已知質(zhì)粒中存在兩個(gè)抗性基因:A是抗鏈霉素基因,B是抗氨芐青霉素基因,且目的基因不插入到基因A、B中,而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。則篩選獲得“工程菌”的培養(yǎng)基中的抗生素最好應(yīng)該()同時(shí)含鏈霉素和氨芐青霉素僅有抗氨芐青霉素僅有鏈霉素?zé)o鏈霉素和氨芐青霉素【答案】A【解析】本題考查基因工程中標(biāo)記基因的作用及其選擇依據(jù),要求考生理解重組質(zhì)粒中標(biāo)記基因的作用,能結(jié)合題意選擇合適的培養(yǎng)基篩選出所需的“工程菌”?;蜻^(guò)程中,質(zhì)粒中標(biāo)記基因的作用是是供重組DNA的鑒定和選擇,其原因是基因工程中,構(gòu)建的基因表達(dá)載
體中目的基因和標(biāo)記基因是連鎖關(guān)系,彼此不分離,因此只要檢測(cè)到受體細(xì)胞內(nèi)含有標(biāo)記基因,也就一定會(huì)含有目的基因;根據(jù)題意可知,該基因工程中,質(zhì)粒中的兩個(gè)抗性基因A抗鏈霉素基因和B抗氨芐青霉素基因在過(guò)程中結(jié)構(gòu)均保持完整,又不帶有任何抗性基因,因此篩選獲得“工程菌”的培養(yǎng)基中的抗生素最好應(yīng)該同時(shí)含鏈霉素和氨芐青霉素,在含有這兩種抗生素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)繁殖的大腸桿菌就是所需的“工程菌”,所以A正確,BCD錯(cuò)誤。在基因工程中,為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常采用土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,在土壤農(nóng)桿菌中常含有一個(gè)Ti質(zhì)粒。某科研小組欲將某抗蟲(chóng)基因?qū)肽持参?,下列分析錯(cuò)誤的是()A.Ti質(zhì)粒含有對(duì)宿主細(xì)胞生存具有決定性作用的基因,是基因工程中重要的載體用Ca2+處理細(xì)菌是重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中的重要方法重組Ti質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌成功感染植物細(xì)胞,可通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)將該細(xì)胞培養(yǎng)成具有抗蟲(chóng)性狀的植物若能夠在植物細(xì)胞中檢測(cè)到抗蟲(chóng)基因,則說(shuō)明將重組質(zhì)粒成功地導(dǎo)入到了受體細(xì)胞【答案】A達(dá)?!窘馕觥縏i質(zhì)粒是基因工程中重要的載體,不含有對(duì)宿主細(xì)胞生存具有決定性作用的基因:用處理細(xì)菌可増加細(xì)胞壁的通透性,是重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌中的重要方法,轉(zhuǎn)基因成功的植物細(xì)胞,可通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)茯得轉(zhuǎn)基因植物。在植物細(xì)胞中檢測(cè)到抗蟲(chóng)目的基因,說(shuō)明目的基因已成功導(dǎo)入,但不能證明其能表達(dá)。下圖表示基因工程中獲取水稻某目的基因的不同方法。下列相關(guān)敘述中正確的是()這三種方法都用到酶,都是在體外進(jìn)行①②③堿基對(duì)的排列順序均相同圖示a、b、c三種方法均屬于人工合成法方法a不遵循中心法則答案】A【解析】這三種方法都是在體外進(jìn)行的,且都用到酶(方法a需要逆轉(zhuǎn)錄酶和DNA聚合酶、方法b需要限制酶、方法c需要DNA聚合酶),A正確;方法a得到的目的基因不含有內(nèi)含子,方法c得到的目的基因的堿基序列可能有多種,因此①②③堿基對(duì)的排列順序不都相同,B錯(cuò)誤;圖示a和c屬人工合成法,而b是從供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因的方法,C錯(cuò)誤;方法a遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,D錯(cuò)誤.故選:A.9.下列關(guān)于基因文庫(kù)的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()可分為基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)cDNA文庫(kù)屬于部分基因文庫(kù)基因組文庫(kù)的基因在不同物種之間均可進(jìn)行基因交流同種生物的cDNA文庫(kù)基因數(shù)量較基因組文庫(kù)基因數(shù)量少【答案】C【解析】基因組文庫(kù)只有部分基因能夠在不同物種之間進(jìn)行基因交流,故選Co10.在用基因工程技術(shù)構(gòu)建抗除草劑的轉(zhuǎn)基因煙草過(guò)程中,下列操作錯(cuò)誤的是()用限制性核酸內(nèi)切酶切割煙草花葉病毒的核酸用DNA連接酶連接經(jīng)切割的抗除草劑基因和載體將重組DNA分子導(dǎo)入煙草原生質(zhì)體用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞【答案】A【解析】限制性樓酸內(nèi)切酶切割的是顧A,而煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,A錯(cuò)'目的基因與載體的連接由顧A連接酶催化連接,B正確,煙草原生質(zhì)體可決作為受體細(xì)胞,C正確'目的基因再抗除草劑基因,所以未成功導(dǎo)人目的基因的細(xì)胞不具有抗除草劑的能力,篩選的時(shí)候應(yīng)該用含除草劑的培養(yǎng)基篩選轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞,D正確。11.研究者將蘇云金芽抱桿菌(Bt)的CrylAb基因?qū)胨炯?xì)胞培育成抗螟蟲(chóng)的克螟稻,克螟稻與普通水稻雜交,子代抗螟蟲(chóng)與不抗螟蟲(chóng)的比例為1:1。下列有關(guān)敘述正確的是()Cry1Ab基因已整合到克螟稻細(xì)胞的染色體上獲取CrylAb基因需使用限制酶和DNA連接酶克螟稻的培育說(shuō)明不經(jīng)過(guò)地理隔離也能產(chǎn)生新物種克螟稻降低了農(nóng)藥的使用量,害蟲(chóng)不會(huì)出現(xiàn)抗藥性【答案】A【解析】克螟稻能抗螟蟲(chóng),說(shuō)明CrylAb基因已整合到克螟稻細(xì)胞的染色體上并成功表達(dá),A正確;獲取CrylAb基因需使用限制酶,但不需要DNA連接酶,B錯(cuò)誤;克螟稻和普通水稻仍然屬于同一個(gè)物種,并不是新物種,C錯(cuò)誤;基因突變是不定向的,因此害蟲(chóng)也會(huì)出現(xiàn)抗藥性,D錯(cuò)誤。12.科學(xué)家將控制某藥物蛋白合成的基因轉(zhuǎn)移到白色來(lái)亨雞胚胎細(xì)胞的DNA中,發(fā)育后的雌雞就能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋,在每一只雞蛋的蛋清中都含有大量的藥物蛋白;而且這些含該藥物蛋白的雞蛋孵出的雞,仍能產(chǎn)出含該藥物蛋白的雞蛋。據(jù)此分析不正確的一項(xiàng)是()這些雞是基因工程的產(chǎn)物這種變異屬于可遺傳的變異該過(guò)程屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)該種變異屬于定向變異【答案】C【解析】根據(jù)題干信息分析,將目的基因〔控制某藥物蛋白合成的基因)導(dǎo)入了來(lái)亨雞胚胎細(xì)胞的D皿中,發(fā)肓成的雞產(chǎn)生了該藥物蛋白的雞蛋,說(shuō)明目的基因在這些雞中表達(dá)了,A正確,這些含該藥物蛋白的漓蛋孵岀的雞,仍能產(chǎn)出?含該藥物蛋白的鴻蛋,說(shuō)明這種變異屬于可遺傳的變異,日正確'該技術(shù)為第一代基因工程技術(shù),并沒(méi)有利用蛋白質(zhì)工程對(duì)控制蛋白質(zhì)合成的基因的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造,C錯(cuò)誤,基因工程的原理是基因重組,且是對(duì)生物性狀的定向改造,即這種變異是定向的,D正確。13.上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白的轉(zhuǎn)基因牛,他們還研究出一種可大大提高基因表達(dá)水平的新方法,使轉(zhuǎn)基因動(dòng)物乳汁中的藥物蛋白含量提高30多倍。標(biāo)志著我國(guó)轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。下列有關(guān)的敘述中,正確的是()所謂“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人白蛋白基因可將白蛋白基因?qū)肱5穆鸭?xì)胞中,通過(guò)組織培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)橹辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中才有人白蛋白基因運(yùn)用基因工程技術(shù)讓牛合成人白蛋白,該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異【答案】D【解析】“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中的人白蛋白基因合成出更多的蛋白質(zhì);動(dòng)物細(xì)胞的全能性變窄,用牛的卵細(xì)胞不能培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛;轉(zhuǎn)基因牛的細(xì)胞中都含有人白蛋白基因,人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白,是因?yàn)槿税椎鞍谆蛑辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。14.干擾素是治療癌癥的重要藥物,它必須從血液中提取,每升人血中只能提取0.5/Ig,所以價(jià)格昂貴。美國(guó)加利福尼亞的某生物制品公司用如下方法(如圖所示)生產(chǎn)干擾素。從上述方式中可以看出該公司生產(chǎn)干擾素運(yùn)用的方法是()個(gè)體間的雜交B.基因工程C.蛋白質(zhì)工程D.器官移植【答案】B【解析】從圖中可以看出整個(gè)過(guò)程為將人的淋巴細(xì)胞中控制干擾素合成的基因與質(zhì)粒結(jié)合后導(dǎo)入酵母菌,并從酵母菌產(chǎn)物中提取干擾素,這項(xiàng)技術(shù)為基因工程。15.科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中,在醫(yī)學(xué)研究及相關(guān)疾病治療方面都具有重要意義。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞具有全能性采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克隆),可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代【答案】B【解析】受精卵的全能性最高;采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因;人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞中表達(dá),說(shuō)明生物共用一套遺傳密碼;通過(guò)克隆產(chǎn)生的后代相同。16.下列關(guān)于基因工程的敘述,錯(cuò)誤的是()目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類(lèi)常用的工具酶人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性D?載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)【答案】D【解析】人胰島素原合成后,須經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工,才能形成具生物學(xué)活性的胰島素。而大腸桿菌是原核生物,沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,因此在犬腸桿菌中表達(dá)后無(wú)生物活性。載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞,但由于它和目的基因是相互獨(dú)立的,并不能促進(jìn)目的基因的表達(dá)。17.下列有關(guān)蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法錯(cuò)誤的有()項(xiàng)蛋白質(zhì)工程無(wú)需構(gòu)建基因表達(dá)載體通過(guò)蛋白質(zhì)工程改造后的蛋白質(zhì)有的仍是天然的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程需要用到限制酶和DNA連接酶蛋白質(zhì)工程是在蛋白質(zhì)分子水平上改造蛋白質(zhì)的A.1B.2C.3D.4答案】C【解析】蛋白質(zhì)工程是對(duì)基因進(jìn)行修飾改造或重新合成,然后進(jìn)行表達(dá),須構(gòu)建基因表達(dá)載體,①錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程獲得的是自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì),②錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程是在基因水平上改造基因,然后將改造的基因與運(yùn)載體結(jié)合形成重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞完成復(fù)制、表達(dá)等,所以④錯(cuò)誤,③正確。某生物中發(fā)現(xiàn)一種基因的表達(dá)產(chǎn)物是具有較強(qiáng)抗菌性和溶血性的多肽P1,科研人員預(yù)期在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)藥物,下一步要做的是()合成編碼多肽P1的DMA片段構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體設(shè)計(jì)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)利用抗原抗體雜交的方法對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)【答案】C【解析】已經(jīng)獲得該目的基因片段,不需要合成編碼目的肽的顧A片段,A錯(cuò)誤;需要構(gòu)建含目的肽的頃A片段的表達(dá)載體,但這不是下一步,E錯(cuò)誤;蛋白質(zhì)工程的第一步是根據(jù)蛋白質(zhì)的功能,設(shè)計(jì)P1氨基酸序列,從而推出其基因序列,C正確:利用抗原甘亢體雜交的方法對(duì)表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)是蛋白質(zhì)工程最后一步,D錯(cuò)誤二、非選擇題復(fù)合型免疫缺陷癥(SCID)患者缺失ada基因,利用利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞,可改善患者的免疫功能.如圖顯示該過(guò)程的主要步驟,回答下列問(wèn)題:?1E常?1E常mda基因丸的T笛屣込荃因的鈿酋圖中所示獲取正常ada基因的方法是從基因文庫(kù)中獲取目的基因,基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和.若要大量獲取該目的基因,可通過(guò)PCR技術(shù)迸行擴(kuò)增.PCR技術(shù)是利用的原理,需要酶催化。PCR技術(shù)擴(kuò)增的前提是根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列合,另外在PCR過(guò)程中需要控制反應(yīng)溫度方面,先用°C左右高溫使DNA受熱變性,而這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)
的催化作用實(shí)現(xiàn)的.(3)將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞進(jìn)行治病的方法叫做【答案】部分基因文庫(kù)DNA復(fù)制熱穩(wěn)定DNA聚合酶引物90-95°C解旋酶(體外)基因治療【解析】試題分析:步鰻①是從基因文庫(kù)的受體菌群中茯取目的基因一一正常ada基因,歩駿②是構(gòu)建基因表達(dá)載體。在該歩驟中,病毒作再運(yùn)載體起作用,歩寢③是將構(gòu)建的基因表達(dá)載體制成病毒誘導(dǎo)劑,歩驟④是通過(guò)病毒誘導(dǎo)劑將目的基因整合到受體細(xì)胞一一患者的T細(xì)胞內(nèi),進(jìn)行體外培養(yǎng)増殖,之后再移植如患者體內(nèi)。(1)基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)如cDNA文庫(kù);【答案】部分基因文庫(kù)DNA復(fù)制熱穩(wěn)定DNA聚合酶引物90-95°C解旋酶(體外)基因治療【解析】試題分析:步鰻①是從基因文庫(kù)的受體菌群中茯取目的基因一一正常ada基因,歩駿②是構(gòu)建基因表達(dá)載體。在該歩驟中,病毒作再運(yùn)載體起作用,歩寢③是將構(gòu)建的基因表達(dá)載體制成病毒誘導(dǎo)劑,歩驟④是通過(guò)病毒誘導(dǎo)劑將目的基因整合到受體細(xì)胞一一患者的T細(xì)胞內(nèi),進(jìn)行體外培養(yǎng)増殖,之后再移植如患者體內(nèi)。(1)基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)如cDNA文庫(kù);PCR技術(shù)的原理是DNA復(fù)制,需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)催化。(2)與細(xì)胞內(nèi)DMA復(fù)制相比,PCR技術(shù)的不同點(diǎn):首先要根據(jù)一段已知目的基因的核苜酸序列合成引物,再在熱穩(wěn)定DNA聚合酶作為催化劑將引物與目的基因DNA單鏈結(jié)合'另外在溫度控制方面,在PCR中先用90?95匸左右高溫處理使D砒變性〔解旋而這一過(guò)程在細(xì)胞內(nèi)是通過(guò)解旋酶的催化作用實(shí)現(xiàn)的?;虼虬屑夹g(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來(lái)的一種分子生物學(xué)技術(shù).結(jié)〔3)將人正常ada基因轉(zhuǎn)入患者自身T細(xì)胞進(jìn)行治病的方法叫做〔體外)基因治療。合圖示回答問(wèn)題。注:neor是新霉素抗性基因;IfgDNAI:拔性叱*o11HSI□If瓦譏t*IHSV-tk和neor基因在同一DNA分子上時(shí)會(huì)表達(dá),可以使無(wú)毒的丙氧鳥(niǎo)苷代謝為毒性物質(zhì),導(dǎo)致細(xì)胞死亡.(1)打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后,利用酶,將之線性化,以提高重組率.通過(guò)技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組.為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞,可在培養(yǎng)液中加入(2)將打靶成功的細(xì)胞注射入
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